Методическая статья

Высокочувствительная измерение гломерулярной проницаемости у мышей с флуоресцеином изотиоцианат-полисукроз 70

DOI:

10.3791/59064

⸱

9 августа 2019 г.

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Nephrology, Medical Faculty, Heinrich-Heine-University

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Здесь мы представляем протокол для проверки glomerular проницаемости у мышей с помощью высокочувствительных, нерадиоактивных трассировщик. Этот метод позволяет проводить повторные анализы мочи с небольшими объемами мочи.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Потеря альбумина в моче (альбуминурия) предсказывает сердечно-сосудистый исход. В физиологических условиях, небольшое количество альбумина фильтруется гломерулем и поглощается в трубчатой системе до достижения предела поглощения. Раннее увеличение патологической фильтрации альбумина может, таким образом, быть пропущено при анализе альбуминурии. Поэтому использование трассеров для проверки гломерулярной пермякции представляется выгодным. Флуоресцентно помеченный трассик флуоресцеин изотиоцианат (FITC)-полисукроз (т.е. FITC-Ficoll), может быть использован для изучения гломерулярной пермской вертики. Молекулы FITC-полисурозы свободно фильтруются гломерулем, но не поглощаются в трубчатой системе. У мышей и крыс, FITC-полисукроз был исследован в моделях гломерулярной проницаемости с помощью технически сложных процедур (т.е. радиоактивных измерений, высокопроизводительных жидких хроматографии (HPLC), фильтрации геля). Мы модифицировали и облегчили FITC-полисахарозный протокол на основе трассировщика для раннего и небольшого увеличения гломерулярной проницаемости fitC-polysucrose 70 (размер альбумина) у мышей. Этот метод позволяет проводить повторные анализы мочи с небольшими объемами мочи (5 кЛ). Этот протокол содержит информацию о том, как трассировщик FITC-полисукроз 70 применяется внутривенно и моча собирается с помощью простого мочевого катетера. Моча анализируется с помощью флуоресценционного считывателя пластин и нормализуется до маркера концентрации мочи (креатинин), тем самым избегая технически сложных процедур.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Функциональные или структурные дефекты в пределах гломерулярного барьера фильтрации увеличивают гломерулярную проницаемость альбумина, в результате чего обнаружение альбумина в моче (альбуминурия). Альбуминурия предсказывает сердечно-сосудистые результаты и является важным маркером для glomerular травмы1. Даже низкие уровни альбуминурии, лежащие в пределах нормального диапазона, связаны с повышенным сердечно-сосудистым риском1.

В физиологических условиях альбумин фильтруется через гломерулус и почтиполностью поглощается в трубчатой системе 2,3. У мышей, обнаружение альбумина в моче, как правило, осуществляется альбумина фермент-связанных иммуносорбент анализа (ELISA) от 24 ч сбора мочи. Если моча из 24 ч мочи или пятно мочи используется, небольшие различия в концентрации альбумина могут быть упущены из-за проблем с чувствительностью анализа. Большинство исследователей, таким образом, используют животные модели, в которых альбуминурия индуцируется надежной почечной травмы из-за токсинов, наркотиков и почечной хирургии.

Таким образом, поиск чувствительного метода для обнаружения небольших и переходных изменений в гломерулярной проницаемости очень важен для поля. Rippe et al. представили крысиную модель для проверки гломерулярной проницаемости, применяя флуоресцентно помеченный трассировщик, а именно FITC-polysucrose 70 (т.е. FITC-Ficoll 70), размером с альбумин4. Приложение трассировщик позволяет тестирование краткосрочных изменений в glomerular проницаемость (в течение нескольких минут) и очень чувствительны4. Два исследования использовали метод трассировщика у мышей5,6. Несмотря на свои преимущества, этот метод, к сожалению, имеет недостатки: он технически очень сложный, радиоактивный и инвазивный. Дальнейший анализ мочи осуществляется только с помощью гель фильтрации или размера исключения HPLC5,6.

В этой работе мы представляем альтернативный, чувствительный, нерадиоактивный и быстрый метод измерения гломерулярной проницаемости у мышей с помощью флуоресцентно помеченного FITC-полисуроз7. Вводя трансуретральный катетер, сбор мочи является менее инвазивным, чем прокол мочевого пузыря, уретотомия и супрапубического катетера применения, и позволяет сбор мочи по крайней мере каждые 30 минут. Анализ мочи выполняется из небольших количествах (5 л) с использованием флуоресцентный считыватель пластин. Концентрации трейда в моче нормализуются до креатинина концентрации в моче с помощью ферментативного анализа креатинина.

