Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Мышиных аспирации орофарингеального модель вентилятора ассоциированной и внутрибольничная бактериальной пневмонии

11.8K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/57672

⸱

28 июня 2018 г.

 ,  ,  , 
1Department of Molecular Microbiology and Immunology, University of Southern California, 2Division of Infectious Diseases, Department of Medicine, LAC+USC Medical Center

В этой статье

Краткое содержание

Среди наиболее распространенных инфекций в человека является инфекционной пневмонии. Соответствующие в vivo модель имеет решающее значение для понимания патогенеза заболевания и тестирования эффективности Роман терапии. С этой моделью мышиных аспирации орофарингеального пневмонии можно рассмотреть патогенеза и новых методов лечения против этих смертоносных инфекций.

Аннотация

Мышиных инфекции модели важны для понимания патогенеза заболевания и тестирования эффективности роман терапевтических средств, предназначенных для борьбы с причинных патогенов. Инфекционной пневмонии среди наиболее распространенных инфекций, представленный пациентов в клинике и таким образом гарантирует соответствующий в vivo модель. Типичные пневмонии модели используют интраназальной прививки, сдавшего чрезмерного организмов за пределами легких, вызывая осложнений пробить и симптомов, таких как синусит, гастрит, энтерит, физические травмы или микрочастица запотевание имитировать аэрозоля распространение более типично туберкулезного, вирусной или грибковой пневмонии. Эти модели не отражают точно патогенеза типичных или здравоохранение внебольничная бактериальная пневмония. Напротив эта мышиных модель ротоглотки аспирационной пневмонии имитирует капелька маршрут в здравоохранение приобрел пневмонией. Прививки 50 мкл бактерий подвеска в ротоглотки наркотизированных мышей вызывает рефлекторный стремление, которое приводит к пневмонии. С этой моделью можно рассмотреть патогенеза причинение пневмонии патогенов и новых методов лечения для борьбы с этими заболеваниями.

Введение

Нижних дыхательных инфекции является смертоносных инфекционных болезней в мире и наиболее распространенной причиной смерти в развивающихся странах1. Во всем мире эти инфекции приходится более 3,2 миллиона смертей1. Кроме того нозокомиальная пневмония является одними из наиболее распространенных и смертоносных форм здравоохранения инфекций и это вызвано наиболее устойчивых к антибиотикам возбудителей2,3. Типичный маршрут приобретения для обоих внебольничная бактериальная пневмония и нозокомиальная пневмония является аспирации орофарингеального содержимого в альвеолы. Мышиных моделях, используемых для изучения эти заболевания часто используют интраназальной прививки4, сдачи много бактерий за пределами легких, вызывая осложнений пробить и симптомы, как синусит и физические травмы, которые несовместимы с болезнью прогрессии в человека, что модели были разработаны для эмуляции. Другие модели могут использовать ингаляции камер и устройств micromisting, которые более точно имитировать туберкулезного, вирусные и грибковые пневмоний, но не точно охарактеризовать нормальный маршрут приобретения для типичных бактериальных пневмоний.

Мышиных аспирации орофарингеального пневмонии модели могут быть использованы для имитации природных маршрутов и патогенез бактериальной пневмонии. По пересевать 50 мкл бактериальной подвеска в ротоглотки наркотизированных мышей с помощью пипетки рефлекторный стремление вытекает, что приводит к инфекционной пневмонии. С помощью этой модели, можно изучить патогенез причинение пневмонии патогенов и новых методов лечения для борьбы с этими заболеваниями с моделью выше верности, более аналогично стремление пневмонии инфекции наблюдаются в человека. Кроме того в отличие от аналогичных моделей, которые заражают через полости5,6, эта модель гарантирует, что полная посевным материалом достигает легких вместо кишечник, где он может вызвать внеофисной воспаления и инфекции, такие как гастрит и энтерита. Наконец в отличие от другой опубликованной модели, которая требует ларингоскоп и прививает через трахею7, эта модель не препятствовать дыхательных путей с иголка калийную и не требуют инъекции для доставки посевным материалом. Вместо этого прививка опирается на естественное стремление рефлекс мыши.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все процедуры с участием животных должны быть одобрены исследователь институциональный уход животных и использование Комитет (IACUC).

