Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Платформа культуры органов переднего сегмента для отслеживания травм открытого глобуса и терапевтической эффективности

1.7K просмотров

DOI:

10.3791/62649

25 августа 2021 г.

В этой статье

Краткое содержание

Травмы глаз с открытым глобусом могут быть без лечения в течение нескольких дней в сельских или военных сценариях, что приводит к слепоте. Терапевтические средства необходимы, чтобы свести к минимуму потерю зрения. Здесь мы подробно описываем модель повреждения открытого глобуса культуры органов. С помощью этой модели можно правильно оценить потенциальные терапевтические средства для стабилизации этих травм.

Аннотация

Травмы открытого земного шара имеют плохие визуальные результаты, что часто приводит к постоянной потере зрения. Отчасти это связано с длительной задержкой между травмами и медицинским вмешательством в сельских районах и применением военной медицины, где офтальмологическая помощь недоступна. Нелеченные травмы подвержены инфекции после того, как глаз потерял свое водонепроницаемое уплотнение, а также потере жизнеспособности тканей из-за внутриглазной гипотензии. Терапевтические средства для временной герметизации травм открытого земного шара, если они правильно разработаны, могут восстановить внутриглазное давление и предотвратить инфекцию до тех пор, пока не станет возможным надлежащий офтальмологический уход. Чтобы облегчить разработку продукта, здесь подробно описано использование платформы для травмы органов переднего сегмента с открытым глобусом для отслеживания терапевтической эффективности в течение не менее 72 ч после травмы. Ткань переднего сегмента свиньи может поддерживаться в специально разработанных блюдах для культуры органов и удерживаться при физиологическом внутриглазном давлении. Колотые повреждения могут быть созданы с помощью пневматической системы, способной генерировать травмы диаметром до 4,5 мм, аналогичные размерам травм, имеющих отношение к военным. Потеря внутриглазного давления может наблюдаться в течение 72 ч после травмы, подтверждая надлежащую индукцию травмы и потерю водонепроницаемого уплотнения глаза. Терапевтическая эффективность может быть отслежена путем нанесения на глаз после индукции травмы, а затем отслеживания внутриглазного давления в течение нескольких дней. Кроме того, модель повреждения переднего сегмента применима к широко используемым методам функционального и биологического отслеживания физиологии переднего сегмента, таким как оценка прозрачности, глазной механики, здоровья эпителия роговицы и жизнеспособности тканей. В целом, метод, описанный здесь, является необходимым следующим шагом на пути к разработке биоматериалной терапии для временного уплотнения травм открытого земного шара, когда офтальмологическая помощь недоступна.

Введение

Травмы открытого глобуса (OG) могут привести к постоянной потере зрения, если их не лечить или, по крайней мере, стабилизировать после травмы1. Однако задержки распространены в отдаленных районах, где доступ к офтальмологической интервенции недоступен, например, в сельских районах или на поле боя в военных сценариях. Когда лечение недоступно, текущий стандарт ухода заключается в защите глаза жестким щитом до тех пор, пока медицинское вмешательство не будет возможным. В военной медицине эта задержка в настоящее время составляет до 24 ч, но ожидается, что она увеличится до 72 ч в будущих боевых операциях в городских условиях, где воздушная эвакуа....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Прежде чем выполнять этот протокол, имейте в виду, что существуют юридические и этические требования к использованию животных в исследованиях и обучении. Если живые животные используются в качестве источника глазной ткани, обратитесь за одобрением в местный этический или юридический орган (IACUC или Комитет по этике и т. Д.) Если есть какие-либо вопросы в получении разрешения на использование животных, не приступайте. Ранее мы определили и сообщили, что свежие глаза свиней, полученные и использованные в течение 24 ч после вскрытия, сравнивались с физиологией in vivo и хорошо себя показали для этих исследований (Animal Technologies, Tyler, TX, США)

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Изображения, полученные с помощью оптической когерентной томографии (OCT), показаны для глаз с травмированным OG, чтобы проиллюстрировать, как выглядит успешная индукция травмы. На рисунке 3 показаны изображения для контроля и OG поврежденной ткани AS сразу после травмы и через 72 ч. Показаны два вида: изображения поперечного сечения через место повреждения и проекция максимальной интенсивности сверху вниз (MMP) для визуализации площади поверхности изображения. Контрольные глаза не показываю.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Существуют критические шаги с платформой asoc OG injury, которые следует выделить, чтобы повысить вероятность успеха при использовании методологии. Во-первых, во время рассечения переднего сегмента сохранение трабекулярной сетки является важным, но сложным для правильного выполнения. Если ТМ нарушена, глаз не будет поддерживать физиологическое давление и не будет соответствовать критериям приемлемости для экспериментального использования. Рекомендуется сначала практиковать процесс рассечения в нормальных условиях, а не в.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов. Мнения, выраженные в этой статье, являются мнениями автора (авторов) и не отражают официальную политику или позицию Медицинского департамента армии США, Министерства армии, Министерства обороны или правительства США.

Благодарности

Этот материал основан на работе, поддержанной Министерством обороны Соединенных Штатов в рамках межведомственного соглашения (No 19-1006-IM) с программой приобретения временного ремонта роговицы (Агентство по развитию медицинской техники армии США).

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
10-32 Прямая вилка из поликарбоната, соединитель трубы с наружной резьбойMcMaster-Carr51525K431
10-32 Винт торцевой крышки, ½ "McMaster-Carr92196A269
10 мл шприцBD302995
20 мл шприцBD302830
Anti-AntiGibco15240-096
Шариковый ключ L McMaster-Carr5020A25
BetadineFisher ScientificNC1696484
BD  Интрамедик  PE 160 ТрубкаFisher Scientific14-170-12E
Ватные палочкиPuritan25-8061WC
DMEM mediaATCC30-2002
FBSATCC30-2020
Тонкие щипцыWorld Precision Instruments15914
МарляCovidien8044
GentamicinGibco15710-064
ГлутамаксGibco35050-061
Уплотнительное кольцо из силикона высокого давления, ширина 2 мм, внутренний диаметр 4мм McMaster-Carr5233T47
Щипцы большиеПрецизионные инструменты World Precision Instruments500365
Большие хирургические ножницыWorld Precision Instruments503261
Щипцы со средними зубьямиWorld Precision Инструменты501217
Гвоздь (предмет для прокола)McMaster-Carr97808A503
Нейлоновые шприцевые фильтрыFisher09-719C
PBSGibco10010-023
Чашка Петри (100 мм)FisherFB0875713
Поликарбонат, трехходовой, запорный кран с наружной резьбой; Луэр  замокFisherNC9593742
Лезвие бритвыFisher12-640
Нержавеющая сталь 18 G  90 градусов  угловая игла дозирующаяMcMaster-Carr75165A81
Нержавеющая сталь 18 G прямая ½ '’ игла для дозированияMcMaster-Carr75165A675
Стерильные стаканы 100 мл с крышкамиVWR15704-092
Vannas  ножницыWorld Precision InstrumentsWP5070

Ссылки

  1. Hilber, D., Mitchener, T. A., Stout, J., Hatch, B., Canham-Chervak, M. Eye injury surveillance in the US Department of Defense, 1996-2005. American Journal of Preventive Medicine. 38, 1 Suppl 78-85 (2010).
  2. Linde, A. S., McGinnis, L. J., Thompson, D. M.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги