Стереотаксическая хирургия для нацеливания на участки мозга у мышей обычно включает доступ через кости черепа и руководствуется ориентирами черепа. Здесь мы излагаем альтернативный стереотаксический подход для нацеливания на хвостовой ствол мозга и верхний шейный отдел спинного мозга с помощью cisterna magna, который опирается на прямую визуализацию ориентиров ствола мозга.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Стереотаксический хирургический подход к микроинъекции каудального ствола головного и верхнего шейного отдела спинного мозга через Cisterna Magna у мышей
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Стереотаксическая хирургия для нацеливания на участки мозга у мышей обычно руководствуется ориентирами черепа. Затем доступ осуществляется через отверстия заусенца, просверленные через череп. Этот стандартный подход может быть сложным для целей в хвостовом стволе мозга и верхней части шейного канатика из-за специфических анатомических проблем, поскольку эти участки удалены от ориентиров черепа, что приводит к неточности. Здесь мы излагаем альтернативный стереотаксический подход с помощью cisterna magna, который использовался для нацеливания на дискретные области, представляющие интерес в каудальном стволе мозга и верхней части шейного канатика. Cisterna magna простирается от затылочной кости до атласа (т. е. второй позвоночной кости), заполнена спинномозговой жидкостью и покрыта твердой мозговой оболочкой. Этот подход обеспечивает воспроизводимый путь доступа к выбранным структурам центральной нервной системы (ЦНС), которые в противном случае трудно достичь из-за анатомических барьеров. Кроме того, он позволяет напрямую визуализировать ориентиры ствола мозга в непосредственной близости от целевых участков, повышая точность при доставке небольших объемов инъекций в ограниченные области, представляющие интерес в каудальном стволе мозга и верхней части шейного канатика. Наконец, такой подход дает возможность избежать мозжечка, что может быть важно для моторных и сенсомоторных исследований.
Введение
Стандартная стереотаксическая хирургия для нацеливания на участки мозга у мышей1 обычно включает фиксацию черепа с использованием набора ушных перекладин и ротовой панели. Затем координаты оцениваются на основе справочных атласов 2,3 и ориентиров черепа, а именно: брегма (точка, где швы лобной и теменной костей сходятся) или лямбда (точка, где швы теменной и затылочной костей сходятся; Рисунок 1А,В). Через отверстие в черепе над предполагаемой целью может быть достигнута целевая область, либо для доставки микроинъекций, либо для инструментов с помощью канюль или оптических волокон. Из-за вариации анатомии этих швов и ошибок в локализации брегмы или лямбды 4,5 положение нулевых точек по отношению к мозгу варьируется от животного к животному. Хотя небольшие ошибки в нацеливании, которые являются результатом этой изменчивости, не являются проблемой для крупных или близлежащих целей, их воздействие больше для небольших областей интереса, которые удалены от нулевых точек в переднезадней или дорсовентральной плоскостях и / или при изучении животных различного размера из-за возраста, деформации и / или пола. Существует несколько дополнительных проблем, которые являются уникальными для продолговатого мозга и верхней части шейного канатика. Во-первых, небольшие изменения переднезадных координат связаны со значительными изменениями дорсовентральных координат относительно твердой мозговой оболочки, обусловленными положением и формой мозжечка (рисунок 1Bi)2,6,7. Во-вторых, верхний шейный канатик не содержится в черепе2. В-третьих, наклонное положение затылочной кости и вышележащего слоя мышц шеи2 делает стандартный стереотаксический подход еще более сложным для структур, расположенных вблизи перехода между стволом головного и спинного мозга (рисунок 1Bi). Наконец, многие мишени, представляющие интерес в каудальном стволе мозга ишейном канатике, являются небольшими 2, требующими точных и воспроизводимых инъекций 8,9.
Альтернативный подход через cisterna magna обходит эти проблемы. Cisterna magna представляет собой большое пространство, которое простирается от затылочной кости до атласа (рисунок 1A, т. е. вторая позвоночная кость)10. Он заполнен спинномозговой жидкостью и покрыт твердой мозговой оболочкой10. Это пространство между затылочной костью и атласом открывается при антерофлексе головы. К нему можно получить доступ, перемещаясь между вышележащими парными животами мышцы longus capitis, обнажая дорсальную поверхность хвостового ствола мозга. Затем можно ориентироваться на области, представляющие интерес, на основе ориентиров самих этих регионов, если они расположены вблизи дорсальной поверхности; или с помощью obex, точки, где центральный канал открывается в IV желудочек, в качестве нулевой точки для координат, чтобы достичь более глубоких структур. Этот подход был успешно использован у различных видов, включая крысу11, кошку12, мышь 8,9 и нечеловеческого примата13 для нацеливания на вентральную респираторную группу, медуллярную медиальную ретикулярную формацию, ядро одиночных путей, область постремы или подъязычное ядро. Однако этот подход широко не используется, поскольку он требует знания анатомии, специализированного инструментария и более продвинутых хирургических навыков по сравнению со стандартным стереотаксическим подходом.
