Целью этой рукописи является представление метода на основе сонографии, который позволяет in vivo визуалировать кровоток в мозговых артериях у мышей. Показано его применение для определения изменений скоростей кровотока, связанных с спазмом сосудов в мышиных моделях субарахноидального кровоизлияния (САГ).
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Анализ церебрального спазма сосудов в мышиной модели субарахноидального кровоизлияния с помощью высокочастотного транскраниального дуплексного ультразвука
* These authors contributed equally
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Церебральный спазм сосудов, возникающий через недели после субарахноидального кровоизлияния, разновидность геморрагического инсульта, способствует задержке ишемии головного мозга. Проблема, встречаемая в экспериментальных исследованиях с использованием мышиных моделей SAH, заключается в том, что отсутствуют методы мониторинга in vivo церебрального спазма сосудов у мышей. Здесь мы демонстрируем применение высокочастотного ультразвука для выполнения транскраниальных дуплексных сонографических исследований на мышах. С помощью метода можно было идентифицировать внутренние сонные артерии (ICA). Скорости кровотока в внутричерепных ICO значительно ускорялись после индукции SAH, в то время как скорости кровотока в экстракраниальных ICO оставались низкими, что указывает на церебральный спазм сосудов. В заключение, метод, продемонстрированный здесь, позволяет осуществлять функциональный, неинвазивный in vivo мониторинг церебрального вазоспазма в мышиной модели SAH.
Введение
Спонтанное субарахноидальное кровоизлияние (САГ) является формой геморрагического инсульта, в основном вызванного разрывом внутричерепной аневризмы1. На неврологический исход в основном влияют два фактора: ранняя черепно-мозговая травма (ЭБР), которая вызвана последствиями кровотечения и связанной с ним транзиторной глобальной ишемии головного мозга, и отсроченная ишемия головного мозга (ДКИ), которая возникает в течение недель после кровотечения2,3. Сообщалось, что DCI затрагивает до 30% пациентов с САГ2. Патофизиология DCI включает ангиографический церебральный....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Эксперименты на животных были одобрены ответственным комитетом по уходу за животными (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz) и проведены в соответствии с Немецким законом о благополучии животных (TierSchG). Были соблюдена все применимые международные, национальные и институциональные руководящие принципы по уходу за животными и их использованию. В этом исследовании мы провели измерения скоростей кровотока внутричерепных и экстракраниальных артерий у самок мышей C57BL/6N в возрасте 11-12 недель с массой тела 19-21 г. Мышей подвергали либо индукционной САХ, либо фиктивной хирургии, которая была подробно описана в другом месте10,
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
У 6 мышей, у 3 из которых SAH индуцировали с использованием модели перфорации эндоваскулярной нити, в то время как у 3 была получена фиктивная операция, скорости кровотока внутричерепной внутренней сонной артерии (ICA) и экстракраниальной ICA были определены за день до операции и через 1, 3 и 7 дней после операции. Измерения проводились в рамках эхокардиографических исследований другого исследования под наркозом изофлураном при сохранении температуры тела на уровне 37 °C19.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Насколько нам известно, это исследование является первым, в котором представлен протокол мониторинга церебрального спазма сосудов в мышиной модели SAH с высокочастотным транскраниальным цветным дуплексным ультразвуком. Показано, что этот метод может измерять увеличение скоростей внутричерепного кровотока после индукции SAH у мышей. В медицине человека это явление хорошо известно3,15. Несколько клинических исследований показали, что повышенные скорости кровотока к.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.
Благодарности
Авторы хотели бы поблагодарить Стефана Кинделя за подготовку иллюстраций в видео. PW, MM и SHK были поддержаны Федеральным министерством образования и исследований Германии (BMBF 01EO1503). Работа была поддержана Крупным инструментационным грантом Немецкого исследовательского фонда (DFG INST 371/47-1 FUGG). ММ был поддержан грантом От Эльзы Крёнер-Фрезениус-Stiftung (2020_EKEA.144).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| крем для эпиляции Balea Balea | ; Германия | ASIN B0759XM39V | крем для эпиляции |
| C57BL/6N мыши | Janvier; Saint-Berthevin Cedex, Франция | n.a.mice | |
| Corneregel | Bausch& Ломб; Рочестер, штат Нью-Йорк, США | REF 81552983 | глазная мазь, смазочные |
| ватные палочки | Hecht Assistent; Sondenheim vor der Rö hn, Германия | REF 44302010 | ватные палочки |
| Ecco-XS бритва | Tondeo; Солиген, Германия | DE 28693396 | бритва |
| Электрод крем | GE; Бостон, Массачусетс, США | REF 21708318 | проводящая паста |
| Нагревательная пластина | Medax; Киль, Германия | 2005-205-01 | |
| Изофлуран | Абви; Висбаден, Германия | n.a. | летучий анестетик |
| Leukofix | BSN медицинский; Гамбург, Германия | REF 02137-00 | лента |
| Механическая рука + микроманипулятор | VisualSonics; FujiFilm, Торонто, Калифорния | P/N 11277 | |
| Салфетки Microbac Paul | Hartmann AG; Гамбург, Германия | REF 981387 | антимикробные ткани |
| MZ400, линейный преобразователь 38 МГц | VisualSonics; FujiFilm, Торонто, CA | REF 51068-30 | ультразвуковой преобразователь |
| Sonosid | ASID Bonz GmbH; Херренберг, Германия | REF 782010 | гель для ультрасонографии |
| Ультразвуковая платформа с нагревательной пластиной и записью ЭКГ | VisualSonics; FujiFilm, Торонто, Калифорния | P/N 11179 | |
| UniVet-Porta | Groppler; Оберперасберг, Германия | Серийный BKGM0437 | изофлурановый испаритель |
| Vevo3100 | VisualSonics; FujiFilm, Торонто, Калифорния | REF 51073-45 | ультразвуковой аппарат |
| VevoLab программное обеспечение | VisualSonics; FujiFilm, Торонто, Калифорния | n.a.evaluation | software |
Ссылки
- Macdonald, R. L., Schweizer, T. A. Spontaneous subarachnoid haemorrhage. Lancet. 389 (10069), 655-666 (2017).
- Macdonald, R. L. Delayed neurological deterioration after subarachnoid haemorrhage. Nature Reviews Neurology. 10 (1), 44-58 (2014).
- Francoeur, C. L., Mayer, S. A....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
