Этика Заявление: Процедуры с участием человека были одобрены человека участником исследований Комитет по этике / этическими комитетами в Академии Синика, Тайвань.
1. Стимулы и экспериментальной программы подготовки
- Подготовьте пул более чем 60 эмоциональных фотографий лица 29 разделить на три выражения лица (сердитый, счастливый, и нейтраль). Используйте графическое программное обеспечение для маскировки волос и ушные части на фотографиях с черным фоном , как показано на рисунке 1А так , чтобы участники могли сосредоточиться на черты лица на фотографиях.
- Открыть фотографию в графическом редакторе. Используйте набор инструментов выбора, чтобы нарисовать эллиптическую область и отрегулировать размер области, так что уши и самые волосы не попадают в эллипс.
- Инвертируйте выделенную область. Нажмите кнопку "Удалить", чтобы удалить нежелательные области на фотографии и заменить его с черным цветом фона.

Рисунок 1. Примеры эмоциональных раздражителей лица. (А) фотография лица , где волосы и уши были замаскированы в черный цвет фона, и (В) линейный рисунок лица , которые редактируются из (A) с помощью графического программного обеспечения. Лица показывают нейтральные, счастливые, и гневные эмоции соответственно от вершины до нижних строк. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
- Создание экспериментального исследования. Набирать участников пилот для выбора подходящих стимулов с фото бассейна.
Примечание: Участники пилотных не должны участвовать в эксперименте ЭЭГ. - Настройте программу стимула презентации, начиная с первого экрана компьютера, представляющего команду задания, а затем 5 Familiarization испытания. Начинайте каждое испытание с крестом фиксации, а затем лица стимул, и с помощью задачи оценки эмоциональность. См Дополнительный файл кода для примера программы.
Примечание: Настоящие пилотные испытания немедленно следуют ознакомительные испытания путем выбора фотографии лица в случайном порядке из пула. - Создание экспериментальной программы, в том числе на экраны команд и центральный экран для глаз фиксации. Создание экрана стимула для лица , как показано на рисунке 2, настроив на фотографии размер будет 18,3 х 24,4 см 2 (ширина х высота) с черным цветом фона, учитывая размер экрана компьютера 41 х 25,6 см 2 с разрешением 1680 х 1050. См Дополнительный файл кода для примера программы.
- Создать систему оценки для оценки эмоциональности в программе , как показано на рисунке 3. Поместите горизонтальную линию в диапазоне от -100 до +100 в непрерывном масштабе в центре экрана withouт любые тик-метки, для центральных и конечных точек, за исключением. Подготовить программу таким образом, чтобы участники могли свободно оценивать эмоциональность фотоснимка лица путем перетаскивания голевой курсор влево для очень зол (-100) и справа на очень рад (+ 100), и нажмите кнопку GO.
Примечание: Подсчет очков линия предназначена без каких-либо тик-меток, так как у пациентов с AS может легко застрять в поместив курсор между клещами во время оценки эмоциональности. Таким образом, непрерывная шкала является предпочтительным для пациентов. - Убедитесь , что программа записывает поведенческие результаты участника (например , время реакции и эмоциональность баллов), которые используются в качестве критериев для выбора фотографий из пула (см шаг 1.3.1).
- Участники пилотных Рекрут (5 управления и 5 в качестве пилотных участников). Диагностика клинических пациентов в соответствии с Gillberg 30 и критериям DSM-IV 26 и администрировать клиническую производный короткого форму Векслера для взрослых Шкала интеллекта (WAIS-III) 31. Матч управления со своими коллегами AS настолько близко, насколько это возможно по признаку пола, а также на оценки IQ словесные / производительность.