Здесь мы описываем пошаговый хирургический подход к достижению ствола мозга и верхней части шейного мозга через cisterna magna, визуализации ориентиров, установке нулевой точки (рисунок 2), а также оценке и оптимизации целевых координат для стереотаксической доставки микроинъекций в дискретные области ствола мозга и спинного мозга, представляющие интерес (рисунок 3). Затем мы обсудим преимущества и недостатки, связанные с этим подходом.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Автор заявляет, что протокол следует руководящим принципам Институционального комитета по уходу за животными и их использованию в Медицинском центре Бет Исраэль Диаконисс.
1. Подготовка хирургических инструментов и стереотаксического каркаса
ПРИМЕЧАНИЕ: Операция проводится в асептических условиях. Стерильность поддерживается с помощью метода стерильного наконечника.
- Установите стереотаксическую руку с микропипеткой или шприцем, заполненным инъекционным препаратом по выбору (аденоассоциированный вирус (AAV) или обычный индикатор) на стереотаксическую рамку и подготовьте адаптер мыши (рисунок 2A).
- Подготовьте автоклавные хирургические инструменты (Таблицу материалов) и поместите их на стерильную поверхность.
2. Индукция анестезии и подготовка мышей
- Включите O2 со скоростью 0,5 л/мин и установите испаритель изофлурана на 4,0, убедившись, что поток O2 поступает в индукционную коробку.
ВНИМАНИЕ: Убедитесь, что индукционная коробка изофлунана помещена в капюшон и что изофлуран удаляется от места операции. - Поместите мышь (10-недельный самец C57BL/6J) в индукционную камеру.
- Как только дыхание замедлится, откройте индукционную камеру и слегка приподнимите мышь. Используйте машинки для стрижки для удаления волос с головы на плечи.
3. Позиционирование мыши в стереотаксическом кадре
- Переместите мышь к стереотаксической рамке и поместите нос в гибкий носовой конус. На этом этапе убедитесь, что поток O2 теперь направлен к носовому конусу.
- Поместите мышь в стереотаксическую рамку, используя только наушники.
ПРИМЕЧАНИЕ: Убедитесь, что ушные вкладыши ровные, а голова ровная. - Антерофлекс головку мыши под углом 90° путем ручного наведения носа. Чтобы закрепить это положение, поместите пластиковый барьер между стойками ушной перекладины адаптера мыши, параллельно стойкам. Плоская часть черепа служит ориентиром, подобно подходу плоского черепа в обычной стереотаксической хирургии.
ПРИМЕЧАНИЕ: Не следует чрезмерно сгибать головку (т.е. за пределы угла 90° между плоскостью лобной кости черепа и плоскостью поверхности стола), так как это препятствует потоку воздуха через верхние дыхательные пути. Если воздушный поток затруднен, переместите мышь, убедившись, что тело поддерживается под туловищем, а пластиковая карта установлена на 90° между плоскостью лобной кости черепа и плоскостью поверхности стола, как показано на рисунке 2A, C. - Поместите грелку под мышь, а затем убедитесь, что шея и остальная часть тела расположены на одном уровне (то есть примерно на 180° или параллельно столу). Набор инструментов, который удерживает пружинные ножницы, можно использовать для подъема тела в это положение.
ПРИМЕЧАНИЕ: Этот шаг важен, так как хвостовой ствол мозга и верхний шейный канатик движутся в зависимости от положения, в отличие от более ростральных частей ЦНС, которые удерживаются на месте черепом. - Вводят однократную дозу 4 мг/кг мелоксикама с медленным высвобождением (SR) подкожно (s.c.) при объеме 2 мкл/г массы тела и наносят смазку на глаза.
- Очистите место хирургического разреза сначала с помощью 70% спиртовой прокладки для приготовления, затем с помощью прокладки для подготовки бетадина, а затем снова с помощью прокладки для подготовки спирта и дайте высохнуть.
