Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Модель эндоваскулярной перфорации субарахноидального кровоизлияния в сочетании с магнитно-резонансной томографией (МРТ)

4.1K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/63150

⸱

16 декабря 2021 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Neurosurgery, Charité - Universitätsmedizin Berlin, corporate member of Freie Universität Berlin, and Humboldt-Universität zu Berlin, and Berlin Institute of Health, 2Department of Experimental Neurology and Center for Stroke Research Berlin, Charité - Universitätsmedizin Berlin, corporate member of Freie Universität Berlin, Humboldt-Universität zu Berlin, and Berlin Institute of Health, 3NeuroCure Cluster of Excellence and Charité Core Facility 7T Experimental MRIs, Charité - Universitätsmedizin Berlin

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Здесь мы представляем стандартизированную модель мыши SAH, индуцированную перфорацией эндоваскулярной нити, в сочетании с магнитно-резонансной томографией (МРТ) через 24 ч после операции для обеспечения правильного места кровотечения и исключения других соответствующих внутричерепных патологий.

Аннотация

Модель перфорации эндоваскулярной нити для имитации субарахноидального кровоизлияния (SAH) является широко используемой моделью, однако этот метод может вызвать высокий уровень смертности, а также неконтролируемый объем SAH и другие внутричерепные осложнения, такие как инсульт или внутричерепное кровоизлияние. В этом протоколе представлена стандартизированная модель мыши SAH, индуцированная перфорацией эндоваскулярной нити, в сочетании с магнитно-резонансной томографией (МРТ) через 24 ч после операции для обеспечения правильного места кровотечения и исключения других соответствующих внутричерепных патологий. Вкратце, мышей C57BL/6J анестезируют внутрибрюшинной инъекцией кетамина/ксилазина (70 мг/16 мг/кг массы тела) и помещают в лежачее положение. После разреза средней линии шеи обнажаются общая сонная артерия (CCA) и каротидная бифуркация, и нерассасывающийся монофиламентный полипропиленовый шов 5-0 вводится ретроградным способом в наружную сонную артерию (ECA) и продвигается в общую сонную артерию. Затем нить инвагинируется во внутреннюю сонную артерию (ICA) и выдвигается вперед для перфорации передней мозговой артерии (ACA). После восстановления после операции мыши проходят МРТ 7,0 Т через 24 ч. Объем кровотечения может быть количественно определен и оценен с помощью послеоперационной МРТ, что позволяет создать надежную экспериментальную группу SAH с возможностью выполнения дальнейших анализов подгрупп на основе количества крови.

Введение

Субарахноидальное кровоизлияние (SAH) вызвано разрывом внутричерепной аневризмы и представляет собой опасную для жизни чрезвычайную ситуацию, связанную со значительной заболеваемостью и смертностью, что составляет около 5% инсультов 1,2. Пациенты с САГ с выраженными головными болями, неврологической дисфункцией и прогрессирующим нарушением сознания3. Около 30% пациентов с САГ умирают в течение первых 30 дней после первоначального кровотечения4. Клинически 50% пациентов испытывают отсроченную черепно-мозговую травму (DBI) после ранней черепно-мозговой травмы. ДБИ характеризуется отсроченной ишемией головного мозга и отсроченным неврологическим дефицитом. Современные исследования показали, что синергетические эффекты нескольких различных факторов приводят к потере неврологической функции, включая разрушение гематоэнцефалического барьера, сокращение мелких артерий, микроциркуляторную дисфункцию и тромбоз 5,6.

Одним из уникальных аспектов SAH является то, что патогенез возникает из экстрапаренхимального расположения, но затем приводит к пагубным каскадам внутри паренхимы: патология начинается с накопления крови в субарахноидальном пространстве, вызывая множество внутрипаренхимальных эффектов, таких как нейровоспаление, апоптоз нейронных и эндотелиальных клеток, кортикальная распространяющаяся деполяризация и образование отека мозга7, См. 8.