- Выполнить экспериментальную процедуру в пилотном исследовании для каждого отдельного участника. После завершения эмоциональную задачу распознавания лица, интервью каждого пилота в качестве участника на разумной продолжительности фиксации центральной глаз и раздражитель представления периодов, сложность задачи, простота использования балльной системы и максимальное количество испытаний для поддержания его / ее концентрация, на основе которой программа может быть изменена для эксперимента EEG (этап 1.3.2)

Рисунок 2. Снимок экрана лица стимула в программе. Размер лица сконфигурирован , чтобы соответствовать высоте экрана. Пустое пространство заполняется черным цветом.загрузить / 53962 / 53962fig2large.jpg "мишень =" _blank "> Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 3. Снимок экрана балльной системы для оценки эмоциональности. Бар скоринг предназначен не иметь галочку. Участнику необходимо перетащить мышью , чтобы выбрать счет назначенного лица и нажмите кнопку GO , чтобы закончить задание. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
- Программа для задачи 1: Сфотографировать сессии.
- Выберите из пула 30 фотографий, включающий 10 каждый для счастливых, сердитых и нейтральных выражений лица (5 мужских и 5 женских лиц для каждого типа выражений), которые дают наиболее сравнимые среднее время реакции и означают эмоциональность счеты между 5 AS и 5 контрольных участников пилот.
- Обновление экспериментальных конфигураций программ путем включения обратной связи от пилотных пациентов, таких как оптимальный период центральный глаз фиксации (то есть, 1000 мс), длительность стимула презентации (то есть, 1000 мс), интервал между раздражитель (т.е. случайным образом распределены в -between 4 и 7 сек), и масштаб системы подсчета очков (т.е. от -100 до 100). Добавьте пять ознакомительные испытания до начала 30 экспериментальных испытаний в программе.
- Изменение числа стимулов и временных интервалов во внешнем текстовом файле конфигурации, связанной с экспериментальной программой.
Примечание: Текстовый файл может быть изменен, чтобы соответствовать различным экспериментальным условиям без вмешательства инженеров программного обеспечения. - Не сосчитать пять фотографий для ознакомления испытаний на 30 отобранных фотографий. Не используйте EEGs и поведенческие данные, записанные в ознакомлении исследованиях в анализе данных.
- Программа Fили Задача 2: Линейный рисунок сессии.
- Создание рисования линий картины 35 фотографий (5 для ознакомительных испытаний, 30 для экспериментальных испытаний), используемых в задаче 1, прослеживая края каждой грани. Используйте графическое программное обеспечение для изменения шкалы серого фотографии в черно-белой линии-чертежи , как показано на рисунке 1В.
Примечание: Шаги ниже для фотографий редактирование является одним из возможных решений для создания линии-чертежи. - В графическом редакторе, настроить яркость / контрастность фотографии, так что первоначальная интенсивность серой шкалы в большинстве пикселей попадает в черный или белый.
- Применить "эскиз эффект" в "эффект" или меню "Фильтр" программного обеспечения для серой шкалы фотографии, так что сохраняется только контур высокой пространственной частоты части, и применять "эффект бедствия", чтобы увеличить дилатацию контурных линий ,
- Используйте любую кисть для улучшения контуров и использовать инструмент Ластикочистить ненужные части. Убедитесь в том, чтобы сохранить важные черты лица путем проверки назад и вперед между оригинальной фотографией и его рисования линий аналог.
- Сделайте копию программы Задача 1 на этапе 1.3, чтобы создать программу для задачи 2 и заменить 35 фотографий в задаче 1 с соответствующими строчных чертежами.
2. Процедура записи ЭЭГ
- Препараты
- Набираем 10 здоровых лиц и 10 пациентов с АС для экспериментов ЭЭГ на основе рекомендаций местных исследований участник человеческого комитета по этике / этическими комитетами.
- Администрирование короткого форму WAIS-III 31 пациентам с индивидуально до экспериментов, и найти средства управления , которые соответствуют пациентов настолько близко , насколько это возможно по признаку пола и на словесные оценки IQ / производительность.
- Регистрация ЭЭГ
- Сиденье участника в удобном кресле в звуковом изолируютd (слабо освещенном) камеры и отрегулировать положение кресла, так что экран компьютера составляет 60 см в передней части участника. После того, как учебник по экспериментальной методике, есть участник заполнить формы согласия наряду с несколькими вопросами о его / ее хиральности.