- Поместите драпировку под корпус.
- Продезинфицируйте руки и наденьте стерильные перчатки.
- Поместите драпировку в месте операции.
4. Операция по доступу к cisterna magna
- Убедитесь, что мышь соответствующим образом обезболена, зажав пальцы ног или проверив рефлекс роговицы.
- Снизить уровень изофлурана до уровня технического обслуживания (2,0).
- Сделайте разрез 1-1,2 см хирургическим лезвием No10 от края затылочной кости по направлению к плечам одним плавным движением.
- Сделайте разрез в средней линии трапециевидной мышцы. Это обнажает парные мышцы longus capitis.
ПРИМЕЧАНИЕ: У мышей трапециевидная мышца представляет собой очень тонкую, почти прозрачную мышцу. Убедитесь, что вы остаетесь в средней линии и не врезаетесь в нижележащие мышцы, так как это вызовет ненужное кровотечение. - Поместите оба втягивающих крючка между парными мышцами longus capitis, один из которых ориентирован влево, а другой вправо. Вес гемостатов обеспечивает натяжение втягивающих крючков, которые могут быть изменены путем повторной регулировки положения гемостатов.
- Расположите хирургический микроскоп на месте, чтобы лучше визуализировать хирургическое поле.
- Используйте тупые щипцы ламинэктомии, чтобы отделить левый и правый живот парной мышцы longus capitis, начиная с затылка, где хорошо видна средняя линия. Направьте тупые щипцы через кость затылка по средней линии вниз к тому месту, где она встречается с цистерной твердой мозговой оболочки, а затем продолжайте через твердую мозговую оболочку к атласу.
ПРИМЕЧАНИЕ: Нет необходимости разрезать парные мышцы longus capitis, так как ничто не удерживает их вместе в средней линии; это вызовет ненужное кровотечение. - Переставьте втягивающие устройства и отрегулируйте напряжение, переместив гемостаты, открыв вид cisterna magna.
- Используйте тупые щипцы ламинэктомии, чтобы отделить мышцы дальше по средней линии, чтобы получить хорошее окно обзора ствола мозга и мозжечка.
- Повторяйте шаги 4.7-4.9 по мере необходимости, пока мозжечок и ствол мозга не попадут ниже твердой мозговой оболочки.
- Используя тупые щипцы ламинэктомии, очищают твердую мозговую оболочку от мелких нитей соединительной ткани, перемещая щипцы от средней линии в боковом направлении, пока не появится четкое представление ствола мозга и создают больше бокового пространства, как это необходимо для цели.
5. Открытие цистернальной мембраны
- Используйте угловые щипцы Дюмона (#4/45), чтобы захватить твердую мозговую оболочку, которая простирается от затылочной кости до атласа. Возьмите твердое тело вблизи затылочной кости и используйте пружинные ножницы, чтобы сделать небольшое отверстие (~ 0,5-1,5 мм) в твердой мозговой оболочке.
ПРИМЕЧАНИЕ: В этом ростральном расположении пространство между стволом мозга и вышележащей твердой мозговой оболочкой является самым широким, что обеспечивает достаточно места для безопасных манипуляций с твердой мозговой оболочкой. - Используйте пружинные ножницы, чтобы поднять твердую мозговую оболочку и открыть твердую мозговую оболочку дальше. Размер окна зависит от целевого объекта.
ПРИМЕЧАНИЕ: При многократных продольных инъекциях или двусторонних инъекциях потребуется большее окно; небольшого окошка будет достаточно при совершении одиночных односторонних или среднелинейных инъекций. - Как только твердая мозговая оболочка будет открыта, слейте избыток спинномозговой жидкости стерильным кончиком сигнала.
6. Идентификация ориентиров и нулевой точки
- Посмотрите на дорсальную поверхность ствола мозга с подробными ориентирами через открытую твердую мозговую оболочку. Обекс, точка, где центральный канал открывается в IV желудочек, является стандартной передне-задней и медиолатеральной нулевой точкой.
7. Координаты цели
ПРИМЕЧАНИЕ: Для различных целей мы включили список стандартных координат с передними задними (AP) и медиолатеральными (ML) координатами относительно координат брегмы нулевой точки и cisterna magna с координатами AP и ML относительно нулевой точки obex для облегчения перехода между методологиями (таблица 1). Координаты дорсовентрального (DV) относятся к поверхности мозга или мозжечка (стандартный подход) или поверхности ствола мозга или верхней части шейного канатика (cisterna magna approach) в точке входа AP и ML. Планирование должно быть сделано до операции.
