Моделирование туберкулеза Mycobacterium marinum инфицированных взрослых рыбок данио

Hanna Luukinen; Milka Marjut Hammarén; Leena-Maija Vanha-aho; Mataleena Parikka

doi:10.3791/58299

Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Моделирование туберкулеза Mycobacterium marinum инфицированных взрослых рыбок данио

10.6K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/58299

⸱

8 октября 2018 г.

Hanna Luukinen¹ , Milka Marjut Hammarén¹ , Leena-Maija Vanha-aho¹ , Mataleena Parikka¹^,²

¹Faculty of Medicine and Life Sciences, University of Tampere, ²Oral and Maxillofacial Unit, Tampere University Hospital

В этой статье

Краткое содержание

Здесь мы представляем протокол к модели людских туберкулезом в взрослых рыбок данио, используя свой естественный возбудитель Mycobacterium marinum. Извлечения ДНК и РНК от внутренних органов зараженных данио рерио может использоваться для показывают, что всего микобактериальной загружает в рыбы и хозяина иммунной реакции с ПЦР.

Аннотация

Микобактерии туберкулеза в настоящее время смертоносных человеческий патоген, вызывая 1,7 миллиона смертей и 10,4 миллиона инфекций каждый год. Воздействие эта бактерия вызывает широкий болезни спектра в организме человека, начиная от стерилизованные инфекции активно прогрессирующей смертельной болезни. Наиболее распространенной формой является латентный туберкулез, который протекает бессимптомно, но имеет потенциал, чтобы активировать в молниеносный заболевание. Взрослый данио рерио и его природного патогена Mycobacterium marinum недавно оказались применимыми модель для изучения заболевание широкий спектр туберкулеза. Важно отметить, что спонтанное задержки и возобновления, а также адаптивного иммунного ответа в контексте микобактериальной инфекции могут быть изучены в этой модели. В этой статье мы описываем методы для экспериментальной инфекции взрослых рыбок данио, коллекции внутренних органов для извлечения нуклеиновых кислот для измерения микобактериальной нагрузок и принимающих иммунные реакции путем количественного PCR. В-дом-развитых, м. marinum -конкретного ПЦР анализа более чувствительны, чем традиционных покрытий методами, как он также обнаруживает ДНК от-деления, спящие или недавно мертвых микобактерий. Как ДНК и РНК извлекаются из того же лица, это возможно для изучения взаимосвязи между состояние больного и хозяин и возбудителя экспрессии генов. Взрослый zebrafish модель для туберкулеза таким образом позиционирует себя как очень применимо, не млекопитающих в естественных условиях системы для изучения взаимодействия хост патогена.

Введение

Данио рерио (Danio рерио) широко используется модель животных в биомедицинских исследованиях и это принятой модели для общей биологии позвоночных. Данио рерио была адаптирована для многих областях исследований, моделирования человеческих заболеваний и расстройств, начиная от¹ рак и болезни сердца² инфекции и иммунологических исследований ряда бактериальных ³ и вирусных инфекций⁴ ^, ⁵. Кроме того, бывший внутриутробное развитие зародышей данио рерио сделал данио рерио популярная модель в биологии развития^6....