Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Intramucosal прививки плоскоклеточный рак клеток мышей для опухоли иммунной профилирования и оценки реакции лечение

11.6K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/59195

⸱

22 апреля 2019 г.

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Radiation Oncology, University of Colorado Denver - Anschutz Medical Campus, 2Department of Anesthesiology, University of Colorado Denver - Anschutz Medical Campus, 3Division of Radiology, University of Colorado Denver - Anschutz Medical Campus

В этой статье

Краткое содержание

Здесь мы представляем воспроизводимый метод для разработки модели ортотопическая мышиных плоскоклеточный рак головы и шеи. Опухолей продемонстрировать клинически значимых Гистопатологические особенности заболевания, в том числе некроза, бедных дифференциации, узловой метастазов и иммунных инфильтрации. Опухоль подшипник мышей развивать клинически значимых симптомов, включая дисфагии, перемещение челюсти и потеря веса.

Аннотация

Голова и шея плоскоклеточный рак (HNSCC) является изнурительным и смертельной болезни с высокой распространенностью повторения и неэффективности лечения. Разработать более терапевтические стратегии, важно понимание опухоли microenvironmental факторов, влияющих на сопротивление лечения. Основным препятствием для понимания механизмов болезни и повышение терапии был недостаток мышиных клеточных линий, которые напоминают агрессивным и метастатического характера человека HNSCCs. Кроме того большинство мышиных моделях используют подкожных имплантаций опухолей, которые не имеют важные физиологические особенности области головы и шеи, включая высокую плотность сосудистой, обширные лимфатический сосудистую и резидентов флоры слизистых оболочек. Целью данного исследования является развивать и характеризуют модель ортотопическая HNSCC. Мы используем две генетически различных мышиных клеточных линий и установленным опухоли слизистой мышей. Мы оптимизируем методы пищеварения на основе коллагеназы опухоли для оптимального восстановления единичных клеток от установленных опухоли. Представленные здесь данные показывают, что мышей весьма васкуляризированной опухоли, метастазы в регионарных лимфатических узлах. Одноклеточных многопараметрических массового cytometry анализ показывает наличие различных иммунных населения с миелоидных клеток, представляющих большинство всех иммунных клеток. Модели, предлагаемые в настоящем исследовании имеет применение в биологии рака, опухоли иммунологии и предклинической разработки Роман терапии. Сходство ортотопическая модели клинические особенности течения заболеваний человека будет служить инструментом для расширения перевода и улучшения результатов лечения пациентов.

Введение

HNSCC является пятым наиболее распространенных злокачественных во всем мире, с более чем 600 000 больных диагностируется ежегодно1. Несмотря на агрессивное лечение с участием химиотерапии и лучевой терапии (RT) общий показатель выживаемости (ОС) для HNSCC пациентов без инфекции вируса папилломы человека (ВПЧ) остается ниже 50% после 5 лет2. Это в значительной степени объясняется весьма сложным опухоли микроокружения как опухоли могут быть получены из нескольких различных анатомических сайтов в регионе головы и шеи, включая слизистой оболочки рта, язык, слово рот, полости носа, ротовой полости, глотки, ротоглотки и гортаноглотки. Кроме того головы и шеи регион весьма васкуляризированной и содержит почти половина всех лимфатических узлов в тело3. Большинство исследований, изучения биология опухоли головы и шеи полагаются на модели опухоли в регионе фланге. Такие модели могут предложить проницательность в опухоль внутренние механизмы, но отсутствие родной микроокружения головы и шеи может существенно повлиять трансляционная потенциал таких выводов. Один метод, который был использован для устных опухолей является воздействие канцерогенов 9,10-диметил-1,2-benzanthracene (DMBA)4. Однако, этот метод связан с длительным процессом, индуцирует опухоли в хомяков и крыс, но не в мышей, и результирующая опухоли не обладают многие из Гистологические особенности дифференцированного SCCs5,6. Введение carcinogen4-nitroquinoline 1-оксида (4-NQO), производная водорастворимый хинолона, привели к мыши устных опухолей при применении устно, но также страдают от долгое время экспозиции (16 недель) и ограниченного принять ставку в пределах и между сериями мышей,8,,7,9. Для того, чтобы развивать клинически значимые модели, несколько групп используются генетически модифицированные модели с участием манипуляции драйвер онкогенов или генов супрессоров опухолей, в том числе TP53, TGFB, КАРСТ, HRA и SMAD410. Эти модели может предложить понимание опухоли с известных драйверов генов, но не повторить сложные неоднородность человеческого HNSCCs.

