Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Модель боли при остеоартрите, вызванная внутрисуставной инъекцией моно-йодоацетата у крыс

10.4K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/60649

⸱

20 мая 2020 г.

 ,  ,  ,  ,  , 
1The First Affiliated Hospital, Zhejiang Chinese Medical University, 2College of Pharmaceutical Science, Zhejiang Chinese Medical University

В этой статье

Краткое содержание

Это исследование описывает метод внутрисуставной инъекции моно-йодоацетата у крыс и обсуждает результирующее болевое поведение и гистопатологические изменения, которые предоставляют ссылки для будущих применений.

Аннотация

Современные животные модели остеоартрита (ОА) можно разделить на спонтанные модели и индуцированные модели, обе из которых направлены на моделирование патофизиологических изменений ОА человека. Однако, как основной симптом на поздней стадии ОА, боль влияет на повседневную жизнь пациентов, и существует не так много доступных моделей. Монойодоацетатная (MIA)-индуцированная модель является наиболее широко используемой моделью боли ОА, в основном используемой у грызунов. MIA является ингибитором глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы, которая вызывает гибель хондроцитов, дегенерацию хряща, остеофит и измеримые изменения в поведении животных. Кроме того, изменения экспрессии матриксной металлопротеиназы (MMP) и провоспалительных цитокинов (IL1 β и TNF α) могут быть обнаружены в модели, индуцированной MIA. Эти изменения согласуются с патофизиологическими условиями ОА у людей, что указывает на то, что МИА может вызывать измеримую и успешную модель боли ОА. Это исследование направлено на описание методологии внутрисуставной инъекции МИА у крыс и обсуждение результирующего поведения, связанного с болью, и гистопатологических изменений.

Введение

Остеоартрит (ОА) является наиболее распространенным заболеванием суставов в мире, затрагивающим, по оценкам, 10-12% населения у взрослых1. Наиболее часто вовлеченным суставом является колено, и ОА имеет более высокую заболеваемость у пожилых людей, особенно у женщин2. Как хроническое заболевание, ОА развивается постепенно в течение десятилетий в суставную недостаточность с такими симптомами, как потеря хряща, синовиальное воспаление, остеофитоз, снижение функции и хроническая боль3. По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), ОА является четвертым наиболее распространенным заболеванием у женщин и восьмым наиболее распространенным заболеванием у мужчин. К 2020 году ОА может стать четвертым наиболее инвалидизирующим заболеванием у людей4. Однако доступные в настоящее время методы лечения ОА направлены только на симптомы и продлевают время до операции по замене сустава5.

Спонтанная ОА у пациентов на людях часто занимает много времени для возникновения клинических симптомов, таких как боль в суставах6. На ранних стадиях ОА боль обычно прерывистая и становится более частой и тяжелой по мере прогрессирования заболевания, что делает ее преобладающей жалобой пациентов7. Поэтому за последние полвека были разработаны обширные животные модели боли при ОА для продвижения обезболивающей терапии. Модели ОА классически делятся на спонтанные и индуцированные модели. Спонтанные модели включают естественные модели и генетически модифицированные модели, которые могут более точно имитировать течение первичного ОА у людей8. Индуцированные модели обычно можно разделить на две категории: 1) посттравматическая ОА, вызванная хирургическим вмешательством или другой травмой; или 2) внутрисуставное введение хондротоксических или провоспалительных веществ3. Эти модели закладывают основу для патофизиологического изучения ОА и вносят большой вклад в разработку препаратов для уменьшения боли и повышения функции.

