Методическая статья

Стандартные измерения перепада Transepithelial потенциал слизистой (NPD)

DOI:

10.3791/57006

⸱

13 сентября 2018 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Medicine and the Gregory Fleming James Cystic Fibrosis Center, University of Alabama at Birmingham, 2Department of Pulmonology and Tuberculosis, University Medical Center Utrecht, 3Center for Experimental Medicine, Queens University, Northern Ireland, 4Hadassah Hebrew University Medical Center, Jerusalem, 5Centro Fibrosi Cistica, Azienda Ospedaliera Universitaria Integrata, 6Service de Pneumologie et Allergologie Pédiatriques and Center de Ressources et de Compétence de la Mucoviscidose, Hôpital Necker Enfants Malades, 7INSERM U 1151, Institut Necker Enfants Malades

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Здесь мы представляем стандартизированный протокол для измерения носовой разность потенциалов (NPD). Кистозный фиброз регулятор трансмембранной проводимости (МВТР) и эпителиальных натрия канала (ENaC) функции оцениваются изменения напряжения в через носовой эпителий после superfusion решения, которые изменяют канала активности ионов, предоставляя результат измерения.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Мы описываем стандартизированных измерение разности потенциалов носовой (NPD). В этой технике регулятор трансмембранной проводимости кистозный фиброз (МВТР) и функцию эпителиальной натрия канал (ENaC) контролируются изменением напряжения через носовой эпителий после superfusion решения, которые изменяют ионного канала деятельности. Это возможно путем измерения разности потенциалов между подкожной отсека и эпителия дыхательных путей в ноздрю, используя катетером при контакте с нижней носовой раковины.

Тест позволяет измерение напряжения стабильной базовой и последовательных напряжению изменения после перфузии 100 мкм амилорид, ингибитор реабсорбции Na+ в растворе Рингера; хлоридно свободный раствор, содержащий Амилорид для привода хлорид секрецию и 10 мкм isoproterenol в растворе хлоридно свободный с Амилорид стимулировать циклический аденозинмонофосфат (лагерь)-зависимых хлорид проводимости, относящиеся к МВТР.

Этот метод имеет преимущество демонстрации электрофизиологических свойств двух ключевых компонентов, создания гидратации поверхности жидкости сократимость эпителия дыхательных, ENaC и МВТР. Таким образом это средство полезно исследования для этапа 2 и доказательство концепции испытаний агентов, которые нацелены МВТР и ENaC активности для лечения заболевания легких кистозный фиброз (CF). Это также ключевые процедуры последующих действий создать МВТР дисфункции, когда генетическое тестирование и тестирование пота неопределенны. В отличие от пота хлорид тест относительно более трудоемким и дорогостоящим. Это также требует обучения операторов и опытом для эффективного проведения теста. В этой технике, особенно в молодых или отказывающихся предметов было сообщено subject и внутри изменчивости. Чтобы помочь с этой озабоченностью, интерпретация была улучшена через недавно одобренного алгоритм.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Общая цель этого метода является измерить носовой разность потенциалов (NPD) которая направлена расследовать транс эпителиальных ионного транспорта в естественных условиях1. Эта техника позволяет измерение натрия (Na+) и хлорид (Cl–) транспорта. NPD был использован в качестве исследовательского инструмента с конца 80-х и был принят в 1998 году в качестве диагностической процедуры муковисцидоз Foundation (CFF) консенсуса заявление2 и в 2017 году в руководящих принципах диагностики консенсуса муковисцидоз Foundation (ФФС) 3. действительно, биологических МВТР дисфункции, которая является причиной CF, подтверждается увеличение поглощения Na+ в апикальном мембрана и дефект в Cl– секреции. Этот функциональный тест обеспечивает преимущество инструмент дополнительной диагностики, когда генетика является неоспоримым в больных с неопределенным промежуточных пота теста результаты3. Хотя эта информация может быть также получено кишечных текущего измерения биопсий (ICM), ICM, однако, только в несколько центров во всем мире и нуждается в дальнейшем стандартизации. NPD более доступен в приблизительно 60 глобальных центров и, Кроме того, цели эпителия дыхательных, который является основным местоположением болезни.

Учитывая информацию, которую он предоставляет МВТР деятельности, он также используется в доказательство концепции исследования, стремясь оценить функциональное восстановление МВТР белка модулятор терапии4,5,6,7, 8. Действительно, данные исследований с редактирования мРНК/ген МВТР МВТР potentiator и Корректор терапии, выделить значительные изменения в Cl– и Na+ транспорта с терапии6,9 и подтверждает, что NPD может быть чутко конечная точка в клинических испытаниях. Как нам не хватает чувствительных клинические конечные точки может обнаружить тонкие изменения в клиническое состояние пациента в краткосрочной перспективе, этот доклинических биомаркёра может быть весьма информативным. Быстро расширяет поле МВТР модулятор терапии и нам срочно нужны тесты в естественных условиях , способны быстро расшифровать активных соединений перед большой этап 3 испытания10.

Физиологическое обоснование метода основан на измерении разности потенциалов между эпителия дыхательных путей в ноздрю и подкожной отсека. Ионный канал деятельности изучаются путем измерения стабильной максимальной базовых разность потенциалов (PD), его изменения после блокирования ENaC связанных с Na+ поглощения и вождения Cl– секреции через различные апикальной Cl– транспортеры включая МВТР. МВТР дисфункции отображается с минимальными изменениями в разность потенциалов при стимуляции секреции Cl– через лагеря зависит от пути и увеличение ENaC опосредованной поглощения Na+ как обнаружены более негативные базовые разность и расширение ответ на амилорид. Механистический основы для CF по сравнению с нормальной PD приводится на рисунке 1.

