Описан производственный протокол для мелкосерийного производства пробиотического ферментированного молочного напитка с помощью новой бактериальной закваски.
Методическая статья
Описан производственный протокол для мелкосерийного производства пробиотического ферментированного молочного напитка с помощью новой бактериальной закваски.
Роман высушенный бактериальный консорциум лактобактерии рамнозус Йоба 2012 и термофильный стрептококк C106 культивируют в 1 л молока. Этот свежий стартер может быть использован для производства ферментированного молока и других ферментированных пищевых продуктов либо дома, либо в небольших количествах и в сельской местности. Для свежего стартера, 1 л молока пастеризуют в кастрюле, которая помещается в большую ванночку, содержащую воду, помещают на источник тепла. В этой водяной бане, молоко нагревают и выдерживают при температуре 85 ° С в течение 30 мин. Затем молоко охлаждают до температуры 45 ° С, переносили в вакуумную колбу, засевают высушенных бактерий и оставляли в течение по крайней мере 16 часов между 30 ° C и 45 ° C. Для частого домашнего производства, свежий стартер замораживают в кубики льда, которые могут быть использованы для производства малых объемов до 2 л ферментированного молока. Для мелкосерийного производства в странах с ограниченными ресурсами, пастеризации до 100 л молока Is, проведенные в молочных бидонов, которые помещены в большой кастрюле с водой и нагревают на огне при температуре 85 ° С в течение 30 мин, а затем охлаждали до 45 ° С. Затем 100 л партия инокулируют 1 л свежеприготовленного стартера упомянутого ранее. Для обеспечения эффективной ферментации при температуре от 30 до 45 ° С, то молоко может покрыто одеялом в течение 12 часов. Для производства немолочных ферментированные продукты, свежий стартер остается в марлю в течение 12 ч, и слитого от сыворотки могут быть впоследствии использованы для инокуляции широкого спектра пищевого сырья, в том числе овощей и cereal- основанные продукты.
В данной статье описывается протокол производства, который дает возможность получать питательную и пробиотических кисломолочных продуктов и других пробиотических ферментированных продуктов с помощью рассады культуры, которая доказала свою пользу для здоровья. Протокол является надежной и легко выполнить кем-либо в любом месте, в том числе и странах с ограниченными ресурсами.
В странах Африки к югу от Сахары, 21% случаев смерти детей <5 лет вызвана диарея 1, из которых 29% вызвано ротавирусной этиологии , в частности 2. Было показано , что ежедневное потребление ферментированного пищи , содержащей рекомендуемую дозу 1 × 10 10 КОЕ L. rhamnosus GG стимулирует здоровье кишечника и уменьшает частоту и тяжесть ротавирусной диареи , вызванной 3-7.
Полезные бактерии присутствуют в широком диапазоне традиционных ферментированных продуктов по всему югу от Сахары в Африке 8-10. Тем не менее, эти продукты являются почти исключительно домашнего продuced, имеют относительную коротким сроком годности и повышенные риски безопасности вследствие неконтролируемого характера брожения 11. Кроме того, потребление этих традиционных продуктов питания снижается из - за урбанизации и общим вестернизации диет в Африке 10,12.
Родовое пробиотические бактерии L. rhamnosus YOBA 2012 13, который идентичен L. rhamnosus GG, был введен после оригинального патента на L. rhamnosus GG истек 14. Высушенный посевную культуру имеет A W приблизительно 0,1, который держит высокую жизнеспособность после периода хранения по меньшей мере одного года при комнатной температуре (данные не показаны).
Культуру семена упаковывают в порциями 1 г и может быть использовано для производства не более 100 л ферментированного молока. При производстве одного или двух порций в день, заквасок могут помочь достичь производственной мощности до 1000 л в неделю от наканунечень день свежее молоко.
Использование L. rhamnosus YOBA 2012 с S. thermophilus С106 в качестве адъювантной культуры , которая позволяет пробиотика Lactobacillus распространяться 15 представляет собой уникальный бактериальный консорциум, не сообщалось другими авторами. Протокол производства включает в себя рефиксацией содержимого одного пакета (1 г) сублимированного закваски (затравочной культуры) в 1 л молока, что приводит к так называемой свежей стартера после инкубации в течение 16 часов. Свежий стартер впоследствии использовали для инокуляции максимум 100 л молока. Этот метод предварительной инкубации уменьшает количество лиофилизированных бактериальных культур, используемых, тем самым снижая затраты на производство по сравнению с прямой инкубации как описано , например , с помощью Goff 16. Препарат используется для протокола, описанного в настоящем документе, сохраняет преимущества сублимированного культуры, такие как стабильность при хранении и удобства хранения и обработки, в результате чего сильно гeproducible брожение.
