Сухие порошковые составы для ингаляции имеют большой потенциал в лечении респираторных заболеваний. Перед поступлением в исследования на человека необходимо оценить эффективность формулировки сухого порошка в доклинических исследованиях. Представлен простой и неинвазивный метод введения сухого порошка у мышей по внутритрахийому маршруту.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Внутритрахийное администрирование сухой порошковой формулировки у мышей
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
При разработке ингаляционных сухих порошковых составов необходимо оценивать их биологическую деятельность в доклинковых моделях животных. В настоящем документе вводится неинвазивный метод внутритрахальной доставки сухого порошка у мышей. Представлено устройство для погрузки сухого порошка, которое состоит из наконечника трубы для загрузки геля 200 йл, подключенного к шприцу 1 мл через трехгосукайку. Небольшое количество сухого порошка (1-2 мг) загружается в наконечник пипетки и рассеивается на 0,6 мл воздуха в шприце. Поскольку советы пипетки одноразовые и недорогие, различные сухие порошковые составы могут быть загружены в различные советы заранее. Различные составы могут быть оценены в одном и том же эксперименте на животных без очистки устройства и заправки дозы, тем самым экономя время и устраняя риск перекрестного загрязнения из остаточного порошка. Степень дисперсии порошка может быть проверена количеством порошка, оставшегося в наконечнике пипетки. Протокол иносубации в мыши с пользовательским источником света и направляющей канюлей включен. Правильная инотубация является одним из ключевых факторов, влияющих на внутритрахеавную доставку сухой порошковой формулировки в глубокую область легких мыши.
Введение
Легочный маршрут администрации предлагает различные преимущества в доставке терапевтических средств как для местных, так и для системных действий. Для лечения заболеваний легких высокая концентрация местных препаратов может быть достигнута путем доставки легочной артерии, тем самым уменьшая необходимую дозу и снижая частоту системных побочных эффектов. Кроме того, относительно низкая энзиматическая активность в легких может снизить преждевременный метаболизм наркотиков. Легкие также эффективны для поглощения препарата для системного действия из-за большой и хорошо пронизанной поверхности области, чрезвычайно тонкий слой эпителиальных клеток и высокий объем крови в лег....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Эксперименты, проведенные в этом исследовании, были одобрены Комитетом по использованию живых животных для обучения и исследований (CULATR), Университетом Гонконга. Сухой порошок формулировки, подготовленные спрей замораживания сушки (SFD), содержащий 0,5% люциферазы посыльного РНК (мРНК), 5% синтетический пептид PEG12KL4 и 94,5% маннитол (w/w) используются в этом исследовании, чтобы продемонстрировать экспрессиюмРНК в легких 16. Масса среднего аэродинамического диаметра (MMAD) порошка SFD составляет 2,4 мкм. Спрей сушеные (SD) маннитол порошок используются для исследования влияния объема воздуха, используемого в дисперсии
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Когда сухой порошок insufflator используется для доставки порошка аэрозоля в легкие животного, объем воздуха, используемого имеет решающее значение, поскольку это влияет на безопасность, а также эффективность дисперсии порошка. Для оптимизации метода для разгона сухого порошка (1 мг спрея сушеного маннитола) использовались различные объемы воздуха (0,3 мл, 0,6 мл и 1,0 мл), а вес мышей контролировался в течение 48 часов послевведения (рисунок 6). Использование 0,3 мл и 0,6 мл воздуха не вызы.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
В этой работе представлены изготовленные на заказ устройства для инауфляции сухого порошка и внутритрахеальной интратубации. В шаге погрузки порошка сухой порошок загружается в наконечник пипетки с гелем 200 йл. Важно, чтобы осторожно нажмите наконечник, чтобы свободные упаковки порошка на узком конце кончика. Однако, если порошок упакован слишком плотно, они будут застревать в кончике и не могут быть должным образом рассеяны. Рекомендуется нейтрализовать статические заряды порошка и наконечник пипетки, чтобы облегчить п.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
У авторов нет конфликта интересов, чтобы раскрыть.
Благодарности
Авторы хотели бы поблагодарить г-на Рэя Ли, г-на ХК Леунга и г-на Уоллеса Со за их добрую помощь в создании источника света и порошкового insufflator; и Основной фонд факультета для оказания помощи в визуализации животных. Работа была поддержана Советом по грантам на исследования, Гонконг (17300319).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| BALB/c мышь | Самка; 7-9 недель; Масса тела 20-25 г | ||
| CleanCap Firefly Люцифераза мРНК | TriLink Biotechnology | L-7602 | |
| Сухой порошок Insufflator | PennCentury | Model DP-4M | |
| Кетамин 10% | Alfasan International B.V. | NA | |
| Светоизлучающий (LED) резак | Unilite | Internation PS-K1 | |
| Mannitol (Pearlitol 160C) | Roquette | 450001 | |
| Круглый гелеобразный наконечник для пипетки без фильтра (200 & микро; L) | Labcon | 1034-800-000 | |
| Нейлоновая нить | Reach | 30017050 | |
| Один миллилитровый шприц без иглы | Terumo | SS-01T | |
| Оптическое волокно | Данные OMPF1000 | ||
| PEG12KL4 пептид | EZ Biolab | (PEG12)-KLLLLKLLLLLLLLLKLKLKLK-NH2 | |
| Пластик Пастер пипетка с тонким наконечником | Alpha Лаботаторы | LW4061 | |
| Трехходовой запорный кран | Braun | D201 | |
| Ксилазин 2% | Alfasan International B.V. | NA | |
| Zerostat 3 антистатический пистолет | MILTY | 5036694022153 |
Ссылки
- Newman, S. P. Drug delivery to the lungs: challenges and opportunities. Therapeutic Delivery. 8 (8), 647-661 (2017).
- Setter, S. M., et al. Inhaled dry powder insulin for the treatment of diabetes mellitus. Clinical Therapeutics. 29 (5), 7....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
