Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Наводить Complete полипа Регенерация от спинных Physa из Starlet актинии Nematostella vectensis

8.2K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/54626

⸱

14 января 2017 г.

 , 
1Department of Biochemistry and Cell Biology, Center for Developmental Genetics, Stony Brook University

В этой статье

Краткое содержание

Здесь мы демонстрируем, как индуцировать и контролировать регенерацию у звездчатого морского анемона Nematostella vectensis, модельного книдарийского антозоя. Мы демонстрируем, как ампутировать и категоризировать регенерацию с помощью системы морфологического стадирования, и мы используем эту систему для выявления потребности в аутофагии в регенерирующих полипных структурах.

Аннотация

Стрекающие, и , в частности Hydra, были первыми животными , показанные для регенерации поврежденных или разорванных структур, и действительно такие исследования , возможно , запускаемые современный биологический запрос через работу Трамбле более 250 лет назад. В настоящее время исследование регенерации видел возрождение с использованием как "классические" регенеративные организмы, такие как гидры, планарий и хвостатых, а также расширяющийся спектр видов , охватывающих диапазон от многоклеточных, губок через млекопитающих. Кроме того, ее внутренний интерес как биологическое явление, понимание того, как регенерация работает в различных видах будет информировать нас о том, разделяют регенеративные процессы общие черты и / или видов или контекстно-зависимые клеточные и молекулярные механизмы. Актинии стерлядь, Nematostella vectensis, является новой моделью организма к регенерации. Как Hydra, Nematostella является членом древнего филюма, книдарий, но в тон класс Anthozoa, сестра клады к Нуйгогоа, которая является эволюционно более базальной. Таким образом , аспекты регенерации в Nematostella будет интересно сравнить и сопоставить с теми гидры и других кишечнополостных. В этой статье мы представляем метод Bisect, наблюдать и классифицируют регенерацию аборальной конца взрослого Nematostella, который называется physa. Physa естественным образом подвергается делению как средство бесполого размножения, а также естественное деление или ручной ампутация physa вызывает возобновление роста и реформирование сложных морфологией. Здесь мы кодифицированы эти простые морфологические изменения в системе Staging Nematostella регенерации (The NRSS). Мы используем NRSS, чтобы проверить влияние хлорохин, ингибитор лизосомных функции, которая блокирует аутофагии. Результаты показывают, что регенерация полип структур, в частности мезентериев, ненормально, когда аутофагия ингибируется.

Введение

Наблюдение регенерации в одной гидры была знаковым событием в биологии появления как экспериментальной науки 1,2. Регенерация остается явление чрезвычайно широкое обращение к биологу и мирянина, так. Потенциал для онтогенетики, клиницистов, биомедицинской ученых и инженеров ткани , чтобы понять и преодолеть ограничения на регенерации человека делает регенерацию биологии более чем внутренне интересно.

Теперь, с использованием новейших технологий, таких как секвенирование генома и усиления и потери функциональных инструментов, поле готова дразнить друг от друга регенеративные механизмы и в конечном счете понять, как различные виды могут регенерировать в то время как другие не могут. Степень общности в молекулярном, клеточном и морфологических реакций еще предстоит выяснить, но до сих пор кажется, что основные реакции среди животных, которые могут регенерировать более похожи, чем был бы томографовНед только десять лет назад 3.

Стрекающие, в частности, являются снисходительный при регенерации почти все их части тела на фоне широкого спектра морфологического разнообразия. Из одиночного полипа пресной воды, Hydra вместе с крошечных морских полипов, которые строят огромные коралловые рифы, до сложных колониальных сифонофор, таких как Португальской Man-O-War, регенерация часто является способом размножения, в дополнение к механизму ремонта или реформирования поврежденных или утраченных частей тела в результате травмы и хищничества. Являются ли различные виды книдарий используют сходные или различные механизмы для регенерации принципиально интересный вопрос 4-6.

