В этом исследовании подробно описываются важнейшие факторы, которые следует учитывать в экспериментальных проектах с участием самок крыс. В более широком смысле эти данные служат снижению стигмы и помогают в разработке более инклюзивных диагностических и интервенционных инструментов.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Мониторинг эстрального цикла грызунов с использованием вагинального лаважа: нет такой вещи, как нормальный цикл
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Нынешняя методология устанавливает воспроизводимый, стандартизированный и экономически эффективный подход к мониторингу эстрального цикла самок крыс-подростков Sprague Dawley (SD). Это исследование демонстрирует сложность гормональных циклов и широкий спектр понимания, необходимого для построения надежной и достоверной техники мониторинга. Благодаря углубленному изучению основных экспериментальных и процедурных элементов это описание цикла и его основополагающих принципов обеспечивает основу для дальнейшего понимания и деконструирует заблуждения для будущего воспроизведения.
Наряду с описанием процесса сбора образцов с использованием влагалищного лаважа, процедура описывает механизм категоризации данных в четырехступенчатую модель проэструса, течки, метеструса и диэструса. Эти стадии характеризуются новым предлагаемым подходом, использующим 4 категоризирующих детерминанты состояния влагалищной жидкости, типа (типов) клеток, расположения клеток и количества клеток во время сбора. Вариации каждого этапа, благоприятные и неблагоприятные выборки, различие между цикличностью и ацикличностью, а также графические изображения собранных компонентов категоризации представлены наряду с эффективной интерпретационной и организационной практикой данных. В целом, эти инструменты позволяют впервые публиковать поддающиеся количественной оценке диапазоны данных, что приводит к стандартизации коэффициентов категоризации при репликации.
Введение
Новые вклады
Эстральный цикл грызунов был идентифицирован как важный показатель хорошего самочувствия. Однако бессознательные предубеждения исследователей и неточные интерпретации относительно женского тела мешают научному сообществу. Сама этимология слова «эструс» подразумевает чувство неполноценности и негатива. Еврипид использовал этот термин для описания «безумия» или безумия, Гомер для описания паники, а Платон для описания иррационального влечения. Это исследование подчеркивает, как эти первобытные перспективы влияют на современное научное сообщество и решают эти проблемы с помощью новой мозаичной парадигмы — обновленной комбинации ранее изуч....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Все методы обработки и процедуры, изложенные в этом протоколе, соответствуют руководящим принципам по уходу за животными и их использованию Национальными институтами здравоохранения (NIH) и были одобрены Институциональным комитетом по уходу за животными и их использованию (IACUC) Университета Пеппердайна и Комитетом по исследованиям животных канцлера UCLA (ARC).
1. Уход за животными и их использование
- Приобретайте самок крыс, в количестве в соответствии с анализом мощности, и самцов крыс, чтобы способствовать эффекту Уиттена или более последовательному циклу46. Определить штамм исходя из цели исследования в....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Текущие данные отражают данные о женском подростковом SD International Genetic Standardization Program (IGS) в присутствии самцов крыс SD. Эти животные были обнаружены как в лабораториях Университета Пеппердайна, так и в лабораториях UCLA в рамках совместного исследования. На рисунке 5 представлены множественные вариации 4 этапов цикла. Рисунок 5A1 был идентифицирован как образец диэструса с несколькими типами клеток. В этом примере показано, чт.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Ключевые шаги и важные соображения
Некоторые критические шаги в предоставленном протоколе требуют акцента, особенно в коллекции вагинальных клеток. Во время экстракции влагалищной жидкости обеспечение надлежащего угла и глубины введения шприца является ключом к получению удовлетворительных результатов и, в конечном счете, предотвращению раздражения, травмы или стимуляции шейки матки животного. Стимуляция шейки матки может быть одним из источников индукции псевдобеременности, о чем свидетельствуют 12-1.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
У авторов нет конфликта интересов для раскрытия.