В последнее время наиболее широко используемым индуктором для моделирования ОА является моно-йодоацетат (MIA). МИА, ингибитор глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы, может вызывать изменения хрящевого матрикса, деградацию, потерю хряща, синовит и другие изменения, которые сходны с патологическими изменениями остеоартроза человека9. Было отмечено, что внутрисуставная инъекция МИА вызывала постоянную боль через 28 дней после введения МВД, что указывает на то, что модель МИА может быть полезна для исследования хронической ноцицептивной боли 10,11,12. В этом исследовании самцы крыс Sprague-Dawley получали внутрисуставные инъекции с 0,5, 1,5 или 3 мг MIA в коленных суставах. Тяжесть боли в суставах, вызванной МИА, измеряли путем оценки механической и тепловой чувствительности через 1, 7, 14, 21, 28 и 35 дней после инъекций. На этой основе в качестве конечной концентрации было выбрано 1,5 мг МИА для оценки паттернов походки и гистологических изменений через 28 дней после инъекций.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Процедуры с участием животных были одобрены Комитетом по медицинским нормам и этике Чжэцзянского китайского медицинского университета и соответствуют законодательству Китая об использовании и уходе за лабораторными животными.

1. Внутрисуставная инъекция моно-йодоацетата в колено

  1. После одной недели акклиматизации случайным образом и поровну разделите 40 самцов крыс Sprague-Dawley весом 180−200 г (4−5 недель) на четыре группы (n = 10 крыс на группу).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Крысам в контрольной группе будут внутрисуставно введено 50 мкл физиологического раствора, в то время как крысам в экспериментальных группах будут лечить 0,5, 1,5 или 3 мг МИА, растворенного в 50 мкл физиологического раствора, соответственно.
  2. В день инъекции только что приготовить раствор МИА в стерильном физиологическом растворе (0,9% NaCl) в концентрации 15, 30 и 60 мг/мл и 10% растворе пентобарбитала в стерильном физиологическом растворе (0,9% NaCl).
    ВНИМАНИЕ: МИА оказывает крайне разрушительное воздействие на слизистую оболочку, верхние дыхательные пути, глаз и кожу и другие ткани. Поэтому маска и перчатки рекомендуются при приготовлении раствора.
  3. Анестезируют крыс внутрибрюшинной инъекцией кетамина в дозе 60 мг/кг и ксилазина в 5 мг/кг (оба препарата в физиологическом растворе). Осторожно зажмите пальцы крысы пинцетом, чтобы подтвердить анестезию.
  4. Положите крысу спиной вниз. Побрить колено и протереть спиртом область, окружающую коленный сустав.
  5. Держите колено под углом 90° и раскройте белое сухожилие надколенника ниже надколенника. Нажмите кончиком пальца на сухожилие надколенника, чтобы найти щель под надколенником.
  6. В качестве места инъекции выберите место соединения промежутка и бокового сухожилия надколенника. Затем вставьте иглу 26 Г вертикально в участок около 5 мм. Не следует ощущать сопротивления, когда игла находится в суставном пространстве.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Важно держать иглу перпендикулярной месту инъекции.
  7. Вводят 50 мкл физиологического раствора или раствора МИА в полость сустава. Медленно вытащите иглу и оберните кусок марли вокруг места инъекции, чтобы свести к минимуму рефлюкс и утечку. После восстановления после анестезии удалите марлю.
  8. Проверьте поведение, связанное с болью, через 1, 7, 14, 21, 28 и 35 дней после инъекций, как описано в разделе 2.