В этой работе мы продемонстрировать возможность выполнения прививкой intramucosal клеток плоскоклеточный рак у мышей. Привитых клетки развиться в агрессивные опухоли в течение 1 недели после инъекции. Подобно человеческого HNSCCs, опухоли метастазы в регионарных лимфатических узлах. Мы характеризуют гистологические и клинических особенностей заболевания и обеспечить понимание иммунной микроокружения опухоли. Мы предлагаем, что эта ортотопическая модель HNSCC имеет применение в биологии рака, опухоли иммунологии и доклинические исследования. Механизмов иммунной уклонение, опухолевой прогрессии, лечение сопротивления и метастазов представляют области клинического значения, которые могут быть рассмотрены с использованием предлагаемой модели.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все животные процедуры выполнялись в соответствии с утвержденным институциональных животных ухода и использования Комитет (IACUC) протокол из университета Колорадо Денвер (протокол # 00250).

1. опухолевые клетки культуры

Примечание: B4B8 и LY2 клеточных линий были использованы для создания ортотопическая HNSCC опухоли: B4B8 опухолевые клетки были получены от канцероген трансформированных слизистой кератиноциты (от мышей BALB/C)11. LY2 опухолевые клетки были получены из лимфатических узлов метастазы спонтанно Преобразованный BALB/C кератиноцитов линия (Пэм 212)12,13. Обе линии клетки были любезно предоставлены доктор Надараджах, Vigneswaran (UTHealth, Хьюстон, Техас, США).

  1. Использование Дульбекко изменение орла средних (DMEM) F/12 с 10% плода бычьим сывороточным (ФБС) и 1% антимикробной реагент для обслуживания линии клеток. Поддержание этих клеточных линий в стерильных инкубатора при 37 ° C и 5% CO2. Клетки должны использоваться для прививок до более 15 ходов.
  2. Пластина 2 х 106 -4 x 106 клеток в колбах культуры клеток2 175 см.
    Примечание: Клетки обеспечивают менее чем 90% притока, чтобы избежать вызывая реакции стресса.
  3. Когда клетки являются 70% притока (~ 48 ч), удалите фляга из инкубатора и вымыть клетки 3 x с холодной фосфат амортизированное saline (PBS).
  4. Отсоедините клетки из колбы с помощью трипсин 0.25%, достаточно для покрытия поверхности пластины.
    1. Чтобы сделать это, отказаться от 4 мл трипсина в колбе2 175 см, содержащие 70% вырожденная клеток. Инкубируйте клетки с трипсином для 3-4 минут в инкубатор культуры клеток при 37 ° C и 5% CO2.
    2. Визуализируйте клетки под микроскопом для обеспечения мобильный отряд.
    3. Добавьте 12 мл СМИ DMEM F/12, содержащий FBS для нейтрализации активности трипсина.
  5. Аспирационная суспензию клеток и поместите его в 50 мл Конические трубки.
  6. Встряхнуть трубка, содержащая клетки путем переворачивать его 3 x-4 x.
  7. При необходимости смешать с 10 мкл Трипановый синий в пробки microcentrifuge Алиготе 10 мкл суспензии клеток и подсчитать количество ячеек с помощью Горяева. Определить жизнеспособность клеток путем вычитания числа Трипановый сине положительных клеток от общего числа клеток и делим на общее количество клеток.
  8. Центрифуга суспензию клеток на 300 x g 5 мин при 4 ° C.
  9. Ресуспензируйте клеток в сыворотке крови свободных и без антибиотика DMEM на соответствующий объем, так что 1 x 10-6 клетки присутствуют в 50 мкл средств массовой информации.
    Примечание: Основываясь на агрессивность линии в естественных условиях клетки (определяется эмпирически), 1 x 106 клеток на месте инъекции на мышь было сочтено уместным для B4B8 и LY2 клеток.
  10. Место во флаконе, содержащего суспензию клеток на льду.
  11. Место предварительно размороженные базальной мембраны матрицы на льду.
    Примечание: Матрица базальной мембраны был разморожен на ночь при 4 ° C.

