Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Внутричерепная Subarachnoidal маршрут инфекции для расследования роли Streptococcus suis биоплёнки в менингита в мышиной модели инфекции

6.6K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/57658

⸱

1 июля 2018 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricultural University, 2Key Lab of Animal Bacteriology, Ministry of Agriculture, 3OIE Reference Lab for Swine Streptococcosis, 4School of Medicine, Tsinghua University, 5Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses

В этой статье

Краткое содержание

Здесь мы описать маршрут внутричерепного subarachnoidal инфекции у мышей для изучения роли биопленки в Streptococcus suis менингита. Эта инфекция модель подходит также для изучения патогенеза других бактериальный менингит и эффективность новых препаратов против бактериального менингита.

Аннотация

Streptococcus suis -это не только основных бактериальной патогена свиней во всем мире, но и возникающих зоонозные агента. В организме человека и свиньи менингит является основным проявлением инфекции S. suis . Модель подходит инфекции является важным инструментом для понимания механизмов заболеваний, вызванных патогенами. Для изучения патогенеза S. suis инфекции были разработаны несколько маршрутов инфекции у мышей. Однако внутрибрюшинного, интраназально и внутривенного маршруты инфекции не подходят для изучения роли S. suis поверхности компонентов в менингита непосредственно в мозг, например внеклеточная матрица от биопленки. Хотя intracisternal прививка была использована для S. suis инфекции, точные укола не были описаны. Здесь внутричерепной subarachnoidal маршрут инфекции был описан в мышиной модели для изучения роли биопленки в S. suis менингита. S. suis планктонных клетки или клетки состояние биопленки непосредственно вводили в субарахноидальное пространство мышей через инъекции расположен 3,5 мм ростральной от bregma. Гистопатологические анализ и увеличение выражение mRNA TLR2 и цитокины ткани мозга от мышей, вводится с биопленки состояние клетки четко S. suis биопленки играет окончательный ролей в S. suis менингита. Этот маршрут инфекции имеет очевидные преимущества над другими путями инфекции, позволяя изучение взаимодействия хост бактерии. Кроме того, он позволяет эффект бактериальных компонентов на хост иммунные реакции непосредственно в мозг, чтобы быть оценены и имитирует бактериальных вход в центральной нервной системе. Этот маршрут инфекции может быть продлено расследование механизмов менингита, вызванного другими бактериями. Кроме того она может также использоваться для проверки эффективности препаратов против бактериального менингита.

Введение

Streptococcus suis (S. suis) является основных бактериальной патогена свиней во всем мире, вызывая тяжелые заболевания, включая менингит, пневмония, сепсис, эндокардит и артрит1. Это также возникающих зоонозные агент. До настоящего времени сообщалось, что девять серотипов может привести к инфекции в организме человека, в том числе серотипов, 2, 4, 5, 9, 14, 16, 21, 24 и 312,3,4. В организме человека и свиньи менингит является одним из основных клинических признаков инфекции S. suis . Во Вьетнаме и Таиланде S. suis является главной причиной менингита в5взрослых. Микробные биоплёнки являются микроорганизмы, которые соответствуют друг другу и сосредоточены на интерфейс; они крайне важны для вирулентности бактерий, выживание в различных средах и антибиотикорезистентности5. Биоплёнки обычно окружены внеклеточного матрикса, который обычно содержит полисахариды, белков и ДНК6. Последний имеет возможность пребывания воспалительных реакций и цитокина производства7. Участвовать в стрептококков менингита в предыдущих исследованиях сообщалось биопленки. Биопленки способствует Streptococcus agalactiae менингита в модели рыбы тиляпии и биопленки обнаружено в тканях мозга и вокруг менингеальные поверхностей в естественных условиях путем внутрибрюшного прививка8. При менингите пневмококк находится в состоянии биопленки как и бактерии в таком состоянии биопленки были более эффективным в стимулировании менингита в мыши инфекции модель9. Кроме того, в нашем предыдущем исследовании, биопленки состояние, связанное с S. suis в мозг мыши способствует бактериальной вирулентности, выживание анализ10. Однако прямых доказательств участия биопленки в S. suis менингита требует дальнейшего расследования.

