Здесь мы представляем протокол производить жировой ткани производные стромальные сосудистой дроби и ее применение для улучшения функции коленного сустава путем регенерировать ткани хряща человека больных с остеоартрозом.
Методическая статья
* These authors contributed equally
Здесь мы представляем протокол производить жировой ткани производные стромальные сосудистой дроби и ее применение для улучшения функции коленного сустава путем регенерировать ткани хряща человека больных с остеоартрозом.
Остеоартрит (ОА) является одним из наиболее распространенных негативных расстройств. Недавно были предприняты многочисленные попытки улучшить функции колени с помощью различных форм мезенхимальных стволовых клеток (МСК). В Корее, костного концентраты и шнур стволовые клетки крови производные были одобрены Корейский продовольствия и наркотиков администрации (КФДА) для регенерации хряща. Кроме того жировой ткани, полученных стромальные сосудистой дроби (СФДВ) было разрешено от КФДА для совместных инъекций в человека пациентов. Аутологичные жировой ткани производные СФДВ содержит внеклеточного матрикса (ECM) помимо мезенхимальных стволовых клеток. ECM выделяет различные цитокины, которые, наряду с гиалуроновой кислоты (HA) и тромбоцитов богатые плазмы (PRP) активируются хлористого кальция, может помочь MSCs для регенерации хряща и улучшить функции коленного сустава. В этой статье мы представили протокол для улучшения функции коленного сустава путем регенерировать ткани хряща человека больных ОА. В результате протокол впервые сообщалось в 2011 году последовали несколько дополнительных публикаций. Протокол включает Липосакция для получения аутологичной lipoaspirates, смешиваются с коллагеназы. Эта смесь lipoaspirates коллагеназа затем вырежьте и гомогенизированные для удаления больших фиброзной ткани, которые могут засорить иглы во время инъекции. После этого смесь инкубированы для получения жировой ткани производные СФДВ. Результате жировая ткань производные СФДВ, содержащие жировой ткани производные MSCs и пережитков ECM, вводят в колени пациентов, в сочетании с ха и хлорида кальция активирован ОТР. Включены три случая пациентов, которые лечились с нашими протоколом, что приводит к повышению колено боль, отек и диапазон движения наряду с МРТ доказательства гиалинового хряща как ткани.
Знаны, что имеют возможность регенерации хряща1,2,3,4,5,6мезенхимальных стволовых клеток (МСК). Они могут быть легко получены из различных источников: костного мозга, пуповинной крови и жировой ткани, среди многих других. Среди этих источников жировой ткани является единственным источником, где можно получить достаточное количество MSCs без какого-либо расширения культуры для регенерации хряща в клинических параметров7,,8. Аутологичные костного стромальные сосудистой дроби (СФДВ) может быть легко получены также. Однако количество стволовых клеток, содержащихся в расширенной костного мозга-культура является очень низким7,8. Пуповинной крови может содержать достаточное количество MSCs. Однако пуповинной крови не является доступный источник аутологичной СФДВ.
Многочисленные методы обработки жировой ткани для получения СФДВ доступны для клинического применения. Среди них, метод получения MSCs из жировой ткани с помощью коллагеназы, разработаны и подтверждена Зук и др. 5 , 6, очень хорошо приняли. Этот метод использования коллагеназы был изменен для клинического применения в ортопедии. Для того, чтобы применяться к клинических параметров, система должна быть закрытой системы для поддержания стерильности при сохранении удобства. Один частности изменения, представленные в этой статье включает гомогенизацию lipoaspirates. Малого размера lipoaspirates перевариваются относительно быстрее, чем крупные, которые приводят к неравномерное распределение жировой ткани. Кроме того эти большего размера lipoaspirates может производить фиброзной ткани, которые засоряют шприцы и иглы при выполнении совместных инъекций9,10. Для того, чтобы предотвратить эти проблемы, lipoaspirates может гомогенизированные резки и мясорубки lipoaspirates до инкубации с коллагеназы. Результате жировая ткань производные СФДВ может содержать более равномерным внеклеточного матрикса (ECM), по сравнению с lipoaspirates, которые не являются гомогенизированные11. Разбитых ECM, содержащихся в СФДВ может работать как леска12.
В 2009 году аутологичной жировой ткани производные СФДВ позволило Корейский продовольствия и наркотиков администрации (КФДА) при обработке в медицинское учреждение с минимальной обработкой врач13. Впоследствии аутологичные жировой ткани производные СФДВ был использован как потенциального агента для улучшения функций колена в больных остеоартрит (ОА), потенциально регенерировать ткани хряща10,14,15 , 16 , 17 , 18 .
В 2011 году Пак в первый раз показал, что жировая ткань производные стволовых клеток (ИСС) содержащихся в жировой ткани, полученных СФДВ может улучшить функции коленного сустава, потенциально регенерации хрящевой ткани человека больных ОА, когда вводят с тромбоцитов богатые плазмы (PRP) 14. Кроме того Пак et al. сообщили о безопасности данных в 2013 году с участием 91 пациентов. Средняя эффективность в этом безопасность данных составила 67%15. Впоследствии дополнительные исследования Пак et al. показали улучшение коленного функции потенциально вследствие регенерации хрящевой ткани у больных с мениска слезы и Хондромаляция голени10,16,17 ,18. На основании статей сообщалось, известно, что количество стволовых клеток, содержащихся в 100 г жировой ткани, обрабатываемых протоколом, представленные в этой статье может варьироваться от 1 000 000-40,000,000 в зависимости от пациентов характеристики8, 19 , 20 , 21 , 22 , 23.
