Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Измерение и изменяющий Спаривание Drive в Мале

11.1K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/55291

⸱

15 февраля 2017 г.

 ,  ,  , 
1F.M. Kirby Neurobiology Center, Boston Children’s Hospital, 2Harvard NeuroDiscovery Center, Harvard Medical School, 3Department of Neurobiology, Harvard Medical School

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

В данной статье описывается поведенческий анализ , который использует мужской брачный диск в Drosophila melanogaste R для изучения мотивации. Используя этот метод, исследователи могут использовать методы нейрогенетических передовые летать, чтобы раскрыть генетические, молекулярные и клеточные механизмы, которые лежат в основе этой мотивации.

Аннотация

Несмотря на десятилетия исследования, нейронные и молекулярные основы мотивационных состояний остаются тайной. Недавно мы разработали новый, редукционист и масштабируемую систему для глубокого изучения мотивации , используя матовую привод мужской дрозофилы (Drosophila), методы , для которых мы здесь подробно. Поведенческая парадигма сосредотачивается на обнаружении того, что самец спаривание диск уменьшается наряду с плодородие в течение повторных совокуплений и выздоравливает в течение ~ 3 d. В этой системе, мощные нейрогенетических инструменты, доступные в лету сходятся с генетической доступности и мнимого электросхема для сексуального поведения. Такая конвергенция позволяет осуществлять быструю изоляцию и опрос небольших популяций нейронов с определенными мотивационными функциями. Здесь мы подробно проектирование и выполнение анализа сытости, который используется для измерения и изменения мотивации ухаживания в мужском лету. С помощью этогоанализ, мы также показывают, что низкий спаривание привод самец может быть преодолена путем стимуляции дофаминергических нейронов. Анализ сытости является простым, доступным и устойчивым к воздействиям генетического фона. Мы ожидаем, что анализ сытости, чтобы генерировать много новое понимание нейробиологии мотивационных состояний.

Введение

Работа в Drosophila обеспечила глубокую и новаторскую понимание многих биологических явлений, в том числе характер гена 1, принципы эмбрионального развития 2, 3 циркадных ритмов, а также разработка и подключение нервной системы 4, 5, 6. Мотивация остается гораздо менее понятны, чем эти явления, возможно, из-за ограничений на системы, которые были изучены до сих пор. Мотивация в лету, в первую очередь изучается в контексте голода, который создает много проблем в связи с их исчезающе малой потребляемой пищи на кормления бой и экзоскелет, чтобы исключить возможность явных признаков отложения жира. Следовательно, существует потребность в расширении систем, используемых для изучения мотивации в лету.

Мы описываем поведенческую основу для изучения сопрягаемой привода вДрозофилы. Эта система использует преимущества нейрогенетических инструментов в лету, а также доступность 7, 8, 9, 10, 11, 12 и мнимого Коннектом его половой диморфизм схемы 8, 13. Кроме того, большая часть врожденного 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 и 22 уроков, 23, 24 сенсомоторные схемы управления ухаживание была разработана в деталях, предоставляя уникальную возможностьЧтобы найти узел точную схему, на которой мотивация падающее. Мы недавно сообщили , что, в лету, как и у людей, уровень допамина играют центральную роль в сопрягаемой привода 25, 26, 27. Мы получили генетический доступ к соответствующему допамин-продуцирующих и приема нейронов в лету, что облегчает и детальной молекулярно - сеансового уровня анализа этого явления законсервированной с помощью анализов мы описываем здесь 25.

Добавим к поведенческим анализов в Zhang и соавт. 25 новая плоская поведенческая арена , которая позволяет видео скоринг, который мы называем анализ 2-мерный (2-D) сытости, значительное улучшение по сравнению с предыдущими методами. Следовательно, новый анализ является более масштабируемым и количественной оценке, и поэтому больше подходит для генетических экранов генов и нейронов, участвующих в мотивации. Мы используем этот новый анализ, вместе с ухаживания анализов и neurogeромагнитных манипуляции, чтобы продемонстрировать, как измерять и изменять ответная диск в лету.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Примечание: Этот протокол описывает получение (разделы 1 - 3), исполнение (раздел 4), а также анализ (Раздел 4) сытости анализов 2-D. Затем, используя дофаминергической стимуляции в качестве примера, в разделе 5 показано, как сочетать thermogenetic стимуляцию с сытости анализов 2-D, чтобы вызвать гиперсексуальность. Раздел 6 описывает 3 способа проверки результатов анализов сытости 2-D. Наконец, в разделе 7 показано, как измерить восстановление сопрягаемой привода у самцов мух.