1. Подготовка бактериальных посевным материалом

  1. Изолируйте бактериальных колоний.
    1. Полоска бактериальный штамм (например, A. baumannii «HUMC1») на соответствующую стерильную агар носителе (например, Tryptic соевый агар), стараясь создавать изолированные колонии.
    2. Инкубируйте на соответствующих условиях (например, на ночь при 37 ° C).
  2. Растут на ночь культуры.
    1. Выберите представителя, изолированные колонии от агар пластины с помощью стерильного пересевать цикла и использовать его для инокуляции 10 мл среды надлежащие стерильные бульон (например, Tryptic соевый бульон).
    2. Разрешить образец достичь стационарной фазы в надлежащих условиях (например, 37 ° C с встряхивания на 200 об/мин на ночь в вентилируемые Кап, 50 мл конические флаконе).
  3. Растут субкультуры.
    1. Передачи 100 мкл ночь культуры до 10 мл свежего стерильные бульон с помощью пипетки.
    2. Позволяют достичь фазы экспоненциального/журнал в надлежащих условиях (например, 37 ° C с встряхивания на 200 rpm для 3 h в вентилируемые Кап, 50 мл конические флаконе).
  4. Вымойте субкультуры.
    1. Удалите из своей среды инкубирования субкультура.
    2. Центрифуга на 4000 × g за 5 мин до Пелле бактерий.
    3. Аспирационная и удалить супернатант.
    4. Добавьте 10 мл стерильной фосфат амортизированное saline (PBS) в вихрь энергично до тех пор, пока полностью высокомобильна и пеллет.
    5. Повторите шаги 1.4.2 - 1.4.4 дважды, в общей сложности 3 стирок.
  5. Регулировка концентрации бактериальных подвеска.
    1. С помощью спектрофотометра, что меры, оптическая плотность 600 Нм (OD600), измерения оптической плотности бактериальных подвеска.
    2. Добавить стерильные PBS бактериальных подвеска пока оптической плотности посевным материалом падает ОД600 0.5, используя уравнения Cя× Vя = Cf× Vf, где сосредоточено «C», «V» – объем, «я» Это первоначальный, и «f» является окончательным. * Cf всегда должна быть 0,5; Vf переменная решить.
    3. Если бактериальная подвеска опускается ниже ОД600 0.5, центрифуга его на 4000 × g 5 мин Пелле бактерии и удалить соответствующее количество супернатант достичь ОД600 0.5.
    4. Выполнение серийных разведений в стерильных PBS (например, три разведения 1: 100 для достижения 1 × 10-6) и пластины на стерильную агар для определения коэффициента корреляции, который показывает бактериальных концентратов в формировании колонии единиц (CFUs/мл) в ОД600 0.5.
      Примечание: Значение этого коэффициента корреляции будет отличаться для каждого штамма каждого вида и должен быть определен до подготовки посевным материалом для инфекции.
    5. После определения коэффициента корреляции, используйте его для создания посевные желаемой концентрации (например, 2 × 108- 1 × 10-9 CFUs/мл); Если желаемый посевным материалом больше чем ОД600 0.5, центрифуга бактериальных подвеска на 4000 × g 5 мин Пелле бактерии и удалить соответствующее количество супернатант достичь желаемой концентрации.
    6. Выполните в естественных условиях экспериментальных исследований для определения вирулентности каждого бактериальной изоляции в каждом штамм мыши, как эти значения будут различаться между бактериальных изолятов того же вида и мышей различных генетических особенностей. Различных видов грамотрицательных LD100 мышей составляет 1-5 × 108 CFUs/мыши, хотя некоторые штаммы смертоносных в нижнем инокуляты.
  6. Заморозить идентичные аликвоты для будущего использования как по требованию, точной инокуляты, как ранее опубликованные8 (необязательно).
    1. Подготовка 1 Л бактериальной посевным материалом как описано выше, передачу двух конических флакон 500 мл и центрифуги на 4000 × g за 5 мин.
    2. Отменить 450 мл супернатант от каждого конические флакона и Ресуспензируйте гранулы бактерий в оставшихся супернатант.
    3. Передать стакан 250 мл, содержащие бар магнитные перемешать сосредоточены посевные бактериальных и непрерывно Смешайте над плитой перемешать в 300 об/мин.
    4. Тщательно передачи ровно 600 мкл концентрированного бактериальных посевным материалом (например, 1 × 10-10 CFUs/мл) с помощью пипетки 1.6-мл флаконе криогенные, содержащие ровно 300 мкл стерильных H2O и 300 мкл стерильных глицерина; перемешать и хранить при температуре-80 ° C.
      Примечание: Глицерин, необходимых для хранения может посрамить экспериментальные результаты и вызвать избыточную смертность, поэтому надо промыть его.
    5. Когда все будет готово для использования, оттепель образца для 10 мин при комнатной температуре.
    6. Передача 1 мл в 50-мл флаконе конические, добавить 9 мл стерильного PBS и центрифуги в 4000 × g за 5 мин до Пелле бактерий. Аспирационная супернатант и Ресуспензируйте предопределенное количество CFUs (1 мл × замороженные запасов концентрация в CFUs/мл) в соответствующий объем PBS для достижения желаемой концентрации для инфекционных посевным материалом.

