Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Microphysiologic платформа для человеческого жира: зажатой белой жировой ткани

6.1K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/57909

⸱

15 августа 2018 г.

 ,  ,  , 
1Department of Pharmacology, Louisiana State University Health Sciences Center, 2Department of Surgery, Louisiana State University Health Sciences Center

В этой статье

Краткое содержание

Белой жировой ткани (Ват) имеет критические недостатки в его текущей модели основной культуры, препятствуют развитию фармакологического и метаболических исследованиях. Здесь мы представляем протокол для получения жировых microphysiological системы сэндвич Ват между листами стромальных клеток. Эта конструкция обеспечивает стабильной и гибкой платформой для первичного Ват культуры.

Аннотация

Белой жировой ткани (Ват) играет решающую роль в регулировании веса и повседневной здоровья. Тем не менее существуют значительные ограничения для моделей доступны основной культуры, все из которых не удалось точно охарактеризовать жировой микроокружения или продлить жизнеспособность Ват за две недели. Отсутствие надежной первичной культуры модели серьезно препятствует исследования в Ват метаболизм и разработки лекарств. С этой целью мы использовали стандарты NIH в microphysiologic системы для разработки Роман платформы для Ват основной культуры под названием «SWAT» (слоеное белой жировой ткани). Мы преодолеть естественным плавучести адипоцитов сэндвич фарша Ват кластеры между листами жировой производные стромальных клеток. В этой конструкции Ват образцы являются жизнеспособной более чем восемь недель в культуре. SWAT сохраняет нетронутыми ECM, к ячейке контактов и физического давления в естественных условиях Ват условий; Кроме того Сват поддерживает надежные транскрипционный анализ профиля, чувствительность к экзогенных химических сигналов и функция цельной ткани. SWAT представляет простой, воспроизводимые и эффективный метод первичной жировой культуры. Потенциально это широко применимые платформы для научных исследований в физиологии Ват, Патофизиология, метаболизм и фармацевтических разработок.

Введение

Жировой ткани является основным органом, ожирения, которая осуществляет прямые ежегодные медицинские расходы между 147 миллиардов долларов и 210 миллиардов долларов в США1. Накопления жировой ткани также способствует других ведущих причин смерти, такие как болезни сердца, диабета II типа и некоторых видов рака2. В vitro культуры модели необходимы для метаболических исследований и разработки лекарств, но текущие исследования модели жировой ткани имеют серьезные недостатки. Адипоцитов хрупкие, жизнерадостный и неизлечимо дифференцированных клеток, которые не будут придерживаться пластмассы культуры клеток и поэтому не может быть культивировали, с использованием обычных клеток культуры методов. Начиная с 1970-х годов были использованы в попытках несколько методов для преодоления этих препятствий, включая использование стекла coverslips, потолок культуры, подвеска культуры и внеклеточной матрицы3,4,5, 6 , 7. Однако, эти методы были отмечены гибель клеток и дифференцировке, и они обычно используются для не более чем в течение двух недельного исследования. Кроме того, эти модели не пытайтесь повторить родной жировой микроокружения, поскольку они не поддерживают нетронутыми ECM, поддержки взаимодействия между адипоциты и стромальные клетки, ни клетки сократительной силы оказывают друг на друга в в естественных условиях Ват.

В отсутствие метода золотой стандарт начального жировой культуры жировой исследования опирается главным образом на дифференцированной предварительно адипоцитов (diffAds). DiffAds многокамерный, сторонником и метаболически активные. Напротив основной белый адипоцитов однокамерные, nonadherent и демонстрируют сравнительно низкий метаболизм. Текущего жировых культуры моделей неспособность пилки физиологии здоровых зрелых жировой ткани, вероятно, основным фактором в отсутствие утвержденных FDA лекарства, которые непосредственно нацелены адипоцитов. В самом деле отсутствие физиологического в vitro моделей органа является серьезной проблемой на большинство органов и болезни.