Животные модели S. suis инфекции были разработаны в мышей, используя внутрибрюшинного (и.п.)11, интраназально (и.н.)12, внутривенные (и.в.)13и маршруты intracisternal (i.c.) инфекции14, 15 , 16. Однако, и.п., и.н. и и.в. маршруты инфекции не подходят для изучения роли S. suis поверхности компонентов в менингита непосредственно в мозг. К ним относятся внеклеточная матрица от биопленки. Хотя i.c. прививка была использована для S. suis инфекции, точные укола не был описан в этих документах. В отличие от стереотаксического координаты инъекции для прививки внутричерепного subarachnoidal явно были описаны в предыдущем исследовании17. Это позволило легко признание прививка точки и более упрощенным экспериментальный протокол. Кроме того маршрут внутричерепного subarachnoidal инфекции имитирует бактериальных вход в центральной нервной системе из пазухи или среднего уха17и отношения между среднего уха и менингита, вызванного S. suis была продемонстрирована Мадсен et al18. Кроме того применяя внутричерепного subarachnoidal маршрут инфекции в мышей, мы продемонстрировали, что S. suis малых РНК rss04 способствует менингита в наших предыдущих исследования10.

В настоящем исследовании, внутричерепной subarachnoidal маршрут инфекции был использован в мышей для расследования роли биопленки в S. suis менингита. Мышей были инфицированы планктонных клетки или биопленки состояние клеток S. suis по этому маршруту инфекции. Гистопатологические анализ и увеличение выражение mRNA TLR2 и цитокинов из ткани мозга мышей, вводится с биопленки состояние клетки четко указывается, что S. suis биопленки способствует менингита.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Мыши инфекции экспериментов были утверждены на лабораторных животных мониторинга Комитета провинции Цзянсу, Китая и выступал в лабораторных животных центр от Нанкин аграрный университет (номер разрешения: SYXK (Su) 2017-0007).

1. Подготовка бактерий

Примечание: S. suis серотипа 2 вирулентным штаммом P1/7 был изолирован от больных свиней с менингитом19. Штамм P1/7 был выращен в бульоне Тодд-Хьюитт (THB, формула литр THB: сердце инфузии, 3.1 g neopeptone, 20,0 г декстрозы, 2.0 g; 2,0 г, натрия хлорида; 0,4 г, динатрия фосфата; карбонат натрия, 2,5 г) и покрытием на Тодд-Хьюитт агар (THA, формула за литр THA: Сердце инфузии, 3,1 г; neopeptone, 20,0 г; декстроза, 2,0 г; натрия хлорид, 2,0 г; динатрия фосфат, 0,4 г; карбонат натрия, 2,5 г; агар, 15,0 g) при 37 ° C и 5% CO2.

  1. Коллекция из штамма планктонных клетки P1/7
    1. Собирать 5 мл планктонных клеток от середины журнала фазы культуры (OD600= 0,6), центрифуги для 3 мин на 8000 × g и затем смывают 3 раза с PBS.
    2. Ресуспензируйте клетки с 5 мл 25% глицерина в THB, аликвота в 5 трубок и затем хранить при температуре-80 ° C.
  2. Коллекция из штамма P1/7 биопленки состояние клетки
    1. 20 мл на ночь культуры и добавить к 180 мл свежего THB; Разделите разреженных культуры на 10 раунда культуры пластин одинаково и затем поместить пластины в инкубаторе при 37 ° C в 5% CO2 на 24 часа.
    2. После инкубации shake пластины нежно ресуспензируйте бактерии, которые еще не присоединились к пластине и затем удалить супернатант путем аспирации.
      Примечание: Осторожно встряхнуть пластину и избежать resuspending отложений.
    3. Добавьте 5 мл PBS урожай биопленки состояние клетки, полностью Ресуспензируйте отложений и затем передать образец новой трубки.
    4. Sonicate биопленки состояние клетки от последнего шага со следующими параметрами: 60 Вт, 4 циклов, 5 s на и 10 s выкл.
    5. Центрифуга для 3 мин на 8000 × g и хранить супернатант в-80 ° C.
      Примечание: Супернатант могут содержать компоненты биопленки и может использоваться для Ресуспензируйте биопленки бактерий до заражения, как описано в подопытных животных (шаг 3).
    6. Ресуспензируйте отложений с 10 мл 25% глицерина в THB и затем сохранить состояние клетки биопленки на-80 ° C.