Диаграмма электрохимического градиента, активность CFTR/ENaC, эпителиальный транспорт, анализ патологии МВ.
Рисунок 1: резюме фигура ионного канала активности. (A) Ион деятельность эпителия дыхательных демонстрируя сбалансированной деятельности ENaC и МВТР в обычные предметы и (B) потеря активности МВТР, что приводит к увеличилось ENaC опосредованной транспорт натрия и снижается МВТР зависимых хлорид транспорта. ENaC: эпителиальный натриевых каналов, Na+: натрия, МВТР: кистозный фиброз трансмембранного регулятор, CL–: хлорид, МВ: милливольт, PD: разность потенциалов, мин: минута/s пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Однако этот тест демонстрирует определенную степень изменчивости как на повторные измерения в пределах той же пациентки и среди пациентов с же генотипом. Это имеет огромное значение для облегчения интерпретации изменений после лечения модулятор. Кроме того мы все еще не проверенных порогов, проведения различий между CF и здоровых испытуемых. Это может частично объясняться различия между наличием клинических средств и методов, используемых. Таким образом значительные международные усилия, направленные на стандартизации теста продолжается. НАС ФФС-TDN (муковисцидоз Foundation-терапии развития сети) и ECFS-CTN (Европейский муковисцидоз общества-клинические испытания сети) создал NPD стандартные оперативные процедуры (СОП) для использования в многоцентрового и научно-исследовательских испытаний. Этот недавно совместной работы CTN и TDN привело к комбинированные, международные СОП, объединяя опыт CTN и TDN (2014)11. Этот документ представляет протокол и тест методы для того, чтобы нанимать NPD для диагностики CF или следователь начало судебных разбирательств доказательства в концепция. Каждый центр реализации метода отвечает за применение ее институциональных исследований человеческого этики Комитету для утверждения.

Диаграмма нейронауки; шприцевые насосы, электроды, компьютерный интерфейс; Измерение нервного потенциала.
Рисунок 2: схема всего рекомендуется установка NPD. Обратите внимание, что рекомендуемые установки показано, в том числе последовательный перфузии насосы и установки серии 4-стоп кран. В СОП показаны конкретных соединений и примеры компонентов. (Диаграмма изменения с разрешения от Соломона, г.м. грудь, 201013) Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Общий поток экспериментальной изложена в Рисунок 2, согласно которому NPD измеряется между осмотра моста, позиционируется на мосту эпителия поверхности и ссылка помещены в подкожной пространстве, оба связаны с электродами и высокоомные вольтметр.

Это обеспечивается 2 различных систем: есть 2 установок электрода приемлемыми ссылка: (i) сбалансированный Ag/AgCl электродов и электрокардиограммы (ЭКГ) мост крем заполнены подключен к подкожного пространства незначительные ссадины или (ii) насыщенных каломель Half-Cells и агар заполнены 22 - для 24-иглы введен подкожно. Контакт для слизистой оболочки носа включена по двойной просвета катетера. Один люмен заполнены с агар или ЭКГ крем и подключен к измерительного электрода, другой позволяет перфузии на слизистую оболочку носа различных решений.

Кончик знакомства труб помещается на слизистую оболочку дыхательных под нижней носовой раковины (рис. 3).

Процесс установки катетера; Эндоскопическая диаграмма носа, показывающая положение нижних и средних носовых раковин.
Рисунок 3: размещение изучения труб на слизистую оболочку дыхательных. (A) внешний вид показаны размещения. (B) Rhinoscopic вид, демонстрируя размещения. (C) диаграмма указанием анатомического расположения для размещения катетера. PD: разность

Для изучения реакции PD несколько препаратов, superfusion решения применяются через второй просвета катетера. Есть несколько ключевых шагов относительно подготовки и проведения измерений NPD, которые подробно описаны ниже в протоколе, от первоначальной подготовки для анализа данных.

После подготовки решений и электродов адекватного качества тестирования электродов и катетеры позволяет для основных проведения теста. Базальные измерения производятся вдоль нижней носовой раковины, которая позволяет выбрать лучшее место для измерения, обычно, с самым негативным измерения. Затем последовательно орошений определить Na+ (ENaC) и Cl– (МВТР зависимые) ионов потока через изменения напряжения через носовой эпителий.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Протокол, с участием человека предметов был одобрен Комитетом исследования всех участвующих институтов. Каждый центр реализации метода отвечает за применение ее институциональных исследований человеческого этики Комитету для утверждения.

1. решение подготовка

  1. Подготовка решений #1, #2 и #3, которые являются базовые решения, в пакетах 1 Л до процедуры и хранимые на местах (таблица 1).
    Примечание: Амилорид светочувствительных и должны храниться в темноте (см. таблицу 1 для решения композиции) (см. СОП для подготовки подробного решения11).
    1. Помещать в буфер все решения в рН 7,4 и 0,22 мкм фильтром бутылку топ.
    2. Для решения #3 сначала добавьте фосфат содержащие соли, дать им возможность ионизировать для предотвращения кристаллизации (см. в таблице 2 для решения композиции).
      Примечание: Последовательность смешивания имеет решающее значение для решения #3.
    3. Храните эти решения на 4 ° C (стабильный за 3 месяца) или при-20 ° C (стабильный на 6 месяцев).
    4. Подготовка решений #4 и #5, добавив агенты на день тестирования NPD. Isoproterenol свет и окисления чувствительных и он теряет свою активность при комнатной температуре (демонстрации 4% распада более 4 ч в 4 – 8 ° C). Хранить при 4 ° C.
      Примечание: СПС является свет и окисления чувствительных (см. таблицу 3).
СоединениеМолекулярная массаКонцентрация (мм)Композиция (г/Л)
NaCl581488.58
CaCl2 2 H2O1472.250,33
KCl754.050,3
K2HPO4 1742.40.42
KH2 PO4 1360.40.05
MgCl2 6 H2O2031.20,24

Таблица 1: Раствор состава.

СоединениеМолекулярная массаКонцентрация (мм)Композиция (г/Л)
Na глюконат21814833,26
Глюконат CA4302.250,97
K глюконат2344.050,95
K2 HPO4 1742.40.42
KH2 PO4 1360.40.05
MgSO4 7 H2O2461.20,24

Таблица 2: Решение композиции.

РешениеРешение номерСодержаниеEDC Марк
Звонарей инъекцийРешение № 1/АБуферизованный звонарей для инъекцийЗВОНАРЕЙ
Звонарей + АмилоридРешение № 2/BБуферизованный звонарей + 100 мкм АмилоридАМИЛ
Нулевой Cl– + АмилоридРешение № 3/CБуфер нулевой Cl– + 100 мкм АмилоридOCL
Нулевой Cl– , амилорид + isoproterenolРешение № 4/DБуфер нулевой Cl– + 100 мкм Амилорид + 10 мкм isoproterenolISO
Нулевой Cl–+ isoproterenol + Амилорид СПСРешение № 5/EБуфер нулевой Cl– + 100 мкм Амилорид + 10 мкм isoproterenol + 100 мкм СПСATP

Таблица 3: Список решение.