2. Поведенческие оценки

  1. Механический порог вывода (MWT)
    ПРИМЕЧАНИЕ: MWT был измерен тестом фон Фрея13 , и наблюдатель был ослеплен инъекциями, которые получили животные.
    1. Поместите крысу в приподнятую пластиковую клетку (17 см х 11 см х 13 см) с основанием из проволочной сетки, подвешенной на 50 см над столом. Убедитесь, что тестовая среда тихая и дайте крысе 30 минут, чтобы адаптироваться к окружающей среде.
    2. Нажмите иглу фон Фрея перпендикулярно на подошвенную поверхность задней лапы каждой крысы. Увеличивайте давление постепенно (примерно 20 г/с) и линейно до тех пор, пока не произойдет подъем лапы или облизывание лапы.
    3. Используйте силу, меньшую, чем предыдущее пороговое значение, чтобы убедиться, что порог является минимальным усилием вывода. Протестируйте каждую крысу более трех раз, с интервалом не менее 3−5 минут.
    4. Запишите минимальную силу, вызывающую рефлекс отвода лапы. Усредните данные как MWT крыс.
  2. Задержка теплового вывода (TWL)
    ПРИМЕЧАНИЕ: TWL измеряли с помощью подошвенного испытательного аппарата (Таблица материалов), и наблюдатель был ослеплен к инъекциям, которые получили животные.
    1. Поместите коробку из плексигласа (60 см х 20 см х 14 см, разделенную на 6 отсеков) на стеклянную пластину толщиной 3 мм и поместите крыс в коробку (по одной в каждом отсеке). Убедитесь, что окружающая среда тихая, а температура в помещении постоянная.
    2. Дайте крысам 30 минут, чтобы адаптироваться к тестовой среде.
    3. Откалибруйте тепловой стимул с помощью инфракрасного радиометра. Установите желаемую интенсивность инфракрасного излучения на уровне 70 единиц.
    4. Поместите инфракрасный излучатель/детектор на контейнер непосредственно под центром тестируемой лапы.
    5. Нажатие кнопки START . Таймер запустится автоматически. Контроллер автоматически выключит инфракрасный свет и полностью остановит таймер, как только произойдет движение лапы.
    6. Запишите время реакции при появлении выведения лапы и облизывания лапы.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Положительный ответ на тест расценивается как изъятие лапы и облизывание лапы. Если происходит только изъятие лапы, это следует рассматривать как добровольное движение крысы, а не положительную реакцию.
    7. Повторите тест более трех раз. Усредните данные как TWL крыс.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Каждое воздействие лучистого тепла не должно превышать 20 с. Инфракрасные стимуляции на одной и той же задней лапе должны быть не менее чем на расстоянии 3−5 мин друг от друга.
  3. Анализ паттернов походки
    ПРИМЕЧАНИЕ: Анализ рисунка походки был измерен с использованием системы визуализации (Таблица материалов), и наблюдатель был ослеплен инъекциями, которые получили животные.
    1. Отрегулируйте длину отсека для ходьбы с помощью ручек на обоих концах отсека для ходьбы до подходящей длины для крыс (например, 61 см).
    2. Поместите крысу в отсек для ходьбы и обучите крыс совершать непрерывные пробежки в течение не менее 5 циклов со скоростью 18 см / с до официального эксперимента.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Когда крыса впервые помещается в отсек для ходьбы, скорость может быть установлена примерно на 20 см / с и отключена при беге около 2 с. Затем установите скорость 18 см/с. Осторожно постучите по спине крысы перегородкой, если крыса делает паузу или отступает во время ходьбы. Старайтесь постепенно снижать скорость с 18 см/с до 10 см/с. Если крыса в конечном итоге не сможет выполнить тест, допустимо выбрать другую крысу для теста.
    3. Медленно увеличивайте скорость беговой дорожки, пока она не достигнет целевой скорости (18 см/с). Снимайте не менее 5 с видео непрерывного движения крысы с помощью высокоскоростной цифровой видеокамеры, установленной под прозрачным поясом беговой дорожки.
    4. Протестируйте каждую крысу с интервалом не менее 5 минут, чтобы получить по крайней мере три непрерывных пробега.
    5. Нарисуйте «ограничительную рамку», чтобы определить границу изображения ходячего животного в программном обеспечении для визуализации, и введите скорость бега для каждого видео. Выберите видео как группу и автоматически обрабатывайте видео с помощью программного обеспечения. После обработки видео программное обеспечение выведет несколько электронных таблиц для отчета об индексах походки, включая стойку, поворот, торможение, движение, частоту педалирования, последовательность шагов и т. Д.
    6. Рассчитайте общую площадь лап (см2), среднюю длину шага (см) и объедините длину шага.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Общая площадь лап - это среднее значение общей площади четырех лап каждой группы крыс, а площадь лап определяется как максимальная площадь лапы, контактирующая с беговой дорожкой во время фазы стойки цикла шага. Длина шага - это расстояние между начальными контактами одной и той же лапы в одном полном шаге. Единичная длина шага = средняя длина шага (см)/длина тела (см).

