Инструменты для диагностики желчных кислот мальабсорбции и измерить транспорта желчи кислоты в естественных условиях ограничены. Инновационный подход в живых животных описано , что использует комбинированный протон (1 H) плюс фтор (19 F) магнитно - резонансной томографии; эта новая методология имеет трансляционной потенциал для скрининга мальабсорбции желчных кислот в клинической практике.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Использование нескольких фторированных желчных кислот и
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Наряду с их традиционной роли в качестве моющих средств, которые облегчают усвоение жиров, возникающих литература указывает на то, что желчные кислоты являются сильнодействующими сигнальные молекулы, которые влияют на несколько органов; они модулируют моторику кишечника и выработку гормонов, и изменяют тонус сосудов, метаболизм глюкозы, метаболизм липидов, а также использование энергии. Изменения в фекальных желчных кислот может привести к изменению кишечника микробиомом и способствуют толстой кишки патологии, включая cholerrheic диареи и рака толстой кишки. Основные регуляторы состава фекальной желчной кислоты являются тонкой кишки апикальной натрий-зависимого желчной кислоты Transporter (ASBT) и фактор роста фибробластов-19 (Fgf19). Снижение экспрессии и функции ASBT уменьшает кишечное желчной кислоты вверх берут. Кроме того, данные в пробирке предполагают , что некоторые FDA одобренные препараты ингибируют функцию ASBT. Дефектные релиз FGF19 увеличивает синтез в печени желчных кислот и их высвобождение в кишечнике до уровней, которые переполняют ASBT. Либо ASBT дисфункция или недостаток FGF19 увеличивает пECal желчных кислот и может вызвать хронический понос и способствуют неоплазии толстой кишки. К сожалению, инструменты для измерения желчи мальабсорбции кислоты и действия препаратов на транспорте желчных кислот в естественных условиях ограничены. Для того, чтобы понять сложные действия желчных кислот, методы, необходимые, которые позволяют одновременный мониторинг желчных кислот в кишечнике и метаболических тканях. Это привело нас к зачатию инновационный метод измерения транспорта желчи кислоты в живых животных , используя комбинацию протона (1 H) и фтора (19 F) магнитно - резонансной томографии (МРТ). Новые индикаторы для фтора (F 19) основе живого животного МРТ были созданы и испытаны, как в пробирке и в естественных условиях. Сильные стороны такого подхода включают в себя отсутствие воздействия ионизирующего излучения и трансляционной потенциал для клинических исследований и практики.
Введение
Наряду с их классической роли в качестве моющих средств , которые облегчают усвоение жиров из кишечника, желчных кислот появились в качестве мощных сигнальных молекул , влияющих на несколько органов в дополнение к тем , которые связаны с их энтерогепатической циркуляции 1,2. Помимо контроля за их собственный метаболизм, желчные кислоты модулируют несколько аспектов желудочно - кишечного тракта физиологии (например, сократительной способности кишечника и инкретиновый производства гормонов, физиологии толстой кишки, и предрасположенность к раку) и иметь системные эффекты на сосудистый тонус, глюкозы и липидного обмена, а также использование энергии.....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Следующий протокол придерживается руководящих принципов, утвержденных животных по уходу и использованию комитета (Institutional IACUC) в Университете штата Мэриленд школы медицины (IACUC Протокол № 0415011, утвержденной 18 июня 2015) по.
1. Gavaging Мыши с 19 F-меченых желчные кислоты
- С принудительным кормлением мышей с 150 мг / кг веса тела 19 F-меченых желчных кислот. Заполните 1 мл шприц до нужного объема с 19 F-меченых желчных кислот исходного раствора [желчный кислотно-трифтор-ацетил лизина (CA-лиз-TFA, в 1: 1 полиэтиленгликоль 400: фосфатом Дульбекко буферный солевой раствор) или cholylsarcosine- трифтор-N-мет....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Использование АБМФ для МРТ в естественных условиях , чтобы "видеть" желчной кислоты транспорта в режиме реального времени имеет большой потенциал как для исследований и клинического применения. Кроме того, методы, описанные здесь резекции желчного пузыря и биохимического анализа его содержимого с помощью жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии обеспечивают средство подтверждения результатов визуализации. Однако обоснованность этих методов требует точного дозирова.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Синтез СА-лиз-ТФК и CA-Sar-TFMA и анализа в пробирке их переноса с использованием стабильно трансфецированных Мадин-Дарби клетки собачьих почек , выражающие ASBT и эмбриональные клетки почки человека экспрессию полипептида натрия / таурохолат совместно переносящий (НПБТ) подробно описаны в другом месте 13,14. Здесь акцент делается на пероральное введение АБМФ затравки для живых животных, с последующим урожаем желчного пузыря, печени и крови для анализа содержания АБМФ, и, в частности, с изображениями.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы не имеют ничего раскрывать.
Благодарности
Эта работа была поддержана Национальным институтом здравоохранения, Национального института диабета, желудочно-кишечных и почечных заболеваний (номера грантов R21 DK093406 и T32 DK067872 к JP.R.) и награду Заслуги В.А. (грант номер 1BX002129 к JP.R.).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Duall size-21 полностью стеклянный шлифовальный станок | Kimble Chase Life Science, Vineland, NJ | 885351-0022 | |
| Bruker BioSpec 70/30USR Avance III 7T горизонтальный измерительный сканер | MR Bruker Biospin MRI GmbH, Германия | Используйте сопутствующее программное обеспечение Paravision Version 5.1 (см. шаг 3.5) | |
| Bruker 40 мм 19F/1H двойная настройка линейной объемной катушки | Bruker Biospin MRI GmbH, Германия | Используйте сопутствующее программное обеспечение Paravision версии 5.1 (см. шаг 3.5) | |
| Система Waters Acquity UPLC с квадрупольным детектором | Waters Corporation, Milford, | ||
| Waters Acquity UPLC этиленовый мостовой гибрид C8 1.7 μ м 2,1 х 50 мм колонна | Waters Corporation, Милфорд, Массачусетс | ||
| Gavage Needle | Braintree Scientific, INC. | N-010 | 20 G-1.5" изогнутый мяч 2.25 мм |
| 2 Нержавеющая сталь Гемостаты | VWR | 10755-018 | 4 и 5 дюймов, прямой |
| кетамин | MWI Veterinary Supply | 501090 | Кетамин зетамин 100 мг/мл |
| Ксилазин | Akorn, Inc. | 20 мг/мл | |
| Внутрибрюшинный катетер | Abbott | AbbocathTM-T.I.V. G720-A01 4535-42 | 24-G x 0.75" |
Ссылки
- Thomas, C., Pellicciari, R., Pruzanski, M., Auwerx, J., Schoonjans, K. Targeting bile-acid signalling for metabolic diseases. Nat Rev Drug Discov. 7, 678-693 (2008).
- Vallim, T. Q., Edwards, P. A. Bile acids have the gall to function as hormones. Cell Metab. 10, 162-164 (2009).
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