Кроме того, протокол производства , как описано в этой статье не требует высокотехнологичного оборудования , в отличие от стандартных методов производства , используемых в развитых странах 17.
Наконец свежий стартер может быть использован для инокуляции других (немолочных) сырья для производства широкого спектра ферментированных пищевых продуктов, как успешно показано на Obushera, Kwete, Удзи и Zomkom, все на основе зерновых традиционно ферментированных пищевых продуктов из Уганды (первые два), Кении и Буркина - Фасо, соответственно 15. Это лишь незначительная часть огромного количества ферментированных продуктов , разработанных в Африке 18.
Брожение распад макромолекул, таких как крахмал, сахара и белков в продукты, которые имеют повышенную усвояемость, благодаря деятельности ферментов и / или микроорганизмов. Брожение является широко используемым методом в странах Африки к югу от Сахары. одеватьэфир с сушкой и засолки она позволяет хранение продуктов в отсутствие охлаждения помещений или промышленных методов , таких как консервирование 9,19. Традиционная ферментация часто использует обратную выносных, в котором небольшая часть от предыдущей партии добавляется к новой партии для облегчения процесса ферментации и уменьшить вероятность неудачи брожения 11. Харрисон и Томкинс 20 описывают широкий спектр традиционных африканских ферментированных продуктов на основе кукурузы, сорго или проса, а также полезную роль эти продукты могут привести к отъема детей, например , за счет снижения детской диареи и связанного с ним смертности. Ноут и Саркар 19 описывают традиционное производство ферментированного маниоки блюдо , которое широко потребляется в Западной Африке. Франц и др. 9 обеспечивают обширное описание африканских ферментированных продуктов , отнесенных к категории в зерновых и растительных продуктов, крахмалистых корнеплодов продуктов и белковых продуктов животного происхождения. В дополнение к этому, Narvhus и Gadaga 21 конкретно описывают традиционное производство кисломолочных продуктов в Африке.
Для производства пробиотических кисломолочных продуктов (или другие ферментированные продукты), особенно в случае домашнего производства, наличие морозилке выгодно хранить свежий стартер в замороженных порций. В странах с ограниченными ресурсами, производство ферментированного молока может быть выполнена хорошо молочными производящих общин. Накопленный опыт с местными сообществами в Уганде указывает на то, что молочные кооперативы являются подходящими для лица занимают производство йогурта из собственных поставок молока. Доступность молоко может выгодно, хотя это также возможно, хотя и менее предпочтительно, чтобы приготовить большие порции кисломолочных продуктов, в большей сковороде. Кроме того, наличие электроэнергии и с ним соединенного присутствия охлаждения объектов в местных магазинах и киосках в странах с ограниченными ресурсами является преимуществом в расширении бизнеса и сокращения OF потери из-за порчи. Тем не менее, как будет обсуждаться в протоколе, путем добавления сорбат калия можно сохранить йогурт в течение нескольких дней при температуре окружающей среды и уменьшить spoilages в случае колебаний напряжения.
1. Подготовка Fresh Starter
Чтобы подготовить свежий стартер, возьмите 1 л либо сверхвысокой температуре (UHT) переработки молока или свежего коровьего молока. Если это УВТ-молоко, переходите к шагу 1.3. Если оно свежее коровье молоко, переходите к шагу 1.1.
2. Производство небольших партий на бытовом уровне
3. Производство в сельской местности в странах с ограниченными ресурсами
Примечание: Используйте максимум 100 л молока на 1 л свежего стартера.
4. Производство прочих ферментированных продуктов
В этом разделе описывается производство ферментированных, кроме кисломолочных продуктов с максимальным объемом приблизительно 50 L.
В левой части таблицы 1 показана схема раздела 1 протокола. За этим следует обобщенной комбинированной схеме секций 2 и 3 на правой стороне стола.
Брожение профили молока , привитых с культурой семян с использованием протокола производства , как описано в этой статье были записаны. На рисунке 1 показана брожение свежего стартера (как описано в разделе 1). На рисунке 2 показана ферментацию ферментированного молока (конечный продукт , как описано в разделах 2 и 3). Поскольку на практике в сельских районах строгий контроль температуры трудно, измерения проводились при температуре 37 ° C и 45 ° C.