3. Гистопатологические и иммуногистохимические анализы

  1. Усыпляют крыс путем внутрибрюшинной инъекции пентобарбитала натрия по 150 мг/кг (готовят в физиологическом растворе). Немедленно резецируйте коленные суставы для гистологических анализов.
  2. Зафиксируйте суставы в 10% формалине в течение 24 ч, декальцинируйте 10% ЭДТА в фосфатно-буферном физиологическом растворе (PBS) в течение 8 недель, а затем встраивайте суставы в парафин.
    ВНИМАНИЕ: Формалин может вызвать раздражение глаз, кожи и дыхательных путей. С ним следует обращаться в капюшоне.
  3. Секционируйте парафиновые встроенные соединения толщиной 3 мм с микротомом и плавайте на водяной бане 40 °C, содержащей дистиллированную воду.
  4. Перенесите секции на стеклянные горки. Сушите горки в течение ночи и храните слайды при комнатной температуре (RT), чтобы продолжить последующее окрашивание.
  5. Поместите слайды в духовку с температурой 60 °C на 4 ч для депарафинизации.
  6. Погружайте слайды последовательно в ксилол, ксилол, 100% этанол, 100% этанол, 95% этанол, 80% этанол и 75% этанол в течение 5 мин, соответственно, на РТ.
  7. Окрашивание участков гематоксилином и эозином (H&E), сафранином-О (SO) и альциановым синим гематоксилином (ABH), а также антителами против коллагена типа II крыс (Col2), коллагена типа X (Col10) и матриксной металлопротеиназы 13 (MMP13), как описано на этапах 3.8−3.12.
  8. Окрашивание H&E
    1. Промойте горки деионизированнымH2Oв течение 3 мин. Окрашивание гематоксилином в течение 3−5 мин.
    2. Промойте горки деионизированным H2O 3x, по 1 мин каждый, пока на поверхности не останется гематоксилина.
    3. Окрашивание горок эозином на 30 с. Затем промойте слайды деионизированным H2O 3x, по 1 мин каждый, пока на поверхности не останется эозина.
    4. Погружайте слайды в 0,1% аммиака на 10−20 с. Затем промойте слайды деионизированным H2O 3x, по 1 мин каждый.
    5. Погружайте слайды последовательно в 95% этанол, 100% этанол, ксилол, ксилол и ксилол в течение 1 мин соответственно.
    6. Закрывайте слайды нейтральной смолой.
  9. ОКРАШИВАНИЕ SO
    1. Промойте горки деионизированнымH2Oв течение 3 мин. Окрашивание гематоксилином в течение 3−5 мин.
    2. Дифференцируют быстро в 1% кислом спирте (около 3 с). Затем промойте слайды деионизированным H2O 3x, по 1 мин каждый, пока на поверхности не останется гематоксилина.
    3. Окрашивание горок раствором Fast Green (FCF) в течение 5 мин. Затем промойте слайды деионизированным H2O 3x, по 1 мин каждый.
    4. Окрашивание слайдов с SO в течение 1−2 мин. Затем промойте слайды деионизированным H2O 3x, по 1 мин каждый.
    5. Промойте слайды 1% уксусной кислотой в течение 1−2 мин, чтобы удалить остаточный FCF. Промойте горки деионизированным H2O в течение 1 мин.
    6. Погружайте слайды последовательно в 95% этанол, 100% этанол, ксилол, ксилол и ксилол в течение 1 мин соответственно.
    7. Закрывайте слайды нейтральной смолой.
  10. Окрашивание ABH
    1. Промойте горки деионизированнымH2Oв течение 3 мин. Погружайте слайды в 1% кислый спирт на 30 с и ненадолго сливайте на бумажном полотенце (не смывайте).