- Используйте три набора координат для определения цели: AP, ML и DV. Из-за положения головы относительная ориентация структур ствола мозга варьируется в зависимости от местоположения.
- Для целевого расстояния >0,4 мм от каудального до обекса (рисунок 1B, зеленый) выполните следующие действия.
- AP: Используйте любой стандартный стереотаксический справочный атлас (например, Paxinos и Franklin atlas2) или серии тканей, вырезанные в поперечной плоскости, чтобы оценить расстояние AP между obex и целью.
- ML: Используйте любой стандартный стереотаксический эталонный атлас или серию тканей, вырезанную в поперечной плоскости, чтобы оценить расстояние ML между obex и мишенью.
- Д.В.: Оцените координаты относительно поверхности мозга или мозжечка в целевой точке AP и ML. Используйте любой стандартный стереотаксический эталонный атлас или серии тканей, вырезанные в поперечной плоскости, чтобы оценить расстояние между поверхностью ствола мозга по желаемым координатам AP и ML и целью.
- Для целевого расстояния <0,4 мм от каудального до обекса (рисунок 1B, оранжевый) выполните следующие действия.
- АП: Скорректируйте координаты, чтобы учесть антерофлексию ствола мозга. Для вентральных и ростральных координат точка входа ствола мозга AP будет более каудальной относительно координаты AP цели в стандартной плоскости.
- МЛ: Получение координат цели из стандартного стереотаксического эталонного атласа или тканевого ряда, вырезанного в поперечной плоскости. Координаты будут относительно визуализированной средней линии на целевом уровне точки доступа.
- Д.В.: Оцените координаты относительно поверхности ствола мозга в целевой точке AP и ML. Отрегулируйте DV с учетом антерофлексии ствола мозга. Для вентральных и ростральных координат координат DV будут больше, чем расстояние от дорсальной поверхности ствола мозга в стандартной плоскости.
- Для целевого расстояния >0,4 мм от каудального до обекса (рисунок 1B, зеленый) выполните следующие действия.
8. Инъекция мишени
- Опустите пипетку или шприц к мишени с помощью стереотаксического рычага и введите раствор как для стандартных стереотаксических подходов. Оставить на месте на 1-5 мин после инъекции, чтобы избежать следа иглы при использовании объемов между 3-50 нл. Затем поднимите пипетку или шприц с помощью стереотаксической руки.
- Повторите шаг 8.1. для нескольких целей.
9. Закрытие хирургического поля
- Осторожно снимите крючки с хирургического поля. Парные мышцы longus capitis будут возвращаться в нейтральное положение, полностью покрывая cisterna magna. Не закрывайте трапециевидную мышцу и твердую мозговую оболочку в средней линии, так как они слишком хрупкие, чтобы удерживать швы.
- Закройте кожу тремя нейлоновыми или полипропиленовыми швами (5-0 или 6-0).
10. Послеоперационный уход
- Выключите изофлуран и извлеките мышь из стереотаксической рамки. Поместите мышь в чистую клетку на грелку и наблюдайте, пока не проснетесь и не пошевелитесь.
- Следите за состоянием здоровья, весом и швами в послеоперационные дни 1-3. Снимите швы на 10-й день, если они еще не сняты.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Подход cisterna magna позволяет нацеливаться на каудальный ствол мозга и верхние структуры шейного канатика, которые в противном случае трудно достичь с помощью стандартных стереотаксических подходов или склонны к непоследовательному нацеливанию. Операция по достижению cisterna magna требует разрезов кожи, тонкого слоя трапециевидной мышцы и открытия твердой мозговой оболочки и поэтому хорошо переносится мышами. Он особенно эффективен и менее инвазивн при нацеливании на множественные (продольно диспергированные ...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Стандартная стереотаксическая хирургия обычно полагается на ориентиры черепа для расчета координат целевых участков в ЦНС1. Затем доступ к целевым участкам осуществляется через отверстия для заусенцев, которые просверливаются через череп1. Этот метод не идеален для каудального ствола мозга, так как целевые участки расположены далеко от ориентиров черепа в переднезадней и дорсовентральной плоскостях2, а также поскольку анатомия черепа и вышел...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторам нечего раскрывать.