Для ферментации при 37 ° С, подкислении профили двух саше тестируемых показывают небольшое различие в началеэкспоненциальной подкисление примерно за 30 минут, и в производстве свежего стартера и конечного продукта. Конечные значения рН обоих культур идентичны после 16 ч.
Типичные значения рН и титры для распространяющейся L. rhamnosus и С. штаммы thermophilus Следуя описанным процедурам производства для различных ферментированных пищевых продуктов можно найти в таблице 2. Количество клеток L. rhamnosus и С. thermophilus определяли на MRS среде с агаром и LM17, соответственно, с использованием обычно применяемых микробиологическими методами покрытия. Конечные количества клеток из L. rhamnosus YOBA 2012 были 1,7 х 10 7, 3,7 х 10 9 и 3,3 х 10 9 КОЕ мл -1 для кисломолочного, kwete и Uji соответственно. Конечные значения рН составили 4,3 и 4,2 для ферментированного молока и kwete соответственно. Предварительные результаты показали, что добавление potasсиюм сорбат перед ферментацией не оказывает негативного влияния , но даже увеличивает число жизнеспособных L. rhamnosus YOBA 2012 бактерий в йогурте через две недели после производства (данные не показаны).
На рисунке 3 показаны результаты высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в сочетании с детектором показателя преломления (RI) не ферментированных молока по сравнению с ферментированного молока. Результаты показывают, что уровень лактозы в снижении молока, в то время как уровни молочной кислоты и уровни галактозы увеличиваться, что является результатом метаболической активности посевной культуры.

Рисунок 1. Брожение профиль свежего стартера из полудрагоценных обезжиренного молока (1,5% жира, 3,5% белка). Один литр молока заражают один пакетик (1 г) семенной культуры и брожении при 37 ° C(••••, дублировать), а также 45 ° C (- - - -, дублировать) в течение 16 часов. Прямая линия (----) при рН 4,4 вставляется как признак того, чтобы определить , когда брожение закончено. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 2. Брожение профиль ферментированного молока (конечный продукт) из полудрагоценных обезжиренного молока (1,5% жира, 3,5% белка). Один литр молока заражают один 20 г свежего стартера и ферментируют при температуре 37 ° С (•• ••, дублировать), а также 45 ° C (- - - -, дубликат) в течение 16 ч. Прямая линия (----) при рН 4,4 вставляется как указание, чтобы определить, когда брожение завершается.Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 3. ВЭЖХ-элюции модели не ферментированных молока (черный) и молока , ферментированного в течение 16 часов с посевной культурой (синий). Узоры элюции указывают на потребление лактозы и производства галактоза и лактат. Сугарс и слабой кислоты были идентифицированы на основании времени удерживания и отношение площади поверхности пика УФ-поглощения и показателя преломления. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Таблица 1. Семя культура Applica Протокол ции. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой таблицы.

Таблица 2. Распространение лактобактерии рамнозус Йоба 2012 в различных ферментированных продуктов. Данные были получены из Корт и др. 15. Ферментация проводили при 37 ° С, если не указано иное. Количество клеток в L. rhamnosu сек YOBA 2012 и S. thermophilus C106 после прививки и колебалась от 1 × 10 6 и 1 × 10 7 КОЕ мл -1. Функциональный mutandabota был подготовлен с стартером , содержащий исключительно L. rhamnosus YOBA 2012 , как сообщает Мпофу 24 и др.; ND, не определено.d / 54365 / 54365tbl2large.jpg "целевых =" _blank "> Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть увеличенную версию этой таблицы.
Справочная файла. Локальное производство и продажа пробиотических йогуртов в сельских районах Африки. Кадры и фотографии принимаются в Balawoli и Namagera, Уганда, май 2016 г. Клип показывает цепочку создания стоимости, начиная от приема молока до переработки, упаковки, продаж и, наконец, к потреблению партии 50 л пробиотического йогурта, приготовленного с использованием только основного оборудования. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы скачать.