Мы, и другие были разработки anthozoan, Nematostella vectensis в качестве модели для регенерации 7-17. Недавно мы разработали систему определения стадии для описания регенерации всего тела от морфологически однородного куска ткани надвое от Aboraл конец полипа 10. В то время как Nematostella полипы могут регенерировать , когда разрезанный на любом уровне, мы решили сократить взрослых на аборальной позиции в наиболее морфологически простого региона, physa, отчасти потому , что это близко к нормальной плоскости естественного бесполого деления 18, а также из - за него наблюдение разрешений и молекулярный анализ того, как все тело повторно собраны от простейших морфологических компонентов.

Балетмейстер система Nematostella Регенерация (NRSS) обеспечивает относительно простой набор морфологических критериев , которые могут быть использованы , чтобы выиграть прогресс любого аспекта регенерации путем ампутированной physa, при нормальных условиях культивирования или экспериментально возмущенных ситуаций , таких как небольшие лечения молекулы, генетических манипуляций или экологического изменения. Как и ожидалось, NRSS становится принята в качестве морфологического помост, на котором можно ссылаться на клеточные и молекулярные события регенерации10.

Наконец наш метод резки производит зияющую дыру на несколько порядков больше , чем контактный точки прокола , используемой в недавнем исследовании 17, но оба раны заживают в течение около 6 часов. Документирование визуально арестовывая и отдельные фазы закрытия раны следует предложить экспериментальные подходы для объяснения кажущейся независимости от размера раны и времени, которое требуется, чтобы закрыть. Таким образом, более глубокое визуальное понимание аборальной процесса ампутации, предусмотренных этим протоколом, будет способствовать дальнейшие исследования в этой системе регенерации модели и расширить применение этой системы с использованием промежуточной Nematostella vectensis.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

1. Кондиционер животных для температуры, питания и цикл свет / темнота

  1. Получить Nematostella vectensis взрослых от одного из многочисленных лабораторий Nematostella по всему миру, или поставщика некоммерческий (таблица 1)
  2. Поддерживать Nematostella при постоянной температуре (обычно от 18 до 21 ° C) в темноте, в "1 / 3x" Искусственная морская вода (ASW) при солености 12 промилле (п.п.). Поддержание культуры в простых натриево-известкового стекла блюд культуры, как правило , 250 мл или 1,5 л мощностью 11.
    Примечание: Эти простые условия культивирования обычно используются среди лабораторий, изучающих Nematostella, но уход культура также может быть автоматизировано 19.
  3. Поток Nematostella свеже вылупившихся артемии науплии 2 - 4 раза в неделю. Hatch цисты артемии в полную силу (36) п.п. или 1 / 3x ASW при 30 ° C, в неглубокой прямоугольной стеклянной посуде 20 или влюбой из ряда небольших масштабах, коммерческих или самодельных артемии инкубаторах. Если инкубатор не доступен, креветки вылупляются при комнатной температуре, но сделать это более медленно.
    Примечание: Для этого часто требуется более 24 ч для завершения.
  4. Заменить культуру воды анемона не реже одного раза в неделю. Для лучшего здоровья взрослых, тщательно очистить (без мыла) культуры миски один раз в неделю накопленных слизистых выделений, которые покрывают чашу и может ловушку несъеденная пищевых продуктов и отходов, а также запутать животных.