2. катетер

  1. Использование ПВХ, стерильные, одного использования, 2 люменов (0.7 мм внутренний Ø) катетер с круглой и гладкой конечности (2,5 мм Наружный Ø), который разработан специально для NPD.
    1. Установить контакты с слизистую оболочку на стороне отверстие, 2 мм до кончика с отверстием на вершине для перфузии (см. шаг 10.1).
    2. Подключите один из этих двух подключений Luer-lock катетера измерительного электрода и другое одно к перфузионного насоса. Используйте канал, окрашенных в синий как измеряя люмен. Тег катетер на каждом интервале 0,5 см на 10 см.
      Примечание: Мертвое пространство-0,3 мл. Предпочтительнее использовать описанную выше процедуру для подготовки катетер если это не представляется возможным выполнить следующие два шага.
    3. Вырежьте равных (~ 76 см) длины трубки катетера PE50 и PE90.
    4. Прикрепите их вместе в 1 см кусок кремния резиновой трубки. Вставьте 25 G тупым кончик иглы ожидающий в противоположном конце трубы PE-90. Вставьте 25 G Бабочка иглы ожидающий в противоположном конце трубки PE50, убедившись, что не прокол трубы, как это делается.

Двухпросветная катетерная схема; размеры с маркировкой; Используется для введения медицинской жидкости.
Рисунок 4: катетер используется для измерения NPD. Врезные окно демонстрирует катетера с измерительного отверстия.

3. Подготовка агар кожи мост (Бабочка иглы) и катетер

Примечание: Манипуляции расплавленный агар может вызвать ожоги, и это должно быть сделано с осторожностью.

  1. Подготовка 3% агар, смешивая 3 g агар с 100 мл раствора #1 в широкий рот бутылку. Расплава агар в микроволновой печи до растворимые (прозрачный).
    1. Заполните шприц 10 мл теплой агар.
    2. Подключите шприц впоследствии к Бабочка иглы (23 G) и отмеченные просвета катетера. Придать агар, пока он не появится на кончике.
    3. Позвольте ему остыть по крайней мере 10 минут.
    4. Убедитесь, полностью заполнены и визуализированы быть свободным от пузырьков воздуха мост кожи и катетер.
    5. Хранения сыпучих кожи мостов в #1 на 4 ° C и не использовать после 1 недели.

4. Если использование ЭКГ крем

  1. Разбавьте ЭКГ крем с решением #1 (1:1, v/v Рингера). Пусть пока без воздушных пузырьков.
    1. Заполните шприц 10 мл разбавленной ЭКГ крем.
    2. Подключите шприц к заметному просвета катетера и медленно вводить ЭКГ крем, до тех пор, пока он появится на нижней стороне отверстие.
    3. Убедитесь, что катетер полностью заполнены и без воздушных пузырьков.

5. система сбора данных

Примечание: Общие установки система сбора данных показано на рисунке 5.

Настройка электрофизиологии с биоусилителем, электродами и сбором данных для анализа нейронных сигналов.
Рисунок 5: Настройка системы сбора данных. Демонстрируя соединения bioamplifier и headstage для интерфейса компьютера, а также подключения электрода в headstage11. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

  1. Соединения
    1. Подключите компьютер к системе сбора данных (Таблица материалов) с помощью кабеля USB.
    2. Для подключения к bioamplifier система сбора данных, подключите BNC кабель от канала 1 вход на системе сбора данных (спереди) выход на bioamplifier (бэк).
    3. Подсоедините bioamplifier к headstage с пользовательских кабель предварительно headstage винты в входной части передней bioamplifier.
    4. Подключите headstage электродов и земли электрода. Используйте стандартный 2 мм женщина женщина разъемы для подключения передней headstage к электродам.
      Примечание: Порт утоплена и подходит только одно направление 2 мм кабеля: красный измерительный электрод для пациента носа (через носовой катетер); Черный-ссылка электрода к мосту кожи пациента; Белый для ЭКГ электродов заземлен для субъекта кожи.
    5. Установите bioamplifier как описано: смещение: потяните, чтобы активировать, включите для регулировки, оставить в запрашиваемой позиции после перестройки; Напряжение: DC; 1 МВ cal: нейтральную позицию; Мощность: На сбор данных, Выкл для зарядки батареи; Прибыль: Установка до 10; Полосовые: LoFreq (космического ручку): DC; Полосовые: HighFreq (внутренние ручки): 1 кГц; Объем: выкл.

6. Настройка смещения головы этап

  1. Подключите ноутбук и усилитель в последовательности, как указано в СОП11. Включите систему сбора данных, а затем ноутбук (последовательность имеет важное значение для программного обеспечения признать аппарат используется для сбора данных).
    1. Отрегулируйте смещение головы-этап согласно последовательности СОП.

7. смещения

Примечание: Существует несколько смещения, чтобы быть проверены для обеспечения стабильности системы электрические измерения. (см. рис. 6)

  1. Для смещения электродов место электрод сравнения (отрицательный) и измерительного электрода (положительные) вместе в разреженных ЭКГ крем или 3 M KCl. Убедитесь, что разность потенциалов, читая между электродами близок к нулю на headstage.
    1. Для создания моста смещение катетера и/или кожи, место Luer-lock конец носовой катетер или Luer-lock конце моста кожи в ванну с измерительного электрода (положительные). Поместите другой конец катетера в ЭКГ крем Ванна или 3 M KCL, содержащий ссылку (отрицательный) электрода обеспечение того, что разность потенциалов близок к нулю на headstage.
    2. Чтобы настроить смещение замкнутой, убедитесь, что цепь закрыт при замене носовой катетер в ванне электродов. Проверьте, что замкнутой смещение чтения около 0 mV (= «смещение»; ± 2,5 МВ). Отрегулируйте ручку смещения headstage довести смещение 0 mV.
      Примечание: Это подтверждает, что все соединения в цепи нетронутыми. Если это не так, носовой катетер не может быть нетронутыми (воздушные пузыри в агар или крем ЭКГ). Измените моста агар или толкать крем ЭКГ в установке. Смещение электрода должны быть выполнены прежде, последовали закрытые системы (замкнутой смещение) с электродом и мост (рис. 6).

Схема установки электродов для ванны KCl или ЭКГ; электроды сравнения и измерительные электроды; носовой катетер.
Рисунок 6: Настройка смещение электрода (A), (B) катетера (или мост) смещение, смещение замкнутой (C).

8. шприц Set-up

Примечание: Ниже приводится рекомендуемая настройка.