Простой протокол производство с использованием основного оборудования и нового ферментированного культуры еды стартера, описанной в этой статье облегчает производство высококачественного пробиотических кисломолочных продуктов на бытовом уровне, так и в сельской местности в странах с ограниченными ресурсами. Это имеет решающее значение для пастеризации молока в течение как минимум 30 мин, чтобы получить достаточное уменьшение или ликвидацию организмами, вызывающими порчу и потенциальных патогенных микроорганизмов. Кроме того, достаточное нагревание вызывает денатурации сывороточного белка 17 , который будет впоследствии ассоциировать с казеиновые мицеллы 25 приводит к образованию поперечных связей в кисломолочных 26. Следовательно, вязкость конечного продукта увеличивается по сравнению с менее интенсивно нагретое молоко 27. Также очень важно, чтобы избежать инокуляции молока выше 45 ° С, так как при более высоких температурах бактерии будут инактивированы.
Точно так же, если таковая имеется, и стоимость-эффективный, использование пастеризованное молоко является предпочтительным, особенно для производства свежего стартера. Во-первых, УВТ-молоко практически свободен от нежелательных микроорганизмов. Во-вторых, в стерилизованных молочных сывороточных белков широко денатурированный, что делает их более доступными для бактериальных протеаз, способствуя их деградации и последующего роста йогурта бактерий. В процессе охлаждения, белки частично повторно сворачивают в нативном состоянии, поэтому повторное нагревание перед посевом полезно для производства йогурта. Пролонгированные результаты брожения в ферментированного молока с рН <4,4, что часто нежелательно. Брожение может быть остановлена своевременно путем размещения ферментированного молока в холодильнике.
Местного производства йогуртов в Африке было показано, содержат значительные уровни лактококков 28 , такие как L. Lactis, что может привести к производству пептидов , которые имеют горький вкус 29-32, который , как правило , undesirabле 31. Поэтому, очень важно , что брожение происходит при температуре от 45 до 35 ° C 15,28. Так как температура будет медленно уменьшаться во время ферментации в полу-контролируемой среде, прививка делается при 45 ° C, максимальная допустимая температура. Достаточная изоляция в процессе ферментации имеет важное значение, чтобы избежать снижения температуры ниже 35 ° C.
Ручная производство йогурта в сельской местности имеет относительно высокий риск микробного загрязнения организмами, вызывающими порчу. В частности, Дрожжи могут распространяться в кислых условиях в йогурте. Загрязнение дрожжей может привести к чрезмерному добычи газа, либо в фазе инкубации или во время хранения, тем самым портя йогурт сразу или значительно сокращает срок его хранения 33,34. Уровни Дрожжи могут быть сведены к минимуму путем термической стерилизации и / или очистка с помощью гипохлорита натрия всех посуды и оборудования перед каждым контактным остроумия ч молоко или йогурт. Особенно после того, как дрожжи порча произошло, тяжелой и обширной стерилизации и очистки требуется для устранения загрязнения.
Выше описанные риски ясно показывают, что успех применения этого протокола производства в бедных странах с ограниченными ресурсами ограничивается его ручной характер и с ним связывают усиление скорости порчу. Скорость порча становится еще выше в районах, которые испытывают недостаток объектов охлаждения или имеют сильно колеблющемся доступности электроэнергии. Кроме того, отсутствие доступа к недорогому упаковочного материала высокого качества может ограничить поглощение описанного протокола. Необходимое оборудование является основным и универсальным, но лаборатория или кухонный термометр имеет важное значение. И, наконец, в настоящее время лишь ограниченное число стран имеют средств, чтобы произвести лиофилизированный закваски. В большинстве стран с ограниченными ресурсами не хватает этих объектов, и, следовательно, зависят от импорта, чтобы получить этот продукт.
