Этот протокол вводит световое пятно анализа для расследования Drosophila личинки фототаксического поведения. В этом анализе, световое пятно генерируется как свет стимуляции, и процесс избегания личинок света регистрируется инфракрасной световой системы визуализации.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Свет пятно основе анализа для анализа Drosophila Larval Фототаксис
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Личинки Drosophila melanogaster показывают очевидное светоизбегающее поведение во время стадии кормления. Дрозофилы личинки фототаксис может быть использован в качестве модели для изучения поведения животных избегания. Этот протокол вводит свет-пятно анализа для расследования личинки фототаксиповедения. Экспериментальная настройка включает в себя две основные части: систему визуальной стимуляции, которая генерирует световое пятно, и инфракрасную световую систему визуализации, которая фиксирует процесс избегания личинок света. Этот асссепозволяет отслеживать поведение личинок перед входом, во время встречи и после выхода из светлого пятна. Детали движения личинок, включая замедление, паузу, отливку головы и поворот, можно уфиксировать и проанализировать с помощью этого метода.
Введение
Личинки Drosophila melanogaster показывают очевидное светоизбегающее поведение во время стадии кормления. Drosophila личинки фототаксис был под следствием, особенно в последние 50 лет1,2,3,4,5,6,7 ,8. В последние годы, несмотря на то, что 1) многие нейроны посредничества личинок света избегания были определены4,5,
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
1. Подготовка личинок дрозофилы
- Приготовить стандартную среду, состоящую из вареной кукурузной муки (73 г), агара (5,6 г), соевой муки (10 г), дрожжей (17,3 г), сиропа (76 мл) и воды (1000 мл).
- Поднимите все мухи при 25 градусах По Цельсию на стандартной среде в комнате с 12 ч/12 ч свет/темный цикл.
2. Подготовка агарных тарелок
- Приготовьте 1,0% агар-раствор. Взвесьте 3 г агара в стакане 500 мл с балансом, затем добавьте 300 мл дистиллированной воды. Поместите фольгированную бумагу на выключатель, чтобы предотвратить испарение воды. Нагрейте стакан в микроволновой печи до кипения.
- Вынят....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Согласно протоколу, исследование светового пятна было использовано для исследования поведения избегания света третьей личинки instar, которые были подняты при 25 градусах По Цельсию на стандартной среде в комнате с 12 ч/12 ч свет/темный цикл. Одна личинка w1118 была протестирована с помощью проверки светового пятна при 25,5 градусах По Цельсию. Средняя интенсивность света светового пятна, генерируемого светодиодом 460 нм, составила 0,59 мВт/см2. Весь процесс ввода и выхода из светового пят.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Этот протокол представляет световое пятно анализа, чтобы проверить способность личинок Дрозофилы, чтобы вырваться из света. Этот асссепозволяет отслеживать поведение личинок перед входом, во время встречи и после выхода из светлого пятна. Детали движения личинок могут быть захвачены и проанализированы. Световое пятно анализ очень прост и обладает сильной практикой. Стоимость всего устройства не высока. В эксперименте светодиодный свет используется в качестве источника света. При необходимости его можно заменить .......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторам нечего раскрывать.
Благодарности
Эта работа поддерживается фондом естественных наук Китая (31671074) и фондами фундаментальных исследований для провинциальных университетов Чжэцзяна (2019X-X003-12).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 850 нм и более; 3 нм | Светодиодные датчики Thorlabs, США | PM100A | , совместимые с фотодиодами и тепловыми<бр/> Диапазон оптической мощностиa: от 100 пВт до 200 Вт<бр/> Доступный диапазон длины волны датчикаa: 185 нм-25 мкм; m Частота обновления дисплея: 20 Гц<бр/> Полоса пропусканияa: DC-100 кГц<бр/> Диапазон датчика фотодиодаb: 50 нА-5 мА<бр/> Диапазон датчика термобатареиb: 1 мВ-1 В |