Клинические исследования ограничены несколькими факторами, что делает животную модель критическим элементом в последовательной и точной имитации патомеханистических изменений заболевания. Были предложены различные протоколы модели SAH, например, аутологичная инъекция крови в cisterna magna (ACM). Также модифицирован метод с двойной инъекцией аутологичной крови в цистерну магна и зрительный хиазм цистерны (БТР) соответственно 9,10. В то время как аутологичная инъекция в кровь является простым способом имитации патологического процесса спазма сосудов и воспалительных реакций после субарахноидального кровоизлияния, последующее повышение внутричерепного давления (ВЧД) происходит относительно медленно, и никаких заметных изменений проницаемости гематоэнцефалического барьера индуцируется11,12. Другой метод, периартериальное размещение крови, обычно используемый в больших моделях SAH (например, обезьяны и собаки), включает размещение антикоагулянтной аутологичной крови или сопоставимых продуктов крови вокруг сосуда. Изменения диаметра артерии можно наблюдать с помощью микроскопа, служащего индикатором церебрального спазма сосудов после SAH13.

Barry et al. впервые описали модель эндоваскулярной перфорации в 1979 году, в которой базилярная артерия обнажается после удаления черепа; затем артерию прокалывают вольфрамовыми микроэлектродами с использованием микроскопической стереотаксической техники14. В 1995 году Бедерсон и Велкен модифицировали модель Зеа-Лонга церебральной ишемии и установили эндоваскулярную перфорацию, которая постоянно улучшалась с 15,16. Этот метод основан на том, что мыши и люди имеют схожую внутричерепную сосудистую сеть, известную как круг Уиллиса.

Для послеоперационной оценки и классификации SAH в мышиной модели были предложены различные подходы. Sugawara et al. разработали шкалу оценок, которая широко используется с 2008 года17. Этот метод оценивает тяжесть САГ на основе морфологических изменений. Однако для этого метода морфология мозговой ткани мыши должна быть исследована под непосредственным зрением, и поэтому мышь должна быть принесена в жертву для оценки. Кроме того, было установлено несколько методов определения тяжести САГ in vivo. Подходы варьируются от простой неврологической оценки до мониторинга внутричерепного давления (ICP) и различных методов радиологической визуализации. Кроме того, оценка МРТ была показана как новый, неинвазивный инструмент для оценки тяжести SAH, коррелирующий с неврологическим баллом18,19.

Здесь представлен протокол для модели SAH, вызванной эндоваскулярной перфорацией, в сочетании с послеоперационной МРТ. В попытке создать систему для объективизации количества кровотечений в условиях in vivo , мы также разработали систему для классификации SAH и количественной оценки общего объема крови на основе МРТ с высоким разрешением 7,0 Т с высоким разрешением T2. Такой подход обеспечивает правильную индукцию САГ и исключение других патологий, таких как инсульт, гидроцефалия или внутримозговое кровоизлияние (ICH) и осложнения.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Эксперименты проводились в соответствии с руководящими принципами и правилами, установленными Landesamt fuer Gesundheit und Soziales (LaGeSo), Берлин, Германия (G0063/18). В этом исследовании использовали самцов мышей C57Bl/6J (8-12 недель) весом 25 ± 0,286 г (средняя ± т.е. м.).

1. Подготовка животных

  1. Индуцировать анестезию путем введения кетамина (70 мг/кг) и ксилазина (16 мг/кг) внутрибрюшинно. Поддерживать нормальную температуру тела, способствуя быстрому введению глубокой анестезии. Проверьте адекватную седацию с болевым стимулом, таким как защемление пальца ноги, и проверьте отсутствие реакции.
  2. Тщательно сбрите волосы шеи мыши бритвой, очистите их 70% этанолом с последующим бетадином / хлоргексидином и нанесите 1% лидокаина на поверхность кожи для местного контроля боли.
  3. Поместите мышь в положение лежа на спине. Используйте ленту для фиксации конечностей и хвоста, осторожно растягивая кожу шеи на противоположную сторону операции. Одновременно немного приподнимите шею.
  4. Используйте офтальмологическую мазь (например, 5% декспантенол) для предотвращения обезвоживания глаз во время операции.