2. Выбор и релаксация Питательно условных животных

  1. Выберите размер соответствием полипы приблизительно одинаковой длины (3 - 5 см, когда, естественно, расслаблены) и поместить их в миску, отделенной от колонии в течение трех дней до ампутации.
    Примечание: количество животных, отобранных для резки будет определяться экспериментом проводится, конечно, но в целом мы рекомендуем, по крайней мере пять животных на одну точку образца с шестью репликаций. Таким образом,В типичном эксперименте минимум 30 животных будет предварительно выбран. В общем, имеет смысл выбрать более чем минимальное число (30), так как ампутации, которые нерегулярно (см ниже) может впоследствии повлиять на выигрыш.
  2. Удалить блюдо из отобранных животных из инкубатора в комнате свет, по крайней мере за один час до ампутации.
    Примечание: Время экспозиции на свету и вибрации обработки, вероятно, приведет животные сокращаться, поэтому они должны быть адаптированы или "смягчены" путем инкубации на лабораторном столе. Животные станут тугоплавкого на ощупь и освещенность, и в этот момент можно перемещать осторожно пипеткой.
  3. Дополнительно: Обезболить животных путем добавления 7,5% MgCl 2 (в 1 / 3x ASW). Осторожно добавьте раствор MgCl 2 в миску со стандартной пластиковой 5 мл пипетки.
    Примечание: Хотя животные в конечном счете станет приученный к свету и к физической манипуляции, может быть предпочтительным, чтобы давать наркоз животным для поддержания или "исправить" Tон расслабленном состоянии после того, как они стали удлиненные 16,21,22.
  4. Используйте широкий канал (> 0,5 см), пластик пипетки для передачи (в 1 / 3x ПЛО) пяти животных из бассейна, чтобы отсечь, в нижней части стерильной резки стекла тарелки диаметром 100 мм, содержащей 12 п.п. ASW. Поместите блюдо на сцену стереомикроскопа с переменным увеличением от 10 - 40х.
    Примечание: Если животные не были под наркозом и расслабленным для резки, они все еще могут реагировать на прикосновения и стереоскоп освещения и, таким образом, возможно, потребуется несколько минут, чтобы стать расслабленным снова.

3. Ампутация

  1. Использование стерильным скальпелем, ампутацию аборальном physa от каждого полипа, с целью получить участок physa, который приблизительно до тех пор, как он широкий и не содержащий брыжейку.
    Примечание: Идеальный сайт вырезать просто аборальная к прекращению брыжейки. На плоскости резания происходит переход от брыжейки собственно к тонкому лИнес , соответствующий каждому мезентериальной вставки (смотри рисунок 1, стрелки). Отсутствие брыжейки имеет решающее значение , поскольку он производит слизистый , которые могут облегчить "затыкать" дыры 17,30.
    1. Поместите лезвие скальпеля в контакте с животным в желаемом месте ампутации. Делайте это либо без посторонней помощи (руки), или осторожно захватывая тело животного с # 5 щипцов (Dumont стиле или подобное).
    2. Вырезать через ткань, усиливая изогнутое лезвие скальпеля в «качалке» движения по всему телу.
      Примечание: Ткань должна разрывать чисто, как скальпель качались и освободить нужный раздел physa от донора. Однако, если небольшой кусочек ткани до сих пор соединяет тело и physa, вырезать его с помощью скальпеля. Не пытайтесь отделить соединенные части, потянув, так как это может привести к повреждению physa.
  2. Удалите каждую ампутировали 'донора' полип из чашки и вернуть его к SEPAЧаша скорость маркированы '' объединенные с ампутированными конечностями; дата чашу и вернуть его в маточной культуры.
    Примечание: Ампутированные полипы исцелит рану аборальной в течение суток, а затем можно подавать в обычном режиме. Они будут регенерировать нормально выглядящую physa в течение двух недель и в этот момент physa может быть ампутированными снова, если это необходимо.
  3. Полоскание вырезанную physa, которые остаются в разделочной блюдо в 12 п.п. ASW, а затем перенести каждую physa в отдельную стерильную лунку в мульти-луночный культуральный планшет, который уже имеет 10 мл 12 п.п. ASW в каждую лунку.
    Примечание: В этом примере используется шесть-луночного планшета, с каждым хорошо владеющее 10 мл морской воды и пять вырезанной physa. В общей морской воде должна охватывать physa достаточно, чтобы избежать воздействия воздуха из-за движения при обращении с ними и потенциального испарения. Пластина или скважины должна иметь крышку.
  4. Повторите шаги 3.1 - 3.3, чтобы собрать по меньшей мере 5 physa в каждую лунку зарезервированное для каждого экспериментального лечения.
  5. Выдержите physa при температуре, которая будет провIde наилучшую скорость регенерации для планируемых экспериментальных допросов. Поместите пластину, содержащую physa в температуре, отрегулированной инкубаторе, при фиксированной температуре, определенной желаемой скорости регенерации.
    Примечание: physa будет регенерировать недостающие ткани и образуют полную полип при инкубации при температуре от 15 до 27 ° С. Скорость регенерации зависит от температуры в течение первых двух стадий, за исключением. Средний день для достижения Этап 4 для всех температур 7 суток после срезки и это также совпадает с регенерацией при 21 ° C. При 27 ° С, 4 этап достигается примерно 3 дня раньше и при 15 ° С, стадия 4 задерживается примерно на 3 г по сравнению с регенерацией при 21 ° C (также см Reference 10).