2. сканирование электронная микроскопия (SEM) анализ

  1. Исправить собранных биопленки состояние клетки и планктонные клетки с помощью параформальдегида 4% для 12-24 ч при 4 ° C.
  2. Промойте образцы быстро с дистиллированной водой и обезвоживанию образцы последовательно с растущей концентрации этанола (25%, 50%, 70%, 90% и 100%), за 30 мин в каждом решении.
  3. Придерживайтесь высушенных образцов металлические держатели с двухсторонней ленты и наконец пальто их в испаритель с золота и палладия.
  4. Наблюдать за образцы от сканирующий электронный микроскоп, используя следующие параметры: EHT (дополнительные высокого напряжения) = 10 кв; WD (рабочее расстояние) = 7.0 и 8.0 мм; Увеличение = 5000 ×; Сигнал A = SE1.

3. животных эксперименты

  1. Использовать SPF 6 week-old самок мышей BALB/c в настоящем исследовании. Заразить всех мышей через трассу внутричерепного subarachnoidal инфекции, чьи инъекции является расположен 3,5 мм, Ростральные от bregma. Стереотаксическая координаты инъекции были четко описаны Chiavolini et al17.
    1. Для гистопатологические анализа, заразить две группы мышей (5 мышей каждой группы) с помощью планктонных клетки или биопленки состояние клеток в дозе 3 × 107 образуя колонии единиц (CFU), и еще 5 мышей вводили с PBS как элемент управления.
    2. Для выявления экспрессии мРНК TLR2 и цитокинов в мозге, заразить две дополнительные группы мышей (6 мышей на группу) с помощью планктонных клетки или биопленки состояние клеток в дозе 3 × 107 кое.
    3. Определите количество жизнеспособных бактерий, покрытие серийных разведений на THA.
    4. Усыпить всех мышей на 12 ч после инфекции для дальнейших исследований.
      Примечание: Глицерин в средстве акций должны быть удалены перед инфекцией. Как планктонных и биопленки состояние клетки оправился от-80 ° C 3 раза промывают PBS. Затем планктонные клетки высокомобильна с PBS и разбавляют до соответствующей дозы для инфекции; биопленки состояние клетки высокомобильна с сохраненной супернатант (от шага 1.2.5) и разбавляют до соответствующей дозы для инфекции. Объем для инфекции не должно быть более чем 50 мкл.
  2. Обнаружение выражение mRNA TLR2 и цитокинов в ткани мозга
    1. Извлечь общее РНК из ткани мозга, используя набор для извлечения РНК.
      1. Для каждой мыши Используйте весь мозг ткани для извлечения РНК. Весь мозг ткани делят на 5 трубок. Занять до 100 мг мозговой ткани и добавьте 1 мл раствора лизис каждая трубка, содержащая лизировать матрицы, предоставляемый в комплект.
      2. Процесс трубку в гомогенизатор для 40 s при настройке 6.0, а затем центрифуги трубки на 12000 х g и 4 ° C за 5 мин.
      3. После центрифугирования передавать новые пробки microcentrifuge Верхний этап.
      4. Инкубировать переданного образца за 5 мин при комнатной температуре; 300 мкл хлороформ, вихревые для 10 s и затем инкубировать в течение 5 мин при комнатной температуре.
      5. Центрифуга для трубки на 12000 × g и 4 ° C для 5 минут передать новой трубки Верхний этап.
      6. 500 мкл холодной абсолютного этанола на трубу, прежде чем переворачивать его в 5 раз и затем сохраните образец при-20 ° C для по крайней мере 1 час.
      7. Центрифуга для трубки на 12000 × g и 4 ° C на 15 мин и удалить супернатант. Помыть лепешка с 500 мкл холодной 75% этанола в свободный РНКазы H2O.
      8. Удаление этанола, сухой воздух Пелле за 5 мин при комнатной температуре и Ресуспензируйте РНК в 100 мкл РНКазы свободный H2O.
      9. Инкубировать РНК в течение 5 мин при комнатной температуре и определения концентрации РНК, с помощью bioanalyzer РНК.
    2. Выполните синтез cDNA, включая ликвидацию геномной ДНК (геномная ДНК), используя Термоциклер с комплект реагентов обратной транскрипции (RT).
      1. Добавить 1 мкг РНК содержащие 2 мкл трубки 5 x gDNA ликвидации буфера, 1 мкл геномная ДНК ликвидации фермента и свободный РНКазы H2O до тех пор, пока объем достигает 10 мкл. Инкубируйте 2 мин при 42 ° C.