2. обезболивающим мышей

  1. Кетамин/Ксилазина
    Примечание: Анестезия с кетамином/Ксилазина имеет длительность, который предлагает достаточно времени для исследователя, который является новым на эту технику, чтобы завершить процедуру прививка, прежде чем мыши пробуждает.
    1. Подготовка 10 мл инъекционного раствора путем объединения 8,5 мл pharmaceutifcal класса PBS, 1 мл 100 мг/мл кетамина раствор (конечная концентрация 10 мг/мл) и 0,5 мл, 20 мг/мл Ксилазина Стоковый раствор (конечная концентрация 10 мг/мл).
    2. Управлять 10 мкл/g внутрибрюшинной инъекции (IP) (например, 250 мкл для мыши 25-g).
    3. Применить глазная мазь в глазах мышей, под наркозом с кетамином/Ксилазина потому, что их глаза подвержены повреждениям во время продолжительных периодов анестезии.
    4. Поместите указатель мыши в клетке и контролировать до тех пор, пока он просыпается от анестезии.
      Примечание: Животное не следует оставлять без присмотра до тех пор, пока он сознание достаточно для поддержания грудной recumbency.
  2. Изофлюрановая
    Примечание: Мышь быстро проснуться от изофлюрановая индуцированной анестезии после удаления из камеры индукции, поэтому этот метод анестезии должны использоваться только после стать владеют на процедуре прививка.
    1. Место наивно мышей в камеру соответствующего размера индукции с проточной кислорода.
    2. После того, как палата является запечатанный закрыты, анестезировать мышей, используя точность испаритель для добавления изофлюрановая на 4% (v/v) по крайней мере 5 минут; подтвердить анестезии, удалив мыши из камеры для индукции и измерения, как долго он принимает просыпаться от анестезии (~ 60 s).
      Примечание: Учтите, что обезболивание, что время может меняться на основе институциональных руководящих принципов и некоторые животные могут потребовать более 5 мин, чтобы стать полностью под наркозом.
    3. Поддержание анестезии для до 10 мин, регулируя изофлюрановая концентрации до 2-3%; Если общая продолжительность анестезии составляет > 15 мин, применять глазной мази в глаза наркотизированных мышей.
    4. Поместите указатель мыши в клетке и контролировать до тех пор, пока он просыпается от наркоза, как шаг 2.1.

3. прививки/заражение мышей

  1. Приостановить наркотизированных мыши, висит на его верхней резцов на сильный, тонкие строки (например, зубной нитью) закреплен на неподвижный объект на высоте примерно в два раза мышью длина тела (например, 20 см) над поверхностью эксплуатации (например лабораторном столе).
  2. Осторожно потяните мыши язык изо рта с помощью стерильных, туп законченному щипцами. Передать язык стерильные, перчатках пальцем для предотвращения случайного дробления языка мыши. Держите язык за пределами рот, позволяя доступ к ротоглотки и предупреждения проглатывания посевным материалом в сторону.
  3. Удерживая язык мыши, место 50 мкл посевным материалом (бактериальная суспензия) в ротоглотки с помощью микропипеткой; ротоглотки расположен на стыке ротовой полости и глотки к задней части рта.
    Примечание: Очень важно поставить только жидкость, дозирование до первой остановки на микропипеткой. Мышь будет остановить дыхание на несколько секунд, когда посевные помещается в ротоглотки; в конце концов рефлекторный стремление приведет к мыши вдыхать бактериальных подвеска, обозначается характерный треск жидкости, введя легких, что приводит к пневмонии инфекции.
  4. Если посевные далеко не помещается обратно достаточно, чтобы блокировать нормальное дыхание, щепотка ноздри с щипцами заставить рефлексивный стремление через рот и последующие ингаляции посевным материалом.
  5. После прививки отпустите язык, удалить мыши из строки подвеска, поместите его в клетке и контролировать до тех пор, пока он просыпается от наркоза, как шаг 2.1.