4. Оценка Регенерация с постановкой системы Nematostella регенерации (NRSS)

  1. Забьет physa с ​​помощью стерео-соединение микроскопа с переменной Magnificвания (10 - 80X). Оценка свежесрезанные Nematostella physa в стадии 0 и продолжить счет в то же время каждый день после ампутации (ДПА) , используя NRSS 10.
    Примечание: Для ключевых критериев постановки и подробнее см Reference 10.
    1. Оценка physa как стадия 0 (открытая рана), если свежесрезанных physa появляется в виде формы купратах массы, напоминающей вялый воздушный шар, с открытым участок раны, скорее всего виден.
      Примечание: края раны также могут склеиваться с самого начала, но ткань будет по-прежнему быть свернуты и не хватает жесткости. Края открытой раны может наблюдаться претерпевает радиальное сжатие, как рана заживает.
    2. Оценка physa как 1 этап (Рана), если рана ампутация появляется закрыто.
      Примечание: Раны расположение будет соответствовать будущему оральной полюсу. Наружная поверхность вокруг будущего оральной полюса может начать показывать различные арки, соответствующие нижележащих радиально симметричным энтодермальных мезентериальных вставками.
    3. Показатель рНYSA в Стадии 2 (радиальный) Арчес если поверхность полости рта полюса появляется завышена, открывая восемь поднятых арок, располагающихся в радиально-симметричной рисунком и разделенных канавками. Наблюдать небольшие, полусферических волдыри на вершине арки. Они будут столь же высокой, как широкий, вероятен временный характер, и первоначально включала одним слоем эктодермы клетки.
      Примечание: В некоторых случаях двухслойные везикулы может стабилизироваться. Примечание: При этом или более поздних стадиях слизистая слой может появиться инкапсулировать physa (рисунок 2) в мембранном 'оболочки'. Этот герметизирующий материал должен быть удален, чтобы облегчить скоринг.
    4. Оценка physa как стадия 3 (Tentacle), если бутоны щупалец, содержащих эндодермальных и эктодермальные слои ткани стабильно образуются в полости рта конца, по крайней мере некоторых радиальных арок.
      Примечание: Щупальца длиннее, чем они широки и минимально подвижны. Physa покажет увеличилась, но переменную инфляции, так что брыжейки зачатки может стать визавикими простирающийся от мезентериальной вставки в полость тела (первичная клетка).
    5. Оценка physa в стадии 4 (линейный мезентериев), если physa содержит восемь различных, видимые мезентерий, которые простираются в первичная клетка из вставок в стенке тела, оральные-аборальная длины, которые более чем в два раза их радиальной ширины, измеренной от того, где они появляются для подключения в глотку на ее аборальной конце (enterostome).
      Примечание: Четыре или меньше мезентериев имеют "гофрированные" внутренние свободные края. Глотка видна. Более восьми щупалец видны, подвижны, а иногда они сжимаются в тело.