Таким образом, этот новый метод предлагает чувствительный инструмент для изучения ранней гломерулярной травмы с повышенной гломерулярной проницаемости.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Исследования проводились в соответствии с руководящими принципами, изложенными в Руководстве по уходу и использованию лабораторных животных (Публикация Национальных институтов здравоохранения США No 85-23, пересмотренный 1996 год). Все эксперименты на животных проводились в соответствии с соответствующими институциональными разрешениями (государственное правительство Landesamt f'r Natur, Umwelt und Verbraucherschutz (LANUV) справочный номер 84-02.04.2012.A397).

1. Подготовка инструментов, решений и оборудования

  1. Восстановите FITC-polysucrose 70 с 0,9% стерильного хлорида натрия (NaCl) до конечной концентрации 10 мг/мл (т.е. 100 мг в 10 мл NaCl).
  2. Диализ FITC-полисукоз 70 раствор для удаления свободных молекул FITC в одночасье при 4 градусах Цельсия (молекулярный вес отсечения (MWCO) на 10 000). Используйте 1 l 0.9% стерильных NaCl на 10 мл FITC-полисукозоза 70 при постоянном перемешивании. Защитите от света. Aliquot диализированный FITC-полисуроз 70 и хранить его при -20 градусах Цельсия.
  3. Для FITC-polysucrose 70 bolus добавьте 4 qL 10 мг/мл FITC-полисукроз 70 раствора до 996 л 0,9% NaCl (окончательная концентрация FITC-полисахаррозы 70: 40 мкг/мл).
  4. Для раствора эквилибриации инфузии добавьте 20 л 10 мг/мЛ FITC-полисуроз 70 к 9,98 мл стерильного NaCl, уступая конечной концентрации 20 мкг/мл.
  5. Для экспериментального раствора добавьте препараты или вещества в раствор инфузии (например, для ангиотензина II «Анг II» (Анг II) для 25 г мыши, добавьте 3 л Анг II раствора 1 мМ).
  6. Для операции приготовьте одну бритву, два хирургических зажима, одну пару хирургических ножниц, два пинцета, два тонких пинцета, одну пару тонких ножниц и тампоны. Приготовьте две шелковые нити 10 см (4-0- 6-0) для перевязок.
  7. Для размещения центрального венозного катетера приготовьте шприц калибра 10 мл с помощью иглы 21 Г. Поместите кончик иглы в катетер длиной 30 см (с внутренним диаметром 0,58 мм). Подключите катетер калибра 0,58 мм к катетеру 10 см (с идентификатором 0,28 мм). Вырезать кончик меньшекатия косой, чтобы создать острый кончик, который вводится в яремной вены.
  8. Приготовьте анестезию (т.е. интраперитонеальную анестезию кетамина, 100 мг/кг массы тела и ксилазин, 5 мг/кг массы тела).
  9. Подготовьте 22 G ангиокатетер, отбросив иглу и пометив катетер 1 см от кончика. Разогреть грелку до 37 градусов по Цельсию.
  10. Подготовьте устройство кровяного давления и при необходимости измените мембрану измерения артериального давления.

