Method Article

Развитие прямого Pulp-укупорки модель для оценки пульпозного ранозаживляющим и Репаративная дентина Формирование у мышей

DOI:

10.3791/54973

⸱

January 12th, 2017

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1The Shapiro Family Laboratory of Viral Oncology and Aging Research, The UCLA School of Dentistry, 2UCLA Jonsson Comprehensive Cancer Center, 3David Geffen School of Medicine at UCLA

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Мы опишем метод шаг за шагом выполнения прямых пульпы на мышах зубов для оценки пульпарного заживления раны и формирования репаративного дентина в естественных условиях.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Зубная пульпа - это жизненно важный орган зуба, полностью защищенный эмалью и дентином. Когда пульпа подвергается воздействию из-за кариесогенных или ятрогенных повреждений, ее часто закрывают биосовместимыми материалами, чтобы ускорить заживление пульпозной раны. Конечная цель состоит в том, чтобы регенерировать репаративный дентин, физический барьер, который функционирует как «биологическое уплотнение» и защищает подлежащую ткань пульпы. Несмотря на то, что эта процедура прямого удаления пульпы уже давно используется в стоматологии, молекулярный механизм заживления пульпозной раны и образования репаративного дентина до сих пор плохо изучен. Чтобы индуцировать репаративный дентин, укупорка пульпы была проведена экспериментально у крупных животных, но в меньшей степени у мышей, предположительно из-за их небольших размеров и вытекающих из этого технических трудностей. Здесь мы представляем подробный, пошаговый метод выполнения процедуры укупорки пульпы у мышей, включая подготовку полости, подобной полости класса I, размещение материалов для укупорки пульпы и процедуру реставрации с использованием стоматологического композита. Наша модель мышей с крышкой пульпы будет играть важную роль в исследовании фундаментальных молекулярных механизмов заживления пульпозной раны в контексте репаративного дентина in vivo, позволяя использовать трансгенных или нокаутных мышей, которые широко доступны в исследовательском сообществе.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Кариес зубов является одним из наиболее распространенных заболеваний полости рта и основной причиной хирургических вмешательств в зубные ряды почти у всех людей1,2. Прогноз хирургических вмешательств и реставраций зуба во многом зависит от правильной реакции пульпы и успешного заживления раны. Действительно, кариес, который проникает глубоко через эмаль и дентин, часто приводит к обнажению подлежащей пульпы, которая часто «закрыта» стоматологическими материалами, такими как гидроксид кальция (Ca(OH)2) или гидравлические кальциево-силикатные цементы (HCSC), включая минеральные триоксидные агрегаты (MTA). Конечной целью такой процедуры укупорки пу....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Мыши были приобретены у Jackson Laboratory и хранятся в патогена вивария в UCLA Отдел лабораторных животных медицины (DLAM). Эксперименты проводились в соответствии с утвержденными институциональными руководствами Исследовательского комитета канцлера животных (ARC # 2016-037).

1. Мышь обезболиванием

  1. Используйте восемь-недельных самок мышей C57 / НД6 (п = 3).
  2. Обезболить мышей с использованием растворов (5 мг / кг веса мыши) кетамином (80-120 мг / кг веса мыши) / ксилазина и управлять внутрибрюшинно (IP) в дозе 10 мл / кг.
  3. Приготовьте кетамином (80 - 120 мг / кг) / ксилазином (5 мг / кг) растворы и вводить их внутрибрюшинно (IP) в....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Здесь мы показали процедуры шаг за шагом выполнить покрытие пульпы на мышах зубов. Одним из ключевых аспектов пульпы у мышей должна иметь соответствующее устройство. В связи с этим, имея микроскопа с 10 - кратным увеличением мощности является существенным (Фиг.1А). Чтобы создать класс-I-подобный препарат в зуб, мы использовали ¼ круглый заусенцев в электрической высокой скорости наконечник при 200000 оборотов в минуту (рис 1В). В качестве альтернативы, л.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В настоящее время существует несколько различных экспериментальных моделей , доступных для проверки эффектов в естественных условиях стоматологических материалов, строительных лесов, или факторов роста на одонтогенного дифференциации зубных стволовых клеток пульпы (DPSCs) 13. Эти модели включают в себя внематочной аутологичной трансплантации DPSCs в орган, такой как капсулу почки или подкожное трансплантацию DPSCs в иммунодефицитом мышей с подмостей 14,15. Тем не менее, эти методы ограниче.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторам нечего раскрывать.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Это исследование было поддержано R01DE023348 (RHK) из NIDCR / NIH и Научно-исследовательского гранта факультета (RHK) из Совета по научным исследованиям ученого Сената Лос-Анджелеса отделения Калифорнийского университета.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Стереомикроскоп BM-LEDMEIJI TechnoMicroscope 
Optima MCX-LED Bien Air Dental1700588-001Электромоторный двигатель
изофлуранHenry scheinhealth NDC 11695-0500-2
1/4 круглый борBrasseler001092T0
Эндодонтический K-файлRoydent98947
ProRoot MTADentsplyPROROOT5WMTA
Paper pointHenry schein100-3941
Ultra-EtchUltradent product Inc.Кислотный травитель
OptiBond SoloPlusKerr29669Клеи
Coltolux LEDColtene/whaledent Inc.C7970100115Отверждаемый световой блок
Характеризация тонировкиBiscoT-14012Текучий композитный
SkyscanBreuker1275uCT сканер
MicromThermoHM355SMicrotome
Hematoxyline-1Thermo Scientific7221
Eosin-YThermo Scientific7111
Cytoseal 60Thermo Scientific8310-16Монтажное решение
animal

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Dye, B., Thornton-Evans, G., Li, X., Iafolla, T. Dental caries and tooth loss in adults in the United States, 2011-2012. NCHS Data Brief. (197), 197(2015).
  2. Bagramian, R. A., Garcia-Godoy, F., Volpe, A. R. The global increase in dental caries. A pending public health crisis. Am J Dent<....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Direct Pulp cappingPulpal Wound HealingReparative Dentin FormationMouse ModelCavity PreparationMTA PlacementDental CompositeMicro CT ScanHistological AnalysisDMP1 Staining

Related Articles