  1. Оттепель решения #1, #2 и #3 примерно 1 час перед измерением.
    1. Подключите к запорный ближе к катетер расширение линии.
    2. Включите все насосы и промойте катетер с решением #1 полностью очистить от катетер пока запорные краны ясно пузырьков.

9. размещение ссылок и измерения электрод

Установка измерительного электрода на объект с подкожным мостом; нейрофизиологический эксперимент.
Рисунок 7: Субъект с измерительным электродом и подкожной мост готов к измерениям.

  1. Были предметом исследования принять в положении сидя перед оператором NPD. Для большего комфорта место ноги на дополнительный антистатический коврик и голову на остальной ортоптическое Чин.
    1. Подключите электрод свинца местах на ЭКГ площадку на руку субъекта (рис. 7).
    2. Вставить подкожные иглы в спинной предплечья (агар системы) либо применить электрод сравнения к ЭКГ крем на область ранее минимально прошлифовать на предплечье (см. пункты 7 – 10 ниже).
    3. Проверьте подключение к подкожного пространства путем измерения разности потенциалов с кожей (палец PD) и просят тему закрыть «измеряя дыра», щипать катетера между кончик его большим и указательным пальцем.
    4. Если палец PD -30 mV или более негативным, проверьте вставки Бабочка иглы. Повторите истиранию (для ЭКГ крем set-up) и проверьте мостов.
    5. Запустите решение #1 шприцевый насос на 80 мл/ч начала с правую ноздрю.
    6. Измерить PD палец как устойчивый отрицательного напряжения (типичный диапазон от -40 до -80 МВ).
    7. При использовании системы крем ЭКГ: разбавить ЭКГ крем 1:1 и заполнить катетер после полного флеша от из зонда дыра, как ранее видели для агар.
    8. Подключите катетер к 50 мл шприц, наполовину заполненный кремом ЭКГ электродов, позволяя проверить смещение электрода и мост от множества купаться.
    9. Подключите ссылка Ag/Cl электрода к подкожного пространства, незначительные предыдущих минимальный ссадины кожи, кожа будет отображаться «розовый и блестящие» когда будет достигнут уровень дермы.
    10. Расположите измерительного электрода, покрытые ЭКГ крем на кожу прошлифовать. Проверьте палец PD, как ранее показанный для агар системы.

10. Измерение базальной PD

  1. Вставьте носовой катетер в правую ноздрю, освещающей rhinoscope (или эквивалент) для визуализации нижней носовой раковины. Использование передней оконечности как ориентир, заранее катетер, ориентация уступает сайт нижней носовой раковины на слизистую оболочку дыхательных путей. В качестве альтернативы если размещение является сложным, дыра зонда могут быть размещены в контакте с полом ноздрю.
    Примечание: Катетер является достаточно жесткой, чтобы руководствоваться оператора в ноздрю. Для облегчения размещения, один канал катетера окрашен в синий и содержит зонд стороне отверстие при контакте с нижней носовой раковины. Это предотвращает вращение катетера. Указанную на катетер от 1 до 10 см обеспечивают легкий опорных точек.
    1. Измерьте PD на нижней носовой раковины. Для этой цели убедитесь, что измерения отверстием катетера закрыт путем ее размещения против слизистой оболочки нижней носовой раковины (Марк право базальной на).
    2. Измерить PD, 3.0, 2.0, 1.5, 1.0 и 0,5 см (расстояние в пределах уступает слухового прохода от нижней носовой раковины): Марк право базальной PDs.
    3. Сохранить каждое измерение, на заданном расстоянии приблизительно 5 s каждый обеспечить постоянное чтение (± 1 mV) и для облегчения точной интерпретации базальной PD ценностей.
    4. Повторите действия, описанные в левую ноздрю, используя функциональную клавишу левой базальной PDs (3 см, 2см и т.д.) и слева базальной на.
    5. С помощью базальной PD меры как руководство, щуп носовой катетер на сайт наиболее негативный сигнал (до 3 см от передней оконечности нижней носовой раковины) и безопасный с небольшой кусок ленты на кончике носа (или эквивалент).

11. NPD трассировки последовательный орошений

  1. Для правую ноздрю
    1. Убедитесь, что решение капает из носа пациента. У субъекта себя удобную позицию с их головы вниз (часто помогал, имея отдыха их голову на руки или использовать chinrest или других иммобилизации устройства). Напомните предметом к минимуму движение и не прикасайтесь к носу или трубы и избегать разговоров.
    2. Поверните решение #1 (Ringers) насос (5 мл/мин или 300 мл/ч). Запись до тех пор, пока стабильное значение получается (< 1 mV изменения/30 сек).
      Примечание: Это занимает около 3 минут для достижения стабильности.
    3. Выключите перфузии с решением #1.
    4. Запустите перфузии с решением #2 (амилорид). Запись NPD минимум 3 мин (если напряжение плато в сомнения, продолжить запись для до 5 мин).
    5. Запустите перфузии с решением #3 (Zero хлорид). Запись NPD минимум 3 мин (если плато напряжения не является стабильным, продолжить запись для до 5 мин).
    6. Запустите перфузии с решением #4 (Isoproterenol). Запись NPD минимум 3 мин [если плато напряжения не является стабильным (постоянное напряжение трассировки для по крайней мере 30 s < 1 mV дрейфа), продолжить запись для до 5 мин].
    7. Запустите перфузии с решением #5 (АТФ). Запись NPD не менее 1 мин, пока не получается пик гиперполяризирующий ответ.
    8. Включите перфузии с решением #1 (Ringers) и позволяют 30 s для сброса катетера.
    9. Выключите перфузии решение #1.
    10. Повторите эту процедуру для левую ноздрю.

12. конец теста

  1. Проверьте и записывать стабильной палец PD («пост палец») для 5 s.
    1. Удаление субъекта кожный мост и повязка с сайта вставки на коже. Для системы крем AgCl/ЭКГ удалите электрода от руки.
    2. Запись напряжения «Окончательный закрыто петля смещение», как описано для измерения смещение начального замкнутой (см. шаг 7.1.3).
    3. Марк окончательный смещение с функциональной клавиши.
    4. Остановить сбор данных (нажмите «начать»).
      Примечание: Текущий СОП рекомендует использовать 100 мкм СПС для того чтобы активировать purinergic кальция зависимых Cl– секреции, в качестве позитивного элемента управления для тестирования; Однако это дополнительный тест.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В нормальной сократимость эпителия Na+ поглощения является основной Ион транспортной деятельности. Это приводит к негативным сократимость поверхности разность отношении интерстиция. Перфузии ENaC канала блокатор Амилорид приводит к менее негативные разность потенциалов. Затем, superfusion Cl–-бесплатное решение создает химических градиент для Cl-, который создает более негативные разность потенциалов и активирует все перевозчики Cl– , включая МВТР. Далее Isoproterenol, который увеличивает внутриклеточную лагерь, увеличивает секрецию Cl– активируя специально МВТР и увеличивает разность потенциалов.