2. Этап подготовки

  1. Мочевый катетер
    ПРИМЕЧАНИЕ: Раздел 2.1 следует протоколу, как описано Reis et al.7. На рисунке 1 и дополнительной рисунке 1 показано размещение мочевого катетера у самок мышей.
    1. Анестезируемая мышь кетамин/ксилазин (см. шаг 1.8). Используйте тест на нос и щепотку для подтверждения правильной анестезии. Для поддержания анестезии повторяйте анестезию (например, с половиной дозы) после 60 мин. Правильная анестезия подтверждается, если тест на щепотку ног не приводит к рефлекторным снятию.
      ПРИМЕЧАНИЕ: В этом протоколе используются женские мыши FVB.
    2. Расположите мышь в царской реанисте на гробе 37 градусов по Цельсию. Затяните нижнюю часть живота и найдите уретраальный осиум (например, под микроскопом).
    3. Используйте пластиковую часть катетера 22 G ангиокатетера и смазать его ксилокаин гель. Введите его тщательно 3 мм в уретральный осий при параллельном дистальной оси уретры(рисунок 1A).
    4. Поверните верхнюю часть ангиокатетера 180 ", сохраняя кончик в уретральной остюи и поддержания оси уретры (Рисунок 1B).
    5. Введите катетер 7 мм дальше в мышь, так что он находится в мочевом пузыре(рисунок 1C). Не заставляйте катетер выйти за пределы сопротивления. Исправьте положение катетера с самого начала, если ощущается сопротивление. Принять к сведению, что если положение мочевого катетера является правильным, моча может уже появиться в катетере.
    6. Поместите 1,5 мл коричневой трубки поверх ангиокатера для сбора мочи. Нанесите 1 мл 0,9% NaCl подкожно для повышения производства мочи.
  2. Центральный венозный катетер
    1. Бритье шеи мыши и поместите его в лежачих голову к хирургу. Гипернатягивайте голову мыши лентой.
    2. Дезинфицировать шею 70% изопропанола. Сделайте небольшой разрез кожи (5 мм) ниже челюсти, используя пинцет и ножницы. Вырезать кожу примерно на 1 см в направлении грудины до середины грудины достигается.
    3. Тщательно вскрыть кожу на правой стороне шеи, используя ножницы. Сделайте прямоугольный разрез кожи на правой стороне мыши, чтобы разоблачить мягкую ткань шеи. Используйте ножницы и пинцет. Закрепите кожу лоскутами двумя зажимами.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Яремная вена проходит вдоль левой стороны щитовидной железы или слегка покрыта правой долей щитовидной железы. После этого шага используйте микроскоп для операции.
    4. Тщательно разоблачить яремную вену тупой подготовки, используя кончик тонкого пинцета. Избегайте травм венвиных ветвей.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Возможно, потребуется удалить ткани мелкими ножницами. Будьте осторожны при использовании ножниц для удаления тканей, как это увеличивает риск кровотечения.
    5. Поместите и закройте лигатуру шелковой нитью (4-0 к 6-0) в дистальной части видимой яремной вены (к голове мыши). Положите напряжение на лигатуру, закрепив шелковую нить лентой, чтобы обеспечить небольшое напряжение на яремной вены. Подготовьте лигатуру вокруг проксимальной части яремной вены.
    6. Заполните катетер раствором эквилиберации инфузии (см. шаг 1.4) и зафиксните катетер лентой так, чтобы катетер выровнял яремную вену. Контроль за пузырьками, чтобы избежать эмболии воздуха.
    7. Поднимите яремную вену мелкими пинцетом в месте вставки (место вставки 1-2 мм проксимальна лигатуры). Выровнять трубки параллельно яремной вены. Проколить яремную вену, направленную на просвет, и вставить примерно 2-4 мм, параллельно оси яремной вены. Избегайте оживленных движений.
    8. Закройте лигатуру, чтобы починить катетер. Контроль за герметичность лигатуры путем тщательного просмотра через микроскоп. Положите влажный тампон над местом операции.
  3. Измерение артериального давления
    1. Поместите хвост-манжеты в нижней части хвоста мыши в то время как мышь лежит в царских recumbency. Начните измерения и повторите их 10x в точке времени. Создайте среднее из измерений.
    2. Отрегулируйте положение хвостовой манжеты, если измерения артериального давления не кажутся правильными и ложные данные производятся.

3. Этап равновесия

  1. Измените трубку для сбора мочи до начала фазы равновесия и поместите ее на лед.
  2. Ввести 10 мл шприц заполнены FITC эквилибриации фазы решения (см. шаг 1.4) с 21 G иглы и большего катетера (с ID 0,58 мм) и поместить его в шприц насос.
  3. Сложите тампон и поместите его вокруг малотоннажного катетера (с идентификатором 0,28 мм), который вводится в яремную вену. Положите катетер внутри тампона. Поместите зажим над тампоном, чтобы отменить ретроградный кровоток или эмболию воздуха. Соедините 27 G иглу с 1 мл шприц заполнены FITC болюс в конце малого судна катетер.
  4. Откройте зажим и нанесите fitC bolus (100 л). Закройте зажим снова и соедините больший катетер с меньшим катетером. Запуск шприца насоса с 0,008 мл /мин (0,480 мл / ч). Продолжить настой в течение 60 мин.

4. Экспериментальная фаза

ПРИМЕЧАНИЕ: На этом этапе, влияние наркотиков на glomerular пермьизбирательность может быть исследована.