      2. 10 мкл главный микс (1 мкл RT фермента Mix, 1 мкл RT грунтовка смеси, 4 мкл 5 x 2 буфера и 4 мкл РНКазы свободный H2O) в реакции решение от последний шаг и затем осторожно перемешать. Немедленно приступить к реакции RT: 37 ° C 15 мин и затем 85 ° C за 5 s.
      3. Выполните количественный анализ в реальном времени PCR (RT-ПЦР) с помощью ПЦР в реальном времени машина с комплектом SYBR RT-ПЦР. Добавьте 10 мкл 2 x фермента, 0,8 мкл вперед грунт, 0,8 мкл обратный грунт, 0.4 мкл 50 x ROX ссылка краситель II, 2 мкл cDNA шаблон, и свободный РНКазы H2O до общего объема 20 мкл.
      4. Запуск каждого образца в трех экземплярах, с использованием следующих параметров тепловой: 30 s на 94 ° C, а затем 40 циклов 5 s при 95 ° C и 34 s при 60 ° C, с заключительной стадии 15 s при 95 ° C, 1 мин при 60 ° C и 15 s при 95 ° C. Праймеры для RT-ПЦР, перечислены в таблице 1. Уборка генов B2m и 18s рРНК были использованы в качестве механизмов внутреннего контроля.
    3. Расчет изменения относительной фолд, основанный на методе 2-ΔΔCt .
  3. Наблюдение за Гистологические срезы
    1. После фиксации 24 h с 10% формалина реконструировать фиксированной мозговой ткани в соответствующих размеров кусков ткани на 2-3 мм.
    2. Положите кусочки ткани в внедрения кассету и погрузиться в новом решении фиксирующие для обезвоживания автоматические вакуумные осушителя.
    3. Возьмите фиксированной ткани и обезвоживает он последовательно в повышении концентрации этанола (70%, 80%, 95%, 95% и 100%), за 30 мин в каждом решении.
    4. Transparentize образца с ксилол 15 мин, окуните его в жидкий парафин при 60 ° C 90 мин и затем внедрить с помощью внедрения машины.
    5. Нарезать ломтиками 3 мкм парафин блок встроенных ткани, плитка срез на воде при температуре 45 ° C и затем высушить на воздухе.
    6. Инкубировать в разделе 3 ч, при 60 ° C, пятно с помощью гематоксилин и эозином (он) метод и запечатать его с нейтральной десен.
    7. Наблюдать гистопатологические изменения головного мозга с помощью оптического микроскопа. Четыре точки системы классификации была использована для оценки гистологических изменений. Использование непарных t -тест для статистического анализа.
      Заторов/кровотечения: отсутствует, оценка 0; небольшая область фокуса заторов/кровотечения, Оценка 1; большие области фокуса заторов/кровотечения, или несколько небольших участков фокуса заторов/кровотечения, Оценка 2; до трех больших фокуса заторов/кровотечения сайтов Оценка 3; Диффузный заторов/кровотечения, Оценка 4.
      Некроз: отсутствует, оценка 0; некроз, Оценка 1; Диффузный появления некротических клеток 1-10, Оценка 2; очагов некроза вырожденная, Оценка 3; обширные вырожденная некроз, Оценка 4.
      Воспалительных клеток инфильтрата: отсутствует, оценка 0; несколько и фокуса инфильтратов, Оценка 1; Мультифокальные проникновения или проникновения с образованием агрегатов, Оценка 2; до трех агрегатов Оценка 3; и более чем четырех агрегатов, Оценка 4.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Был проведен анализ SEM для изучения биопленки в экспериментальных условиях. Как показано на рисунке 1, существует значительная разница в биопленки между планктонных клеток (рис. 1А) и биопленки состояние клеток (рис. 1Б). SEM анализ показал, что биопленки бактерий в кусты и несколько слоев и они были помещены в внеклеточного матрикса, в то время как планктонных бакт...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Маршрут внутричерепного subarachnoidal инфекции, описанные здесь имеет очевидные преимущества над другими путями заражения. Это позволяет следователей для изучения взаимодействия хост бактерии и эффект бактериальных компонентов на хост иммунные реакции непосредственно в мозге, которые имитируют бактериальной вход в центральной нервной системе. Таким образом этот маршрут инфекции может быть продлено расследование механизмов менингита, вызванного другими бактериями. Кроме того она может также использоваться для проверки эф...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют ничего сообщать.