    2. Погружайте слайды в ABH на 1 ч. Затем промойте слайды деионизированным H2O 3x, по 1 мин каждый, пока на поверхности не останется ABH.
    3. Дифференцируют быстро в 1% кислом спирте (около 3 с). Промойте слайды деионизированным H2O 3x, по 1 мин каждая.
    4. Погружайте горки в 0,5% аммонийной воды на 15 с. Затем промойте слайды деионизированным H2O 3x, по 1 мин каждый.
    5. Погружайте слайды в 95% этанол на 1 мин. Погружайте слайды в раствор эозина/апельсина G на 1,5 мин.
    6. Погружайте слайды последовательно в 95% этанол, 100% этанол, ксилол, ксилол и ксилол в течение 1 мин соответственно.
    7. Закрывайте слайды нейтральной смолой.
  11. Изучите все слайды под микроскопом и статистически оцените по шкале 0−13 путем двойного слепого наблюдения, согласно системе оценки Манкина14.
  12. Иммуногистохимия
    1. Промойте горки деионизированнымH2Oв течение 3 мин.
    2. Погрузите слайды в цитрат натрия 0,1 М и поместите слайды в духовку с температурой 60 °C на 4 ч, чтобы извлечь антиген.
    3. Погружайте слайды в 0,3% Triton X-100 в PBS в течение 10 минут. Затем промойте слайды PBS 2x, по 3 мин каждый.
    4. Инкубировать срезы в 3% раствореН2О2в метаноле на РТ в течение 10 мин для блокирования эндогенной пероксидазной активности. Промойте слайды с помощью PBS 2x, 3 мин каждый.
    5. Инкубировать секции с 5% козьей сывороткой в PBS в течение 30 мин при RT, чтобы блокировать любое неспецифическое связывание. Промойте слайды с помощью PBS 2x, 3 мин каждый.
    6. Инкубировать участки в течение ночи при 4 °C со 100 мкл разбавленных PBS (1:1000) первичных антител против коллагена типа II крыс (Col2), коллагена типа X (Col10) и матриксной металлопротеиназы 13 (MMP13). Промойте слайды с помощью PBS 2x, 3 мин каждый.
    7. Инкубировать участки со 100 мкл разбавленного PBS (1:1000) вторичного антитела (козьего антимышего вторичного или козьего антимышечного вторичного) в течение 20 мин на RT. Промыть слайды PBS 2x, 3 мин каждый.
    8. Инкубировать секции со 100 мкл рабочего раствора 3,3'-диаминобензидина (DAB). Следите за реакцией, так как хромогенная реакция превращает участки эпитопа в коричневый цвет.
      ВНИМАНИЕ: DAB является канцерогеном. Всегда надевайте перчатки и работайте в капюшоне при работе с DAB.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Время развития цвета может варьироваться от нескольких секунд до 10 минут.
    9. Как только на участках появится коричневый цвет, промойте слайды деионизированным H2O2x, по 3 мин каждая.
    10. Погружайте слайды в гематоксилин на 1−2 мин, чтобы противодействовать горкам. Затем промойте слайды деионизированным H2O 3x, по 1 мин каждый.
    11. Погружайте слайды последовательно в 95% этанол, 100% этанол, ксилол, ксилол и ксилол в течение 1 мин соответственно.
    12. Закрывайте слайды нейтральной смолой.
    13. Наблюдайте за цветом окрашивания антител в срезах под микроскопом.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