  1. Измените мочевых труб (время точки 0 мин) на другой 1,5 мл коричневой трубки. Положите тампон вокруг катетера маломерного судна и закройте зажим, как указано в шаге 3.3.
  2. Отключите большой катетер от катетера маломерного судна. Измените шприцы на экспериментальные фазовые решения (см. шаг 1.5). Пусть инфузионный насос работает так, что большой катетер наполнен раствором равновесия.
  3. Воссоедините катетеры, избегая эмболии воздуха, и вновь откройте зажим. Запуск шприца насоса на 0,008 мл / мин.
  4. Продолжить запуск шприц насос в течение 60 минут и собирать мочу в мочевой трубке после этого (моча 60 мин). Поместите трубку мочи на лед.
  5. Пожертвуйте мышью путем вывиха шейки матки во время анестезии. Перед утилизацией мышь наблюдается в течение 5 минут, чтобы убедиться, что она мертва.

5. Анализ мочи

  1. Измерение флуоресценции
    1. Оттепель мочевого бассейна и разбавить его 1:10 с фосфат-буфером солевая (PBS).
      ПРИМЕЧАНИЕ: Мочевый бассейн представляет собой бассейн мочи, которая была собрана из здоровых мышей в 12-24 ч мочи коллекции в метаболической клетке.
    2. Подготовьте стандарты для измерения флуоресценции. Возьмите 10 коричневых трубок 1,5 мл и пометьте их пустыми (1:10 разбавленного бассейна мочи) и следующие концентрации FITC-polysucrose 70 (0,625, 1,25, 2,5, 5, 10, 20, 40, 80 и 160 мкг/мл).
    3. Пипет 246 л разбавленного бассейна мочи в коричневую трубку 1,5 мл и добавить 4 л концентрации запасов FITC-polysucrose 70 (см. шаг 1.1), чтобы получить окончательную концентрацию 160 мкг/мл FITC-polysucrose 70. Пипетка 100 л разбавленного бассейна мочи во все остальные трубки.
    4. Разбавить 1:2 путем трубоукладки 100 л из 160 мкг/мЛ FITC-полисуроз 70 трубки в 80 мкг/мл трубки и продолжать с другими концентрациями. Обеспечить надлежащую смесь разбавленных концентраций (например, путем вихря трубки перед продолжением).
    5. Разбавить образцы мочи мыши (0 мин, 60 мин) 1:10 с разбавленным мочевого бассейна.
    6. Пипетка 5 зл и каждая стандартная концентрация FITC-polysucrose 70 и образцы мочи мыши в виде трипликируется в черной 384-хорошей пластине. Центрифуге пластины на 1000 х г в течение 15 с, чтобы избежать пузырьков.
    7. Проанализируйте 384-ну колодец в считывателе пластин. Выполните возбуждение на уровне 496 нм и измерьте флуоресценцию на уровне 525 нм.
  2. Измерение креатинина
    1. Следуйте инструкциям производителя. Вкратце, приготовьте стандарты креатинина, разбавив 10 мкм стандартного раствора креатинина 100 мМ с 990 зл и буфером креатинина для подготовки стандартного решения 1 мМ.
    2. Добавьте 0, 2, 4, 6, 8 и 10 л стандартного раствора креатинина 1 мМ в 96-колодственную пластину для генерации стандартов 0, 2, 4, 6, 8 и 10 нмоль/колодца, соответственно. Добавьте крематининовый буфер асссея к каждой скважине, чтобы довести объем до 50 зл.
    3. Подготовьте реакционные смеси, добавив 42-44 л креатинина ассеабуфера, 2 злител креатиназы, 2 Зл креатининазы, 2 Зл азимоза креатинина и 2 Л креатинина. Для заготовки используйте 44 злител креатинина, 2 злителкреазы, 2 Зла смеси ферментов креатинина и 1-2 л креатинина.
    4. Добавьте 50 qL соответствующей реакции смеси для каждого колодца в 96-хорошо пластины и инкубировать его в течение 60 минут на горизонтальной шейкер при 37 градусов по Цельсию. Защитите пластину от света во время инкубации. Измерьте абсорбцию на 570 нм на плите считывателя.
    5. Рассчитайте концентрации креатинина, вычитая пустое значение из всех показаний. В результате будет единица наномол/микролитр. Умножьте концентрацию креатинина на молекулярный вес креатинина (113,12 нг/нмоль), чтобы получить единицу нанограмм/микролитр.

