Биопсия и витрификация человека

Roberta Maggiulli; Adriano Giancani; Danilo Cimadomo; Filippo  M. Ubaldi; Laura Rienzi

doi:10.3791/59625

Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Биопсия и витрификация человека

23.5K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/59625

⸱

26 июля 2019 г.

Roberta Maggiulli¹ , Adriano Giancani¹^,² , Danilo Cimadomo¹ , Filippo M. Ubaldi¹ , Laura Rienzi¹

¹G.EN.E.R.A. Centers for Reproductive Medicine, ²DAHFMO, Unit of Histology and Medical Embryology, Sapienza University of Rome

В этой статье

Краткое содержание

Для эффективного проведения предимплантационного генетического тестирования требуется карангоцистая биопсия и витрификация. Подход, предусматривающий последовательное открытие zona pellucida и извлечение 7-8 трофектодермных клеток в день 5-7 после оплодотворения, ограничивает как количество необходимых манипуляций, так и воздействие эмбриона на неоптимальные условия окружающей среды.

Аннотация

Биопсия Blastocyst выполняется для получения надежной генетической диагностики во время циклов ЭКО с предимплантационным генетическим тестированием. Затем идеальный рабочий процесс влечет за собой безопасный и эффективный протокол витрификации, в связи с временем поворота диагностических методов и переноса выбранного эмбриона (ы) на физиологический эндометрий в следующем естественном цикле. Подход к биопсии, охватывающий последовательное открытие zona pellucida и извлечение 5-10 трофектодермных клеток (в идеале 7-8), ограничивает как количество необходимых манипуляций, так и воздействие эмбриона на неоптимальные условия окружающей среды. После надлежащей подготовки, техника была воспроизводима между различными операторами с точки зрения сроков биопсии (8 мин, в диапазоне 3-22 мин в зависимости от количества эмбрионов к биопсии на блюдо), убедительные диагнозы, полученные (97,5%) и живой коэффициент рождаемости после vitrified-разогретый euploid blastocyst передачи (Зgt;40%). Выживаемость после биопсии, витрификации и потепления составила 99,8%. Скорость повторного расширения на 1,5 ч от потепления была выше, чем 97%, в значительной степени зависит от сроков между биопсией и витрификации (в идеале 30 мин), бластоцист морфологического качества и день биопсии. В общем, лучше vitrify рухнул бластоцист; поэтому в циклах, не связанных с PGT, может быть выполнена лазерная искусственная усадка, чтобы вызвать коллапс эмбриона до криоконсервации. Наиболее перспективной перспективой будущего является неинвазивный анализ средств массовой информации культуры ЭКО после бластоциста культуры в качестве предположительного источника эмбриональной ДНК. Однако этот потенциальный авангард все еще находится в стадии расследования, и еще предстоит определить и утвердить надежный протокол.

Введение

Основной целью современной эмбриологии человека является максимизация числа живорождений на стимулируемый цикл и сокращение затрат, времени и усилий для достижения беременности. Для достижения этой цели должны быть использованы проверенные подходы к отбору эмбрионов для выявления репродуктивно компетентных эмбрионов в когорте, полученных в ходе цикла ЭКО. Согласно последним данным, бластоцист культура¹ в сочетании с комплексным хромосомным тестированием и витрифицированной теплой euploid переносэмбриона эмбриона (ET) является наиболее эффективной основой для повышения эффективности ЭКО². Очевидно, что тестирование анеупл....