2. ячейки инъекции в мышей

  1. Приготовить смесь 1:1 матрицы мембраны клеток: подвал (по 50 мкл).
  2. Добавление ячейки затем постепенно Пипетка матрице базальной мембраны. Избегайте введения пузырьков воздуха. Убедитесь, что смесь производится непосредственно перед инъекцией животных. Добавление матрицы базальной мембраны клеток для длительного периода времени может привести к ячейке, поселившись в матрице смесь, которая затрудняет тщательно встряхните смесь. Это приведет к значительной изменчивостью размера опухоли между мышей.
  3. Осторожно перемешать. Убедитесь, что выполняются все действия с участием матрицы на льду. Базальной мембраны матрица будет полимеризоваться при комнатной температуре.
  4. Подготовьте шприцы для прививки.
  5. Нагрузка 0,5 мл-шприцы (23 G) с 100 мкл раствора матрицы мембраны клеток/подвале.
  6. Храните шприцы на льду во избежание базальной мембраны матрица полимеризации.
  7. Анестезировать мышей, поместив их в камере с изофлюрановая и кислорода (2,5%).
  8. Убедитесь, что мышей глубоко под наркозом перед выполнением инъекций (путем обеспечения отсутствия реакции на щепотку мыс).
  9. Вставьте иглу в регионе щечной вправо или влево. Это осуществляется через имеющиеся открытое пространство по бокам рта.
  10. Убедитесь, что язык мыши не находится в пути.
    Примечание: Это легко засунуть язык, который приведет к язык опухоли. При необходимости переместите язык на противоположной стороне.
  11. Держите шприц параллельно щечной области внутри полости.
  12. Когда будете готовы придать, отступить шприц и медленно вставьте шприц углом 10°.
  13. Придать 100 мкл суспензии матрицы мембраны клеток/подвале в течение 5 s.
  14. Возьмите шприц в место для дополнительных 5 s для обеспечения всех материал закачивается.
    Примечание: Для управления nontumor подшипник мышей инъекционные смеси сыворотки свободных СМИ и матрицы (как описано выше) без опухолевых клеток.
  15. Осторожно снять шприц.
  16. Продолжите процедуру выше остальных мышей.
  17. Разрешить за 1 неделю до тех пор, пока опухоли начинают появляться грубо (3 50 – 200 мм для B4B8 и LY2 клетки).

3. Мониторинг мышь

  1. Выполните первое измерение при помощи штангенциркуля на 1 неделю после инъекции клеток опухоли. Чтобы вычислить объем опухоли, используя внешние суппортов, определяют наибольший продольный диаметр (длина) и наибольший поперечный диаметр (ширина) и использовать измененные эллипсоидальной формула14,15.
    figure-protocol-1
  2. Продолжать выполнять регулярные суппорта измерений для тома опухоли (1 x x-2 в неделю на регулярной основе).
  3. Измерения веса животных для оценки последствий роста опухоли на кормление.

4. заготовка опухоли

  1. Когда достигается экспериментальной конечной точки, усыпить животных, с использованием надлежащих мер (например, CO2 удушья, обезглавливание или шейки матки дислокации).
    Примечание: В этом исследовании, конечной точки было достигнуто если мышей стала устаревшей (с потерей веса > 15% от их первоначального веса, отсутствие ухода, кахексия) или если размер опухоли достигло 1000 мм3.
  2. Начните, рассекает животного, создавая длинный разрез через по средней линии в области шеи.
    1. Использование тупой щипцы захватить кожи и острые ножницы, чтобы вырезать кожу.
  3. Вставьте ножницами аккуратно под кожей, охватывающих опухоли и создавать воздушные карманы, нажав ножницы через и в кожу.
  4. Как только кожа достаточно отсоединяется от опухоли, определить крылом лимфатические узлы (DLNs) и акцизных их избежать опухолевой ткани проклятый наличием лимфатических узлов.
    Примечание: Большие опухоли может достигать и/или покрытия DLN. В зависимости от типа выполняемой пробирного изоляции нетронутыми лимфатических узлов необходимо, чтобы избежать утечки иммунных клеток в опухоли, которая приведет к искажению результатов анализа.
  5. Вырежьте через границы опухоли до тех пор, пока весь объем отсоединяется.