1. Металлообрабатывающее 8- и 32-камерных Поведенческие Аренас

Примечание: Каждая поведенческая арена состоит из нескольких слоев лазерной резки пластиковых листов , скрепленных с помощью винтов с шестигранной головкой и большим пальцем гайки на каждом из четырех углов (Рис . 1А)

  1. Изготовить слои арене. Изготовить каждый слой , используя лазерный резак , чтобы вырезать листы оргстекла к соответствующей формы (рис 1B, 1C для продуктов).
    Примечание: Многие исследования Institutioнс имеют лазерные резаки в своих механических мастерских или мейкера пространств. Если учреждение имеет доступ к лазерным резаком, продолжайте выполнять следующие шаги. Если нет, то следуйте инструкциям, приведенным в шаге 1.2 вместо этого.
    1. Для каждого слоя, откройте шаблон проектирования в программном обеспечении лазерного резака.
      Примечание: Проекты могут быть найдены в соответствующим названием PDF - файлов (например, 8-камерный Арена - Layer 2 - Doors.pdf) в дополнительного материала 1. Этот файл также содержит аннотации для типа пластика , которые будут использоваться (например, 1 / 8 дюймов (т.е. 3,175 мм) прозрачный акрил). Точная толщина каждого слоя не имеет решающего значения. Основным требованием является обеспечение 0,12 дюйма (3 мм) или более свободного вертикального пространства в камерах.
    2. Настройка параметров лазера (мощность, фокус и т.д.) для типа и толщины пластика , которые будут использоваться. Поместите пластик в отрезателя кровати лазерной и запустить лазерный резак.
      Примечание: Эти настройки будут широко варьироваться в зависимости от лазерного cutteг модель и сила его лазера. Найти подходящие настройки, основанные на прошлом опыте или путем сокращения испытаний на лома пластика. Глубокие шестигранные гравюр включены в конструкции с выемкой шестигранные головки винтов. Эта функция позволяет одной рукой закручивания гаек большого пальца и позволяет арен отдыхать плашмя на скамейке (без выступающих головок винтов). Тем не менее, делая глубокие гравюр часто бывает трудно достичь, и отнимает много времени, используя лазерный резак. Этот шаг является необязательным и может быть пропущен, не влияя на поведенческие результаты.
    3. При разрезании дверную раму (Layer 2, рисунок 1А), а также использовать соответствующие параметры лазера для гравировки число камер , включенных в проект (как показано на Рисунке 1B, 1C).
  2. Оформить заказ с онлайн-лазерной резки переработчиков. Загрузите все файлы дизайна PDF для 8- и / или 32-камерной арене и указать тип материала (например, 1/8 дюйма (т.е. 3,175 мм) КлиоR акрил) на основе аннотаций в файлах. Результаты будут выглядеть как на фигурах 1В (8-камера арены) и 1С (32-камерная арены).
  3. Сборка арен с помощью четырех шестигранных винтов и четыре пальца гайки , чтобы выровнять и скрепить пластиковых слоев (Рис . 1А) На аренах будет выглядеть как на рисунке 1D, 1E (8-камера) и рис 1F, 1G (32-камеры).
    Примечание: Пищевой стенка (слой 4 на рисунке 1А) используется только для 2-D сытости анализов и опускается в 32-камерных арен, которые используются в брачных анализах.

2. Приготовление еды для 2-D сытости Пробирной

Примечание: Поскольку сытость анализ 2-Д охватывает 4,5 часа, летучая пища используется на арене, чтобы обеспечить питание и воду. Этот протокол использует, но не ограничивается, обычный кукурузной муки-агар летать пищу.