2. Индукция SAH

figure-protocol-1
Рисунок 1: Пошаговые изображения хирургической техники. (А) Изображение обнаженной анатомии правой сонной артерии: идентифицированы ОАС и ее бифуркация в ИКА и ЭКА, а также небольшие ветви ЭКА (ОА и СТА). (B) ЭКА мобилизуется из окружающих тканей и перевязывается двумя швами перед ее разрезанием. Третья перевязка должна быть размещена свободно рядом с бифуркацией, не закупоривая ее. (C) ICA и CCA временно закупориваются (либо с перевязкой, либо клипсами) для предотвращения чрезмерного кровотечения при тщательном надрезе ЭКА. D) нить накала вставляется в ЭКА и переносится в ОАС. Предварительно организованная перевязка должна быть тщательно затянута, чтобы не возникало выпота крови, но продвижение нити остается возможным. (E) МКА и ОАС вновь открываются, а пень ЭКА необходимо отрегулировать в сторону черепа. Проталкивая нить ~ 9 мм вперед в ICA, бифуркация ACA-MCA будет достигнута, и сосуд затем перфорируется путем проталкивания нити накала ~ 3 мм дальше. (F) Нить накала изымается после обеспечения временной религации ОАС. Предварительно организованная лигирование ЭКА быстро закупоривается, и ОАС вновь открывается, чтобы разрешить реперфузию. Сокращения: ACA = передняя мозговая артерия, CCA = общая сонная артерия, ECA = наружная сонная артерия, MCA = средняя мозговая артерия, ICA = внутренняя сонная артерия, OA = затылочная артерия, PPA = крылогопалатиновая артерия, STA = верхняя щитовидная артерия. Шкала = 2 мм. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

  1. Откройте кожу шеи стерильным скальпелем, от подбородка до верхнего края грудины (1,5 см), и тупо отделите слюнные железы от окружающей их соединительной ткани.
  2. Отделите группу мышц вдоль одной стороны [в данном случае правой стороны] трахеи, обнажив оболочку общей сонной артерии (ОАС), покрытую питательными кровеносными сосудами и венулами. ОАС и блуждающий нерв расположены в непосредственной близости друг от друга.
  3. Диссоциировать ВСС и оставить свободным 8-0 шелковый шов вокруг КЦА без его перевязки заранее. Обратите внимание на защиту блуждающего нерва, так как он легко повреждается (рисунок 1А).
  4. Тройная бифуркация CCA, ICA и ECA видна вдоль нижней задней трети диастаза. Рассекните дистальный конец ЭКА и сажайте сосуд в два раза дальше, насколько это возможно.
  5. Отсоедините ЭКА в средней точке дважды перевязанного сегмента, создав культю сосуда.
  6. Предварительно организуйте одну перевязку нити накала вокруг культи ЭКА, не закрывайте ее до успешного введения нити накаливания.
  7. Используйте шов или микрозажим для временного закрытия ICA и CCA (рисунок 1B).
  8. Сделайте небольшой разрез (примерно половину диаметра ЭКА) в ЭКА с помощью микрососудистых ножниц. Вставьте проленовую нить 5-0 (альтернативно 4-0) в ЭКА и перенесите ее в ОАС.
  9. Слегка закройте лигатуру на ЭКА, ослабив микрозажим на ICA и CCA (рисунок 1C).
  10. Осторожно оттяните нить накаливания и отрегулируйте культю ECA в черепном направлении, инвагинируя нить через бифуркацию в ICA (рисунок 1D).
  11. Направьте наконечник нити медиально под углом ~30° к средней линии трахеи и ~30° к горизонтальной плоскости. Вытолкните нить накаливания вперед внутри ICA. После достижения бифуркации ACA-MCA встречается сопротивление (~9 мм).
  12. Продвиньте нить на 3 мм дальше, перфорируя правый ACA. Быстро выводят нить на культю ЭКА, позволяя крови течь в субарахноидальное пространство.
  13. Держите нить накала в этом положении около 10 с (рисунок 1Е). Наличие мышечного тремора, ипсилатерального миоза, задыхания, измененного сердечного ритма и недержания мочи может быть подтверждающим свидетельством успешной операции.
  14. Временно закройте ККА, чтобы избежать избыточной кровопотери. Вытащите нить мгновенно и обжарьте ЭКА заранее подготовленным швом. Вновь открыть ОАС и разрешить реперфузию и дальнейший выпот крови в субарахноидальное пространство (рисунок 1F).
  15. После проверки на утечку кровотечения продезинфицируйте кожу, окружающую рану, чтобы предотвратить послеоперационные инфекции кожи, и зашить рану нерассасывающимся швом из полиэфирного волокна 4-0.
  16. Поместите мышь в термобокс до тех пор, пока сознание не восстановится. Подождите, пока животное полностью проснется, и убедитесь, что оно восстановило достаточное сознание для поддержания грудинного покоя. Не возвращайте животных в компанию других мышей до полного выздоровления.
  17. Вводят 200-300 мг/кг парацетамола с массой тела для послеоперационного обезболивания.
  18. Проверяйте мышей ежедневно после операции.