5. опухоль, обработки нисходящие приложения

  1. По течению гистологическое обследование место опухоли в формалина 10% при комнатной температуре. Чтобы избежать overfixation, замените формалин 70% этиловом спирте. Для анализа потока цитометрии процесс опухоли, как описано ниже.
    Примечание: Ткани могут храниться в формалин за 72 ч до overfixation может стать проблематичным для некоторых видов окрашивания.
  2. Вырезать опухоль на 1 – 2 мм-размера куски с помощью стерильных лезвие бритвы или острыми ножницами.
  3. Место частей вырежьте опухоли в 50 мл Конические трубки с коллагеназы III (4250 единиц на сэмпл), DNase I (0,1 мг на сэмпл) и ингибитор трипсина (1 мг на сэмпл).
  4. Инкубируйте при 37 ° C за 30 мин при встряхивании каждые 10 мин.
    Примечание: Образцы могут быть размещены в закрывающейся мешок, стерилизованное с 90% этанола и помещены в инкубатор культуры клеток.
  5. После 30 мин добавьте 20 мл Хэнка сбалансированного солевого раствора (HBSS) и спина на 300 x g за 5 мин.
    Примечание: HBSS состоит из хлорид калия, хлорид натрия, бикарбонат натрия, натрия фосфат двухосновной, монокальций фосфат натрия и глюкозы.
  6. Отменить супернатант и Ресуспензируйте гранулы в 2 – 3 мл буфера lysis эритроцитов (РБК). Пипетка строго.
    Примечание: Буфер lysis РБК состоит из аммония хлорид, натрия бикарбонат и динатриевой.
  7. Проинкубируйте 2 мин при комнатной температуре.
    Примечание: Длительный инкубационный могут быть токсичными для других клеточных популяций.
  8. Добавьте 20 мл HBSS для нейтрализации эффекта буфера lysis.
  9. Центрифуга на 300 x g 5 минут и удалить супернатант.
  10. Ресуспензируйте гранулы в 10 мл HBSS.
  11. Передать решение через 70 мкм нейлон фиксатор и центрифуги на 300 x g для 5 минут удалить супернатант.
  12. Повторите шаги 5,8 – 5,10 и передайте суспензию клеток через 40 мкм нейлон фиксатор, чтобы убедиться, что любые дополнительные мусор удаляется из подвеска.

6. ячейки окрашивание и сбора данных

  1. Ресуспензируйте Пелле клеток в 1 мл HBSS.
  2. Подсчет количества ячеек, используя Горяева или счетчик автоматизированных клеток, как описано в шаге 1.7
  3. Определите количество ячейке и соответствующей концентрации для окрашивания.
    Примечание:     идеальной клетки концентрация для потока цитометрии пятнать это 1-2 миллионов клеток. Например если окрашивание производится в 96-луночных тарелку и есть 10 миллионов клеток, Ресуспензируйте образца в 1 мл и пластины 100 мкл на 1 миллион клеток в колодец.
  4. Добавьте блок ФК (CD16/CD32) в концентрации 1: 100 для предотвращения привязки nonantigen специфических иммуноглобулинов в FcγIII и FcγII рецепторов. Инкубируйте 5 мин при комнатной температуре.
    1. Центрифуга и Ресуспензируйте Пелле клеток в 100 мкл потока цитометрии ячейки пятнать буфера (состоит из солевой раствор, содержащий 5% FBS, ЭДТА 2% и 1% HEPES).
  5. Выполняйте клеточной поверхности, окрашивание согласно предоставленных поставщиком инструкции (Добавление каждое антитело на соответствующие разрежения). Инкубируйте 60 мин при комнатной температуре.
    1. Центрифуга и Ресуспензируйте Пелле клеток в 100 мкл HBSS. Повторите 2 x, чтобы избавиться от избыточных антитела.
  6. Запуск образцов на соответствующие проточный цитометр.
    1. Если анализ внутриклеточных маркеров (например, foxp3), выполняют клетки permeabilization и окрашивание согласно инструкциям поставщика.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