4. Мониторинг прогрессирования заболевания

Примечание: Из-за страданий животных, различные показатели должны использоваться для обозначения когда мышей стали умирающий; эвтаназия должна выполняться после этого определения, в соответствии с утвержденной ранее протокол IACUC; включают различные маркеры moribundity температуры тела, потеря веса, внешний вид, походка и другие биомаркеров, которые могут быть получены из крови (например, через ИСТАТ)9,10,11,12, 13,14,,1516.

  1. Усыпить мышей согласно ранее утвержденный протокол IACUC (например, CO2 следуют шейки матки дислокации).
  2. Удаление легких от Усыпленных мыши путем разрезания трахеи, легочной артерии и легочной вены недалеко от легких.
    1. Микроскопия
      1. Место в образец формы легких (или части).
      2. Заполните формы образца с оптимальной температуры резки (O.C.T.) соединение, полностью погружаясь в ткани.
      3. Заморозить образца при температуре-80 ° C.
      4. Отправьте образец патологоанатомическую лабораторию раздел и смонтировать на слайдах для микроскопии.
    2. Бактериальные бремя
      1. Весят легочной ткани на аналитический баланс.
      2. Передача легочной ткани в 50-мл конические флакон, содержащий 2-5 мл стерильной PBS (в зависимости от размера ткани).
      3. Однородный легочной ткани с гомогенизатор ткани.
      4. Выполните серийных разведений огневки в стерильных PBS для достижения примерно 1000 CFUs/мл, основанные на ожидаемых бактериальной нагрузки в легких.
        1. Например, если ожидается 1 × 10-9 CFUs/мг, выполняют три разведения 1: 100: передачи 100 мкл огневки до 9,9 мл PBS и вихревые; Это первый разбавления 1: 100. Передачи 100 мкл первого разбавления 1: 100 до 9,9 мл PBS и вихревые; Это второй разбавления 1: 100. Передачи 100 мкл второй разбавления 1: 100 до 9,9 мл PBS и вихревые; Это третий и последний 1: 100 разрежения.
        2. Если бактериальная бремя в легких неизвестен, выполняют широкий спектр разведений захватить ожидаемый диапазон.
      5. Плита dilution(s) на стерильную агар.
        1. Подготовить стерильные бульон Tryptic сои (БСЭ) с плиты агара (TSA): комбинат 30 g TSB, 15 г агара, 1 Л воды, смешать с магнитной мешалкой и тепла до кипения на ~ 100 ° C за 5 мин разрешить, чтобы остыть и затем автоклава на жидком цикла на 15 мин разрешить охладить до ~ 55 ° C, передача 10 мл свежего газобетона TSA для стерильных Петри и дайте ему остыть до комнатной температуры. Пусть сухой на benchtop для 2-5 d или открытые под биобезопасности, кабинет на 10 мин.
        2. Перенести чашку Петри, содержащие стерильные TSA 100 мкл разбавления и распределены по ВСТ с использованием разбрасывателя или стеклянные бусины.
        3. Храните Петри на ночь при 37 ° C в увлажненные инкубатора (т.е., 37 ° C инкубатор, содержащие открытые 1-Л стакан с водой)
      6. Определить CFUs/мл легких огневки, основанный на агаре покрытие (например, 100 CFUs на плите TSA с 100 мкл третьего и окончательного растворения, описанных выше, будет иметь 100 CFUs/100 мкл × 100Дил #1 × 100Дил #2 × 100Дил #3 = 1 × 10-9 CFUs/mL).
      7. Рассчитать CFUs/mg легочной ткани на основе путем деления огневки легких CFUs/мл, мг легких тканей/мл огневки (например, если используется образец описанных выше 100 мг легочной ткани, гомогенизации в 5 мл PBS, затем 1 × 10-9 CFUs/мл ÷ 100 мг / 5 мл = 5 × 107 CFUs/mg).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Тщательно следуя протокол, можно легко получить воспроизводимые и надежных данных. Очень важно строго придерживаться один настроенный посевным материалом подготовки протокола для экспериментов, чтобы сравнить один друг к другу. Также важно правильно обрабатывать мышей во время процедуры заражения. Не забудьте поставить мышей в анестезии камеру лишена изофлюрановая. Мыши будут паниковать, если они помещены в камеру, что предварительно заполнены изофлюрановая и могут испытывать лишний стрес...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Чтобы быть уверенным мышей не являются миниатюрные люди. Результаты, полученные из модели мыши необходимо рассматривать в контексте и впоследствии толковать применимость к людям, основанный на различия и сходства между двумя видами6. Важно также выбрать соответствующий мыши штамм как некоторые более подвержены некоторые инфекции, чем другие; то же самое относится к штамм возбудителя выбора16.