    6. Оценка physa как стадия 5 (преимущественно плиссе мезентериев) если physa имеет более четырех мезентерий с плиссировка и плиссировка более полно и извилистый, чем на этапе 4. Животное имеет почти "нормальный" взрослый внешний вид, но нет никаких видимых гонад клетки.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Прогрессирование морфологических событий во время регенерации в отрезанной physa показана на рисунке 1А, который включает в себя представительные вид physa на каждом этапе NRSS. Типичный сайт physa разрез показан на взрослого (Arrowheads). На фотографиях на рисунке 1А показывают прогрессивную регенерацию полости рта и тела структур из свежесрезанных physa через полностью сформированные полипа. Рисунок 1B, C показано расположение внутренн...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Использование Nematostella в качестве модели заживления ран и регенерации становится все более популярным. Таким образом, важно, чтобы иметь возможность визуализировать морфологические закономерности конкретного протокола, прежде чем эффективных клеточных и молекулярных анализов могут быть назначены и сравнены. Nematostella имеют высокую степень регенеративной «гибкости», будучи в состоянии реформировать практически любую недостающую структуру ампутирована в любом месте, на пост-Planula этапах жизни. Т...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Эта работа была поддержана Нью-Йорк Stem Cell Science (NYSTEM C028107) Грант на ОТВ.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Nematostella vectensis, взрослыхМорская биологическая лаборатория (MBL)некоммерческийпоставщик
Стеклянная чашка для культуры, 250 млCarolina Biological Supply741004250 мл
стеклянная чашка для культуры, 1 500 млCarolina Biological Supply7410061 500 мл
полиэтиленовая пипетка для переноса, 5  mLСША Scientific 1022-2500узкий канал, градуированный
полиэтиленовый трансферный пипет, коническийSamco202-205отрезал 1 дюйм кончика для изготовления широкого отверстия
Одноразовый скальпельПерьевая безопасная бритва Co. LtdNo 10лезвие должно быть изогнуто
# 5 Dumont Пинцет тонкой точкиRobozRS5045альтернативные поставщики доступны
чашка Pyrex Petri, диаметр 100 ммCorning3160может заменить другие стеклянные пластины Петри
стерильные 6-луночные пластиныCorning Falcon 353046или аналогичный от другого производителя
Стерильный 12-луночный планшетNunc 150628или аналогичная от другого производителя
Стерильная 24-луночная пластинаCellstar, Greiner bio-one662-160или аналогичная от другого производителя
Рассол креветки hathery kitSan Francisco Bay; drsfostersmith.comCD-154005вариант для выращивания рассола креветок
пирексраспространенная в продуктовых магазинахопция для выращивания рассола
Искусственная смесь морской воды 50 галлонов и более Instant Ocean; drsfoster-smith.comCD-116528других брендов может быть достаточно
Пластиковый контейнер для приготовления запаса ASWразличныераспространенные 25 галлонные пластиковые мусорные баки OK
Полипропилен CarboyCarolina Biological Supply716391Для рабочего запаса ASW @ 12 ppt
Beaker, Graduated, 4,000 млPhytoTechnology LaboratoriesB199Для разбавления 36 ppt ASW до 12 ppt
Стереомикроскопы и источники светаразличного назначения с непрерывным увеличением 1 - 40X