Напротив CF предметам, отсутствует или неблагополучных МВТР приводит к увеличению ENaC опосредованной Na+ поглощения12. В результате разность базовых более негативными. Деполяризации, наблюдается с применением Амилорид больше, тогда как минимальный или никаких изменений в разность потенциалов при стимуляции секреции Cl– зависимых путями МВТР. Это можно увидеть в представительных Прориси в рисунке 8показаны «здоровый» против «CF» Прориси.

Электрофизиологическая карта, изменение БП у здоровых, F508del; амилорид, стадии Cl/Iso, исследовательский анализ.
Рисунок 8: представитель Прориси «здоровый» темы и темы с сравни PD: разность потенциалов, ΔAmiloride: Дельта амилорид, 4с 0 Cl––: низкая хлорид: изменения в PD между завершением решения #2 и #4 решения перфузии, S1-S4: этапы 1-4, зеленая линия на графиках A и B указывают NPD трассировки и черный стрелки показывают разницу в разности потенциалов

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В естественных условиях, NPD предоставляет уникальный измерения, которые могут выполняться неоднократно на основе продольных и демонстрирует, что с повторных измерений, аналогичные продольной результаты наблюдаются на group-wise и индивидуальной основе14, 15. Существует убедительные доказательства того, что NPD имеет отличные дискриминации ценностьь для разграничения CF от не CF. 25 исследования последовательно показали статистически значимой разницы в Cl– и Na+ проводимость между пациентами с CF и здорового управления10. В то время как несколько ранее разработанной индексы демонстрации этой способности, мы ожидаем, что новые обновления необходимы, учитывая недавние стандартизации методологии7,8.

Модификации и устранение неполадок

Этот тест требует несколько основных шагов для обеспечения точных измерений. Это включает смещение замкнутой электродов и катетеры обеспечить выполнение системы к рекомендуемым стандартам. Пациенты должны оставаться по-прежнему и воздерживаться от говорить как это минимизирует артефакты и катетер смещения. Это затрудняет тест в некооперативных больных и техника поступили только в одном исследовании у детей до 6 лет7лет.

Предварительная инспекция носовой эпителий необходимо обеспечить, что не существует корки или слизь на эпителий, который может повлиять на измерения.

Очень важно необходимо отметить, что место размещения катетера является предметом обсуждения. СОП, представленные здесь использует измерения под нижней носовой раковины (ИТ). Размещение катетера под его была стандартизирована в многоцентровых исследованиях и, таким образом, это рекомендуемый метод. С отверстие сбоку катетер, который может быть трудно поддерживать фирма контакт со слизистой оболочки носа, находясь в контакте с решения производится измерение под его. Другие группы могут измерить PD на носовой этаже, который является технически проще. Важно отметить, что Вермюлен (2011) продемонстрировал, что 2 методы являются сопоставимыми16.

Потепление решения остается предметом дискуссии между европейскими и центры США17,18. Она пропагандируется что использование решений при 37 ° C вместо 22 ° C увеличивает наблюдаемое общее хлорид ответ приблизительно 25% и isoproterenol зависимых хлорид ответ приблизительно 95%18. Однако потепление увеличивает изменчивость, как оцениваются более стандартное отклонение всего хлорид ответ17. Поэтому как потепление решения является дополнительным фактором изменчивости, рекомендуется не для того, чтобы согреть решения, если требуется на основе исследования.

Мы ранее сравнить оба электрода методы и обнаружили, что каломель, так и AgCl электродов системы аналогичным образом действовали в базальную и стимулированную течений в обычные предметы13.

Ограничения метода

Этот тест является предметом значительной изменчивости в пределах субъекта. Изменчивость скоринга особенно распространена в больных с неопределенным Прориси и это должны быть учтены для диагностики приложения19. Изменчивости факторами острого верхних дыхательных путей, обширные носовые полипы, предварительного синуса хирургия и CF-связанных воспаление, которые уменьшают его специфичность и чувствительность20,10. Кроме того, интерпретация Прориси могут отличаться между читателей, хотя эксперт читателей продемонстрировать отличные соглашения количественные скоринга и интерпретируемость CF и-CF Прориси, контрастируя с значительной изменчивости в доверия трассировки19.

Внутренняя изменчивость против существенных порогов

Очень важно, что физиологические изменчивость измерения является значительным, как показано в различных исследованиях10, такие испытания терапии гена МВТР, которые продемонстрировали значительную изменчивость в изменения в общем объеме перевозок хлорида и Амилорид диапазон2221,. Поперечного сечения оценки предполагает, что нулевой Cl– плюс isoproterenol ответ выше порога -5 -7 mV является светотеневой границы между CF и предметы-CF10.

Мы тем не менее отсутствие четкого знания о величину изменения этого параметра, представляющих эффективной коррекции МВТР в испытаниях фаза II с болезнью, изменении терапии. Для оценки индивидуального ответа, повторные тесты контроля ответ на вмешательство может потребоваться выделить значительные изменения от внутренней изменчивости. Очень важно, что будущие долгосрочные исследования с болезнью, изменяя наркотиков должны продемонстрировать, что улучшение МВТР функции коррелирует с улучшением в клинически значимых исходах или суррогатных исходов (например, увеличение ОФВ1) МВ болезни. Действительно последний этап II Ivacaftor исследование продемонстрировало отмечены положительные клинические результаты, несмотря на небольшое улучшение секреции хлорид23.

Такие исследования поможет установить, если порогового значения улучшения в транс эпителиальных Cl–проводимость может быть параметром суррогат для клинические выгоды. Это будет важным параметром для направления развития МВТР модификации терапии.

Значение в отношении существующих методов: пот тест и кишечные текущего измерения (ICM)

У больных с '' сомнительных '' кистозный фиброз как оценку промежуточных пота концентрация Cl– между 30 и 60 мм, NPD композитный баллов чувствительный инструмент для диагностики пациентов '' CF-скорее '' и '' CF-вряд ли ''10 . Кишечные измерения тока (ICM), который обеспечивает ex vivo измерение чистой Cl– потоков через ректальной эпителий, также позволяет определение остаточного МВТР функции с высокой чувствительностью, потому что МВТР высоко выражается в Этот эпителий.