  1. Частично собрать 2-D сытости арены (8-камеры) с помощью слоев 3 - 6(см рисунок 1А для уровня заданий) и затяните его с накатанной гайки и винтов с шестигранной головкой.
  2. Поместите свежую пищу муха в чистую, микроволновой безопасной бутылки. Добавить достаточно воды , чтобы покрыть нижнюю поверхность бутылки (фиг.2А).
  3. Микроволновая печь еды на высоко в течение 30 - 45 сек. Ход выполнения и перемешать каждые 15 сек , пока не растает (рис 2B). ВНИМАНИЕ! Fly еды легко выкипает.
  4. Используйте притупляются 1000 мкл кончиком пипетки (рис 2C) медленно передавать ~ 1 мл расплавляют пищи в каждую камеру (рис 2D).
  5. Дайте пище resolidify при температуре 4 ° С в течение ~ 10 мин (рис 2E) до полного сборки арены (рис 2F).
  6. Используйте заполненную арену для экспериментов (см раздел 4) или хранить при температуре 4 ° С.
  7. Храните остатки пищи при 4 ° С и повторного использования.

3. Подготовка Virgin самок для поведенческого Assays

Примечание: 2-D сытости анализы используют большое количество девственных самок мух (~ 120 - 160 для полной поведенческой арены), которые трудно собрать с помощью стандартных методов. В данном разделе описывается альтернативный подход с использованием HS-спрятанный трансгенов на Y - хромосоме 28, который успешно используется в брачных анализах 25, 29. Запас используется для генерации белоглазой девственные самок имеет генотип w1118 (X) / HS-спрятанный (Y); + / + + / + (Блумингтон инвентарный номер 24638).

  1. Флип летит в новую бутылку когда - то 20 - 50% от куколок eclosed (см рисунок 3А, например) и имеется достаточное количество мужчин (5 - 10) распространяющиеся запас.
  2. Теплового шока оригинальную бутылку в ванну 37 ° C для горячей воды в течение 1 ч , чтобы в достаточной степени активировать HS-СПРЯТАННОЕ убить самцов (фигура 3В). После теплового шока, только самки Эклоз из этих бутылок и так будет оставаться девственницей до тех пор,анализов.
    Примечание: Убедитесь , что все стороны бутылки равномерно нагревается (рис 3A для воды линии). Продлить на этот раз до 2 ч, если 1 ч не является достаточным, чтобы усыпить всех лиц мужского пола.
  3. Изолировать накопившиеся самок в течение по крайней мере 3 дней до экспериментов , чтобы убедиться , что они достаточно стар , чтобы быть сексуально восприимчивым 25, 29.
    Примечание: Y-хромосомы меньше мужчин иногда возникают из этого запаса. Эти самцы имеют белые глаза и не подвержены воздействию теплового шока, потому что они не содержат HS-газоразрядных трансгенов. Они не могут производить сперму и , следовательно , не может уменьшить восприимчивость у самок 30, 31.

4. Выполнение и Забив 2-D сытости Assays

Примечание: Важно контролировать возраст самцов мух как изменения спаривание привода с возрастом. Этот протокол использует мужчин, которые 3 - 4 d старый 25 .

  1. Установите инкубатор до нужной температуры (например, 23 ° C для стандартных, экспериментов RT) и влажности (> 30%). Для инкубаторах без контроля влажности, оставляя за собой чашку воды в инкубаторе достаточно.
  2. Поместите 2-D сытость анализа арена в инкубаторе в течение ~ 30 мин, чтобы уравновесить температуру и для предотвращения образования конденсата в камерах в процессе эксперимента. Вращающиеся двери должны быть в открытом положении.
  3. Используйте муха аспиратор 32 отсосать 15 - 20 девственных самок в каждую камеру арены (рисунок 4).
    Примечание: Важно, что женщины и мужчины не под наркозом в тот же день, что и анализа. По нашему опыту, это может повлиять на женскую и мужскую восприимчивостью брачное поведение.
  4. Отберите 1 самец в каждую камеру.
  5. Поместите загруженную арену в инкубаторе под стандартной потребительской видеокамеры (рисунок 5) и пленки в течение 4,5 ч.
  6. Оценка видео, отмечая , когда каждый самец летать начинается и заканчивается каждый сопряженный (т.е. совокупление). Этот шаг может занять много времени на первый взгляд. С практикой, можно забить видео на скорости 5х или выше.
    Примечание: Так как мухи спариваются в течение ~ 20 мин при температуре ~ 23 ° C ( более короткий срок при более высоких температурах) , 29, можно пролистать первые 15 мин каждого спариванию.
  7. После регистрации все время спаривания, суммировать количество спариваний для каждой мухи (см показательные результаты).
  8. Используйте предоставленный код для генерации ethogram. См Дополнительный материал 2 для кода, инструкции, и, например, данные.
  9. С помощью CO 2 или холодной температуры обезболить мух перед их удалением.

