Научно-исследовательские лаборатории несут значительные расходы в результате нарушения агентов тестирования. Хвост вен инъекции являются сложной технике освоить для достижения последовательного успеха, с наиболее опытных технологов, часто неся ошибки нарушения. Существует нет надежного способа подтверждения успешного инъекции. Этот протокол предлагает решение этой проблемы, давая исследователям качественный и количественный метод для проверки успеха инъекции Вену мышиных хвост. Здесь,8,7,nanoemulsion, NIRF, меченного25 включает агент по выбору (в данном случае, наркотиков) и образы на месте инъекции в тепловизор малых животных NIRF. Существует также возможность разработки на основе nanoemulsion агент и использовать тот же принцип NIRF изображений путем включения коммерчески доступных инфра красной краски. Кроме того готовые к использованию изображений агентов с большим количеством приложений, таких как опухоль изображений, метаболические изображений, мобильный людьми, и apoptosis также коммерчески доступны. Инъекция производится с помощью стерильной иглой или, альтернативно, катетер IV; Это зависит от предпочтений исследователя. Кроме того автоматизированных хвост вен инжекторы26 были использованы для оказания помощи в этом процессе и совместимы с этой методологии. Однако эта технология еще не стать коммерчески доступными.
Есть важные шаги в методе инъекции Вену хвост, которые обеспечивают более высокий показатель правильного агента администрирования. Во-первых хвост должны быть очищены с этанол, чтобы удалить грязь и мусор, что позволяет исследователям получить более наглядное представление связи. Расширяя Вены, погрузив хвост в теплой воде является также очень важным шагом в методе, поскольку она позволяет больше площадь поверхности для инъекций. Инъекций в более дистальной точке на хвост ключе позволяет для некоторых ошибок, в том случае, если множественные попытки необходимы. Инъекции, должно выполняться в более проксимальном позиции в хвост как хвост вен увеличивается в размерах, как подошел хвостовой аспект тела животного. Кроме того контралатеральной хвост вен может использоваться, если иглы не более трех-пяти узлов на ипсилатеральной хвост вен.
Успешного управления агента тестирования приводит к практически нет сигнала NIRF точке впрыска. Если сопротивления не ощущается во время администрации инъекции и мало что не флуоресцирования на хвост, затем инъекции могут быть записаны как успешный. Если почувствуете сопротивление во время инъекции и там тропа NIRF сигнал вдоль некоторых длина хвоста, то инъекций регистрируется как неудачной и вероятно частично подкожной. Флуоресценции изображения взяты предварительная и впрыск, а качество инъекции оценивается путем наблюдения за качественно или количественно анализируя сигнал флуоресценции в месте инъекции. Программное обеспечение, сопровождающих тепловизор флуоресценции NIR часто способен выполнять этот анализ.
Этот метод может быть адаптирована несколькими способами. Это применимо к хвост инъекции Вену мышей и крыс. Большинство малых животных NIR флуоресценции тепловизоры будет способный разместить мышиных грызунов. Уровень анестезии должны быть скорректированы в зависимости от веса животного, в соответствии с протоколом IACUC научно-исследовательской лаборатории. Еще одна возможная модификация является подготовка на основе nanoemulsion зонд либо путем включения инфракрасного красителя в исследователь сформулировал агента покупки готовых к использованию изображений агент, с учетом конкретных биологических приложений.
Если крыса является относительно большим, он часто может быть трудно расположить его в малых животное томографа. Таким образом, рекомендуется, что тестовый образ взят с животным в ящик перед инъекцией, и поле зрения установлено, где виден хвост. Это полезно для ленты, хвост, чтобы ящик томографа, чтобы убедиться, что он не двигаться во время визуализации.
Альтернативные методы, пытаясь оценить качество хвост вен, что инъекции в мелких животных ограничены для использования маркировки реагенты, которые не мешают параллельных экспериментальных процедур и требуют эвтаназии животных postinjection 12,13. Некоторые реагенты могут повлиять исходы исследования и терапевтических оценки животных участвующих, поэтому рекомендуется уход в экспериментальный дизайн.
Этот метод может в будущем, уточняться с достижениями в технологии визуализации малых животных, а также улучшения в инфракрасной флуоресцентных зондов. Биологические датчики с включены инфракрасный краситель, предназначенные для ряда различных приложений, может использоваться на этапе агента администрирования дизайна исследования для проверки качества инъекции, как описано в этом метод2,3 ,27,28,,2930,,3132.