3. Измерение МРТ

  1. Через 24 часа после операции выполните МРТ с помощью сканера грызунов (Таблица материалов) и специального резонатора головы мыши - здесь использовался 20-миллиметровый квадратурный объемный резонатор передачи/приема.
  2. Поместите мышь на подогретое одеяло для циркуляции воды, чтобы обеспечить постоянную температуру тела ~ 37 °C. Индуцировать анестезию 2,5% изофлурана в смеси O2/N2O (30%/70%) и поддерживать 1,5-2% изофлурана через лицевую маску под непрерывным контролем вентиляции.
  3. Сначала выполните быстрое эталонное сканирование, получив 3 ортогональных пакета срезов (Tri-Pilot-Multi, FLASH со временем повторения TR/echo TE = 200 мс/3 мс, 1 среднее, угол сальто FA = 30°, поле зрения FOV = 28 мм x 28 мм, матрица MTX = 256 x 256, толщина среза 1 мм, общее время захвата TA = 30 с).
  4. Затем для визуализации используйте для визуализации 2D-взвешенную T2-взвешенную 2D-спин-эхо-последовательность (параметры визуализации TR/TE = 5505 мс/36 мс, коэффициент RARE 8, 6 средних значений, 46 смежных осевых срезов толщиной среза 0,35 мм для покрытия всего мозга, FOV = 25,6 мм x 25,6 мм, MTX = 256 x 256, TA = 13 мин).
  5. Если результат неясен, используйте дополнительную градиентную эхо-последовательность, вызванную дыханием T2*, с той же изодантностью, что и при сканировании T2w (2D FLASH, TR/TE = 600 мс/6,3 мс, FA = 30°, 1 среднее, 20 осевых срезов толщиной 0,35 мм, FOV и MTX идентичны T2w, TA = 5-10 мин в зависимости от скорости дыхания).
  6. Перенесите данные в формат изображения DICOM и используйте программное обеспечение ImageJ для классификации SAH и объемной обработки сгустков крови. Подробная информация о количественной оценке приведена в качестве пошагового руководства в дополнительном материале (дополнительный рисунок 1).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Смертность
Для этого исследования в общей сложности 92 самца мышей C57Bl/6J в возрасте от 8 до 12 недель были подвергнуты операции SAH; в них мы наблюдали общий уровень смертности 11,9% (n = 12). Смертность наблюдалась исключительно в течение первых 6-24 ч после операции, предполагая периоперационную смертность, а также само кровотечение SAH в качестве наиболее вероятных способствующих факторов.