С помощью этой методологии мы установили модель боли ОА у крысы и обнаружили результирующие изменения. MWT и TWL отражали механическую аллодинию и термическую гипералгезию соответственно. Как показано на рисунке 1, МИА индуцировала механическую аллодинию и термическую гипералгезию, присутствующие в зависимости от дозы. Примечательно, что снижение MWT достигло пика с 21 дня до 28 дней, а затем восстановилось, предполагая, что на этом этапе может произойти восстановление суставов, но MWT групп...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Крысиная модель ОА, индуцированная МВД, является устоявшейся, широко используемой моделью. Внутрисуставное введение МИА первоначально вызывает тяжелое и острое воспаление, которое приводит к более длительной и дегенеративной фазе ОА17,18. В этом исследовании мы измерили ноцицептивную чувствительность MWT и TWL и оценили изменения походки с помощью системы визуализации. Предыдущие отчеты показали, что инъекция МИА может повысить чувствительность афферентных волоко...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Это исследование финансировалось Китайским фондом естественных наук провинции Чжэцзян (грант No: LY17H270016), Национальным фондом естественных наук Китая (грант No: 81774331, 81873049 и 81673997) и Научно-техническим проектом традиционной китайской медицины Китая провинции Чжэцзян (грант No: 2013ZQ007 и 2016ZZ011).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Антитело против коллагена IIAbcam(UK)34712Первичное антитело для иммуногистохимии (ИГХ)
Антитело против коллагена X (Col10)Abcam(UK)49945Первичное антитело для ИГХ
DigiGait Imaging SystemMouse Specifics (Бостон, Массачусетс, США)Оборудование для анализа паттернов походки
ЭозинСигма-Олдрич861006краситель для ПЭ окрашивание
Fast Green FCFSigma-AldrichF7252Краситель для окрашивания SO
Козье антитело против мышиZSGQ-BIO (Пекин, Китай)PV-9002Вторичное антитело для ИГХ
Козье антитело против кроликаZSGQ-BIO (Пекин, Китай)PV-9001Вторичное антитело для ИГХ
ГематоксилинSigma-AldrichH3163Краситель для окрашивания HE
MIASigma-AldrichI4386-10Gпорошок
MMP13Cell Signaling Technology, Inc. (Danvers, MA, США)69926Первичное антитело для IHC
Центр модульного встраивания тканейThermo Fisher Scientific (США)EC 350Производство парафиновых блоков.
Аппарат для подошвенного тестированияUgoBasile (Италия)37370Оборудование для анализа TWL
Набор реактивов PrimeScript RT (Perfect Real Time)TaKaRa Biotechnology Co. Ltd. (Далянь, Китай)RR037AИзвлечение общей РНК из культивируемых клеток
Ротационные и скользящие микротомыThermo Fisher Scientific (США)HM325Прецизионные парафиновые срезы.
Safranin-OSigma-AldrichS2255Краситель для окрашивания SO
Tissue-Tek VIP 5 JrSakura (Япония)Вакуумный инфильтрационный процессор

