Средне-пропускная способность, отбор проб для оценки воздействия на Ca2 +-сигнализации и Акросома реакции в человеческой спермы

Anders Rehfeld; Dorte Louise Egeberg Palme; Kristian Almstrup; Anders Juul; Niels Erik Skakkebaek

doi:10.3791/59212

Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Средне-пропускная способность, отбор проб для оценки воздействия на Ca^{2 +}-сигнализации и Акросома реакции в человеческой спермы

7.9K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/59212

⸱

1 марта 2019 г.

Anders Rehfeld¹^,² , Dorte Louise Egeberg Palme¹^,² , Kristian Almstrup¹^,² , Anders Juul¹^,² , Niels Erik Skakkebaek¹^,²

¹Department of Growth and Reproduction, Copenhagen University Hospital, ²International Center for Research and Research Training in Endocrine Disruption of Male Reproduction and Child Health (EDMaRC), University of Copenhagen

В этой статье

Краткое содержание

Здесь, две средних-пропускная способность анализов для оценки воздействия на Ca^{2 +}-описаны сигнализации и Акросома реакции в человеческой спермы. Эти анализы могут использоваться для экрана быстро и легко большое количество соединений для воздействия на Ca^{2 +}-сигнализации и Акросома реакции в человеческой спермы.

Аннотация

CA^{2 +}-сигнализации имеет важное значение для функции нормальных клеток спермы и мужской фертильности. Аналогично реакция Акросома имеет жизненно важное значение для способности человека сперматозоид проникает вителлинового и оплодотворить яйцеклетку. Именно поэтому представляет большой интерес для проверки соединений (например, экологические химических веществ или наркотиков кандидатов) за их влияние на Ca^{2 +}-сигнализации и Акросома реакции в человеческой спермы либо для изучения потенциального неблагоприятного воздействия на человека сперматозоид функции или для изучения возможной роли в качестве средства контрацепции. Здесь описаны два анализов средне-пропускная способность: 1) на основе флуоресценции assay для оценки воздействия на Ca^{2 +}-сигнализации в человеческой спермы и 2) изображения гранулярных assay для оценки реакции Акросома в человеческой спермы. Эти анализы могут использоваться для экран большое количество соединений для воздействия на Ca^{2 +}-сигнализации и Акросома реакции в человеческой спермы. Кроме того анализов может использоваться для создания узкоспециализированных доза реакция кривых индивидуальных соединений, определить потенциальные аддитивности/синергизм для соединения двух или более и для изучения режима фармакологических действий путем конкурентного ингибирования эксперименты с ингибиторами CatSper.

Введение

Цель двух анализов, описанные здесь является изучить воздействие на Ca^{2 +}-сигнализации и Акросома реакции в человеческой спермы, как уже было показано для нескольких соединений в ряде публикаций, используя эти assays¹^,²^, ³^,⁴^,⁵^,⁶^,⁷. CA^{2 +}-сигнализации и Акросома реакции являются жизненно важное значение для нормального человека сперматозоид функцию и плодовитость мужчины.

Общая цель клетки....