Степень кровотечения SAH
В общей сложности 50 мышей получил...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Таким образом, стандартизированная модель мыши SAH, индуцированная операцией перфорации эндоваскулярной нити, представлена с незначительной инвазией, коротким оперативным временем и приемлемыми показателями смертности. МРТ проводится 24 ч после операции для обеспечения правильного места кровотечения и исключения других соответствующих внутричерепных патологий. Кроме того, мы классифицировали различные классы кровотечения SAH и измерили объемы кровотечения, что позволило проводить дальнейший анализ подгрупп на основе степ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Отсутствие конфликта интересов

Благодарности

SL был поддержан Китайским советом по стипендиям. КТ была поддержана стипендией БИГ-МД Берлинского института здравоохранения и Фонда Зонненфельда. RX поддерживается Программой ученых-клиницистов БИГ-Шарите, финансируемой Charité-Universitätsmedizin Berlin и Берлинским институтом здравоохранения. Мы признаем поддержку со стороны Немецкого исследовательского фонда (DFG) и Фонда публикаций открытого доступа Charité - Universitätsmedizin Berlin.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Крем для глазBayer815529836Bepanthen
Программное обеспечение для анализа изображенийImageJВ комплекте с Java 1.8.0_172
Лигионный шов (5-0)SMISilk black USP
Источник света для микроскопаZeissCL 6000 LED
КетаминCP-pharma797-037100 мг/мл МРТ
BrukerPharmascan 70/16  7 Тесла
МРТ снимки получены программнымобеспечением BrukerBruker Paravision 5.1
Парацетамол (40 мг/мл)bene Arzneimittel4993736
проленовой нитью (5-0)ErhiconEH7255
RazorWellaHS61
Хирургический инструмент (тонкие ножницы)FST14060-09
Хирургический инструмент (щипцы #1)AESCULAPFM001R
Хирургический инструмент (щипцы #2)AESCULAPFD2855R
Хирургический инструмент (щипцы #3)HammacherHCS 082-12
Хирургический инструмент (иглодержатель)FST91201-13
Хирургический инструмент (пружинные ножницы Ванны)FST15000-08
Хирургический микроскопZeissStemi 2000 C
Мониторинг вентиляцииStony BrookМониторинг мелких животных &
Шовный материал для раневых систем (4-0)ErhiconCB84D
XylavetCP-pharma797-06220 мг/мл