5. Использование Thermogenetic Манипуляции обратного сытости в 2-D сытости Assays

Примечание: Этот протокол проверяет, является ли thermogenetic стимуляция определенной популяции нейронов может преодолеть чувство насыщения. Экспериментальная FLIэс выразить термочувствительного катион канал TRPA1 в определенных популяциях нейронов (БАС-TRPA1). Перечисленные ниже шаги применимы к стимуляции дофаминергических нейронов (TH-Gal4), которые были показаны в целях содействия ответная привода 25. Эти шаги могут быть использованы в сочетании с другими нейронными водителей, чтобы обнаружить другие группы населения, которые способствуют ответная диск.

  1. Для того, чтобы побудить thermogenetically спаривание поведения в сытых мух, повышают температуру в инкубаторе (например, от 23 ° C до 28,5 ° C) после завершения полного 4,5 ч 2-D сытости эксперимент.
  2. После того , как инкубатор достигнет желаемой температуры, продолжайте тепловой стимуляции и оценка вязки (т.е.. Совокуплений) самцов в течение 1 ч (см Представитель Результаты).
    Примечание: Температура и продолжительность стимуляции может варьироваться в зависимости от генотипа, поэтому необходимо устранить оптимальные условия, которые мешают суперстимуляции нейронов в то время как по-прежнему производя Robuй фенотип.

6. Использование ухаживания и Locomotion для проверки сытости

Примечание: В этом разделе описываются 3 дополнительных методов, которые могут быть использованы для проверки результатов анализов сытости 2-D. Они не требуются для каждого теста.

  1. Используйте ухаживания анализы для проверки сытости.
    1. Отберите один мужчина и одна девственница в каждой из 32 камер в ухаживании арене.
    2. Фильм мух за ~ 20 мин с использованием стандартной потребительской видеокамеры.
    3. Оценка индекса ухаживания (CI) для количественной оценки ухаживание 25; это доля времени , потраченное на выполнение брачного поведения (пение, следуя, и т.д..) и спаривание (т.е. совокупление) над окном в 5 мин. Это окно начинается с первого экземпляра брачного поведения. Если мужчина муха не начинается ухаживание в первые 15 мин, его CI 0. Наивные WT мух должен показать CI больше 0,9, в то время как полностью сытым муха должна иметь CI бElow 0.2. Другие меры , ухаживания могут быть также рассмотрены 23, 33.
  2. Забив ухаживание в сытости анализах 2-D
    1. Оценка количества времени , что мужчина муха проводит ухаживания, в течение определенного периода времени сытости анализа 2-D (например, первый час). Ухаживание определяется как мужчина , выполняющего любой шаг ритуала (пение, после и т.д.). В отличие в разделе 6.1.3, этот шаг не включает в себя время самец тратит спаривание.
    2. Разделить время ухаживания выше на общее время самец не сопряженным (т.е. не совокупляются) в тот же период времени. Например, если мужчина летать судов в течение 15 мин и помощников в течение 20 мин в течение первого часа, соотношение составляет 15 мин / (60 мин - 20 мин) = 0,375. Отношение показан как "Фракция nonmating время в ухаживании» в репрезентативных результатов.
  3. Использование локомоции анализа для оценки истощения
    1. Частично собрать 32-камера арены со всеми частями но контраст листа.
    2. Отберите один самец муха (ни одна женщина мух) в каждой из 32 камер в ухаживании арене.
    3. Фильм мух за ~ 10 мин с использованием стандартной потребительской видеокамеры.
    4. Отслеживание мух плагин MTrack2 в ImageJ (http://valelab.ucsf.edu/~nstuurman/ijplugins/MTrack2.html~~HEAD=pobj).