- Используйте колпачок с EEG 132 Ag / AgCl электродов (в том числе 122 10-10 система ЭЭГ и биполярного VEOG, HEOG, ЭКГ, ЭМГ электродов, наряду с шестью-лицевых мышц каналов) для записи EEGs. Соедините крышку с двумя 64-канальных усилителей с 0,1-100 Гц аналоговый фильтр полосовой оцифровывать сырье EEGs при 1000 Гц частотой дискретизации.
- Установите стандартный 128-канальный EEG колпачок на голове каждого участника. Отрегулируйте колпачок так, чтобы электрод с надписью "ссылка" находится в положении "Cz", которая расположена относительно ориентиров по средней линии передней / задней (т.е. середина Насьон к ИНИОН расстояния) и левого / правого ориентиров (т.е. середина левого / правого tragis), в соответствии с EEG международная система 10/10.
- Осторожно используйте тупую иглу, чтобы придать токопроводящий гель на все электроды. Перемешать с иглой медленно внутри электрода , чтобы обеспечить хороший гель контакта между кожей головы и электродом (то есть, чтобы держать импеданс ниже 5 кОм). Постоянно проверять состояние геля контакта на электродах с пометкой "ссылка" и "землю" на крышке EEG, чтобы убедиться, что измерения импеданса является правильным.
- Обратите внимание на сопротивление электрода при просмотре экрана электрода импеданса поддерживается программным обеспечением записи ЭЭГ (например , SCAN 4.5 в данном исследовании) , что , как правило , идет с системой ЭЭГ. На экране, электроды представлены в цветах, а также различные цвета показывают уровни импеданса.
- Поместите один HEOG электрод на кантуса одного глаза (положительный сайт), а второй электрод на кантуса другого глаза (отрицательный участок), один VEOG электрода выше, а другой ниже лEFT глаза, биполярные электроды ЭКГ на задней левой и правой руки, и биполярных электродов ЭМГ в области между большим и указательным пальцами правой руки, а также шесть лицевых электродов вокруг брови и щеки.
- Запись в тетради те плохие каналы, в которых сопротивление выше, чем 5 кОм, или непосредственно сохранить экран, показывающий сопротивление на всех электродов. Используйте это в качестве будущей ссылки для отбрасывания плохих каналов на этапе обработки данных ЭЭГ.
- Запись покоя состояние EEGs после инструктажа участника закрыть глаза в течение 12 мин. За это время дважды проверить качество потока мгновенного ЭЭГ, показанного на экране поддерживаемого программного обеспечения для записи ЭЭГ.
Примечание: Там должны быть четкие альфа-волны распространяются в затылочных каналах во время закрытыми глазами состояния по сравнению с глазами-открытом состоянии. Если альфа-волны слишком шумные (не обращая внимания на плохие каналы) или искаженной, вернитесь к шагу 2.2.4 и отрегулируйте контакт геля. - Запуск двух экспериментальных задач в уравновешивается порядке через участников. Запись EEGs, нажав на значок записи на экране поддерживаемого программного обеспечения для записи.
- После прочтения инструкции задач, отображаемого на экране, есть каждый участник выполняет 5 ознакомительные испытаний, за которыми следуют испытаний 30 заданий. Используйте ту же процедуру, как для фотографии и рисования линий задач. В инструкции задач, поощрять участников назначить счет к эмоциональности лица стимул как можно быстрее.
- ВАЖНО: Проверьте программы, подготовленные на этапах 1.3.2 и 1.4.2 для корректной отправки событий во времени заблокирован в начале центральной фиксации глаз, лица предъявления стимула, и нажатие кнопки GO к программному обеспечению для записи во время оценки эмоциональности. Те время развития кодируются как числовые и может быть проверено на экране поддерживаемого программного обеспечения для записи.