Учитывая изменение функции МВТР МВТР модуляторы, связь между эти различные изменения биомаркеров МВТР в настоящее время неясно. Хотя недавние работы на основе Ivacaftor определено что NPD и пот тест коррелированных4, не еще не было установлено, если измерения в дыхательных путях лучше предиктором дыхательных исход чем, например, потом протестировать24 , 25 или изменения в ICM. Кроме того модификатор препараты также могут отличаться в конкретные недостатки их органа. Что касается NPD важно отметить, что изменения в базальной PD и Амилорид ответ Экспресс Na+ транспорта, в то время как изменения в 0 Cl– и isoproterenol реакции Экспресс транспорт Cl– . Это еще не устанавливается, какие из них более важным для мелиорации болезни.

Будущее применение этой техники

Ожидается, что использование этой техники вне поле CF. Поскольку этот метод уникально подходит для демонстрации+ Na и Cl– ионного канала, он может применяться для демонстрации дисфункции заболеваний дыхательных путей, включая астмы26,27хронический бронхит, бронхоэктатическая болезнь-CF28 и рецидивирующий панкреатит29. Кроме того изменения этой техники использовались в нижних дыхательных путей (LAPD) для демонстрации ниже airways сосредоточены МВТР дисфункции в хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) пациентов с хроническим бронхитом30.

NPD обеспечивает чувствительных в vivo биомаркеров МВТР функции, которая может использоваться для обоих диагностики и, Кроме того, для доказательства в концепция исследования, стремясь исправить МВТР и ENaC канала активности в трансляционного исследования. Это позволяет Продольная Оценка транс эпителиальных функции и перспективным в качестве стратегии для персонализированной медицины адаптировать наиболее эффективным корректором для каждого пациента с CF.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторы заявляют, что они не имеют никаких финансовых интересов.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Это исследование было поддержано Рабочей группой для МВТР функции Комитета по стандартизации (клинические испытания сети, Европейское общество муковисцидоза) и национальных ресурсов центр рабочей группе (сеть развития терапии, кистозный фиброз Фонд). Дополнительная поддержка была оказана Фондом CF (Clancy FY09 для GMS) и низ (DK072482 СМР и GMS).

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Инфузионный насос KD Scientific (или эквивалент – например, программируемые инфузионные насосы, предоставленные учреждением/больницей)Портативный
биоусилитель BMA-200 AC/DC Портативный биоусилитель переменного тока/постоянного токаAD Instruments
IS0-Z для BMA-200AD Instruments
Windows-совместимый ПК - Минимальные требования Windows XP или вышеРазличное
программное обеспечение AD Instruments: GLP Client V6 (Windows) или вышеAD Instruments
электрод ЭКГ (заземление для объекта исследования)Больничный стандарт
2 мини-каломельных электрода сравненияFisher Scientific13-620-79
Хлорид калия KCl, гранулированный – USP, вес формулы 76, кол-во: 500 гСтерильный контейнер Spectrum
(например, контейнер для сбора образцов или аналогичный) для использования в каломельной ванне KCl, с отверстиями, вырезанными в крышке для удержания электродов на месте. (Если не предоставлено производителем электрода.)Больничный стандарт
2 электрода: Ag/AgCl 8 мм TP электродBIOPAC SystemsUNSHLD-EL258
2 Ag / AgCl электроды, B0194, заглушка 4 ммSLE Instruments
Signacreme® Проводящий электрод КремFisher ScientificParker Labs ref # 17-05
Устройство для истирания кожиPROMED FeelingRef 374901
Hi Di 541 M, Алмазные наконечники зубные заусенцыAsh Tools
Becton Dickinson PE 50 трубкаFisher Scientific427411
Becton Dickinson PE 90 трубкаFisher Scientific427421
Силастическая трубка, 0,062" Идентификационный номер, 0.095" ODFisher Scientific508-007
Хирургическая лента с микропорами (25 мм x 9,1 м)3M1530-1
Двухпросветный катетер Marquat Длина: 80 см; Внешний диаметр: 2,5 мм; Внутренний диаметр каналов: 0,8 мм; Расстояние между боковыми отверстиями и кончиком: 2 мм. Знак ЕС Соглашение для NPD: I0202USMarquatI0202US
шелковая лента 1" X 10 ярдов3M Durapore1538-1
IV удлинительная трубка (30", 50/коробка)International LimitedIMN30
Трехсторонний запорный кран (50/коробка)MedexMX5311L
Стерильные шприцевые фильтры (АНОТОП 25 стерильные 50 шт; 0,22-&м; m или меньшие фильтры; или эквивалент)Fisher Scientific09-926-7
Becton Dickinson Intramedic Luer адаптер заглушки (20 G, для подключения к PE90 при использовании носового катетера, произведенного на месте исследования)Fisher Scientific427564
Becton Dickinson 23 G, 0.75" Вакуумер (" бабочка») иглы (0,6 мм x 19 мм; 50 U/коробка) (для подключения к PE50) при использовании носового катетера, произведенного на месте исследования)Шприц Fisher Scientific367283
Becton Dickinson 60 мл без иглы с наконечником Luer-Lok (40/коробка)Шприц Fisher Scientific309653
Becton Dickinson 10 мл без иглы с наконечником Luer-Lok (100/коробка)Fisher Scientific309604
Одноразовые стерильные салфетки (при наличии в учреждении)Больничный стандарт
70% EtOH (1 пинта), номер в каталоге Aaper Alcohol and Chemical Co. NC9274019 (или эквивалент)Одноразовые
Corning, 0,22 μ m размер пор (0,15 – 1,0 л допустимых объемов)Fisher Scientific430624
Buffer Cert Ph 10.00 (1 L Sn04332) – для калибровки pH-метраFisher Scientific
Buffer Cert Ph 4.00 (1 L Sn04327) – для калибровки pH-метраFisher Scientific
Buffer Cert Ph 7.00 (500 mL Sn04328) – для калибровки pH-метраFisher Scientific
Одноразовые пеленки (синие прокладки; 23 x 36 дюймов 150 дюймов в коробке; или эквивалент в соответствии со стандартом больницы)SureCare
23 G, 0,75 дюйма Вакутайнер» бабочка» иглы (0,6 мм x 19 мм; 50 ед./коробка)Becton Dickinson367283
Difco Laboratories Agar (Noble 100 g 0142-15-2; или эквивалент)Fisher Scientific
Welch Allyn Rhinoscope 71000-C (или эквивалент)Fisher Scientific
Welch Allyn Convertible Handle Battery 72300 (или эквивалент) ИЛИ отоскоп с батареейFisher Scientific
Подставка для головы и подбородка (или эквивалент; опционально)Richmond Products, Inc629R
Статическое рассеивающее антиусталостное матирование  (или эквивалент)Fisher ScientificNo. 791
РЕАГЕНТЫ ДЛЯ РАСТВОРОВ, СМЕШАННЫХ НА МЕСТЕ
Sodium Chloride, Granular – USP NaClSpectrumФормула Вес: 58; Размер: 500 г
хлорида кальция CaCl2 • 2H2O – Вес формулы USPSpectrum: 147; Размер: 500 г
кристалла гексагидрата хлорида магния, MgCl2• 6H2O – Вес формулы USPSpectrum: 203; Размер: 500 г
Фосфат калия двухосновный, безводный, гранулированный, KH2PO4 – Вес формулы USPSpectrum: 174; Размер: 500 г
одноосновных кристаллов фосфата калия – NF (KH2PO4)Масса формулы спектра: 136; Размер: 500 г
глюконата натрия - USP (соль мононатрия)Спектрформулы Вес: 218; Размер: 500 г
глюконата кальция – USP (безводный порошок)Вес формулы спектра: 430; Размер: 500 г
глюконата калия - USP (безводный)Спектрформулы Вес: 234; Размер: 500 г
гептагидрата сульфата магния – USP MgSO4• 7H2OМасса формулы спектра: 246; Размер: 500 г
амилорида гидрохлорида – Вес формулы USPSpectrum: 302; Размер: 5 г
Аденозин 5'-трифосфат (АТФ) (соль динатрия)СпектрФормула Вес: 551; Размер: 5 г
хлорида магния, гексагидрат, кристалл – USP MgCl2• 6H2OМасса формулы спектра: 203; Размер: 500 г
Вода двойной дистиллированной (ddH2O)Больничная аптечнаяформула Вес: NA; Размер: 1 л
изопротеренола гидрохлорида для инъекций - USP 1 мг/5 мл ампулыБольничная аптекаФормула Вес: 248; Размер: одноразовый
Ringers Injection, USP или Ringers IrrigationHospital PharmacyFormula Вес: NA; Размер: 5 л
стерильные фильтры для бутылок Fisher Scientific

