Методическая статья

Структурные оценки in vivo глазных заболеваний у моделей грызунов с использованием оптической когерентной томографии

3.2K просмотров

DOI:

10.3791/61588

24 июля 2020 г.

В этой статье

Краткое содержание

Здесь мы описываем использование спектрально-доменной оптической когерентной томографии (SD-OCT) для визуализации структур сетчатки и глаз in vivo в моделях дегенерации сетчатки, глаукомы, диабетической ретинопатии и близорукости.

Аннотация

Спектрально-доменная оптическая когерентная томография (SD-OCT) полезна для визуализации структур сетчатки и глаз in vivo. В исследованиях SD-OCT является ценным инструментом для оценки и характеристики изменений в различных моделях заболеваний сетчатки и глаз и травм. В моделях дегенерации сетчатки, индуцированных светом, SD-OCT может использоваться для отслеживания истончения слоя фоторецептора с течением времени. В моделях глаукомы SD-OCT может использоваться для мониторинга уменьшения слоя нервных волокон сетчатки и общей толщины сетчатки, а также для наблюдения за купированием зрительного нерва после индуцирования глазной гипертензии. У грызунов с диабетом SD-OCT помог исследователям наблюдать уменьшение общей толщины сетчатки, а также уменьшение толщины определенных слоев сетчатки, особенно слоя нервных волокон сетчатки с прогрессированием заболевания. В мышиных моделях близорукости SD-OCT можно использовать для оценки осевых параметров, таких как изменения осевой длины. Преимущества SD-OCT включают в себя визуализацию глазных структур in vivo, возможность количественно отслеживать изменения размеров глаза с течением времени, а также его быструю скорость сканирования и высокое разрешение. Здесь мы подробно описываем методы SD-OCT и показываем примеры его использования в нашей лаборатории в моделях дегенерации сетчатки, глаукомы, диабетической ретинопатии и близорукости. Методы включают анестезию, визуализацию SD-OCT и обработку изображений для измерения толщины.

Введение

Спектрально-доменная оптическая когерентная томография (SD-OCT) является точной модальностью визуализации с высоким разрешением, которая позволяет клиницистам и исследователям исследовать глазные структуры неинвазивно. Этот метод визуализации основан на интерферометрии для захвата трехмерных изображений сетчатки in vivo в микрометровом масштабе 1,2. Он стал одним из наиболее часто используемых методов визуализации в исследованиях зрения и в клинике из-за легкого обнаружения и точности патологических особенностей, таких как структурные дефекты и / или истончение слоев сетчатки и субретинальной жидкости

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все описанные процедуры были одобрены Комитетом по институциональным делам ветеранов Атланты по уходу за животными и их использованию и соответствовали руководству Национального института здравоохранения по уходу и использованию лабораторных животных (NIH Publications,8-е издание, обновлено в 2011 году).

ПРИМЕЧАНИЕ: Система SD-OCT, используемая для разработки протокола ниже, описана в Таблице материалов. Хотя некоторые из процедур специфичны для этой конкретной системы, общий подход может быть адаптирован для других устройств OCT и моделей животных. Кроме того, в нашей лаборатории эти протоколы обычно используютс....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

SD-OCT считается успешным, если получены высококачественные изображения, позволяющие надежно измерить размеры глаза. Здесь различные применения SD-OCT проиллюстрированы с использованием моделей дегенерации сетчатки, глаукомы, диабетической ретинопатии и близорукости.

В модели световой дегенерации сетчатки (LIRD) воздействие яркого света (10 000 люкс) вызывает дегенерацию фоторецепторных клеток в сетчатке9. Репрезентативные изображения SD-OCT показывают более тонкий внеш.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Визуализация глазных структур in vivo с высоким разрешением позволяет оценить изменения сетчатки и глаз с течением времени. В этом протоколе было продемонстрировано, что SD-OCT фиксирует различия в глазных структурах in vivo в моделях дегенерации сетчатки, глаукомы, диабетической ретинопатии и близорукости.

Наиболее важным аспектом при выполнении SD-OCT является получение четкого изображения сетчатки или другой глазной структуры, представляющей интерес. Важно потратить время, чтобы убедиться, .......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Эта работа была поддержана наградами Департамента по делам ветеранов rehab R&D Service Career Development Awards (CDA-1, RX002111; КДА-2; RX002928) для RSA, Merit Award (RX002615) и Research Career Scientist Award (RX003134) для MTP, Career Development Award (CDA-2, RX002342) для AJF, EY028859 для MTP, NEI Core Grant P30EY006360, Research to Prevention Blindness и Foundation Fighting Blindness.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
1% тропикамидСандозСандоз #6131403550; NDC-24208-585-59
0,5% тетракаинAlconNDC 0065-0741-12
AIM-RAS G3 120 VLeica Bioptigen90-AIMRAS-G3-120Специализированная платформа для удержания головки сканера ОКТ для мышей
Celluvisc gelREFRESH CELLUVISC#4554; NDC-0023-4554-30
G3 18 мм Телецентрический объективLeica Bioptigen90-BORE-G3-18
G3 Объектив для мышиLeica Bioptigen90-BORE-G3-M
G3 Крысиный объективLeica Bioptigen90-BORE-G3-R
ГрелкаИзготовление11-1130
Программное обеспечение InVivoVue LeicaBioptigenСпециализированное программное обеспечение, которое работает в паре с системой Leica Bioptigen SD-OCT
MATLABMathworksпрограмма математического моделирования
Мышь/крыса НаборLeica Bioptigen90-KIT-M/RМышь/крыса Система юстировки грызунов
СалинADDIPAK200-39
Система Envisu R4300 VHR 120 VLeica Bioptigen90-R4300-V1-120SD-OCT система

Ссылки

  1. Wojtkowski, M., et al. Ultrahigh-resolution, high-speed, Fourier domain optical coherence tomography and methods for dispersion compensation. Optics Express. 12 (11), 2404-2422 (2004).
  2. Nassif, N., et al.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи