Выращивание<em&gt; Caenorhabditis Элеганс</em&gt; В трех измерениях в лаборатории

Tong Y. Lee; Kyoung-hye Yoon; Jin I. Lee

doi:10.3791/55048

Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Выращивание

18.3K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/55048

⸱

12 декабря 2016 г.

Tong Y. Lee¹ , Kyoung-hye Yoon¹ , Jin I. Lee¹

¹Division of Biological Science and Technology, Yonsei University

В этой статье

Краткое содержание

Мы представляем простой метод для построения 3D-систем культивирования нематод под названием NGT-3D и NGB-3D. Они могут быть использованы для изучения нематод пригодности и поведения в местах обитания, которые более похожи на натуральные Caenorhabditis Элеганс места обитания , чем стандартные 2D - лаборатория C. Элеганс культуры пластин.

Аннотация

Использование генетических модельных организмов, таких как Caenorhabditis elegans, привело к плодотворным открытиям в биологии за последние пять десятилетий. Большая часть того, что мы знаем о C. elegans, ограничена лабораторным выращиванием нематод, которые могут не обязательно отражать среду, в которой они обычно обитают в природе. Выращивание C. elegans в 3D-среде обитания, которая больше похожа на 3D-матрицу, с которой черви сталкиваются в гнилых фруктах и растительном компосте в природе, может выявить новые фенотипы и поведение, не наблюдаемые в 2D. Кроме того, эксперименты в 3D могут показать, насколько фенотипы, которые мы наблюдаем в 2D, актуальны для червя в природе. Здесь представлен новый метод, с помощью которого C. elegans нормально растет и размножается в трех измерениях. Выращивание C. elegans в Nematode Growth Tube-3D (NGT-3D) может позволить нам измерить репродуктивную пригодность штаммов C. elegans или различные условия в 3D-среде. Мы также представляем новый метод, получивший название Nematode Growth Bottle-3D (NGB-3D), для культивирования C. elegans в 3D для микроскопического анализа. Эти методы позволяют ученым изучать биологию C. elegans в условиях, которые в большей степени отражают окружающую среду, с которой они сталкиваются в природе. Это может помочь нам понять лежащую в основе эволюционную значимость физиологии и поведения C. elegans, которые мы наблюдаем в лаборатории.

Введение

Изучение нематоды Caenorhabditis elegans в лаборатории привело к плодотворным открытиям в области биологии за последние пять десятилетий¹. C. elegans был первым многоклеточным организмом^, геном которого был секвенирован в 1998 году2, и он оказал неоценимое влияние на понимание вклада отдельных генов в развитие, физиологию и поведение всего организма. В настоящее время ученые стремятся глубже понять, как эти гены могут способствовать выживанию и репродуктивной пригодности организмов в их естественной среде, задавая вопросы об экологии и эволюции на генетическом^{уровне.}

C. elegans сн....