7. Восстановление после Спаривание Drive 2-D сытости Пробирной

  1. Выполните сытость анализ 2-D, как описано в разделе 4, но аспирата самец улетает в конце анализа.
  2. Изолировать мужских мух при 23 ° С в течение требуемого количества дней.
  3. Выполните сытости анализ 2-D с восстановленными мужчин и оценка их вязки (т.е. совокуплений) всего за 1 час (см Представитель Результаты).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Для того, чтобы охарактеризовать Drosophila сопрягаемой привод, 3-дневного возраста, WT Кантон-S самцы были протестированы в анализе на сытость 2-D. В течение анализа (4,5 ч), самцы спариваются в среднем 4,8 ± 0,3 (среднее ± стандартная ошибка среднего, SEM) раз. Спаривание инициируют в основном в течение первых 2 ч (78%) (рис 6А, 6В) и становятся менее частыми , поскольку анализ прогрессирует (рисунок 6А, 6В). Это уменьшение не из - за отсутств...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Мотивационные состояния могут быть сытым, поддерживается и отводили 34. Мы представляем анализ сытости 2-D, которая быстро и решительно измеряет все эти аспекты спаривание диска в лету. Этот анализ открывает возможность использования передовых мух генетические манипуляции для изучения молекулярных и схемы компонентов мотивированного поведения.

Анализ сытости зависит от способности самца успешно и судебную совокупиться, а также прекратить совокуплений в соответствующее...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Авторы благодарят Майка Крикмора, Драгану Рогуля и Мишель Франк за комментарии к рукописи. Павел Горелик оказывал техническую поддержку по изготовлению поведенческих арен. Эта работа проводилась в лаборатории Майка Крикмора и также поддерживается Фондом Уайтхолла (главный исследователь: Драгана Рогуля). S.X.Z. является стипендиатом Стюарта H.Q. и Виктории Куан в Гарвардской медицинской школе.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
1/16 дюйма прозрачный акрилMcMaster-Carr8589K12Используется для изготовления арен; см. Дополнительный материал 1 для дизайна.
1/8 дюйма прозрачный акрилMcMaster-Carr8589K42Используется для изготовления арен; см. Дополнительный материал 1 для дизайна.
3/16 дюйма прозрачный акриловыйMcMaster-Carr8560K219Используется для изготовления арен; дизайн см. в Дополнительном материале 1.
1/32 дюйма черный делринMcMaster-Carr8575K132Используется для изготовления арен; см. Дополнительный материал 1 для дизайна.
Винты с шестигранной головкой, длина 1 дюйм (50x)McMaster-Carr92314A115 Используется для изготовления арен. Может быть заменен винтами 3/4 дюйма (92314A113, McMaster-Carr) для 32-камерных арен.
Гайки с накатанной головкой (25x)McMaster-Carr92741A100Используется для изготовления арен. Может быть заменен на обычные шестигранные гайки (90480A005, McMaster-Carr).
ВидеокамеруCanonVixia HF R700можно заменить на любую потребительскую комкордеру.