В своем позиционном документе, объявив о создании своей программы Microphysiological системы (MPS) национальные институты здравоохранения (NIH) сообщили, что 2013 успеха во всех фармацевтических клинические испытания на человеке только 18% для этапа II и 50% для фазы III Клинические испытания8. Программе MPS предназначена для непосредственного решения неспособность в vitro монокультуры модели физиологии человека. НИЗ определяет MPSs как культура системы, состоящей из человека первичной или стволовых клеток многоклеточного 3D конструкций, которые пилки функционирования органа. В отличие от модели редукционистской однородной, увековечен клеточных культур MPSs должен точно модель ячеек, наркотиков клеток, лекарственного препарата и орган наркотиков взаимодействий9. В отличие от краткосрочных методов первичной культуры низ стандартов диктовать м/с устойчивости более 4 недель культуры8. Более подробная информация о программе MPS можно найти на низ RFAs (#RFA-TR-18-001)10.

Мы разработали простой, Роман, адаптации, и недорогой жировой м/с называют «зажатая белой жировой ткани» (SWAT)11. Мы преодолеть естественным плавучести адипоциты, «сэндвич» рубленый первичной жировой ткани между листами жировой производные стромальных клеток (ADSCs) (рис. 1). Результирующая 3D конструкции резюмирует контакт ячеек и родной жировой микроокружения, окружая Зрелые адипоцитов с населением клетки естественным Адипоцит поддержки. SWAT протестирована, демонстрируя 8-недельного жизнеспособности, ответ на экзогенные сигнализации, секрецию Ади­по­Кин и приживления в животной модели.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все задачи были выполнены в присоединение к протоколам #8759 и #9189, как одобрено IRB отделение LSUHSC-NO. Все животные работа была выполнена в присоединение к протоколу #3285 утверждения IACUC Управлением по LSUHSC-NO.

1. Заполнение сэндвич ячеек листов

Примечание: Смотрите Рисунок 1.

  1. Семя ADSCs на приблизительно 80% confluency в культуре ткани пластины (6 см или 6-ну пластины). Для каждой скважины SWAT желаемого, семян 1 обычных культуры ткани хорошо и 1 хорошо соответствующего размера на пластиковые пластины с покрытием poly(N-isopropylacrylamide (pNIPAAm) культуры ткани.
    Примечание: Соответственно, 6-ну тарелку SWAT потребует заполнение ячеек на один стандартный 6-ну культуры ткани пластины (базовый уровень) и один 6-ну pNIPAAm покрытием культуры ткани пластины (верхний слой). pNIPAAm покрытием плиты могут быть куплены коммерчески или производится в лаборатории12,,1314.
  2. Сохранить ADSCs при 37 ° C и 5% CO2 в Дульбекко изменение Eagle среднего (DMEM) с 10% FBS и 1 x пенициллина/стрептомицина. Изменить СМИ каждые 2 дня.
  3. Разрешить клетки сливаются до тех пор, пока они становятся 100% притока и взять на полосатый узор (примерно 6-8 дней).
    Примечание: Эти клетки нужно будет функционировать в качестве одной неповрежденной ячейки листа с целью стабилизации плавучесть жировой ткани. Недостаточно вырожденная клетки будет фрагмент после посева с Ват.

2. Подготовка СПЕЦНАЗА поставок

  1. Подготовьте несколько 10 мл аликвоты из 1 x Хэнк сбалансированный соли раствора (HBSS); Подготовьте достаточно для желаемое количество пластин с объемом для запасных.
  2. Подготовьте поршень аппарат для посева SWAT. Постройте поршень, используя простые акриловые пластмассы, состоит из ствола, придает круглый диск. Убедитесь, что она вписывается в окружности культуры ткани скважины (диаметр: < 6 см на 6 см блюдо, < 3,5 см для 6-ну плиты; Приблизительная масса: 6.7 g для 6 см блюдо, 5,1 g для 6-ну плиты).
    1. Подготовка дополнительных плунжеров для обеспечения, что процедура будет работать гладко в случае, что есть проблема с любой индивидуальный поршень.
    2. Обернуть ленту лаборатории вокруг обода диска поршень, по крайней мере 2 x, для предотвращения утечки раствора желатина.
    3. Спрей биобезопасности кабинета (BSC) с 70% EtOH. Спрей вниз 15 мл конические пробки стойки внутри BSC с пустым, раскрытый 15 мл конические трубы; трубы поможет обеспечить размещение плунжеров желатина.
    4. Тщательно распылите каждый поршень намоткой ленты с 70% EtOH и место в 15 мл Конические трубки на стойке. Брызги металла шайбы (Приблизительная масса 6,3 g) и поместите их на решетку вместе с парой подключили щипцами; шайба будет добавить вес к плунжеров во время посева SWAT.
    5. Закройте створки BSC и включите УФ света для облегчения сушки и стерилизации.
      Примечание: В идеале, провести этот шаг за 24 часа до посева SWAT. Кроме того проводить процесс в день ткани коллекции/SWAT посева; Однако в этом случае, позволяют 15 – 45 мин для УФ сушки и стерилизации.

