Метод, изложенный ниже, направлен на обеспечение всеобъемлющего протокола подготовки нейрохирургии нечеловеческих приматов (NHP) с использованием нового сочетания трехмерных (3D) методов печати и извлечения мрт данных.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Метод, изложенный ниже, направлен на обеспечение всеобъемлющего протокола подготовки нейрохирургии нечеловеческих приматов (NHP) с использованием нового сочетания трехмерных (3D) методов печати и извлечения мрт данных.
В этой работе мы наметим метод хирургической подготовки, который позволяет практическое планирование различных нейрохирургов в NHPs исключительно с использованием данных, извлеченных из магнитно-резонансной томографии (МРТ). Этот протокол позволяет для генерации 3D печатных анатомически точных физических моделей мозга и черепа, а также агарозы гель модель мозга моделирования некоторых механических свойств мозга. Эти модели могут быть извлечены из МРТ с помощью программного обеспечения для извлечения мозга для модели мозга, и пользовательский код для модели черепа. Протокол подготовки использует самые современные технологии 3D-печати, чтобы сделать взаимопоморотные мозги, черепа и формы для моделей мозга геля. Модели черепа и мозга могут быть использованы для визуализации тканей мозга внутри черепа с добавлением краниотомии в пользовательском коде, что позволяет лучше подготовиться к операциям непосредственно с участием мозга. Применение этих методов предназначено для операций, связанных с неврологической стимуляцией и записью, а также инъекциями, но универсальность системы позволяет в будущем расширить протокол, методы экстракции и модели до более широкого спектра операций.
Примат исследования были ключевым шагом в прогрессировании медицинских исследований от животных моделей для человеческихиспытаний 1,2. Это особенно важно при изучении нейробиологии и нейротехники, так как существует большое физиологическое и анатомическое несоответствие между мозгом грызунов и мозгом нечеловеческих приматов (NHP)1,2,3. С появлением генетических технологий, таких как хемогенетика, оптогенетика, и кальция изображений, которые требуют генетической модификации нейронов, нейронной инженерии исследования изучения нервной функции в NHP получила особое внимание в качестведоклинтической модели для понимания функциимозга 2,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16. В большинстве экспериментов NHP неврологии, нейрохирургические меры необходимы для имплантации различных устройств, таких как головные столбы, стимуляции и записи камер, электродныхмассивов и оптических окон 4,5,6,7,10,11,13,14,15,17,18.
Текущие лаборатории NHP используют различные методы, которые часто включают неэффективные методы, включая облечение животного, чтобы соответствовать ногам головы и приблизить кривизну черепа вокруг места краниотомии. Другие лаборатории подходят головной столб черепа в хирургии или использовать более продвинутые методы получения необходимых измерений для имплантации, как анализ атласа мозга NHP и магнитного резонанса (MR) сканирует, чтобы попытаться оценитькривизны черепа 2,10,11,16. Нейрохирургии в NHPs также включают инъекции жидкости, и лаборатории часто не имеют никакого способа визуализировать прогнозируемые места инъекциив головном мозге 2,4,5,13,14 опираясьисключительно на стереотаксис измерений и сравнения с MR сканирования. Эти методы имеют степень неизбежной неопределенности от того, чтобы быть не в состоянии проверить физическую совместимость всех сложных компонентов имплантата.
Таким образом, существует необходимость в точном неинвазивном методе нейрохирургического планирования в NHPs. Здесь мы представляем протокол и методологию подготовки имплантации и инъекций этих животных. Весь процесс проистекает из МРТ, где мозг и череп извлекаются из данных для создания трехмерных (3D) моделей, которые затем могут быть напечатаны 3D. Модели черепа и мозга могут быть объединены для подготовки к черепно-мозговой операции, а также головы должности с повышенным уровнем точности. Модель мозга также может быть использована для создания формы для литья анатомически точной модели геля мозга. Гель мозга в одиночку и в сочетании с извлеченным черепом может быть использован для подготовки к различным инъекциям операций. Ниже мы опишем каждый из шагов, необходимых для МРТ на основе инструментария для нейрохирургической подготовки.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Все процедуры для животных были одобрены Институтом по уходу за животными и использованию животных При Вашингтонского университета. Были использованы два самца резус-макаки (обезьяна H: 14,9 кг и 7 лет, обезьяна L: 14,8 кг и 6 лет).
1. Приобретение изображений
2. Извлечение мозга
3. Моделирование мозга
4. Мозг литья
5. Моделирование черепа
6. Создание краниотомии в 3D модели черепа
7.3D печать
ПРИМЕЧАНИЕ: Используются два типа 3D-принтеров дляфизических прототипов (Таблицаматериалов). Для следующих спецификаций все настройки программного обеспечения для 3D-принтера и печати должны быть по умолчанию, если не указано иное.