Благодарности
Эта работа была поддержана R01 NS079623, P01 HL149630 и P01 HL095491.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Спиртовая прокладка | Med-Vet International | Артикул: MDS090735Z | кожный препарат для профилактики инфекции в области хирургического вмешательства |
| Угловые щипцы, Dumont #5/45 | FST | 11251-35 | только для захвата твердой мозговой |
| оболочки Бетадиновая прокладка | Med-Vet International | SKU:PVP-PAD | кожный препарат для профилактики инфекции в области хирургического вмешательства |
| Субъединица холерного токсина-b, конъюгат Alexa Fluor 488/594 | Thermo Fisher Scientific | 488: C34775, 594: C22842 | Флуоресцентные индикаторные |
| машинки для стрижки | Wahl | Model MC3, 28915-10 | для бритья шерсти в области операции |
| Держатель электрода с угловым зажимом | Kopf | 1770 | для удержания стеклянной пипетки |
| Расходомер | Gilmont instruments | модели #65 MM | для регулирования потока изофлурана и кислорода к мыши в операционной плоскости |
| Флуоресцентные микросферы, полистирол | Thermo Fisher Scientific | F13080 | Флуоресцентный индикатор |
| Грелка | Stoelting | 53800M | Терморегуляция |
| Индукционная камера с портом Комплект для подключения | Midmark Inc | 93805107 92800131 | камера для обеспечения начальной анестезии |
| Инсулиновый шприц | Exelint International | 26028 | для введения физраствора и анальгетика |
| Isoflurane | Med-Vet International | артикул:RXISO-250 | ингаляционный анестетик |
| Isoflurane Matrix VIP 3000 испаритель | Midmark Inc | 91305430 | аппарат для ингаляционной доставки анестетика |
| щипцы для ламинэктомии, Dumont #2 | FST | 11223-20 | только для очистки твердой мозговой оболочки |
| медицинского воздуха, сжатый | Linde | UN 1002 | Используется со стимулятором и PicoPump для подачи воздуха для прецизионного впрыска раствора |
| Meloxicam SR | Zoo Pharm LLC | Лот # MSR2-211201 | обезболивающий |
| Микрогематокрит боросиликатное стекло предварительно откалиброванная капиллярная трубка | Globe Scientific Inc | 51628 | для трансфекции материала на назначенные координаты |
| Мышиный адаптер | Stoelting | 0051625 | адаптация крысиной стереотаксической рамки для мышиной хирургии |
| Иглодержатель, Студент Холстед- Комары Гемостатики | FST | 91308-12 | для наложения швов |
| Кислородный регулятор | Продукты жизнеобеспечения S | /N 909328, лот 092109 | регулировать уровень кислорода из кислородного баллона |
| Кислородный баллон, сжатый | Linde | USP UN 1072 | поставляется вместе с изофлурановой анестезией |
| Пластиковая карта | не применимо | не применимо | любая твердая пластиковая карта, вырезанная по размеру стереотаксической рамки (например, удостоверение личности) |
| Пневматический PicoPump (или аналогичный) | World Precision Instruments (WPI) | SYS-PV820 | Для прецизионного раствора для инъекций |
| физиологического раствора, стерильный | Mountainside Medical Equipment | H04888-10 | для замены жидкостей организма, потерянных во время операции |
| Рукоятка скальпеля, #3 | FST | 10003-12 | до держать скальпель |
| Ножницы, Wagner | FST | 14070-12 | для разрезания полипропиленового шва |
| Пружинные ножницы, Vannas 2,5 мм с прилагаемой коробкой | ножницы FST | 15002-08 | только для открытия твердой мозговой оболочки, коробка для поднятия тела |
| Стереотаксический микроманипулятор | Kopf | 1760-61 | прикреплен к держателю электрода для регулировки положения на основе координат |
| Стереотаксическая U-образная рама в сборе и внутриклеточная опорная пластина | Kopf | 1730-B, 1711 | рама для хирургии |
| Стерильные аппликаторы с ватными наконечниками | Puritan | 25-806 10WC | абсорбирующие кровь из операционного поля |
| Стерильные нефенестрированные простыни | Henry Schein | 9004686 | для стерильного хирургического поля |
| Стерильная офтальмологическая мазь | Puralube | P1490 | окулярная Стимулятор смазки |
| & Трубка | Grass Medical Instruments | S44 | для обеспечения контролируемого предварительного сжатия воздуха для прецизионного введения раствора |
| Хирургическое лезвие #10 | Med-Vet International | Артикул: 10SS | для разреза кожи |
| Хирургические щипцы, Extra fine Graefe | FST | 11153-10 | для удержания кожи |
| Хирургические перчатки | Med-Vet International | MSG2280Z | для аскептической хирургии |
| Хирургический микроскоп | Leica | Model M320/ F12 | для 5-40Х увеличения операционного участка |
| Шов 5-0 полипропилен | Oasis | MV-8661 | для закрытия кожи |
| Tegaderm | 3M | 3M ID 70200749250 | обеспечивает стерильный барьер |
| Универсальный зажим и стойка | Kopf | 1725 | крепится к стереотаксической U-образной раме и внутриклеточной опорной пластине |
| Крючок для раны с Гемостаты Хартмана | FST | 18200-09, 13003-10 | для разделения мышц и обеспечения хирургического окна |
Ссылки
- JoVE. Rodent Stereotaxic Surgery. JoVE Science Education Database. , Neuroscience (2021).