3. Подготовка плунжеров желатин — приложение к верхней ячейки листов

  1. Нагреть на водяной бане до 75 ° C.
  2. Приготовляют раствор желатина, добавив 0,75 г порошка желатина 10 мл бульона 1 x HBSS. Под зонт мкл 100 1 M NaOH сбалансировать рН раствора.
    1. Добавьте 10 мл запасов на водяной бане и shake энергично каждые 5 мин до тех пор, пока порошок растворяется в раствор. Цель для растворения порошка желатина вскоре после добавления в ванну с подогретой водой.
    2. Включите вентилятор BSC, выключить свет УФ и поднять створку. Брызг поверхность BSC и подготовить фильтр поставок (5 мл luer-lock шприцы и 0,2 мкм шприц фильтры). Подготовьте несколько фильтров, чтобы эффективно штамм достаточных объемов желатин для применения к поршни.
  3. Когда раствор желатина достигает однородной консистенцией, фильтр решения и применить его к плунжеров. Загрузите шприц с желатином. Применить желатин для пластиковых плунжеров через шприц фильтр (~2.5 для 6-ну пластина, ~4.5 мл на 6 см блюдо) и позволяют укрепить (~ 20 мин).
  4. Когда желатин твердый, берем ленту от края плунжеров. Увлеченные пинцетом удалить желатин от внешнего края плунжера (т.е., поднятые края мениска). Убедитесь, что оставшийся желатин в центре поршень полностью уровня для максимального контакта с ADSC лист.
  5. Когда удаляется избыток желатина, осторожно применять желатин плунжеров для пластин с покрытием pNIPAAm ADSC. Используйте шайбы металла, чтобы весить вниз плунжера. Не срез ячеек листов при применении плунжеров.
  6. Оставьте плунжеров на листах ячейки для 1,5 ч при комнатной температуре. Инкубируйте пластины/поршни в ледяной воде ванны для 1,5 h завершить диссоциации клеток листа от поверхности пластины с покрытием pNIPAAm.
    1. Проявлять осторожность при инкубации в ледяной ванне; не позволяйте ледяной ванне загрязнить ячейки СМИ во время инкубации.
    2. После окончания инкубации, очистите в нижней части пластины с покрытием pNIPAAm удалить нестерильные воды.