Ссылки

  1. Lenhoff, S. G., Lenhoff, H. M. Hydra and the Birth of Experimental Biology: Abraham Trembley's Memoirs Concerning the Natural History of a Type of Freshwater Polyp with Arms Shaped like Horns. , The Boxwood Press. (1986).
  2. Trembley, A. Mémoires pour servir à l'histoire d'un genre de polypes d'eau douce, à bras en forme de cornes. , Jean & Herman Verbeek. (1744).
  3. Poss, K. D. Advances in understanding tissue regenerative capacity and mechanisms in animals. Nat Rev Genet. 11 (10), 710-722 (2010).
  4. Galliot, B. Hydra, a fruitful model system for 270 years. Int J Dev Biol. 56 (6-8), 411-423 (2012).
  5. Gold, D. A., Jacobs, D. K. Stem cell dynamics in Cnidaria: are there unifying principles? Dev Genes Evol. 233 (1-2), 53-66 (2013).
  6. Holstein, T. W., Hobmayer, E., Technau, U. Cnidarians: an evolutionarily conserved model system for regeneration? Dev Dyn. 226 (2), 257-267 (2003).
  7. Amiel, A. R., et al. Characterization of Morphological and Cellular Events Underlying Oral Regeneration in the Sea Anemone, Nematostella vectensis. Int J Mol Sci. 16 (12), 28449-28471 (2015).
  8. Warren, C. R., et al. Evolution of the perlecan/HSPG2 gene and its activation in regenerating Nematostella vectensis. PLoS One. 10 (4), e0124578(2015).
  9. Gong, Q., et al. Integrins of the starlet sea anemone Nematostella vectensis. Biol Bull. 227 (3), 211-220 (2014).
  10. Bossert, P. E., Dunn, M. P., Thomsen, G. H. A staging system for the regeneration of a polyp from the aboral physa of the anthozoan Cnidarian Nematostella vectensis. Dev Dyn. 242 (11), 1320-1331 (2013).
  11. Stefanik, D. J., Friedman, L. E., Finnerty, J. R. Collecting, rearing, spawning and inducing regeneration of the starlet sea anemone, Nematostella vectensis. Nat Protoc. 8 (5), 916-923 (2013).
  12. Tucker, R. P., et al. A thrombospondin in the anthozoan Nematostella vectensis is associated with the nervous system and upregulated during regeneration. Biol Open. 2 (2), 217-226 (2013).
  13. Passamaneck, Y. J., Martindale, M. Q. Cell proliferation is necessary for the regeneration of oral structures in the anthozoan cnidarian Nematostella vectensis. BMC Dev Biol. 12, (2012).
  14. Trevino, M., Stefanik, D. J., Rodriguez, R., Harmon, S., Burton, P. M. Induction of canonical Wnt signaling by alsterpaullone is sufficient for oral tissue fate during regeneration and embryogenesis in Nematostella vectensis. Dev Dyn. 240 (12), 2673-2679 (2011).
  15. Renfer, E., Amon-Hassenzahl, A., Steinmetz, P. R., Technau, U. A muscle-specific transgenic reporter line of the sea anemone, Nematostella vectensis. Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (1), 104-108 (2010).
  16. Burton, P. M., Finnerty, J. R. Conserved and novel gene expression between regeneration and asexual fission in Nematostella vectensis. Dev Genes Evol. 219 (2), 79-87 (2009).
  17. DuBuc, T. Q., Traylor-Knowles, N., Martindale, M. Q. Initiating a regenerative response; cellular and molecular features of wound healing in the cnidarian Nematostella vectensis. BMC Biol. 12, (2014).
  18. Hand, C., Uhlinger, K. R. Asexual reproduction by transverse fission and some anomalies in the sea anemone Nematostella vectensis. Invert Biol. 114, 9-18 (1995).
  19. Fritzenwanker, J. H., Technau, U. Induction of gametogenesis in the basal cnidarian Nematostella vectensis(Anthozoa). Dev Genes Evol. 212 (2), 99-103 (2002).
  20. Magie, C., Bossert, P., Aramli, L., Thomsen, G. Science's super star: The starlet sea anemone is an ideal tool for student inquiry. The Science Teacher. 83 (3), 33-40 (2016).