Благодарности

Эта работа была поддержана гранты национальных ключевых исследований и развития программа Китая [2017YFD0500102]; Национальный природный науки фонд Китая [31572544]; Государственный ключевой Лаборатория ветеринарной этиологические биологии [SKLVEB2016KFKT005]; в Шанхае сельского хозяйства применяется технология развития программы, Китай [G2016060201].

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Todd Hewitt Broth(THB)Becton, Dickinson and CompanyDF0492078Растворите 30 г порошка в 1 л очищенной воды. Автоклав на 121° на 15 мин.
AgarDSBIO16C0050Растворите 15 г порошка в 1 л THB. Автоклав на 121° на 15 мин.
Система очистки воды Milli-Q ReferenceMerck KGaAZ00QSVCUSбез Dnase/ Rnase
NaClTianjin Kemiou Chemical Reagent Co., Ltd10019318растворить 8 г NaCl, 0,2 г KCl, 1,42 г Na2HPO3, 0,27 г KH2PO4 в 1 л очищенной воды. Автоклав на 121° на 15 мин. Используйте KOH для регулировки pH до 7,4.
Na2HPO3Xilong Scientific Co., Ltd9009012-01-09Растворите 8 г NaCl, 0,2 г KCl, 1,42 г Na2HPO3, 0,27 г KH2PO4 в 1 л очищенной воды. Автоклав на 121° на 15 мин. Используйте KOH для регулировки pH до 7,4.
KClXilong Scientific Co., Ltd9009017-01-09Растворите 8 г NaCl, 0,2 г KCl, 1,42 г Na2HPO3, 0,27 г KH2PO4 в 1 л очищенной воды. Автоклав на 121° на 15 мин. Используйте KOH для регулировки pH до 7,4.
KH2PO4Xilong Scientific Co., Ltd9009019-01-09Растворите 8 г NaCl, 0,2 г KCl, 1,42 г Na2HPO3, 0,27 г KH2PO4 в 1 л очищенной воды. Автоклав на 121° на 15 мин. Используйте KOH для регулировки pH до 7,4.
KOHXilong Scientific Co., Ltd9009014-01-09Растворите 8 г NaCl, 0,2 г KCl, 1,42 г Na2HPO3, 0,27 г KH2PO4 в 1 л очищенной воды. Автоклав на 121° на 15 мин. Используйте KOH для регулировки pH до 7,4.
ГлицеринSionpharm Chemical Reagent Co., Ltd10010618Разбавленный равным объемом очищенной воды, автоклав на 121° в течение 15 мин
4% параформальдегидаSionpharm Chemical Reagent Co., Ltd80096675
25% глутаральдегидSionpharm Chemical Reagent Co., Ltd30092436в 10 раз разбавленный очищенной водой для фиксации.
EthanolSionpharm Chemical Reagent Co., Ltd10009218
ChloroformSionpharm Chemical Reagent Co., Ltd10006818
SpctrophotometreDeNovix Inc.DS-11+
Ультразвуковая клеточная дробилкаNingBo Scientz Biotechnology Co.,LtdJY96-IIN
ЦентрифугаHitachi Koki Co., LtdCT15RE
ХолодильникAucma Co., LtdDW-86L500
Сканирующий электронный микроскопZeissEVO-LS10
FastRNA Pro Green KitMP Biomedicals#6045-050
FastPrep-24 ИнструментMP Biomedicals116005500
Инструмент для ПЦРSensoQuest GmbH1124310110
QuantStudio 6 FlexThermo Fisher Scientific4485689
SYBR Premix Ex Taq IITakara Biomedical Technology (Beijing) Co., LtdRR820A
PrimeScript RT набор реактивов с gDNA EraserTakara Biomedical Technology (Beijing) Co., LtdRR047A
Полностью закрытый тканевый процессорLeica Biosystems Nussloch GmbHASP200S
Модуль встраивания парафина с подогревомLeica Biosystems Nussloch GmbHEG1150H
Полуавтоматический ротационный микротомLeica Biosystems Nussloch GmbHRM2245
Водяная баня для парафиновых срезовLeica Biosystems Nussloch GmbHHI1210
Автокраситель XLLeica Biosystems Nussloch GmbHST5010
Agilent 2100Agilent TechnologiesG2939A
Оптический микроскопOlympusBX51