4. белой жировой ткани обработка

  1. При сборе жировых тканях человека от операционной комнате, держите все образцы в стерильный контейнер, который является на льду пока SWAT должна быть заполнена. Добавьте стерильные обслуживания средств массовой информации, таких как фосфат амортизированное saline (PBS), контейнер жировой ткани стабильности.
  2. Добавьте холодной камере питательной среды для 1.5 мл пробирок microcentrifuge для каждого блюдо хорошо, чтобы быть посеяны (100 мкл 6-ну пластины, промаркированные на 6 см блюдо).
  3. Фарш жировой ткани.
    1. Для твердых жировой ткани сегментов выполните следующее.
      1. Вымойте значительная часть жировой ткани 3 x в стерильных PBS и удалить столько PBS как можно скорее.
      2. Крупно фарш ткани с щипцами и стерильные бритвы и удалить столько сосудистую и фасции как можно скорее (см. обсуждение более подробно).
      3. Мелко фарш жира с бритвой, пока фарш ткани берет на толстые, жидкой консистенции.
        Примечание: В идеале ткани появится однородных с не видны отдельные сегменты Ват хотя это не всегда возможно.
    2. Процесс lipoaspirate следующим образом.
      1. В BSC лента стерильные марлевые над верхней части стакан и место этот стакан в больших стакан для сбора любой избыток жидкости.
      2. С помощью Пипетки серологические 25 мл, привлечь столько lipoaspirate как необходимое и применить его к поверхности стерильной марлей. Применяйте PBS непосредственно на поверхность мыть lipoaspirated жира и удалить избыток крови и остатков липидов.
      3. Используйте щипцы для восстановить осушенных ткани, передача его в стерильных размола поверхности и фарш lipoaspirate.
  4. Используйте стерильные бритвой отрезать дистального конца p1000 наконечники для передачи фарш из ткани; Это сведет к минимуму касательное напряжение, что может привести к Адипоцит лизис. По достижении соответствия надлежащего ткани передачи желаемый объем фарш из ткани для каждого 1,5 мл (300 – 400 мкл 6-ну пластины, 500 – 600 мкл 6 см блюдо). Смешайте фарш Ват и СМИ кратко в трубах.
  5. Возьмите опорные плиты ADSC и сцеживаться/аспирационная средств массовой информации. Замените Ват/СМИ смесь от каждого 1,5 мл средства массовой информации.
    1. Аккуратно удалите желатин плунжеров из пластины с покрытием pNIPAAm и применить их к Ват смесь на опорные плиты ADSC. Изучите однослойные пластины с покрытием pNIPAAm под микроскопом, чтобы подтвердить сотовой отряда.
  6. Установка блока тепла приблизительно 37 – 40 ° c под BSC. С плунжеров еще на месте переместите плиты поверхности блока тепла. Добавьте 2-3 мл утепленные культуры средств массовой информации для инкубации клеток и облегчения плавления желатина.
  7. После ~ 30 мин осторожно удалите плунжеров из поверхности пластины. Замените крышки базовой культуры ткани пластины и перейти к инкубатор культуры клеток. Когда желатин полностью сжиженных при 37 ° C, аспирационная и заменить средства массовой информации культуры клеток.
  8. Поддерживать SWAT при 37 ° C и 5% CO2 в среде M199 свободного фенола красного с 7 мкм инсулина, дексаметазон 30 мкм, 1 x пенициллина/стрептомицина. Сохраняйте в примерно 2 мл средства массовой информации для 6-ну пластин и 3 мл для блюд, 6 см. Изменить СМИ каждые 2 дня.

5. SWAT урожай

  1. Подготовить коллагеназы (коллагеназа 0.5 мг/мл, 500 Нм аденозина, в PBS) аликвоты в 15 мл конические трубы (примерный объем 10 мл). Замораживание труб и хранить их при-20 ° C.
  2. Аспирационная любой питательной среды от клеток, вымыть 1 x с PBS и затем аспирационная PBS. Подготовьте коллагеназы аликвоты, размораживание их в ванну воды 37 ° C.
    Примечание: В идеале, решение коллагеназы достигнет 37 ° C; сразу же после этого добавьте ткани.
  3. Добавьте все ткани от пластины SWAT в отдельных аликвоты. Урожай SWAT, с помощью стерильных клеток лавный и перенести его на аликвоты коллагеназы с кончиком пипетки p1000 отсечения. Добавьте ткани непосредственно в 15 мл конические пробирки, содержащие коллагеназы решение.
    1. Кроме того Инкубируйте в ткани/коллагеназы смесь в 50 мл Конические трубки; увеличение площади поверхности будет и далее содействовать ферментативного пищеварения.
  4. Место пробоотборные трубки в инкубирован орбитальный шейкер под углом 45°. Инкубируйте на 200 об/мин, при 37 ° C за 30-60 мин.
  5. Место 250 мкм сетчатый фильтр в новой 15 мл Конические трубки для коллекции. Залейте раствор переваривается Адипоцит через фильтр.
    Примечание: Это позволит все клетки проходят через время фильтрации фиброзной ткани.
  6. Разрешить поток через сидеть в течение 5 мин при комнатной температуре для этапа разъединения.
    Примечание: Адипоцитов будет плавать в верхней части решения, в то время как жировых клеток стромы (ИСС) будет располагаться ниже этапов. Центрифугирование за 5 мин на 500 x g также может максимизировать разделения клеток или урожай вокруг ADSCs в гранулах.
  7. С помощью кончика пипетки p1000 отсечения, адипоциты (плавающий слой в верхней части решения коллагеназы) передать microcentrifuge коллекции 1,5 мл. Принимая на время ~ 250 мкл, Пипетка медленно вдоль края трубки для сбора адипоцитов.
    1. Медленно вращайте трубки во время сбора адипоциты для максимального восстановления клеток, придерживаясь внутри. Сохраните рисунок больше клеток до 1,5 мл пробки microcentrifuge.
  8. Удалите лишнюю жидкость из изолированных адипоциты, с помощью шприца придает иглы (~ 21 G). Потопить иглу под плавающий слой Адипоцит. Агитировать кратко к выбить любой клетки, придерживаясь оси иглы иглы, а затем ждать выбили адипоцитов плавать в верхней.
  9. Медленно нарисуйте лишнюю жидкость, стараясь избежать непреднамеренного удаления адипоцитов. Используйте градации пробки microcentrifuge последовательно изолировать образца томов (например,. 0,1 мл для каждого образца).
  10. Использование изолированных клеток для экстракции ДНК/РНК, пробирного поглощение глюкозы, липолиз пробирного и т.д.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Жизнеспособность SWAT первоначально оценивалась путем последовательного brightfield изображений отдельных кластеров Ват (n = 12) приблизительно 7,6 недель. Кластеры оставался обеспеченным в месте на монослое на протяжении этого времени. Незначительные морфологические изменения наблюдались с отдельными адипоцитов слегка сновать или смещение позиции. Однако адипоциты ни многокамерный со временем стать, что указывает на отсутствие дифференцировке, ни сделал они проявляют каких-либо видимых п...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Этот протокол подробности использования ADSCs для сэндвич человека белой жировой ткани; человеческого ADSC клеточных линий могут быть изолированы через устоявшихся протоколы15. Однако система может быть адаптирована для удовлетворения потребностей индивидуальных исследований (например, использование 3T3L-1 клетки мыши сэндвич Ват). Этот процесс включает в себя обработку первичных человеческих тканей. Стандартные меры предосторожности должны применяться; обрабатывать ткани человека как BSL-2 патоге...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют ничего сообщать.