В пробирке оценки LY2 и B4B8 пролиферации клеток показали, что обе линии клетки имеют аналогичные удвоение раз (21 h и 23 h, соответственно). In vivo, обе линии клетки сформировали единый, видимым и ощутимым массы в течение 1 недели прививка (рис. 1A). В мышах с учетом LY2 опухоли челюсть было смещено 3 недели из-за опухоли бремя (рис. 1A). Контроль мышей, которые не получили опухолевые клетки не развиваются опухоли как ожидалось...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Тщательный анализ и характеристика микроокружения опухоли представляют важной стратегией для понимания механизмов развития опухоли, прогрессии, и метастазов и для разработки эффективной терапии. Рак головы и шеи является сложное заболевание, которое может быть взято из нескольких анатомических сайтов в области головы и шеи. Основным препятствием для понимания механизмов болезни и повышение терапии был недостаток мышиных мыши клеточных линий, которые напоминают агрессивным и метастатического характера человека HNSCCs. Кро...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют ничего сообщать.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Коллагеназа IIIWorthington Biochemical Corp.
DNase IWorthington Biochemical Corp.
Блок Fc (CD16/32)BD Biosciences553141  Клон 2.4G2 
Проточная цитометрия Окрашивающий буферeBioscience00-4222-26
HBSSThermoFisher Scientific14175079без кальция, без магния, без фено-красного Helois
масс-цитометрFluidigmNA
Matrigel мембранная матрицаCorning CB-40234B
Сканер МРТBrukerNA7,4 Тесла RBC
лизис буферBioLegend420301
ингибитор трипсинаWorthington Biochemical Corp.
LS004183LS006328LS002830