Ссылки

  1. Sturtevant, A. H., Bridges, C. B., Morgan, T. H. The spatial relations of genes. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 5 (5), 168-173 (1919).
  2. Campos-Ortega, J. A., Hartenstein, V. The Embryonic Development of Drosophila melanogaster. , Springer. Berlin Heidelberg: Berlin, Heidelberg. (1985).
  3. Hall, J. C. Systems Approaches to Biological Rhythms in Drosophila. Methods in Enzymology. 393, 61-185 (2005).
  4. Luo, L. Rho GTPases in neuronal morphogenesis. Nature reviews. Neuroscience. 1 (3), 173-180 (2000).
  5. Schmucker, D., Clemens, J. C., et al. Drosophila Dscam Is an Axon Guidance Receptor Exhibiting Extraordinary Molecular Diversity. Cell. 101 (6), 671-684 (2000).
  6. Jan, Y. N., Jan, L. Y. HLH proteins, fly neurogenesis, and vertebrate myogenesis. Cell. 75 (5), 827-830 (1993).
  7. Stockinger, P., Kvitsiani, D., et al. Neural circuitry that governs Drosophila male courtship behavior. Cell. 121 (5), 795-807 (2005).
  8. Yu, J. Y., Kanai, M. I., Demir, E., Jefferis, G. S. X. E., Dickson, B. J. Cellular Organization of the Neural Circuit that Drives Drosophila Courtship Behavior. Current biology. 20 (18), 1602-1614 (2010).
  9. Zhou, C., Pan, Y., Robinett, C. C., Meissner, G. W., Baker, B. S. Central Brain Neurons Expressing doublesex Regulate Female Receptivity in Drosophila. Neuron. 83 (1), 149-163 (2014).
  10. Rideout, E. J., Dornan, A. J., Neville, M. C., Eadie, S., Goodwin, S. F. Control of sexual differentiation and behavior by the doublesex gene in Drosophila melanogaster. Nature neuroscience. 13 (4), 458-466 (2010).
  11. Manoli, D. S., Foss, M., Villella, A., Taylor, B. J., Hall, J. C., Baker, B. S. Male-specific fruitless specifies the neural substrates of Drosophila courtship behaviour. Nature. 436 (7049), 395-400 (2005).
  12. Kimura, K. I., Ote, M., Tazawa, T., Yamamoto, D. Fruitless specifies sexually dimorphic neural circuitry in the Drosophila brain. Nature. 438 (7065), 229-233 (2005).
  13. Cachero, S., Ostrovsky, A. D., Yu, J. Y., Dickson, B. J., Jefferis, G. S. X. E. Sexual dimorphism in the fly brain. Current biology. 20 (18), 1589-1601 (2010).
  14. Clowney, E. J., Iguchi, S., Bussell, J. J., Scheer, E., Ruta, V. Multimodal Chemosensory Circuits Controlling Male Courtship in Drosophila. Neuron. 87 (5), 1036-1049 (2015).
  15. Kallman, B. R., Kim, H., Scott, K. Excitation and inhibition onto central courtship neurons biases Drosophila mate choice. eLife. 4, e11188(2015).
  16. von Philipsborn, A. C., Liu, T., Yu, J. Y., Masser, C., Bidaye, S. S., Dickson, B. J. Neuronal control of Drosophila courtship song. Neuron. 69 (3), 509-522 (2011).
  17. Zhou, C., Franconville, R., Vaughan, A. G., Robinett, C. C., Jayaraman, V., Baker, B. S. Central neural circuitry mediating courtship song perception in male Drosophila. eLife. 4, e08477(2015).
  18. Kohatsu, S., Koganezawa, M., Yamamoto, D. Female contact activates male-specific interneurons that trigger stereotypic courtship behavior in Drosophila. Neuron. 69 (3), 498-508 (2011).
  19. Kohatsu, S., Yamamoto, D. Visually induced initiation of Drosophila innate courtship-like following pursuit is mediated by central excitatory state. Nature Communications. 6, 6457(2015).
  20. Fan, P., Manoli, D. S., et al. Genetic and neural mechanisms that inhibit Drosophila from mating with other species. Cell. 154 (1), 89-102 (2013).
  21. Kurtovic, A., Widmer, A., Dickson, B. J. A single class of olfactory neurons mediates behavioural responses to a Drosophila sex pheromone. Nature. 446 (7135), 542-546 (2007).
  22. Ejima, A., Smith, B. P. C., et al. Generalization of Courtship Learning in Drosophila Is Mediated by cis-Vaccenyl Acetate. Current Biology. 17, 599-605 (2007).