Благодарности

Авторы хотели бы признать институциональной поддержки, оказываемой LSU медицинских наук центр, который финансировал проект.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
10x HBSSThermofisher14185052
желатинSigma-aldrichG9391
КоллагеназаSigma-aldrichC5138
АденозинSigma-aldrichA9251
DMEMThermofisher11995065
M199 MediaThermofisher11043023Фенол без красных 
250 &микро; m Сетчатый фильтрPierce87791
0.2 & микро; m Шприцевой фильтр Celltreat229747
5 мл шприцев Luer-Lok Металлические
Это Они просто добавляют вес к задней части заглушек, чтобы обеспечить равномерный контакт между клетками и желатином, при этом их легко хранить и стерилизовать. Примерная масса: 6,3 г 
Name<strong>CompanyНомер в каталоге<strong>Комментарии
Оборудование с подогревом
Incubated Orbital ShakerVWR10020-988Образцы должны быть наклонены под углом 45° для облегчения переваривания коллагеназы
Heat BlockУстановите на 37-40 градусов; C и помещен в шкаф биобезопасности
Водяная баняУстановлен на ~75 градусов; C
Название<strong>CompanyНомер в каталоге>Комментарии
Специализированные пластмассы
Upcell Тарелки 6 см 6-многолуночногоNunc174902  или 174901Это коммерчески доступные чашки с покрытием pNIPAAm, которые можно использовать для выращивания верхнего листа ADSC. В качестве альтернативы пластины с покрытием pNIPAAm могут быть изготовлены в лаборатории. диаметр: < 6 см для блюда 6 см, < 3,5 см для 6-луночного планшета; приблизительная масса: 6,7 г для чашки 6 см, 5,1 г для 6-луночного
пластикового плунжерного аппаратаОни могут быть изготовлены так, чтобы поместиться в желаемый пластик с покрытием pNIPAAm (многолуночные пластины, чашки Петри). Они состоят из простого стержня, прикрепленного к круглому диску. Они могут быть изготовлены в лаборатории или на любом предприятии, которое может изготавливать акриловые пластики
шайбы BD 309646 простые металлические шайбы, которые можно купить в любом хозяйственном магазине.