Благодарности
Это исследование было проведено в рамках финансируемого NIH сотрудничества между Центром исследований черепно-мозговых травм Калифорнийского университета в Лос-Анджелесе (BIRC).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Светодиодный студенческий микроскоп AmScope 40X-1000X + 5-мегапиксельная USB-камера | Номер детали AmScope | : M150C-E5 EAN: 0608729747796 Номер модели: M150C-E5 | https://www.amazon.com/AmScope-40X-1000X-Student-Microscope-Camera/dp/B00O9GNOTA/ref=sr_1_15?crid=2W9CHTG8YSOTV& keywords=usb+камера+для+микроскоп& ампер; qid=1572477663& ампер; s=industrial & ампер; sprefix=USB+камера+для+micr%2Cindustrial%2C177& ампер; sr=1-15 |
| BD PrecisionGlide Набор игл, 20G x 1, Короткий скос | Fischer Scientific | 14-815-526 | https://www.fishersci.com/shop/products/bd-precisionglide-single-use-needles-short-bevel-regular-wall-4/14815526#?keyword=BD%20PrecisionGlide%20Needle%20Pack,%2020G%20x%201 |
| кровать O Cob 1/8 | NEWCO | 93009 | https://andersonslabbedding.com/cob-products/bed-ocobs-8b/ |
| Corning™ Предметные стекла для простого микроскопа Простое водо-белое стекло | Fischer Scientific | 12-553-7A | https://www.fishersci.com/shop/products/corning-plain-microscope-slides-microscope-slides-75-x-25mm/125537a |
| Corning™ Прямоугольная крышка стекла | Fischer Scientific | 12-553-464 | https://www.fishersci.com/shop/products/corning-square-rectangular-cover-glasses-rectangle-no-1-thickness-0-13-0-17mm-size-24-x-50mm/12553464#?keyword=true |
| Kimberly-Clark Professional™ Кимтех Наука и торговля; Kimwipes™ Деликатные салфетки, 1-х слойный | Fischer Scientific | 06-666 | https://www.fishersci.com/shop/products/kimberly-clark-kimtech-science-kimwipes-delicate-task-wipers-7/p-211240?crossRef=kimwipes |
| Labdiet Грызун Лабораторный Чау 50 фунтов, 15001 | NEWCO Specialty and LabDiet | 5012 | |
| https://www.labdiet.com/products/standarddiets/rodents/index.html Линейная светодиодная лампа, UL тип A, T8, средний двухконтактный (G13), цветовая температура 4,000 K, люмены 2550 лм | Grainger | 36UX10 | https://www.grainger.com/product/36UX10?gclid=CjwKCAjw_ LL2BRAkEiwAv2Y3SW1WdNdkf7 zdIxoT9R6n2DGnrToJHjv-pwCTca4ahQyExrrtWvbgwRoCi4 cQAvD_BwE& s_kwcid=AL!2966!3!335676016696 !p!! g!! led18et8%2F4%2F840& ef_id= CjwKCAjw_LL2BRAkEiwAv2Y3SW 1WdNdkf7zdIxoT9R6n2DGnrToJ Hjv-pwCTca4ahQyExrrtWvbgwRo Ci4cQAvD_BwE:G:s& s_kwcid=AL!2966!3!335676016696!p!! g!! led18et8%2F4%2F840& cm_mmc= PPC:+Google+PPC |
| Инъекционные пакеты с хлоридом натрия, 0,9% | Live Action Safety | ABB079830939 | https://www.liveactionsafety.com/injection-iv-solution-9-sodium-chloride-1000ml-bags/ |
| Шприц Стерильный 1 мл с наконечником Luer Slip Tip - 100 шприцев от BH Supplies | BH Supplies BH Supplies | ASIN: B07BQDRDC2 UPC: 638632928821 | https://www.amazon.com/1ml-Syringe-Sterile-Luer-Slip/dp/B07BQDRDC2/ref=sr_1_1_sspa?crid=13S8EGEUK90G7& Ключевые слова = 1 мл + стерильный + шприц & ампер; qid= 1572478649& ампер; s=industrial & ампер; sprefix=1+ml+steri%2Cindustrial%2C187& ампер; sr=1-1-spons& ампер; psc=1& ампер; spLa= ZW5jcnlwdGVkUXVhbGlmaWVy PUEyRlo4NFdZWkJLWkxGJm VuY3J5cHRlZElkPUEwMDEzODQ yMjNWNzdWM0hTNzVBRCZlbmNy eXB0ZWRBZElkPUEwNDI3NzAzM< > 0E5SzVKMkxaQVc2JndpZGdldE5h bWU9c3BfYXRmJmFjdGlvbj1jbGlja 1JlZGlyZWN0JmRvTm90TG9nQ2 xpY2s9dHJ1ZQ== |
| Проволочные крышки и полы Проволочная планка для беременных мышейИспользуется с крысиной клеткой (10" x 19" x 8"H )Общий размер | Allentown | LV40326013 | |
| https://www.labx.com/item/wire-lids-and-floors-mouse-maternity-wire-bar-lidused/LV40326013#description Сверхлегкая тканевая и пластиковая одноразовая пеленка 17' x 24' | Medline | EAN: 0480196288558 Глобальный торговый идентификационный номер: 40080196288558 | https://www.amazon.com/Medline-Industries-MSC281224C-Lightweight-Disposable/dp/B00A2G67YU/ref=sr_1_4?keywords=medline+industries+surgical+pads&qid=1572475853& sr=8-4 |
Ссылки
- Schneider, M. Adolescence as a vulnerable period to alter rodent behavior. Cell and Tissue Research. 354 (1), 99-106 (2013).
- Camacho-Arroyo, I., Montor, J. M. Beyond reproductive effects of sex steroids. MiniReviews in Medicinal Chemistry. 12 (11), 10....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