Здесь мы представляем клинический протокол человека коленного OA, аутологичной СФДВ, жировой ткани, полученных с помощью га и ОТР, активированный с хлорид кальция. Первая версия этой клинических протокола, связанных с закрытыми, ручной системы для поддержания стерильности, было сообщено в 201114. Идентичные протокол был оптимизирован, сохранение стерильности и было сообщено в 2013 и 201610,15. Здесь представлен оптимизированный протокол. Схематический обзор протокола представлена на рисунке 1.

Рисунок 1: схема Обзор протокола. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Одобрения и согласия представить следующие доклады были waived Комитетом (MJUIRB) Мёнгчжийский университета институциональных Наблюдательный Совет. Кроме того этот клинический протокол был в соответствии с руководящими принципами Хельсинкской декларации и регулирование КФДА. Для выполнения процедур осознанного согласия были получены из пациентов.
1. липосакция
Примечание: Выполнение с стерильных.
2. Подготовка смеси ASC/ECM с стерильных закрытой системы
3. PRP подготовка с стерильных
4. ASC/ECM смесь на основе лечения
5. после лечения следить
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Трое больных (один 87-летняя женщина с этап 3 ОА, 68-летний мужчина с этапа 3 ОА, и один 60-летняя женщина с этапа 3 ОА) без каких-либо значительных прошлом медицинской истории представил в клинику с стойких колено боль и желаемого для потенциальных Аутологичные жировой ткани производные СФДВ лечение. Все три пациента имели их колена, рассмотренных ортопед и были предложены иметь полная замена коленного сустава (ТКР) и желали иметь хирургии. До процедуры все три пациента получил множестве...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
В 2001 году Зук и др. изолированные стволовых клеток из жировой ткани, разбив коллагеновой матрицы с коллагеназы6. Впоследствии группа показала, что эти стволовые клетки из жировой ткани может превратить в хрящ и других тканях мезодермы в происхождения, доказав, что эти стволовые клетки были мезенхимальных происхождение.
Аналогично процедуры, представленные в этой статье является измененный Протокол применить аналогичный метод для человека пациентов. Основные м...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Авторы не имеют ничего сообщать.
Автор признает поддержку от сотрудников медицинской клиники Mipro и дизайн Jaepil/Дэвид ли рисунок. Эта работа была поддержана научно-исследовательских грантов от био и медицинской программы развития технологии НРФ, финансируемого MSIT (номер СР 2017M3A9E4078014); и Национальный исследовательский фонд из Кореи (СР НАТО) финансируется министерством науки и ИКТ (числа СР 2017R1A2B4002315 и СР 2016R1C1B2010308).
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| <сильно>Материал | |||
| 5% Бетадина (повидон-йод) | Фирсон Ко., Лтд. | ||
| 2% Лидокаин | Дехань Фармасьютикал Ко. | ||
| Тумесцентный раствор | Myungmoon Pharm. Co. Ltd. | N01BB01 | Раствор содержали 500 мл физиологического раствора, 40 мл 2% лидокаина, 20 мл 0,5% маркаина и 0,5 мл адреналина 1:1000. |
| Либераза ТЛ и ТМ исследовательского сорта | Roche Applied Science | 5401020001 | |
| D5LR | Dahan Pharm. Co., Ltd. | 645101072 | Декстроза 5% в растворе лактата Рингера |
| Антикоагулянт цитрат декстроза раствор | Фенвал, Инк. | NDC:0942-0641 | Раствор состоял из 0,8% лимонной кислоты, 0,22% цитрата натрия и 0,223% декстрозы. |
| 3% (по мас./об.) Хлорид кальция | Чунвае Фармацевтическая Компания | ||
| 0,5% (w/v) гиалуроновой кислоты (гиалуроновая кислота | Dongkwang pharm. Co., Ltd. | ||
| 0,25% Ropivacaine | Huons Co., Ltd. | Канюля 670600150 | |
| Equipment | |||
| 3,0 мм | WOOJU Medical Instruments Co. | ||
| шприц Luer-Lock 60 мл | BD (Becton Dickinson) | ||
| Комплект цилиндров для центрифуг | CPL Co., Ltd. | 30-0827044 | |
| Гомогенизатор тканей, содержащий лопасти | CPL Co., Ltd. | 30-0827045 | |
| Вращающийся инкубатор-миксер | Medikan Co., Ltd | MS02060092 | |
| центрифуга | Hanil Scientific Inc. | CE1133 | |
| Магнитно-резонансная томография Philips | Medical Systems Inc. | 18068 | |
| Ультразвуковая система визуализации | Samsung Medison co., Ltd | CT-LK-V10-ICM-09.05.2007 |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE
Запросить разрешение