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. What is a Cystic Fibrosis Diagnosis? Clinics in Chest Medicine. 19, 423-441 (1998).">Rosenstein, B. What is a Cystic Fibrosis Diagnosis? Clinics in Chest Medicine. 19, 423-441 (1998).
  2. The Diagnosis of Cystic Fibrosis: A Consensus Statement: Cystic Fibrosis Foundation Consensus Panel. The Journal of Pediatrics. 132, 589-595 (1998).">Rosenstein, B., Cutting, G. R. The Diagnosis of Cystic Fibrosis: A Consensus Statement: Cystic Fibrosis Foundation Consensus Panel. The Journal of Pediatrics. 132, 589-595 (1998).
  3. Diagnosis of Cystic Fibrosis: Consensus Guidelines from the Cystic Fibrosis Foundation. The Journal of Pediatrics. 181, S4-S15 (2017).">Farrell, P. M., et al. Diagnosis of Cystic Fibrosis: Consensus Guidelines from the Cystic Fibrosis Foundation. The Journal of Pediatrics. 181, S4-S15 (2017).
  4. Changes of CFTR functional measurements and clinical improvements in cystic fibrosis patients with non-p.Gly551Asp gating mutations treated with ivacaftor. Journal of Cystic Fibrosis. 16, 45-48 (2017).">Mesbahi, M., et al. Changes of CFTR functional measurements and clinical improvements in cystic fibrosis patients with non-p.Gly551Asp gating mutations treated with ivacaftor. Journal of Cystic Fibrosis. 16, 45-48 (2017).
  5. Sweat chloride as a biomarker of CFTR activity: proof of concept and ivacaftor clinical trial data. Journal of Cystic Fibrosis. 13 (2), 139-147 (2014).">Accurso, F., et al. Sweat chloride as a biomarker of CFTR activity: proof of concept and ivacaftor clinical trial data. Journal of Cystic Fibrosis. 13 (2), 139-147 (2014).
  6. Effect of VX-770 in Persons with Cystic Fibrosis and the G551D-CFTR Mutation. New England Journal of Medicine. 363, 1991-2003 (2010).">Accurso, F., et al. Effect of VX-770 in Persons with Cystic Fibrosis and the G551D-CFTR Mutation. New England Journal of Medicine. 363, 1991-2003 (2010).
  7. Measurement of nasal potential difference in young children with an equivocal sweat test following newborn screening for cystic fibrosis. Thorax. 65 (6), 539-544 (2010).">Sermet, I., et al. Measurement of nasal potential difference in young children with an equivocal sweat test following newborn screening for cystic fibrosis. Thorax. 65 (6), 539-544 (2010).
  8. Mutations in the Cystic Fibrosis Transmembrane Regulator Gene and In vivo Transepithelial Potentials. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 174 (7), 787794(2006).">Wilschanski, M., et al. Mutations in the Cystic Fibrosis Transmembrane Regulator Gene and In vivo Transepithelial Potentials. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 174 (7), 787794(2006).
  9. Clinical Phenotype and Genotype of Children with Borderline Sweat Test and Abnormal Nasal Epithelial Chloride Transport. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 182 (7), 929-936 (2010).">Sermet-Gaudelus, I., et al. Clinical Phenotype and Genotype of Children with Borderline Sweat Test and Abnormal Nasal Epithelial Chloride Transport. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 182 (7), 929-936 (2010).
  10. CFTR biomarkers: time for promotion to surrogate endpoint? European Respiratory Journal. 14, 38(2013).">De Boeck, K., et al. CFTR biomarkers: time for promotion to surrogate endpoint? European Respiratory Journal. 14, 38(2013).
  11. US CFF-TDN (Cystic Fibrosis Foundation-Therapeutics Development Network) and the ECFS-CTN (European Cystic Fibrosis Society- Clinical Trials Network). Standard Operating Procedure 528.01. Standardized Measurement of Nasal Membrane Transepithelial Potential Difference (NPD). , (2014).
  12. Increased bioelectric potential difference across respiratory epithelia in CF. New England Journal of Medicine. 305 (25), 1489-1493 (1981).">Knowles, M., et al. Increased bioelectric potential difference across respiratory epithelia in CF. New England Journal of Medicine. 305 (25), 1489-1493 (1981).
  13. An international Randomised Multicentre Comparison of NPD Techniques. Chest. 138, 919-928 (2010).">Solomon, G. M., et al. An international Randomised Multicentre Comparison of NPD Techniques. Chest. 138, 919-928 (2010).
  14. Chloride Transport in Nasal Ciliated Cells of Cystic Fibrosis Heterozygotes. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 171, 1026-1031 (2005).">Sermet, I., et al. Chloride Transport in Nasal Ciliated Cells of Cystic Fibrosis Heterozygotes. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 171, 1026-1031 (2005).
  15. Nasal potential difference measurements in diagnosis of cystic fibrosis: an international survey. Journal of Cystic Fibrosis. 13 (1), 24-28 (2014).">Naehrlich, L., et al. Nasal potential difference measurements in diagnosis of cystic fibrosis: an international survey. Journal of Cystic Fibrosis. 13 (1), 24-28 (2014).
  16. Nasal potential measurements on the nasal floor and under the inferior turbinate: Does it matter? Pediatric Pulmonology. 46 (2), 145-152 (2011).">Vermeulen, F., et al. Nasal potential measurements on the nasal floor and under the inferior turbinate: Does it matter? Pediatric Pulmonology. 46 (2), 145-152 (2011).