Примечание: участник может сделать перерыв между двумя задачами. Там нет EEG повторнось во время перерыва.
- Используйте цифровой преобразователь (например, Polhemus FASTRAK 3D дигитайзер в данном исследовании) для записи 3D - позиции электродов и сохранить его в файле (например , .3dd или .dat файл) для совместного регистрации ЭЭГ шапки через участников анализа данных.
- После эксперимента ЭЭГ, попросите участников заполнить опись 35 вопрос о его / ее поведение и чувства во время эксперимента ЭЭГ (например, имеют отрицательные эмоции, чуть не упал в сон), а также обеспечить им компенсацию за участие в эксперименте.
- Принесите участника к туалету, чтобы очистить / высушить его / ее волосы.
- Чистый и стерилизовать колпачок EEG в соответствии с клиническими инструкциями.
3. Обработка данных ЭЭГ
Примечание: программные команды, представленные в этом разделе, являются специфическими для EEGLAB.
- Фильтр ЭЭГ сигналов с помощью фильтра верхних частот 1 Гц и фильтр низких частот 50 Гц с помощью вызоваФункция pop_eegfilt.m 32.
Примечание: Используйте фильтр низких частот 40 Гц а для некоторых стран, которые имеют 50 Гц Частота электросети - Откажитесь плохих каналов с сопротивлением выше 5 кОм после проверки импеданса электрода, записанного на этапе 2.2.6. Выбросьте эти плохие каналы с очень разной мощности спектра по сравнению с соседними каналами путем визуального осмотра особенностей спектра мощности (например, максимальное значение, кривизны и т.д.) в каждом канале.
- Рассчитать и построить спектр мощности сигнала ЭЭГ при помощи вызова функции 32 pop_spectopo.m.
- Повторно ссылаться на ЭЭГ сигналов со средним каналов мозга без плохих каналов с помощью вызова функции pop_reref.m.
- Сегмент EEGs в стимула автоподстройки эпох, каждая из которых находится в диапазоне от -2.0 сек пре- до 1,5 сек после начала стимула. Правильно для базовой линии (от -2,0 до -1.2 сек до начала стимула) путем удаления среднего значения базового VALUэс из каждой эпохи.
- Назовите pop_epoch.m и pop_rmbase.m функции, соответственно. Выберите интервал базовой линии до центральной периода глаз фиксации и началом лица стимула.
- Все плохие эпохи, которые, как представляется, содержат артефакты. Откажитесь от плохих эпох при сохранении эпох, загрязненными глаз мигает. Эпохи с артефактами обычно выглядят шумными или имеют очень высокую пиковую величину (например , выше 100 мкВ) по сравнению с типичными эпох.
- Вызов функции pop_rejmenu.m запустить полуавтоматическую процедуру. Окно взаимодействие будет выскочить повторно подтвердить авто выбранных плохих эпох пользователем с помощью визуального осмотра. Хотя большинство эпох загрязнены глаз мигает, эти эпохи можно условно зарезервированы для последующего удаления путем независимого анализа компонентов (ICA) 33 в шаге 3.8.
- После удаления плохих каналов и плохих эпох, запустить ICA по обрезке данных ЭЭГ с использованием pop_runica.m функция.
- Среди оцениваемых независимых компонентов (ИС), выявлять артефакты в результате движения глаз / мерцании, мышечной активности, сердцебиение, и шум 32 линии.
Примечание: значительно высокую корреляцию (R 2> 0,9) между IC десятков компонента и тех всех референтных каналов (VEOG, HEOG, ЭКГ, а также каналы для лица) указывает на то, что этот компонент в основном способствовало артефактами. По оценкам IC оценки объясняется артефакты могут быть очищены с использованием множественного регрессионного анализа. - Удалить артефакт ИС и оценить чистые EEGs, которые получены произведением ВСА матрицы смешивания и артефактов очищено IC оценка матрицы. Сохраните чистую EEGs для дальнейшего анализа.