  23. Keleman, K., Vrontou, E., Krüttner, S., Yu, J. Y., Kurtovic-Kozaric, A., Dickson, B. J. Dopamine neurons modulate pheromone responses in Drosophila courtship learning. Nature. 489 (7414), 145-149 (2012).
  24. Pan, Y., Baker, B. S. Genetic Identification and Separation of Innate and Experience-Dependent Courtship Behaviors in Drosophila. Cell. 156 (1-2), 236-248 (2014).
  25. Zhang, S. X., Rogulja, D., Crickmore, M. A. Dopaminergic Circuitry Underlying Mating Drive. Neuron. 91 (1), 168-181 (2016).
  26. Bowers, M. B., Van Woert, M., Davis, L. Sexual behavior during L-dopa treatment for Parkinsonism. The American journal of psychiatry. 127 (12), 1691-1693 (1971).
  27. Sacks, O. W. Awakenings. , Vintage Books. New York. (1999).
  28. Dietzl, G., Chen, D., et al. A genome-wide transgenic RNAi library for conditional gene inactivation in Drosophila. Nature. 448 (7150), 151-156 (2007).
  29. Crickmore, M. A., Vosshall, L. B. Opposing dopaminergic and GABAergic neurons control the duration and persistence of copulation in Drosophila. Cell. 155 (4), 881-893 (2013).
  30. Peng, J., Chen, S., Busser, S., Liu, H., Honegger, T., Kubli, E. Gradual Release of Sperm Bound Sex-Peptide Controls Female Postmating Behavior in Drosophila. Current biology. 15 (3), 207-213 (2005).
  31. Yapici, N., Kim, Y. J., Ribeiro, C., Dickson, B. J. A receptor that mediates the post-mating switch in Drosophila reproductive behaviour. Nature. 451 (7174), 33-37 (2008).
  32. Pellegrino, M., Nakagawa, T., Vosshall, L. B. Single Sensillum Recordings in the Insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae. Journal of Visualized Experiments. 36 (36), 1-5 (2010).
  33. Cook, R., Cook, A. The Attractiveness to males of female Drosophila melanogaster: effects of mating, age and diet. Animal behaviour. 23, 521-526 (1975).
  34. Toates, F. M. Motivational Systems (Problems in the Behavioural Sciences). , (1986).
  35. Hall, J. C. The mating of a fly. Science. 264 (5166), 1702-1714 (1994).
  36. Simpson, J. H. Mapping and manipulating neural circuits in the fly brain. Advances in genetics. 65 (9), 79-143 (2009).
  37. Venken, K. J. T., Simpson, J. H., Bellen, H. J. Genetic Manipulation of Genes and Cells in the Nervous System of the Fruit. Neuron. 72 (2), 202-230 (2011).
  38. Klapoetke, N. C., Murata, Y., et al. Independent optical excitation of distinct neural populations. Nature methods. 11 (3), 338-346 (2014).
  39. Bellen, H. J., Levis, R. W., et al. The BDGP gene disruption project: single transposon insertions associated with 40% of Drosophila genes. Genetics. 167 (2), 761-781 (2004).
  40. Spradling, A. C., Stern, D., et al. The Berkeley Drosophila Genome Project gene disruption project: Single P-element insertions mutating 25% of vital Drosophila genes. Genetics. 153 (1), 135-177 (1999).
  41. Parks, A. L., Cook, K. R., et al. Systematic generation of high-resolution deletion coverage of the Drosophila melanogaster genome. Nature genetics. 36 (3), 288-292 (2004).
  42. Matthews, K. A., Kaufman, T. C., Gelbart, W. M. Research resources for Drosophila: the expanding universe. Nature reviews. Genetics. 6 (3), 179-193 (2005).
  43. Ni, J. Q., Liu, L. P., et al. A Drosophila resource of transgenic RNAi lines for neurogenetics. Genetics. 182 (4), 1089-1100 (2009).
  44. Ni, J. Q., Zhou, R., et al. A genome-scale shRNA resource for transgenic RNAi in Drosophila. Nature. 8 (5), 405-407 (2011).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Половое влечение Drosophilaтест на насыщениемотивация к ухаживаниюдофаминергическая стимуляциянейрогенетические инструментыповеденческая парадигмаиндекс ухаживаниячастота спариваниягенетический фоноптогенетика
Измерение и изменяющий Спаривание Drive в Мале
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.