| преобразователь переменного тока в постоянный | Thorlabs, США | S120VC | Размер апертуры: ø 9,5 мм<бр/> Диапазон длин волн: 200-1100 нм<бр/> Диапазон мощности: 50 нВт-50 мВт<бр/> Тип детектора: кремниевый фотодиод (расширенный УФ)<бр/> Линейность: ± Погрешность измерения 0,5% c: ± 3% (440-980 нм), &mn; 5% (280-439 нм), ± 7% (200-279 нм, 981-1100 нм) |
| полосовой фильтр | Thorlabs, США | DC2100 | Диапазон тока светодиодов: 0-2 А<бр/> Разрешение тока светодиода: 1 мА<бр/> Точность тока светодиода: &плюсмн; 20 мА<бр/> Прямое напряжение светодиода: 24 В<бр/> Диапазон частот модуляции: 0-100 кГц синусоида<бр/> Модуляция: произвольный |
| коллимированный светодиодный синий свет | ELP, Китай | USBFHD01M | Макс. разрешение: 1920X1080 F6.0 мм Сенсор: 1/2.7" CMOS OV2710 |
| Компактная консоль измерителя мощности | Океаническая оптика, США | USB2000+(RAD) | Размеры: 89,1 мм x 63,3 мм x 34,4 мм<бр/> Вес: 190 г<бр/> Детектор: Sony ILX511B (2048-элементная линейная кремниевая ПЗС-матрица)<бр/> Диапазон длин волн: 200-850 нм<бр/> Время интеграции: 1 мс – 65 секунд (20 секунд типично)<бр/> Динамический диапазон: 8,5 x 10^7 (система); 1300:1 для одного захвата<бр/> Отношение сигнал/шум: 250:1 (полный сигнал)<бр/> Темновой шум: 50 RMS отсчетов<бр/> Решетка: 2 (250 – 800 нм)<бр/> Щель: ЩЕЛЬ-50<бр/> Объектив детектора: L2<бр/> Сортировка заказов: OFLV-200-850<бр/> Оптическое разрешение: ~2,0 нм FWHM<бр/> Рассеянный свет: < 0,05% при длине волны 600 нм; < 0,10% при 435 нм<бр/> Оптоволоконный разъем: SMA 905 до 0,22 числовой апертуры одножильный волоконный высокомощный |
| светодиодный драйвер | Minhongshi, Китай | MHS-48XY | Рабочее напряжение: DC12V Центральная длина волны: 850 нм |
| веб-камера высокого разрешения | Thorlabs, США | MWWHL4 | Цвет: теплый белый Коррелированная цветовая температура: 3000 K Испытательный ток для типичной мощности светодиодов: 1000 мА<бр/> Максимальный ток (CW): 1000 мА<бр/> Полоса пропускания (FWHM): н/д<бр/> Электрическая мощность: 3000 мВт<бр/> Угол обзора (полный угол): 120?<бр/> Размер эмиттера: 1 мм x 1 мм<бр/> Типичный срок службы: >50 000 ч<бр/> Рабочая температура (без конденсации): от 0 до 40 градусов; C<бр/> Температура хранения: от -40 до 70 °°; C Группа риска: RG1 – Группа низкого риска |
| светодиодная теплая белая | Mega-9, Китай | BP850/22K | ø 25,4(+0~-0,1) мм<бр/> Пропускная способность: 22& 3 нм<бр/> Пиковый коэффициент пропускания: 80%<бр/> Центральная длина волны: 850 нм; 3 нм и нбсп; |
| Спектрометр | Ноэль Данжу | Amcap9.22 | AMCap — это приложение для фото- и видеосъемки с расширенными функциями предварительного просмотра и записи. Это настольное приложение, предназначенное для компьютеров под управлением Windows 7 SP1 или более поздней версии. Мост Видео-для-Windows Поддерживаются устройства, совместимые с DirectShow, будь то дешевые веб-камеры или продвинутые карты видеозахвата. |
| Стандартный датчик мощности фотодиодов | Super Dragon, Китай | YGY-122000 | Вход: переменный ток 100-240 В ~ 50/60 Гц 0,8 А<бр/> Выход: постоянный ток 12 В 2 А |
| Датчик тепловой мощности | Thorlabs, США | M470L3-C1 | Цвет: синий<бр/> Номинальная длина волны: 470 нм<бр/> Ширина полосы пропускания (FWHM): 25 нм<бр/> Максимальный ток (CW): 1000 мА<бр/> Прямое напряжение: 3,2 В<бр/> Электрическая мощность (макс.): 3200 мВт<бр/> Размер эмиттера: 1 мм x 1 мм<бр/> Типичный срок службы: 100 000 ч<бр/> Рабочая температура (без конденсации): от 0 до 40 °°; C<бр/> Температура хранения: от -40 до 70 °°; C Группа рискаb: RG2 – Умеренная группа риска |
| Датчик тепловой мощности | Thorlabs, США | S401C | Диапазон длин волн: 190 нм-20; m Диапазон оптической мощности:10 μ W-1 W(3 Wb) Размер входной апертуры: Ø 10 мм<бр/> Активная площадь детектора: 10 мм x 10 мм<бр/> Максимальная плотность оптической мощности: 500 Вт/см< суп>2 (средняя)<бр/> Линейность: ± 0,5% |
Ссылки
- Grossfield, J. Geographic distribution and light-dependent behavior in Drosophila. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 68, 2669(1971).
- Godoy-Herrera, R. C. L. D. The behavi....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