6. Анализ данных

  1. Рассчитайте концентрацию мочи FITC-polysucrose 70 от стандартной кривой.
  2. Справка FITC-полисуроуз 70 концентрации мочи на концентрации креатинина в репрезентативной мочи.
  3. Справка мочи 60 мин образцы мочи 0 мин образцы контроля и лечение мышей.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Как показано на рисунке 2, метод проверки гломерулярной проницаемости у мышей строится в три фазы. Первая фаза называется фазой подготовки, в которой помещаются мочевой катетер и центральный венозный катетер. Второй этап называется фазой равновесия, начиная с внутривенной инъекции болиса FITC-полисуроз 70 и с последующим непрерывным вливанием FITC-полисуроз7 на 60 мин. Последняя фаза называется экспериментальной фазой. На этом этапе продолжается вливание FITC...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Представленный метод позволяет исследователю проверить glomerular проницаемость у мышей в очень чувствительным образом с помощью трассировщика. С помощью этого метода, краткосрочное увеличение гломерулярной проницаемости может быть диагностировано с использованием только небольшое количество мочи. Наиболее важными шагами для успешного освоения этой техники являются 1) развитие ручного опыта в хирургии мыши, особенно в каннулуляции центральной вены, 2) размещение мочевого катетера без ущерба для слизистой оболочки, и 3) р...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторы благодарят Кристину Швандт, Бланку Дувняк и Николу Кур за исключительную техническую помощь и доктора Денниса Сона за помощь в сканировании флуоресценции. Это исследование было поддержано грантом Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) SFB 612 TP B18 в Л.К.Р. и Л.С. Фонднера не принимала никакого значения в разработке, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Motic SMZ168 BLMoticSMZ168BLмикроскоп для мышиной хирургии
KL1500LCDмикроскопия Pulch и Lorenz150500light для мышиной хирургии
MicrofederschereBraun, AesculapFD100Rтонкие ножницы
Durotip Feine ScherenBraun, AesculapBC210Rдля разреза шеи
Anatomische PinzetteBraun, AesculapBD215Rдля хирургии 
Prä parierklemmeAesculapBJ008Rдля хирургии 
SeraflexSerag WiessnerIC108000шелковая нить
Кетамин 10%Medistarанестезия
Rompun (Ксилазин) 2%Байеранестезия
Тонкая полиэтиленовая трубка ID 0,28 мм OD 0,61 ммPortex800/100/100катетер
Тонкая полиэтиленовая трубка ID 0,58 мм OD 0,96 ммPortex800/100/200катетер
Гарвардский аппарат 11 ПлюсГарвардский аппарат70-2209шприцевой насос
BD Insyte AutoguardBD381823  мочевой катетер
Многомодовый детектор DTX 880Beckman Coulterпланшет ридер
384 лунки микротитерная пластинаNunc262260384 лунки платта
Набор для анализа креатининаSigma-AldrichMAK080для измерения концентрации креатинина
96 лунка пластинаNunc260836для анализа креатинина 
FITC-меченая полисуккроза 70TBD ConsultancyFP70FITC-ficoll
Angiotensin IISigma-AldrichA9525используется для проверки клубочковой проницаемости
BP-98ASoftronдля измерения артериального давления
OTS 40.3040Medite01-4005-00нагревательная пластина для хирургии мышей
Instillagel 6mLFarco-Pharma GmbHдля мочевого катетера
бритвы ExactaAesculapGT415