_content "> Среди продуктов питания, кисломолочный включая йогурт является наиболее распространенным средством для пробиотических бактерий. Производство кисломолочных продуктов , не требует специального оборудования , кроме термометра. Таким образом, сочетание описанных выше первого общего пробиотические закваски 13 с простой протокол производства позволяет воспроизводимым, контролируемое и безопасное производство пробиотических кисломолочных почти никто в любом месте, в том числе производства на уровне отрасли бытовых и коттедж в сельской местности в странах с ограниченными ресурсами. В традиционно практиковали природные брожение, равные уровни пробиотик бактерии не могут быть гарантированы 9. самостоятельно стабильная культура стартера в 1 г пакетики позволяют мелким производителям экономически эффективно производить ферментированные продукты, без необходимости покупать большое количество заквасок , которые обычно теряют жизнеспособность после вскрытия упаковки, особенно когда выдерживали при комнатной температуре и при высокой относительной влажности, которая являетсянасколько нам известно, случай для всех других доступных культур йогурт стартер. Кроме того, количество высушенных бактерий, импортируемую остается очень низкой, ниже 0,1% пробиотического концентрации культуры в конечном продукте, так как почти все закваски производится на месте из-за способа предварительной инкубации, который описан в данном протоколе ,Производство кисломолочных продуктов подробно описана в этой статье, и может стать первым шагом овладеть искусством производства пробиотических ферментированные продукты, которые впоследствии могут быть применены к брожение многих видов других продуктов питания (как об этом говорится в этой статье). Для обновления базового ферментированного молока, возможный следующий шаг является производство реальных плодов ферментированного молока. Это требует подготовки стерильных джем (смесь фруктов, сахара и некоторых добавок необязательно) или приобретение готового конфитюр быть смешан с ферментированного молока после брожения 35,36.
Уилберт Sybesma и Ремко Корт являются основатели Йоба для фонда жизни, не-для некоммерческой организацией, аккредитованной налоговыми органами голландских как общественное благотворительное учреждение (PBI), который направлен на поощрение местного производства и потребления кисломолочных продуктов в Африке , Кисломолочные продукты, изготовленные с посевной культуры Йоба, в том числе йогурт, zomkom, obushera и mutandabota не реализуются Фондом как таковой, но Йоба фундаментные Life стимулирует местное производство и право собственности, позволяя доход деятельности для африканских предпринимателей в пищевой промышленности , Йоба для жизни Фонд распространяет и продает готовые к употреблению пакетики с сушеной бактериальной посевные культуры через сеть партнеров и волонтеров, чтобы облегчить местное производство молочных и зерновых продуктов на основе от контролируемой бактериальной ферментации.
Авторы признают проект Восточно-африканского развития Молочная (EADD) для их практической поддержки на местах в подготовке молочных кооперативов в сельских районах Уганды в ферментированного молочного производства. CSK Food Обогащение признается для производства, контроля качества и оценки ферментативной способности закваски. Lactosan GmbH & Co, Австрия, признается за помощью производства. Авторы благодарят Карин Overkamp (ТНО микробиологии и системной биологии, Zeist, Нидерланды) для анализа методом высокоэффективной жидкостной хроматографии и Деррик Assimwe (UIRI) для записи заявлений автора в Уганде. Эти записи имели место во время МИЦР поддерживаемой вводного совещания ферментированной пищи для жизни проекта (CIFSRF Фаза 2) в Энтеббе, Уганда, май 2016 года VU университета Амстердама и музея Micropia признаются для финансовых взносов и предоставления лабораторного оборудования для производство видео описано в этой статье. Авторы благодарят Вим ван Эгмонддля микроскопии бактерий йогурта.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Стартовая культура Yoba | Фонд Yoba for | Life-Молоко | |
| Получено от местной | коровы-Свежее | , цельное молоко, не содержащее антибиотиков и полученное от здоровой коровы | |
| Опционально сахар | Куплено в местном супермаркете-Использовался | Канесугер, но можно и свекловичный сахар. Без примесей | |
| Лабораторный термометр | Narang Scientific Industries | TM-01 | |
| Лактометр | Narang Scientific Industries | LM-01 | |
| Этанол 96% | Sigma Aldrich | 476226 | |
| pH бумага | Macherey-Nagel GmbH & Co | 90206 | |
| Марля | Beyond Gourmet | - | Любая высококачественная пищевая сырная ткань может подойти |
| Сито/сетчатое фильтр | Cuisinart | CTG-00-3MS | Подойдет любое мелкоячеистое ситечко, но предпочтение отдается сетчатым фильтрам из нержавеющей стали. |
| Термос 1 л | Куплено на местном складе | - | |
| 1 л сковорода + крышка | Куплено на местном складе | Нержавеющая сталь | |
| 2 л Покупается | на местном складе | Любой тепло- и водонепроницаемый материал подойдет | |
| 50 л Покупается | на местном складе | - | Любой тепло- и водонепроницаемый материал подойдет |
| Молочная банка | Narang Scientific Industries | MC-SS-30 | Любую молочную банку из нержавеющей стали можно сделать |
| Одеяло | куплено на местном складе | - | Чем толще одеяло, тем лучше изоляция |
Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE
Запросить разрешение