  17. Influence of perfusate temperature on nasal potential difference. European Respiratory Journal. 42, 389-393 (2013).">Bronsveld, I., et al. Influence of perfusate temperature on nasal potential difference. European Respiratory Journal. 42, 389-393 (2013).
  18. A multi-center study on the effect of solution temperature on nasal potential difference measurements. Chest. 124 (2), 482-489 (2003).">Boyle, M., et al. A multi-center study on the effect of solution temperature on nasal potential difference measurements. Chest. 124 (2), 482-489 (2003).
  19. A Multiple Reader Scoring System for Nasal Potential Difference Parameters. Journal of Cystic Fibrosis. 16 (5), 573-578 (2017).">Solomon, G. M., et al. A Multiple Reader Scoring System for Nasal Potential Difference Parameters. Journal of Cystic Fibrosis. 16 (5), 573-578 (2017).
  20. CFTR functional measurements in human models for diagnosis, prognosis and personalized therapy: Report on the pre-conference meeting to the 11th ECFS Basic Science Conference, Malta, 26-29 March 2014. Journal of Cystic Fibrosis. 13, 363-372 (2014).">Beekman, J. M., et al. CFTR functional measurements in human models for diagnosis, prognosis and personalized therapy: Report on the pre-conference meeting to the 11th ECFS Basic Science Conference, Malta, 26-29 March 2014. Journal of Cystic Fibrosis. 13, 363-372 (2014).
  21. Effect of VX-770 in persons with cystic fibrosis and the G551D-CFTR mutation. New England Journal of Medicine. 363, 1991-2003 (2010).">Accurso, F., et al. Effect of VX-770 in persons with cystic fibrosis and the G551D-CFTR mutation. New England Journal of Medicine. 363, 1991-2003 (2010).
  22. Chronic ataluren (PTC124) treatment of nonsense mutation cystic fibrosis. European Respiratory Journal. 38, 59-69 (2011).">Wilschanski, M., et al. Chronic ataluren (PTC124) treatment of nonsense mutation cystic fibrosis. European Respiratory Journal. 38, 59-69 (2011).
  23. Sweat Chloride as a biomarker of CFTR activity: proof of concept and Ivacaftor clinical trial data. Journal of Cystic Fibrosis. 13 (2), 139-147 (2014).">Accurso, F., et al. Sweat Chloride as a biomarker of CFTR activity: proof of concept and Ivacaftor clinical trial data. Journal of Cystic Fibrosis. 13 (2), 139-147 (2014).
  24. Clinical Mechanism of the Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Potentiator Ivacaftor in G551D-mediated Cystic Fibrosis. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 190 (2), 175-184 (2014).">Rowe, S., et al. Clinical Mechanism of the Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Potentiator Ivacaftor in G551D-mediated Cystic Fibrosis. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 190 (2), 175-184 (2014).
  25. A CFTR corrector lumacaftor and a CFTR potentiator (ivacaftor) for treatment of patients with cystic fibrosis who have a phe508del CFTR mutation: a phase 2 randomised controlled trial. The Lancet Respiratory Medicine. 2 (7), 527-538 (2014).">Boyle, M., et al. A CFTR corrector lumacaftor and a CFTR potentiator (ivacaftor) for treatment of patients with cystic fibrosis who have a phe508del CFTR mutation: a phase 2 randomised controlled trial. The Lancet Respiratory Medicine. 2 (7), 527-538 (2014).
  26. Non-allergic asthma as a CFTR-related disorder. Journal of Cystic Fibrosis. 15 (5), 641-644 (2016).">Schulz, A., Tummler, B. Non-allergic asthma as a CFTR-related disorder. Journal of Cystic Fibrosis. 15 (5), 641-644 (2016).
  27. A pharmacologic approach to acquired cystic fibrosis transmembrane conductance regulator dysfunction in smoking related lung disease. PLoS One. 7 (6), e39809(2012).">Sloane, P. A., et al. A pharmacologic approach to acquired cystic fibrosis transmembrane conductance regulator dysfunction in smoking related lung disease. PLoS One. 7 (6), e39809(2012).
  28. Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Channel Dysfunction in Non-Cystic Fibrosis Bronchiectasis. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 181 (10), 1078-1083 (2010).">Bienvenu, T., et al. Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Channel Dysfunction in Non-Cystic Fibrosis Bronchiectasis. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 181 (10), 1078-1083 (2010).
  29. Genetic and electrophysiological characteristics of recurrent acute pancreatitis. Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition. 60 (5), 675-679 (2015).">Werlin, S., et al. Genetic and electrophysiological characteristics of recurrent acute pancreatitis. Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition. 60 (5), 675-679 (2015).
  30. Acquired Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Dysfunction in the Lower Airways in COPD. Chest. 144 (2), 498-506 (2013).">Dransfield, M. T., et al. Acquired Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Dysfunction in the Lower Airways in COPD. Chest. 144 (2), 498-506 (2013).

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

CFTRENaC

Похожие статьи