Ссылки

  1. Macdonald, R. L., Schweizer, T. A. Spontaneous subarachnoid haemorrhage. The Lancet. 389 (10069), 655-666 (2017).
  2. van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. Subarachnoid haemorrhage. The Lancet. 369 (9558), 306-318 (2007).
  3. Abraham, M. K., Chang, W. -T. W. Subarachnoid hemorrhage. Emergency Medicine Clinics of North America. 34 (4), 901-916 (2016).
  4. Schertz, M., Mehdaoui, H., Hamlat, A., Piotin, M., Banydeen, R., Mejdoubi, M. Incidence and mortality of spontaneous subarachnoid hemorrhage in martinique. PLOS ONE. 11 (5), 0155945(2016).
  5. Okazaki, T., Kuroda, Y. Aneurysmal subarachnoid hemorrhage: intensive care for improving neurological outcome. Journal of Intensive Care. 6 (1), 28(2018).
  6. Kilbourn, K. J., Levy, S., Staff, I., Kureshi, I., McCullough, L. Clinical characteristics and outcomes of neurogenic stress cadiomyopathy in aneurysmal subarachnoid hemorrhage. Clinical Neurology and Neurosurgery. 115 (7), 909-914 (2013).
  7. de Oliveira Manoel, A. L., et al. The critical care management of spontaneous intracranial hemorrhage: a contemporary review. Critical Care. 20 (1), 272(2016).
  8. Schneider, U. C., et al. Microglia inflict delayed brain injury after subarachnoid hemorrhage. Acta Neuropathologica. 130 (2), 215-231 (2015).
  9. Delgado, T. J., Brismar, J., Svendgaard, N. A. Subarachnoid haemorrhage in the rat: angiography and fluorescence microscopy of the major cerebral arteries. Stroke. 16 (4), 595-602 (1985).
  10. Piepgras, A., Thomé, C., Schmiedek, P. Characterization of an anterior circulation rat subarachnoid hemorrhage model. Stroke. 26 (12), 2347-2352 (1995).
  11. Suzuki, H., et al. Heme oxygenase-1 gene induction as an intrinsic regulation against delayed cerebral vasospasm in rats. Journal of Clinical Investigation. 104 (1), 59-66 (1999).
  12. Dudhani, R. V., Kyle, M., Dedeo, C., Riordan, M., Deshaies, E. M. A Low mortality rat model to assess delayed cerebral vasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (71), e4157(2013).
  13. Iuliano, B. A., Pluta, R. M., Jung, C., Oldfield, E. H. Endothelial dysfunction in a primate model of cerebral vasospasm. Journal of Neurosurgery. 100 (2), 287-294 (2004).
  14. Barry, K. J., Gogjian, M. A., Stein, B. M. Small animal model for investigation of subarachnoid hemorrhage and cerebral vasospasm. Stroke. 10 (5), 538-541 (1979).
  15. Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat. Stroke. 26 (6), 1086-1092 (1995).
  16. Veelken, J. A., Laing, R. J. C., Jakubowski, J. The Sheffield model of subarachnoid hemorrhage in rats. Stroke. 26 (7), 1279-1284 (1995).
  17. Sugawara, T., Ayer, R., Jadhav, V., Zhang, J. H. A new grading system evaluating bleeding scale in filament perforation subarachnoid hemorrhage rat model. Journal of Neuroscience Methods. 167 (2), 327-334 (2008).
  18. Egashira, Y., Shishido, H., Hua, Y., Keep, R. F., Xi, G. New grading system based on magnetic resonance imaging in a mouse model of subarachnoid hemorrhage. Stroke. 46 (2), 582-584 (2015).
  19. Mutoh, T., Mutoh, T., Sasaki, K., Nakamura, K., Taki, Y., Ishikawa, T. Value of three-dimensional maximum intensity projection display to assist in magnetic resonance imaging (MRI)-based grading in a mouse model of subarachnoid hemorrhage. Medical Science Monitor. 22, 2050-2055 (2016).
  20. Kothari, R. U., et al. The ABCs of measuring intracerebral hemorrhage volumes. Stroke. 27 (8), 1304-1305 (1996).
  21. Leclerc, J. L., et al. A comparison of pathophysiology in humans and rodent models of subarachnoid hemorrhage. Frontiers in Molecular Neuroscience. 11, 71(2018).
  22. Titova, E., Ostrowski, R. P., Zhang, J. H., Tang, J. Experimental models of subarachnoid hemorrhage for studies of cerebral vasospasm. Neurological Research. 31 (6), 568-581 (2009).
  23. Marbacher, S., et al. Systematic review of in vivo animal models of subarachnoid hemorrhage: Species, standard parameters, and outcomes. Translational Stroke Research. 10 (3), 250-258 (2019).
  24. Marbacher, S., Fandino, J., Kitchen, N. D. Standard intracranial in vivo animal models of delayed cerebral vasospasm. British Journal of Neurosurgery. 24 (4), 415-434 (2010).
  25. Thompson, J. W., et al. In vivo cerebral aneurysm models. Neurosurgical Focus. 47 (1), 1-8 (2019).
  26. Frontera, J. A., et al. Prediction of symptomatic vasospasm after subarachnoid hemorrhage: The modified fisher scale. Neurosurgery. 59 (1), 21-26 (2006).
  27. Fisher, C. M., Kistler, J. P., Davis, J. M. Relation of cerebral vasospasm to subarachnoid hemorrhage visualized by computerized tomographic scanning. Neurosurgery. 6 (1), 1-9 (1980).
  28. Wilson, D. A., et al. A simple and quantitative method to predict symptomatic vasospasm after subarachnoid hemorrhage based on computed tomography: Beyond the fisher scale. Neurosurgery. 71 (4), 869-875 (2012).
  29. Schüller, K., Bühler, D., Plesnila, N. A murine model of subarachnoid hemorrhage. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (81), e50845(2013).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Модель субарахноидального кровоизлияния у мышейвведение филаментасонная артерияТ2-взвешенная МРТградация САКколичественное определение объема кровоизлияниявнутричерепное кровоизлияние
Модель эндоваскулярной перфорации субарахноидального кровоизлияния в сочетании с магнитно-резонансной томографией (МРТ)
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.