Ссылки

  1. Gottschalk, M., Xu, J., Calzas, C., Segura, M. Streptococcus suis: a new emerging or an old neglected zoonotic pathogen? Future Microbiology. 5, 371-391 (2010).
  2. Goyette-Desjardins, G., Auger, J. P., Xu, J., Segura, M., Gottschalk, M. Streptococcus suis, an important pig pathogen and emerging zoonotic agent-an update on the worldwide distribution based on serotyping and sequence typing. Emerging Microbes & Infections. 3 (6), e45(2014).
  3. Kerdsin, A., et al. Emergence of Streptococcus suis serotype 9 infection in humans. Journal of Microbiology, Immunology and Infection. 50 (4), 545-546 (2017).
  4. Hatrongjit, R., et al. First human case report of sepsis due to infection with Streptococcus suis serotype 31 in Thailand. BMC Infect Diseases. 15, 392(2015).
  5. Fittipaldi, N., Segura, M., Grenier, D., Gottschalk, M. Virulence factors involved in the pathogenesis of the infection caused by the swine pathogen and zoonotic agent Streptococcus suis. Future Microbiology. 7 (2), 259-279 (2012).
  6. Hall-Stoodley, L., Costerton, J. W., Stoodley, P. Bacterial biofilms: from the natural environment to infectious diseases. Nature Reviews Microbiology. 2 (2), 95-108 (2004).
  7. Fuxman Bass, J. I., et al. Extracellular DNA: a major proinflammatory component of Pseudomonas aeruginosa biofilms. Journal of Immunology. 184 (11), 6386-6395 (2010).
  8. Isiaku, A. I., et al. Biofilm is associated with chronic streptococcal meningoencephalitis in fish. Microbial Pathogenesis. 102, 59-68 (2017).
  9. Oggioni, M. R., et al. Switch from planktonic to sessile life: a major event in pneumococcal pathogenesis. Molecular Microbiology. 61 (5), 1196-1210 (2006).
  10. Xiao, G., et al. Streptococcus suis small RNA rss04 contributes to the induction of meningitis by regulating capsule synthesis and by inducing biofilm formation in a mouse infection model. Veterinary Microbiology. 199, 111-119 (2017).
  11. Dominguez-Punaro, M. C., et al. Streptococcus suis serotype 2, an important swine and human pathogen, induces strong systemic and cerebral inflammatory responses in a mouse model of infection. Journal of Immunology. 179 (3), 1842-1854 (2007).
  12. Seitz, M., et al. A novel intranasal mouse model for mucosal colonization by Streptococcus suis serotype 2. Journal of Medical Microbiology. 61 (Pt 9), 1311-1318 (2012).
  13. Busque, P., Higgins, R., Caya, F., Quessy, S. Immunization of pigs against Streptococcus suis serotype 2 infection using a live avirulent strain. Canadian Journal of Veterinary Research. 61 (4), 275-279 (1997).