  21. Genikhovich, G., Technau, U. In situ hybridization of starlet sea anemone (Nematostella vectensis) embryos, larvae, and polyps. Cold Spring Harb Protoc. (9), (2009).
  22. Magie, C. R., Pang, K., Martindale, M. Q. Genomic inventory and expression of Sox and Fox genes in the cnidarian Nematostella vectensis. Dev Genes Evol. 215 (12), 618-630 (2005).
  23. Chera, S., Kaloulis, K., Galliot, B. The cAMP response element binding protein (CREB) as an integrative HUB selector in metazoans: clues from the hydra model system. Biosystems. 87 (2-3), 191-203 (2007).
  24. Reitzel, A. M., Burton, P. M., Krone, C., Finnerty, J. R. Comparison of developmental trajectories in the starlet sea anemone Nematostella vectensis: embryogenesis, regeneration, and two forms of asexual fission. Invertebr Biol. 126, 99-112 (2007).
  25. Ikmi, A., McKinney, S. A., Delventhal, K. M., Gibson, M. C. TALEN and CRISPR/Cas9-mediated genome editing in the early-branching metazoan Nematostella vectensis. Nat Commun. 5, 5486(2014).
  26. Jahnel, S. M., Walzl, M., Technau, U. Development and epithelial organisation of muscle cells in the sea anemone Nematostella vectensis. Front Zool. 11, 44(2014).
  27. Kelava, I., Rentzsch, F., Technau, U. Evolution of eumetazoan nervous systems: insights from cnidarians. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 370 (1684), (2015).
  28. Nakanishi, N., Renfer, E., Technau, U., Rentzsch, F. Nervous systems of the sea anemone Nematostella vectensis are generated by ectoderm and endoderm and shaped by distinct mechanisms. Development. 139 (2), 347-357 (2012).
  29. Richards, G. S., Rentzsch, F. Transgenic analysis of a SoxB gene reveals neural progenitor cells in the cnidarian Nematostella vectensis. Development. 141 (24), 4681-4689 (2014).
  30. DuBuc, T. Q., et al. In vivo imaging of Nematostella vectensis embryogenesis and late development using fluorescent probes. BMC Cell Biol. 15, (2014).
  31. Kaur, J., Debnath, J. Autophagy at the crossroads of catabolism and anabolism. Nat Rev Mol Cell Biol. 16 (8), 461-472 (2015).
  32. Carroll, B., Korolchuk, V. I., Sarkar, S. Amino acids and autophagy: cross-talk and co-operation to control cellular homeostasis. Amino Acids. 47 (10), 2065-2088 (2015).
  33. Glick, D., Barth, S., Macleod, K. F. Autophagy: cellular and molecular mechanisms. J Pathol. 221 (1), 3-12 (2010).
  34. Rodolfo, C., Di Bartolomeo, S., Cecconi, F. Autophagy in stem and progenitor cells. Cell Mol Life Sci. 73 (3), 475-496 (2016).
  35. Guan, J. L., et al. Autophagy in stem cells. Autophagy. 9 (6), 830-849 (2013).
  36. Phadwal, K., Watson, A. S., Simon, A. K. Tightrope act: autophagy in stem cell renewal, differentiation, proliferation, and aging. Cell Mol Life Sci. 70 (1), 89-103 (2013).
  37. Varga, M., Fodor, E., Vellai, T. Autophagy in zebrafish. Methods. 75, 172-180 (2015).
  38. Varga, M., et al. Autophagy is required for zebrafish caudal fin regeneration. Cell Death Differ. 21 (4), 547-556 (2014).
  39. Gonzalez-Estevez, C., Salo, E. Autophagy and apoptosis in planarians. Apoptosis. 15 (3), 279-292 (2010).
  40. Buzgariu, W., Chera, S., Galliot, B. Methods to investigate autophagy during starvation and regeneration in hydra. Methods Enzymol. 451, 409-437 (2008).
  41. Tettamanti, G., et al. Autophagy in invertebrates: insights into development, regeneration and body remodeling. Curr Pharm Des. 14 (2), 116-125 (2008).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Наводить Complete полипа Регенерация от спинных Physa из Starlet актинии Nematostella vectensis
Свяжитесь с нами
Рекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

Авторские права © 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.