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chronic Kidney Disease Prognosis Consortium,, et al. Association of estimated glomerular filtration rate and albuminuria with all-cause and cardiovascular mortality in general population cohorts: a collaborative meta-analysis. Lancet. 375 (9731), 2073-2081 (2010).
  2. Mori, K. P., et al. Increase of Total Nephron Albumin Filtration and Reabsorption in Diabetic Nephropathy. Journal of the American Society of Nephrology. 28 (1), 278-289 (2017).
  3. Amsellem, S., et al. Cubilin is essential for albumin reabsorption in the renal proximal tubule. Journal of the American Society of Nephrology. 21 (11), 1859-1867 (2010).
  4. Axelsson, J., Rippe, A., Oberg, C. M., Rippe, B. Rapid, dynamic changes in glomerular permeability to macromolecules during systemic angiotensin II (ANG II) infusion in rats. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 303 (6), F790-F799 (2012).
  5. Grande, G., et al. Unaltered size selectivity of the glomerular filtration barrier in caveolin-1 knockout mice. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 297 (2), F257-F262 (2009).
  6. Jeansson, M., Haraldsson, B. Glomerular size and charge selectivity in the mouse after exposure to glucosaminoglycan-degrading enzymes. Journal of the American Society of Nephrology. 14 (7), 1756-1765 (2003).
  7. Reis, L. O., et al. Anatomical features of the urethra and urinary bladder catheterization in female mice and rats. An essential translational tool. Acta Cirurgica Brasileira. 26, 106-110 (2011).
  8. Konigshausen, E., et al. Angiotensin II increases glomerular permeability by beta-arrestin mediated nephrin endocytosis. Scientific Reports. 6, 39513(2016).
  9. Venturoli, D., Rippe, B. Ficoll and dextran vs. globular proteins as probes for testing glomerular permselectivity: effects of molecular size, shape, charge, and deformability. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 288 (4), F605-F613 (2005).
  10. Bohrer, M. P., Deen, W. M., Robertson, C. R., Troy, J. L., Brenner, B. M. Influence of molecular configuration on the passage of macromolecules across the glomerular capillary wall. The Journal of General Physiology. 74 (5), 583-593 (1979).
  11. Dolinina, J., Rippe, A., Bentzer, P., Oberg, C. M. Glomerular hyperpermeability after acute unilateral ureteral obstruction: Effects of Tempol, NOS-, RhoA- and Rac-1-inhibition. American Journal of Physiology-Renal Physiology. , (2018).
  12. Dolinina, J., Sverrisson, K., Rippe, A., Oberg, C. M., Rippe, B. Nitric oxide synthase inhibition causes acute increases in glomerular permeability in vivo, dependent upon reactive oxygen species. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 311 (5), F984-F990 (2016).
  13. Sverrisson, K., Axelsson, J., Rippe, A., Asgeirsson, D., Rippe, B. Acute reactive oxygen species (ROS)-dependent effects of IL-1beta, TNF-alpha, and IL-6 on the glomerular filtration barrier (GFB) in vivo. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 309 (9), F800-F806 (2015).
  14. Sverrisson, K., Axelsson, J., Rippe, A., Asgeirsson, D., Rippe, B. Dynamic, size-selective effects of protamine sulfate and hyaluronidase on the rat glomerular filtration barrier in vivo. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 307 (10), F1136-F1143 (2014).
  15. Sverrisson, K., et al. Extracellular fetal hemoglobin induces increases in glomerular permeability: inhibition with alpha1-microglobulin and tempol. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 306 (4), F442-F448 (2014).
  16. Axelsson, J., Mahmutovic, I., Rippe, A., Rippe, B. Loss of size selectivity of the glomerular filtration barrier in rats following laparotomy and muscle trauma. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 297 (3), F577-F582 (2009).
  17. Axelsson, J., Rippe, A., Rippe, B. Transient and sustained increases in glomerular permeability following ANP infusion in rats. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 300 (1), F24-F30 (2011).
  18. Axelsson, J., Rippe, A., Rippe, B. Acute hyperglycemia induces rapid, reversible increases in glomerular permeability in nondiabetic rats. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 298 (6), F1306-F1312 (2010).
  19. Axelsson, J., Rippe, A., Venturoli, D., Sward, P., Rippe, B. Effects of early endotoxemia and dextran-induced anaphylaxis on the size selectivity of the glomerular filtration barrier in rats. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 296 (2), F242-F248 (2009).
  20. Andersson, M., Nilsson, U., Hjalmarsson, C., Haraldsson, B., Nystrom, J. S. Mild renal ischemia-reperfusion reduces charge and size selectivity of the glomerular barrier. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 292 (6), F1802-F1809 (2007).
  21. Dolinina, J., Rippe, A., Bentzer, P., Oberg, C. M. Glomerular hyperpermeability after acute unilateral ureteral obstruction: effects of Tempol, NOS, RhoA, and Rac-1 inhibition. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 315 (3), F445-F453 (2018).
  22. Rosengren, B. I., et al. Transvascular protein transport in mice lacking endothelial caveolae. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 291 (3), H1371-H1377 (2006).
  23. Whitesall, S. E., Hoff, J. B., Vollmer, A. P., D'Alecy, L. G. Comparison of simultaneous measurement of mouse systolic arterial blood pressure by radiotelemetry and tail-cuff methods. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 286 (6), H2408-H2415 (2004).
  24. Eisner, C., et al. Major contribution of tubular secretion to creatinine clearance in mice. Kidney International. 77 (6), 519-526 (2010).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

70 FITCII

Похожие статьи