  14. Williams, A. E., Blakemore, W. F. Pathology of Streptococcal meningitis following intravenous intracisternal and natural routes of infection. Neuropathology and Applied Neurobiology. 4 (4), 345-356 (1990).
  15. Dominguez-Punaro, M. C., et al. Severe cochlear inflammation and vestibular syndrome in an experimental model of Streptococcus suis infection in mice. European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases. 31 (9), 2391-2400 (2012).
  16. Auger, J. P., Fittipaldi, N., Benoit-Biancamano, M. O., Segura, M., Gottschalk, M. Virulence Studies of Different Sequence Types and Geographical Origins of Streptococcus suis Serotype 2 in a Mouse Model of Infection. Pathogens. 5 (3), (2016).
  17. Chiavolini, D., et al. Method for inducing experimental pneumococcal meningitis in outbred mice. BMC Microbiology. 4, 36(2004).
  18. Madsen, L. W., Svensmark, B., Elvestad, K., Jensen, H. E. Otitis interna is a frequent sequela to Streptococcus suis meningitis in pigs. Veterinary Pathology. 38 (2), 190-195 (2001).
  19. Holden, M. T., et al. Rapid evolution of virulence and drug resistance in the emerging zoonotic pathogen Streptococcus suis. PLoS One. 4 (7), e6072(2009).
  20. Dominguez-Punaro Mde, L., et al. In vitro characterization of the microglial inflammatory response to Streptococcus suis, an important emerging zoonotic agent of meningitis. Infection and Immunity. 78 (12), 5074-5085 (2010).
  21. Hassan, A., et al. Evaluation of different detection methods of biofilm formation in the clinical isolates. Brazilian Journal of Infectious Diseases. 15 (4), 305-311 (2011).
  22. Vanier, G., et al. New putative virulence factors of Streptococcus suis involved in invasion of porcine brain microvascular endothelial cells. Microbial Pathogenesis. 46 (1), 13-20 (2009).
  23. Takeuchi, D., et al. The contribution of suilysin to the pathogenesis of Streptococcus suis meningitis. Journal of Infectious Diseases. 209 (10), 1509-1519 (2014).
  24. Tenenbaum, T., et al. Polar bacterial invasion and translocation of Streptococcus suis across the blood-cerebrospinal fluid barrier in vitro. Cellular Microbiology. 11 (2), 323-336 (2009).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Биопленочный менингитпланктонные клеткиклетки в состоянии биопленкигистопатологический анализэкспрессия TLR2анализ цитокиновэкстракция РНК
Внутричерепная Subarachnoidal маршрут инфекции для расследования роли Streptococcus suis биоплёнки в менингита в мышиной модели инфекции
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.