8. Подготовка агарозы
9. Агароза литья
ПРИМЕЧАНИЕ: Агароза литья процесс, изложенный ниже, то же самое для полного полушария и верхней половины полушария формы
10. Инъекции в модель агарозного геля
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Манипуляции и анализ МРЭ в качестве предоперационной мерой планирования краниотомиибыли успешно использованы в последние 2,5,10,16. Этот процесс, однако, был значительно усилен добавлением 3D-моделирования мозга, черепа и краниотомии. Нам удалось успешно создать анатомически точную физическую модель мозга, которая отражала область интереса для наших исследований(рисунок 1
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
В этой статье описывается набор инструментов для подготовки к нейрохирургии в NHPs с использованием физических и CAD моделей черепа и анатомии мозга, извлеченных из МРТ-сканирования.
В то время как извлеченные и 3D печатные модели черепа и мозга были разработаны специально для подготовки черепно-мозговых операций и имплантации головы, методология поддается нескольким другим приложениям. Как описано ранее, физическая модель черепа позволяет предварительно изгибать головной столб перед операцией...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
На данный момент у авторов нет конфликта интересов.
Этот проект был поддержан Eunice Кеннеди Shiver Национальный институт здоровья детей и развития человека Национальных институтов здравоохранения в соответствии с премией номер K12HD073945, Вашингтон Национальный исследовательский центр приматов (WaNPCR, P51 OD010425), Центр нейротехнологий (CNT, Национальный научный фонд Инженерно-исследовательский центр в рамках Грант EEC-1028725) и Университет Вашингтона Королевский исследовательский фонд. Финансирование лабораторий Макник и Мартинес-Конде для этого проекта поступило из BRAIN Initiative NSF-NCS Award 1734887, а также NSF Awards 1523614 и 1829474, и SUNY Empire Стипендии для каждого профессора. Мы благодарим Карама Хатиба за помощь в подготовке агарозы, и Тони Дж Уана за техническую помощь.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Программное обеспечение для 3D-печати (GrabCAD Print) | Stratasys | Version 1.36 | Используется для высококачественной 3D-печати |
| Программное обеспечение для 3D-печати (Simplify 3D) | Simplify3D | Version 4.1 | Используется для 3D-печати PLA |
| Agarose | Benchmark Scientific | A1700 | Используется для изготовления гелевых мозгов |
| Черный лак для ногтей | L.A. Colors | CNP637 | Используется для формования |
| геляКанюля (ID 450 мкм, OD 666 мкм) | Polymicro Technologies | 1068150625 | Используется для введения красителя в гелевый |
| катетер мозга Коннектор B | Braun | PCC2000 | Perifix для 20-24 эпидуральных катетеров Gage; Единиц на Cs 50 |
| Принтер Dremel 3D Digilab 3D45 | Dremel | F0133D45AA | Используется для прототипирования в PLA |
| ECOWORKS | Stratasys | 300-00104 | Используется для растворения опорных структур QSR |
| Колба Erlymeyer | Pyrex | 4980 | Используется для формования геля |
| Этилцианоакрилат | The Original Super Glue Corp. | 15187 | Используется для изготовления комбинированной канюли |
| Градуированный цилиндр | 3023 | Используется для формования геля | |
| HATCHBOX PLA 3D принтер Филамент | HATCHBOX | 3DPLA-1KG1.75-RED/3DPLA-1KG1.75-BLACK | 1кг Катушка, 1.75 мм, Красный/Черный |
| Камедь Рожкового Камеди | Модернистская кладовая | 1018 | Жевательный агент для гелевых смесей для мозга |
| MATLAB | MathWorks | R2019b | Используется для экстракция черепа |
| McCormick Yellow Food Color | McCormick | Используется для инъекции красителя | |
| Микроволновая печь | Panasonic | NN-SD975S | Используется для отверждения агарозы |
| Программное обеспечение для МР-визуализации (3D Slicer) | 3D Slicer | Версия 4.10.2 | Используется для создания 3D-моделей |
| Программное обеспечение для МР-визуализации (Mango с плагином BET) | Reasearch Imaging Institute | Версия 4.1 | Используется для работы с мозгом экстракция |
| Philips Acheiva MRI System | Philips | 4522 991 19391 | Используется для визуализации нечеловекообразных приматов |
| Фосфатный буферный раствор | Gibco | 70011-044 | 10X разбавлен водой DI до 1X |
| Насос | WPI | UMP3T-1 | Используется для впрыска красителя |
| Драйвер насоса | WPI | UMP3T-1 | Используется для впрыска красителя |
| Холодильник | General Electric | Используется для консервации агарозного геля | |
| Scientific Spatula | VWR | 82027-494 | Используется для экстракции гелевых форм |
| SolidWorks | Dassault Systèmes | 2019 | |
| Stratasys ABS-M30 филамент | Stratasys | 333-60304 | Используется для высококачественной 3D-печати |
| Stratasys F170 3D-принтер | Stratasys | 123-10000 | Используется для высококачественной 3D-печати |
| Поддержка Stratasys QSR | Stratasys | 333-63500 | Используется для создания опор с помощью модели ABS |
| Шприц | SGE | SGE250TLL | Используется для впрыска красителя |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.