Важно выполнять инфекции требовательная и высокую восп...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют, что они не имеют никаких финансовых интересов.

Благодарности

Эта работа была поддержана национального института аллергии и инфекционных заболеваний в национальных институтов здравоохранения [Грант чисел R01 AI117211, R01 AI130060, R21 AI127954 и AI106375 R42 к BS] и нас продовольственной и лекарствами [контракт HHSF223201710199C для BML].

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
АгарBD214530Объедините с TSB для изготовления
бусин TSA, боросиликатное стеклоKimble135003Стерилизуйте путем запекания или автоклавирования перед каждым использованием
Стакан, 250 млPyrex1003Используется во время точного аликвотирования концентрированной бактериальной инокулянты
ЦентрифугаSorvallST 40RСпособна 4,000&раз; g на 4° C
камера для анестезииKent Scientific CorporationVetFlo-0720вмещает до 5 мышей
Cryomold, промежуточный размерSakura Tissue-Tek4566Одноразовые виниловые образцы форм, 15&раз; в 15 раз;
Зубная нить5 мм Oral-B37000469537Привязать к устойчивому столбу ок. 6" над высотой стола
ЩипцыVWR82027-440Используются для аккуратного вытягивания языка изо рта мыши
Гомогенизатор для легочной тканиOmni InternationalTM125-115Автоклав перед первым использованием; полоскание между образцами
Изофлуран для анестезииAbbott10015516Можно использовать альтернативный препарат; Измените процедуру соответственно
iSTAT КартриджAbbott03P79-25Доступны различные картриджи в соответствии с вашими потребностями
Кетамин, 100 мг/млWestern Medical Supply4165Разбавьте 1:10 в PBS до 1 мг/мл и смешайте с Ксилазином в дозе 1 мг/мл
Мазь для глазAkornTears ОбновленоИзбегайте прикосновения к глазам кончиком дозатора
Оптимальная температура резки (O.C.T.) СоединениеFisher Scientific23-730-571Используется для замораживания образцов легких при температуре -80 °°; С для подготовки к патологии секционная
чашка Петри VWR25384-302Полистирол, одноразовый, стерилизованный, 100&раз; 15 мм
фосфатно-солевой буфер (PBS)Corning21-031-CMPBS Dulbecco без кальция и магния
Наконечники для пипеток, 200-μ LVWR10017-044Автоклав перед применением
Пипеттер, 200-μ LGilsonPipetman P200Автоклав и калибровка перед использованием
Разбрасыватель, бактериальная клеткаBel-ArtF377360006Стерилизация путем запекания или автоклавирования перед каждым использованием
Мешалка, магнитная, 7,9 мм Диаметр и раз; 38,1 мм ДлинаVWR58948-150Используется для размешивания концентрированных бактериальных инокулянтов во время аликвотирования
Пластина для перемешивания, магнитнаяCorningPC-620DИспользуется для размешивания концентрированной бактериальной инокулянты во время аликвотирования
Триптический соевый бульон (TSB)BD211822В сочетании с агаром для получения
флакона TSA, конический, стерильный, 50 млCorning431720Используется для приготовления бактериальной инокулянты
Флакон, конический, стерильный, 500 млCorning431123Используется для концентрации инокулянты для приготовления замороженной инокулянты
Флакон, криогенный, 2,0 млCorning430659Используется для криогенного хранения концентрированного бактериального инокуляционного
ксилазина, 20 мг/млAkornAnaSed InjectionРазбавьте 1:20 в PBS до 1 мг/мл и соедините с кетамином в концентрации 1 мг/мл