- Держите невязки предсказания артефактов ИС (R 2> 0,9) от опорной VEOG, HEOG, ЭКГ и каналов лицевых в партитуре матрице IC. Удалить другие артефакты ИС с помощью функции pop_subcomp.m. Функция возвращает артефакт очищенный EEGs.
4. Статистический анализ
- Перегородка EEG каналов на одиннадцать однородных областей, чтобы уменьшить количество статистических сравнений в ERP и ERSP анализа, то есть, лево- (10 каналов), midline- (14), и правый фронтальный (10); лево- (13) и правой височной (13); лево- (9), midline- (14) и правой центральной части (9); лево- (9), midline- (12) и правой затылочной теменной (9) , как показано на рисунке 4. Эти области определяются в соответствии с функциональной анатомии коры 34. Функциональная однородность сигналов ЭЭГ в этих регионах была подтверждена в различных экспериментах 13,35,36.

Рисунок 4. Раздел канала. Каналы разделены на одиннадцать регионов. LF: левый фронтальный (10 каналов), MF: по средней линии фронтальной (14), RF: правый фронтальный (10), LT: лево-височной (13), RT: правой височной (13), LC: левый центральный (9), MC: по средней линии центральной части (14), RC: правый центральный (9), LP: левый-затылочной теменной (9), MP: срединный-затылочной теменной (12), RP :. правой затылочной теменной (9) Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
- Загрузите чистую EEGs в шаге 3.8. Подсчитать ERP канала путем усреднения сигналы по эпохам в каждом канале, а также региональной ERP путем усреднения ERPs в рамках одного региона.
Примечание: Когда EEGs загружаются с помощью функции pop_loadset.m в EEGLAB, сигналы сохраняются в переменной структуры "EEG.data" в массиве каналов по времени, по-эпохи. - В окне командной строки Matlab, вычислить ERP канала путем усреднения по EEG.data эпох для каждого канала (например, channelERP = среднее (EEG.dat, 3)). Подсчитать региональной ERP путем усреднения ERPs канала в пределах каждого региона в соответствии с разделом 4.1 в (например, региonalERP = среднее (channelERP (индекс, :), 1), где "Индекс" обозначает индексы каналов в данном регионе).
- Рассчитываем ERSPs канала путем применения частотно-временной трансформации (преобразования , например , Wavelet) к эпохе сигналов в каждом канале, а также региональные ERSPs путем усреднения канала ERSPs в том же регионе.
- Выполните частотно-временного преобразования путем вызова функции pop_newtimef.m.
Примечание: В данном исследовании запись "вейвлетные циклы" установлено значение [1, 0,5] и "базовой линии" установлен в положение [-2000 до -1,200] мс. Результирующие ERSPs канала будут сохранены в массиве частоты по времени-по-каналу. - В окне командной строки Matlab, вычислить региональный ERSP путем усреднения ERSPs по каналам внутри каждого региона в соответствии с разделом в 4.1 (например, regionalERSP = среднее (channelERSP (:,:, индекс), 3), где "channelERSP" является выходным от функции pop_newtimef.m, и "индекс" обозначает индексы каналов в AGИвен область).
- Вычислить средние значения в различных временных интервалах (например , 50-150, 150-250, 250-350, 350-450 мс) для регионального ФКЗ. Вычислить средние значения в различных временных интервалах частот (например , 50-150, 150-250, 250-350, 350-450, 450-800 мс в 1-7 Гц и 200-800 мс в 8-30 Гц) для региональных ERSPs.
- Применение MANOVA в статистическое программное обеспечение (например , IBM SPSS) для средних значений региональных ФКЗ и ERSPs оценить основные эффекты для выполнения этой задачи (фото vs. линии волочения), регион (одиннадцать скальп областей) и группы (AS по сравнению с контролем) , а также эффекты взаимодействия между задачами, области и группы.
- В статистическом анализе, рассмотреть пол (мужскую и женскую) в качестве коварьировать, и оценить основные и взаимодействия эффектов, удерживая постоянную Гендерный эффект.