Ссылки

  1. Chaturvedi, A. K., et al. Worldwide trends in incidence rates for oral cavity and oropharyngeal cancers. Journal of Clinical Oncology. 31 (36), 4550-4559 (2013).
  2. Ang, K. K., Sturgis, E. M. Human papillomavirus as a marker of the natural history and response to therapy of head and neck squamous cell carcinoma. Seminars in Radiation Oncology. 22 (2), 128-142 (2012).
  3. Amin, M. B., et al. The Eighth Edition AJCC Cancer Staging Manual: Continuing to build a bridge from a population-based to a more "personalized" approach to cancer staging. CA: A Cancer Journal for Clinicians. 67 (2), 93-99 (2017).
  4. Salley, J. J. Experimental carcinogenesis in the cheek pouch of the Syrian hamster. Journal of Dental Research. 33 (2), 253-262 (1954).
  5. Morris, A. L. Factors influencing experimental carcinogensis in the hamster cheek pouch. Journal of Dental Research. 40, 3-15 (1961).
  6. MacDonald, D. G. Comparison of epithelial dysplasia in hamster cheek pouch carcinogenesis and human oral mucosa. Journal of Oral Pathology & Medicine. 10 (3), 186-191 (1981).
  7. Hawkins, B. L., et al. 4NQO carcinogenesis: a mouse model of oral cavity squamous cell carcinoma. Head & Neck. 16 (5), 424-432 (1994).
  8. Tang, X. H., Knudsen, B., Bemis, D., Tickoo, S., Gudas, L. J. Oral cavity and esophageal carcinogenesis modeled in carcinogen-treated mice. Clinical Cancer Research. 10 (1 Pt 1), 301-313 (2004).
  9. Vered, M., Yarom, N., Dayan, D. 4NQO oral carcinogenesis: animal models, molecular markers and future expectations. Oral Oncology. 41 (4), 337-339 (2005).
  10. Bornstein, S., et al. Smad4 loss in mice causes spontaneous head and neck cancer with increased genomic instability and inflammation. Journal of Clinical Investigation. 119 (11), 3408-3419 (2009).
  11. Thomas, G. R., Chen, Z., Oechsli, M. N., Hendler, F. J., Van Waes, C. Decreased expression of CD80 is a marker for increased tumorigenicity in a new murine model of oral squamous-cell carcinoma. International Journal of Cancer. 82 (3), 377-384 (1999).
  12. Yuspa, S. H., Hawley-Nelson, P., Koehler, B., Stanley, J. R. A survey of transformation markers in differentiating epidermal cell lines in culture. Cancer Research. 40 (12), 4694-4703 (1980).
  13. Chen, Z., Smith, C. W., Kiel, D., Van Waes, C. Metastatic variants derived following in vivo tumor progression of an in vitro transformed squamous cell carcinoma line acquire a differential growth advantage requiring tumor-host interaction. Clinical & Experimental Metastasis. 15 (5), 527-537 (1997).
  14. Euhus, D. M., Hudd, C., LaRegina, M. C., Johnson, F. E. Tumor measurement in the nude mouse. Journal of Surgical Oncology. 31 (4), 229-234 (1986).
  15. Tomayko, M. M., Reynolds, C. P. Determination of subcutaneous tumor size in athymic (nude) mice. Cancer Chemotherapy and Pharmacology. 24 (3), 148-154 (1989).
  16. Yushkevich, P. A., et al. User-guided 3D active contour segmentation of anatomical structures: significantly improved efficiency and reliability. NeuroImage. 31 (3), 1116-1128 (2006).
  17. Dutta, S., et al. The relationship between tumour necrosis, tumour proliferation, local and systemic inflammation, microvessel density and survival in patients undergoing potentially curative resection of oesophageal adenocarcinoma. Britisch Journal of Cancer. 106 (4), 702-710 (2012).
  18. Li, H., et al. Genomic analysis of head and neck squamous cell carcinoma cell lines and human tumors: a rational approach to preclinical model selection. Molecular Cancer Research. 12 (4), 571-582 (2014).
  19. Walsh, N. C., et al. Humanized Mouse Models of Clinical Disease. Annual Review of Pathology. 12, 187-215 (2017).
  20. Oweida, A., et al. Ionizing radiation sensitizes tumors to PD-L1 immune checkpoint blockade in orthotopic murine head and neck squamous cell carcinoma. OncoImmunology. 6 (10), e1356153(2017).
  21. Ferris, R., et al. Further evaluations of nivolumab (nivo) versus investigator’s choice (IC) chemotherapy for recurrent or metastatic (R/M) squamous cell carcinoma of the head and neck (SCCHN): CheckMate 141. Journal of Clinical Oncology. 34, (2016).
  22. Ferris, R. L., et al. Nivolumab for Recurrent Squamous-Cell Carcinoma of the Head and Neck. The New England Journal of Medicine. 375 (19), 1856-1867 (2016).
  23. Harrington, K. J., et al. Nivolumab versus standard, single-agent therapy of investigator's choice in recurrent or metastatic squamous cell carcinoma of the head and neck (CheckMate 141): health-related quality-of-life results from a randomised, phase 3 trial. The Lancet Oncology. 18 (8), 1104-1115 (2017).
  24. Kiyota, N., et al. A randomized, open-label, Phase III clinical trial of nivolumab vs. therapy of investigator's choice in recurrent squamous cell carcinoma of the head and neck: A subanalysis of Asian patients versus the global population in checkmate 141. Oral Oncology. 73, 138-146 (2017).
  25. Ling, D. C., Bakkenist, C. J., Ferris, R. L., Clump, D. A. Role of Immunotherapy in Head and Neck Cancer. Seminars in Radiation Oncology. 28 (1), 12-16 (2018).
  26. Perri, F., et al. Radioresistance in head and neck squamous cell carcinoma: Biological bases and therapeutic implications. Head & Neck. 37 (5), 763-770 (2015).
  27. Yamamoto, V. N., Thylur, D. S., Bauschard, M., Schmale, I., Sinha, U. K. Overcoming radioresistance in head and neck squamous cell carcinoma. Oral Oncology. 63, 44-51 (2016).
  28. Bonner, J. A., et al. Radiotherapy plus cetuximab for locoregionally advanced head and neck cancer: 5-year survival data from a phase 3 randomised trial, and relation between cetuximab-induced rash and survival. The Lancet Oncology. 11 (1), 21-28 (2010).
  29. Bhatia, S., et al. Inhibition of EphB4-Ephrin-B2 Signaling Enhances Response to Cetuximab-Radiation Therapy in Head and Neck Cancers. Clinical Cancer Research. 24 (18), 4539-4550 (2018).
  30. Bhatia, S., et al. Enhancing radiosensitization in EphB4 receptor-expressing Head and Neck Squamous Cell Carcinomas. Scientific Reports. 6, 38792(2016).
  31. Tang, C., et al. Combining radiation and immunotherapy: a new systemic therapy for solid tumors? Cancer Immunology Research. 2 (9), 831-838 (2014).
  32. Oweida, A., et al. Resistance to radiotherapy and PD-L1 blockade is mediated by TIM-3 upregulation and regulatory T-cell infiltration. Clinical Cancer Research. , (2018).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Плоскоклеточный рак головы и шеиортотопическая модель опухолиинъекция в слизистую оболочку щекиколлагеназное переваривание опухолиизоляция единичных клетоканализ методом проточной цитометриимагнитно-резонансная томографиягистологическое исследованиеметастазирование в лимфатические узлы
Intramucosal прививки плоскоклеточный рак клеток мышей для опухоли иммунной профилирования и оценки реакции лечение
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.