Здесь мы представляем стандартизированную модель мыши SAH, индуцированную перфорацией эндоваскулярной нити, в сочетании с магнитно-резонансной томографией (МРТ) через 24 ч после операции для обеспечения правильного места кровотечения и исключения других соответствующих внутричерепных патологий.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Модель эндоваскулярной перфорации субарахноидального кровоизлияния в сочетании с магнитно-резонансной томографией (МРТ)
* These authors contributed equally
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Модель перфорации эндоваскулярной нити для имитации субарахноидального кровоизлияния (SAH) является широко используемой моделью, однако этот метод может вызвать высокий уровень смертности, а также неконтролируемый объем SAH и другие внутричерепные осложнения, такие как инсульт или внутричерепное кровоизлияние. В этом протоколе представлена стандартизированная модель мыши SAH, индуцированная перфорацией эндоваскулярной нити, в сочетании с магнитно-резонансной томографией (МРТ) через 24 ч после операции для обеспечения правильного места кровотечения и исключения других соответствующих внутричерепных патологий. Вкратце, мышей C57BL/6J анестезируют внутрибрюшинной инъекцией кетамина/ксилазина (70 мг/16 мг/кг массы тела) и помещают в лежачее положение. После разреза средней линии шеи обнажаются общая сонная артерия (CCA) и каротидная бифуркация, и нерассасывающийся монофиламентный полипропиленовый шов 5-0 вводится ретроградным способом в наружную сонную артерию (ECA) и продвигается в общую сонную артерию. Затем нить инвагинируется во внутреннюю сонную артерию (ICA) и выдвигается вперед для перфорации передней мозговой артерии (ACA). После восстановления после операции мыши проходят МРТ 7,0 Т через 24 ч. Объем кровотечения может быть количественно определен и оценен с помощью послеоперационной МРТ, что позволяет создать надежную экспериментальную группу SAH с возможностью выполнения дальнейших анализов подгрупп на основе количества крови.
Введение
Субарахноидальное кровоизлияние (SAH) вызвано разрывом внутричерепной аневризмы и представляет собой опасную для жизни чрезвычайную ситуацию, связанную со значительной заболеваемостью и смертностью, что составляет около 5% инсультов 1,2. Пациенты с САГ с выраженными головными болями, неврологической дисфункцией и прогрессирующим нарушением сознания3. Около 30% пациентов с САГ умирают в течение первых 30 дней после первоначального кровотечения4. Клинически 50% пациентов испытывают отсроченную черепно-мозговую травму (DBI) после ранней черепно-мозговой травмы. ДБИ ....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Эксперименты проводились в соответствии с руководящими принципами и правилами, установленными Landesamt fuer Gesundheit und Soziales (LaGeSo), Берлин, Германия (G0063/18). В этом исследовании использовали самцов мышей C57Bl/6J (8-12 недель) весом 25 ± 0,286 г (средняя ± т.е. м.).
1. Подготовка животных
- Индуцировать анестезию путем введения кетамина (70 мг/кг) и ксилазина (16 мг/кг) внутрибрюшинно. Поддерживать нормальную температуру тела, способствуя быстрому введению глубокой анестезии. Проверьте адекватную седацию с болевым стимулом, таким как защемление пальца ноги, и проверьте отсутствие реакции.
- Тща....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Смертность
Для этого исследования в общей сложности 92 самца мышей C57Bl/6J в возрасте от 8 до 12 недель были подвергнуты операции SAH; в них мы наблюдали общий уровень смертности 11,9% (n = 12). Смертность наблюдалась исключительно в течение первых 6-24 ч после операции, предполагая периоперационную смертность, а также само кровотечение SAH в качестве наиболее вероятных способствующих факторов.
Степень кровотечения SAH
В общей сложности 50 мышей получил.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Таким образом, стандартизированная модель мыши SAH, индуцированная операцией перфорации эндоваскулярной нити, представлена с незначительной инвазией, коротким оперативным временем и приемлемыми показателями смертности. МРТ проводится 24 ч после операции для обеспечения правильного места кровотечения и исключения других соответствующих внутричерепных патологий. Кроме того, мы классифицировали различные классы кровотечения SAH и измерили объемы кровотечения, что позволило проводить дальнейший анализ подгрупп на основе степ.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Отсутствие конфликта интересов
Благодарности
SL был поддержан Китайским советом по стипендиям. КТ была поддержана стипендией БИГ-МД Берлинского института здравоохранения и Фонда Зонненфельда. RX поддерживается Программой ученых-клиницистов БИГ-Шарите, финансируемой Charité-Universitätsmedizin Berlin и Берлинским институтом здравоохранения. Мы признаем поддержку со стороны Немецкого исследовательского фонда (DFG) и Фонда публикаций открытого доступа Charité - Universitätsmedizin Berlin.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Крем для глаз | Bayer | 815529836 | Bepanthen |
| Программное обеспечение для анализа изображений | ImageJ | В комплекте с Java 1.8.0_172 | |
| Лигионный шов (5-0) | SMI | Silk black USP | |
| Источник света для микроскопа | Zeiss | CL 6000 LED | |
| Кетамин | CP-pharma | 797-037 | 100 мг/мл МРТ |
| Bruker | Pharmascan 70/16 | 7 Тесла | |
| МРТ снимки получены программным | обеспечением Bruker | Bruker Paravision 5.1 | |
| Парацетамол (40 мг/мл) | bene Arzneimittel | 4993736 | |
| проленовой нитью (5-0) | Erhicon | EH7255 | |
| Razor | Wella | HS61 | |
| Хирургический инструмент (тонкие ножницы) | FST | 14060-09 | |
| Хирургический инструмент (щипцы #1) | AESCULAP | FM001R | |
| Хирургический инструмент (щипцы #2) | AESCULAP | FD2855R | |
| Хирургический инструмент (щипцы #3) | Hammacher | HCS 082-12 | |
| Хирургический инструмент (иглодержатель) | FST | 91201-13 | |
| Хирургический инструмент (пружинные ножницы Ванны) | FST | 15000-08 | |
| Хирургический микроскоп | Zeiss | Stemi 2000 C | |
| Мониторинг вентиляции | Stony Brook | Мониторинг мелких животных & | |
| Шовный материал для раневых систем (4-0) | Erhicon | CB84D | |
| Xylavet | CP-pharma | 797-062 | 20 мг/мл |
Ссылки
- Macdonald, R. L., Schweizer, T. A. Spontaneous subarachnoid haemorrhage. The Lancet. 389 (10069), 655-666 (2017).
- van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. Subarachnoid haemorrhage. The Lancet. 369 (9558), 306-318 (2007).
- Abraham, M. K., Chang, W. -T. W.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
Теги