Ссылки

  1. Cawley, J., Meyerhoefer, C. The medical costs of obesity: An instrumental variables approach. Journal of Health Economics. 31 (1), 219-230 (2012).
  2. Pi-Sunyer, X. The Medical Risks of Obesity. Postgraduate Medicine. 121 (6), 21-33 (2009).
  3. Smith, U. Morphologic studies of human subcutaneous adipose tissue in vitro. Anatomical Record. 169 (1), 97-104 (1971).
  4. Sugihara, H., Yonemitsu, N., Miyabara, S., Yun, K. Primary cultures of unilocular fat cells: characteristics of growth in vitro and changes in differentiation properties. Differentiation. 31 (1), 42-49 (1986).
  5. Sugihara, H., Yonemitsu, N., Toda, S., Miyabara, S., Funatsumaru, S., Matsumoto, T. Unilocular fat cells in three-dimensional collagen gel matrix culture. The Journal of Lipid Research. 29, 691-697 (1988).
  6. Hazen, S. A., Rowe, W. A., Lynch, C. J. Monolayer cell culture of freshly isolated adipocytes using extracellular basement membrane components. The Journal of Lipid Research. 36, 868-875 (1995).
  7. Fried, S. K., Kral, J. G. Sex differences in regional distribution of fat cell size and lipoprotein lipase activity in morbidly obese patients. International Journal of Obesity. 11 (2), 129-140 (1987).
  8. Sutherland, M. L., Fabre, K. M., Tagle, D. A. The National Institutes of Health. Microphysiological Systems Program focuses on a critical challenge in the drug discovery pipeline. Stem Cell Research and Therapy. 4, (2013).
  9. Wikswo, J. P. The relevance and potential roles of microphysiological systems in biology and medicine. Experimental Biology and Medicine. 239 (9), 1061-1072 (2014).
  10. National Institutes of Health. NIH-CASIS Coordinated Microphysiological Systems Program for Translational Research in Space (#RFA-TR-18-001). , Available from: https://grants.nih.gov/grants/guide/rfa-files/RFA-TR-18-001.html (2017).
  11. Lau, F. H., Vogel, K., Luckett, J. P., Hunt, M., Meyer, A., Rogers, C. L., Tessler, O., Dupin, C. L., St Hilaire, H., Islam, K. N., Frazier, T., Gimble, J. M., Scahill, S. Sandwiched White Adipose Tissue: A Microphysiological System of Primary Human Adipose Tissue. Tissue Engineering Part C: Methods. 24 (3), (2018).
  12. Ebara, M., Hoffman, J. M., Stayton, P. S., Hoffman, A. S. Surface modification of microfluidic channels by UV-mediated graft polymerization of non-fouling and 'smart' polymers. Radiation Physics and Chemistry. 76, 1409-1413 (2007).
  13. Lin, J. B., Isenberg, B. C., Shen, Y., Schorsch, K., Sazonova, O. V., Wong, J. Y. Thermo-responsive poly(N-isopropylacrylamide) grafted onto microtextured poly(dimethylsiloxane) for aligned cell sheet engineering. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 99, 108-115 (2012).
  14. Turner, W. S., Sandhu, N., McCloskey, K. E. Tissue Engineering: Construction of a Multicellular 3D Scaffold for the Delivery of Layered Cell Sheets. Journal of Visualized Experiments. (92), e51044(2014).
  15. Bunnell, B., Flaat, M., Gagliardi, C., Patel, B., Ripoll, C. Adipose-derived stem cells: Isolation, expansion and differentiation. Methods. 45 (2), 115-120 (2008).
  16. Akiyama, Y., Kikuchi, A., Yamato, M., Okano, T. Ultrathin poly(N-isopropylacrylamide) grafted layer on polystyrene surfaces for cell adhesion/detachment control. Langmuir. 20 (13), 5506-5511 (2004).
  17. Fried, S. K., Russell, C. D., Grauso, N. L., Brolin, R. E. Lipoprotein lipase regulation by insulin and glucocorticoid in subcutaneous and omental adipose tissues of obese women and men. Journal of Clinical Investigation. 92 (5), 2191-2198 (1993).
  18. Keipert, S., Jastroch, M. Brite/beige fat and UCP1 - is it thermogenesis? Biochimica et Biophysica Acta. 1837 (7), 1075-1082 (2014).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

PNIPAAm
Microphysiologic платформа для человеческого жира: зажатой белой жировой ткани
Свяжитесь с нами
Рекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

Авторские права © 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.