Ссылки

  1. Hunter, D. J., Schofield, D., Callander, E. The individual and socioeconomic impact of osteoarthritis. Nature Reviews Rheumatology. 10 (7), 437-441 (2014).
  2. Neogi, T. The epidemiology and impact of pain in osteoarthritis. Osteoarthritis and Cartilage. 21 (9), 1145-1153 (2013).
  3. Teeple, E., Jay, G. D., Elsaid, K. A., Fleming, B. C. Animal models of osteoarthritis: challenges of model selection and analysis. AAPS Journal. 15 (2), 438-446 (2013).
  4. Woolf, A. D., Pfleger, B. Burden of major musculoskeletal conditions. Bulletin of the World Health Organization. 81 (9), 646-656 (2003).
  5. Bijlsma, J. W., Berenbaum, F., Lafeber, F. P. Osteoarthritis: an update with relevance for clinical practice. Lancet. 377 (9783), 2115-2126 (2011).
  6. McCoy, A. M. Animal Models of Osteoarthritis: Comparisons and Key Considerations. Veterinary Pathology. 52 (5), 803-818 (2015).
  7. O'Neill, T. W., Felson, D. T. Mechanisms of Osteoarthritis (OA) Pain. Current Osteoporosis Reports. 16 (5), 611-616 (2018).
  8. Kuyinu, E. L., Narayanan, G., Nair, L. S., Laurencin, C. T. Animal models of osteoarthritis: classification, update, and measurement of outcomes. Journal of Orthopaedic Surgery and Research. 11, 19(2016).
  9. Takahashi, I., Matsuzaki, T., Hoso, M. Long-term histopathological developments in knee-joint components in a rat model of osteoarthritis induced by monosodium iodoacetate. Journal of Physical Therapy Science. 29 (4), 590-597 (2017).
  10. Liu, P., et al. Ongoing pain in the MIA model of osteoarthritis. Neuroscience Letters. 493 (3), 72-75 (2011).
  11. Combe, R., Bramwell, S., Field, M. J. The monosodium iodoacetate model of osteoarthritis: a model of chronic nociceptive pain in rats. Neuroscience Letters. 370 (2-3), 236-240 (2004).
  12. Pomonis, J. D., et al. Development and pharmacological characterization of a rat model of osteoarthritis pain. Pain. 114 (3), 339-346 (2005).
  13. Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. Journal of Neuroscience Methods. 53 (1), 55-63 (1994).
  14. Mankin, H. J., Dorfman, H., Lippiello, L., Zarins, A. Biochemical and metabolic abnormalities in articular cartilage from osteo-arthritic human hips. II. Correlation of morphology with biochemical and metabolic data. Journal of Bone and Joint Surgery. 53 (3), 523-537 (1971).
  15. Yan, L., et al. Chondroprotective effects of platelet lysate towards monoiodoacetate-induced arthritis by suppression of TNF-α-induced activation of NF-ĸB pathway in chondrocytes. Aging. 11 (9), 2797-2811 (2019).
  16. Yan, B., et al. Intra-Articular Injection of Extract Attenuates Pain Behavior and Cartilage Degeneration in Mono-Iodoacetate Induced Osteoarthritic Rats. Frontiers in Pharmacology. 9, 1360(2018).
  17. Wang, C., et al. Agkistrodon ameliorates pain response and prevents cartilage degradation in monosodium iodoacetate-induced osteoarthritic rats by inhibiting chondrocyte hypertrophy and apoptosis. Journal of Ethnopharmacology. 231, 545-554 (2019).
  18. Yamada, E. F., et al. Evaluation of monosodium iodoacetate dosage to induce knee osteoarthritis: Relation with oxidative stress and pain. International Journal of Rheumatic Diseases. 22 (3), 399-410 (2019).
  19. Schuelert, N., McDougall, J. J. Electrophysiological evidence that the vasoactive intestinal peptide receptor antagonist VIP6-28 reduces nociception in an animal model of osteoarthritis. Osteoarthritis and Cartilage. 14 (11), 1155-1162 (2006).
  20. Lee, S. E. Choline, an alpha7 nicotinic acetylcholine receptor agonist, alleviates hyperalgesia in a rat osteoarthritis model. Neuroscience Letters. 548, 291-295 (2013).
  21. Piesla, M. J., et al. Abnormal gait, due to inflammation but not nerve injury, reflects enhanced nociception in preclinical pain models. Brain Research. 1295, 89-98 (2009).
  22. Udo, M., et al. Monoiodoacetic acid induces arthritis and synovitis in rats in a dose- and time-dependent manner: proposed model-specific scoring systems. Osteoarthritis and Cartilage. 24 (7), 1284-1291 (2016).
  23. Guingamp, C., et al. Mono-iodoacetate-induced experimental osteoarthritis: a dose-response study of loss of mobility, morphology, and biochemistry. Arthritis & Rheumatism. 40 (9), 1670-1679 (1997).
  24. Jeong, J. H., et al. Eupatilin Exerts Antinociceptive and Chondroprotective Properties in a Rat Model of Osteoarthritis by Downregulating Oxidative Damage and Catabolic Activity in Chondrocytes. PLoS ONE. 10 (6), 0130882(2015).
  25. Cook, J. L., et al. Animal models of cartilage repair. Bone & Joint Research. 3 (4), 89-94 (2014).
  26. Little, C. B., Zaki, S. What constitutes an "animal model of osteoarthritis"--the need for consensus. Osteoarthritis and Cartilage. 20 (4), 261-267 (2012).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Инъекция моноиодоацетатапорог механического отдергиваниялатентный период термического отдергиванияанализ походкигистопатологический анализэкспрессия MMP 13коллаген 10-го типадегенерация хряща
Модель боли при остеоартрите, вызванная внутрисуставной инъекцией моно-йодоацетата у крыс
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.