- Paxinos, G., Franklin, K. B. J. The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates. , Academic Press. (2001).
- Lein, E. S., et al. Genome-wide atlas of gene expression in the adult mouse brain. Nature. 445 (7124), 168-176 (2007).
- Rangarajan, J. R., et al. Image-based in vivo assessment of targeting accuracy of stereotactic brain surgery in experimental rodent models. Scientific Reports. 6 (1), 38058(2016).
- Blasiak, T., Czubak, W., Ignaciak, A., Lewandowski, M. H. A new approach to detection of the bregma point on the rat skull. Journal of Neuroscience Methods. 185 (2), 199-203 (2010).
- Popesko, P., Rajtova, V., Horak, J. A Colour Atlas of the Anatomy of Small Laboratory Animals, Volume 2: Rat, Mouse and Golden Hamster. 2, Wolfe Publishing Ltd. (1992).
- Allen Mouse Brain Atlas. Allen Institute for Brain Science. , Available from: https://mouse.brain-map.org/experiment/thumbnails/100042147?image_type=atlas (2004).
- Vanderhorst, V. G. J. M. Nucleus retroambiguus-spinal pathway in the mouse: Localization, gender differences, and effects of estrogen treatment. The Journal of Comparative Neurology. 488 (2), 180-200 (2005).
- Yokota, S., Kaur, S., VanderHorst, V. G., Saper, C. B., Chamberlin, N. L. Respiratory-related outputs of glutamatergic, hypercapnia-responsive parabrachial neurons in mice. Journal of Comparative Neurology. 523 (6), 907-920 (2015).
- Anselmi, C., et al. Ultrasonographic anatomy of the atlanto-occipital region and ultrasound-guided cerebrospinal fluid collection in rabbits (Oryctolagus cuniculus). Veterinary Radiology & Ultrasound. 59 (2), 188-197 (2018).
- Herbert, H., Moga, M. M., Saper, C. B. Connections of the parabrachial nucleus with the nucleus of the solitary tract and the medullary reticular formation in the rat. The Journal of Comparative Neurology. 293 (4), 540-580 (1990).
- Vanderhorst, V. G., Holstege, G. Caudal medullary pathways to lumbosacral motoneuronal cell groups in the cat: evidence for direct projections possibly representing the final common pathway for lordosis. The Journal of Comparative Neurology. 359 (3), 457-475 (1995).
- Vanderhorst, V. G., Terasawa, E., Ralston, H. J., Holstege, G. Monosynaptic projections from the nucleus retroambiguus to motoneurons supplying the abdominal wall, axial, hindlimb, and pelvic floor muscles in the female rhesus monkey. The Journal of Comparative Neurology. 424 (2), 233-250 (2000).
- Wall, N. R., Wickersham, I. R., Cetin, A., De La Parra, M., Callaway, E. M. Monosynaptic circuit tracing in vivo through Cre-dependent targeting and complementation of modified rabies virus. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (50), 21848-21853 (2010).
- Krashes, M. J., et al. Rapid, reversible activation of AgRP neurons drives feeding behavior in mice. The Journal of Clinical Investigation. 121 (4), 1424-1428 (2011).
- Ganchrow, D., et al. Nucleus of the solitary tract in the C57BL/6J mouse: Subnuclear parcellation, chorda tympani nerve projections, and brainstem connections. The Journal of Comparative Neurology. 522 (7), 1565-1596 (2014).
- Ung, K., Arenkiel, B. R. Fiber-optic implantation for chronic optogenetic stimulation of brain tissue. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (68), e50004(2012).
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
Теги