Ссылки

  1. Media Centre, W. H. O. World Health Organization. Fact Sheet - Top 10 Causes of Death. , Available from: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs310/en/ (2017).
  2. Spellberg, B., Talbot, G. H. Recommended Design Features of Future Clinical Trials of Antibacterial Agents for Hospital-Acquired Bacterial Pneumonia and Ventilator-Associated Bacterial Pneumonia. Clinical Infectious Diseases. 51 (S1), S150-S170 (2010).
  3. Kalil, A. C., et al. Management of Adults With Hospital-acquired and Ventilator-associated Pneumonia: 2016 Clinical Practice Guidelines by the Infectious Diseases Society of America and the American Thoracic Society. Clinical Infectious Diseases. 63 (5), e61-e111 (2016).
  4. Medina, E. Murine model of pneumococcal pneumonia. Methods in Molecular Biology. , 405-410 (2010).
  5. Azoulay-Dupuis, E., et al. In vivo efficacy of a new fluoroquinolone, sparfloxacin, against penicillin-susceptible and -resistant and multiresistant strains of Streptococcus pneumoniae in a mouse model of pneumonia. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 36 (12), 2698-2703 (1992).
  6. Mizgerd, J. P., Skerrett, S. J. Animal models of human pneumonia. American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 294 (3), L387-L398 (2008).
  7. Rayamajhi, M., et al. Non-surgical intratracheal instillation of mice with analysis of lungs and lung draining lymph nodes by flow cytometry. Journal of Visualized Experiments. (51), (2011).
  8. Nielsen, T. B., Bruhn, K. W., Pantapalangkoor, P., Junus, J. L., Spellberg, B. Cryopreservation of virulent Acinetobacter baumannii to reduce variability of in vivo studies. BMC Microbiology. 15, 252(2015).
  9. Trammell, R. A., Toth, L. A. Markers for predicting death as an outcome for mice used in infectious disease research. Comparative Medicine. 61 (6), 492-498 (2011).
  10. Bast, D. J., et al. Novel murine model of pneumococcal pneumonia: use of temperature as a measure of disease severity to compare the efficacies of moxifloxacin and levofloxacin. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 48 (9), 3343-3348 (2004).
  11. Hankenson, F. C., et al. Weight loss and reduced body temperature determine humane endpoints in a mouse model of ocular herpesvirus infection. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 52 (3), 277-285 (2013).
  12. Adamson, T. W., Diaz-Arevalo, D., Gonzalez, T. M., Liu, X., Kalkum, M. Hypothermic endpoint for an intranasal invasive pulmonary aspergillosis mouse model. Comparative Medicine. 63 (6), 477-481 (2013).
  13. Nielsen, T. B., et al. Diabetes Exacerbates Infection via Hyperinflammation by Signaling through TLR4 and RAGE. mBio. 8 (4), (2017).
  14. Nielsen, T. B., et al. Monoclonal Antibody Protects Against Acinetobacter baumannii Infection by Enhancing Bacterial Clearance and Evading Sepsis. Journal of Infectious Diseases. 216 (4), 489-501 (2017).
  15. Cheng, B. L., et al. Evaluation of serotypes 5 and 8 capsular polysaccharides in protection against Staphylococcus aureus in murine models of infection. Human Vaccine Immunotherapy. 13 (7), 1609-1614 (2017).
  16. Wong, D., et al. Clinical and Pathophysiological Overview of Acinetobacter Infections: a Century of Challenges. Clinical Microbiology Reviews. 30 (1), 409-447 (2017).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Модель пневмонии у мышейвентилятор-ассоциированная пневмониягомогенизация ткани легкогоколониеобразующие единицыгистопатологический анализоптимальная температура срезасерийные разведениятриптический соевый агар
Мышиных аспирации орофарингеального модель вентилятора ассоциированной и внутрибольничная бактериальной пневмонии
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.