Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Инактивация патогенов посредством фотолиза рибофлавина-5'-фосфата в видимом свете

2.1K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/63531

⸱

6 апреля 2022 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Biotechnology, Ming Chuan University, 2Department of Tourism and Leisure, Hsing Wu University, 3Department of Science Education and Application, National Taichung University of Education, 4Department of Soil and Environmental Sciences, National Chung Hsing University

В этой статье

Краткое содержание

Здесь представлен протокол инактивации патогенных бактерий реактивными формами кислорода, образующимися при фотолизе мононуклеотида флавина (FMN) при облучении синим и фиолетовым светом низкой интенсивности. Фотолиз FMN является простым и безопасным методом для санитарных процессов.

Аннотация

Рибофлавин-5'-фосфат (или флавин мононуклеотид; FMN) чувствителен к видимому свету. Различные соединения, включая активные формы кислорода (АФК), могут быть получены в результате фотолиза FMN при облучении видимым светом. АФК, образующиеся в результате фотолиза FMN, вредны для микроорганизмов, включая патогенные бактерии, такие как золотистый стафилококк (S. aureus). В данной статье представлен протокол деактивации S. aureus, например, посредством фотохимических реакций с участием FMN при облучении видимым светом. Супероксидный радикальный анион (figure-abstract-1), образующийся во время фотолиза FMN, оценивается путем восстановления нитро-синего тетразолия (NBT). Микробная жизнеспособность S. aureus, которая приписывается реактивным figure-abstract-2 видам, была использована для определения эффективности процесса. Скорость бактериальной инактивации пропорциональна концентрации FMN. Фиолетовый свет более эффективен в инактивации S. aureus , чем облучение синим светом, в то время как красный или зеленый свет не стимулирует фотолиз FMN. В данной статье показан фотолиз FMN как простой и безопасный метод санитарных процессов.

Введение

Рибофлавин-5'-фосфат (FMN) образуется фосфорилированием в рибофлавине 5'-положении рибитильной боковой цепи и требуется всем флавопротеинам для многочисленных клеточных процессов для генерации энергии. Он также играет роль витамина для некоторых функций в организме человека1. FMN примерно в 200 раз более растворим в воде, чем рибофлавин2.

Антибактериальная фотодинамическая инактивация (aPDI) бактерий является эффективным способом контроля устойчивости к бактериям 3,4, поскольку она не зависит от режима бактериальной резистентности. Клинически aPDI используется для лечения инфекций мягких тканей с целью уменьшения инфекции внутрибольничной кожи из-за мультирезистентных бактерий 5,6,7,8,9. aPDI также производит гибель клеток, генерируя активные формы кислорода (АФК). АФК, такие как супероксидные радикалы (figure-introduction-1), синглетный кислород, гидроксильные радикалы (•OH) и пероксиловые радикалы, представляют собой свободные радикалы или молекулы, которые содержат реакционноспособный кислород 10,11,12 и обычно являются реакционноспособными 13. Подобно повреждению ДНК, вызванному АФК, перекисное окисление мембраны и разрушение эндотелиальных клеток также являются неблагоприятными биохимическими реакциями, которые приписываются АФК в клетках12.

Использование aPDI для патогенных бактерий включает видимый или ультрафиолетовый источник света для инактивации микроорганизмов в присутствии химических соединений, таких как хлорид метилтиониния14, конъюгат PEI-ce6 15, порфирин16, диоксид титана17, толуидиновый синий O18 и наночастицы оксида цинка19. Толуидиновый синий O и метиленовый синий являются фенотиазиновыми красителями, а метиленовый синий обладает токсичными свойствами. Наночастицы оксида цинка и УФ-облучение связаны с неблагоприятным воздействием на здоровье и окружающую среду. Таким образом, использование надежного, безопасного и простого фотосенсибилизатора посредством фотолиза при видимом облучении заслуживает дальнейшего изучения.

Микроэлемент, рибофлавин или FMN, не токсичен и действительно используется для производства пищевых продуктов или кормления20. Как FMN, так и рибофлавин очень чувствительны к световому облучению2. ПриУФ-излучении 1,2,21,22,23 и облучении синим светом10,24 эти два соединения достигают возбужденного состояния. Активированный рибофлавин или FMN, который производится фотолизом, переходит в триплетное состояние, и АФК генерируются одновременно 2,25. Kumar et al. сообщили, что рибофлавин, активированный ультрафиолетовым светом, избирательно вызывает повышенное повреждение гуанинового фрагмента ДНК у патогенных микроорганизмов26. При облучении ультрафиолетовым светом фотодинамически активированный рибофлавин, как показано, способствует генерации 8-OH-dG, который является биомаркером окислительного стресса, в двухцепочечной ДНК27. Сообщается, что S. aureus и E. coli деактивируются АФК при фотолизе рибофлавина или FMN 10,24,28. Предыдущее исследование авторов показало, что фотолитические реакции с участием рибофлавина и FMN уменьшают кристаллический фиолетовый, триарилметанный краситель и антибактериальное средство, которое figure-introduction-2генерирует, и устраняют большую часть антимикробной способности кристаллической фиалки28. Когда флавинадениндинуклеотид или FMN облучают синим светом, полученные АФК продуцируют апоптоз в клетках HeLa для их отравления in vitro29. Используя фотохимическую обработку в присутствии рибофлавина, Cui et al. инактивировали лимфоциты путем ингибирования их пролиферации и выработки цитокинов30.

Фотолиз рибофлавина применяют для инактивации возбудителя крови УФ10,24, но компоненты крови могут быть нарушены при УФ-облучении30. Также сообщается, что тромбоциты, подвергшиеся воздействию ультрафиолета, постепенно повышают эффективность маркеров активации P-селектина и LIMP-CD63 на их мембранах. Необходимо исследовать цитотоксичность УФ-излучения и высокоинтенсивного облучения, и фотосенсибилизатор, который является несложным и безопасным во время фотореакции FMN с участием видимого света, будет очень полезен.

Свет более коротких длин волн имеет больше энергии и гораздо чаще вызывает серьезные повреждения клеток. Однако при наличии подходящего фотосенсибилизатора облучение низкоинтенсивным фиолетовым светом может подавлять патогенные микроорганизмы. Таким образом, фотосенсибилизация и генерация figure-introduction-3 FMN при облучении фиолетовым светом важны для изучения, чтобы определить путь, по которому АФК от фотолиза FMN увеличивает инактивацию бактерий.

Борьба с противомикробными препаратами является общей проблемой, и разработка новых антибиотиков часто занимает десятилетия. После облучения фиолетовым светом фотоинактивация, опосредованная FMN, может уничтожить патогенные бактерии окружающей среды. В этом исследовании представлен эффективный антимикробный протокол in vitro с использованием фиолетового света для стимулирования фотолиза FMN и, таким образом, генерации figure-introduction-4 для aPDI. Микробная жизнеспособность S. aureus используется для определения осуществимости FMN-индуцированного aPDI.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

1. Настройка системы фотолиза

  1. Установите шесть светодиодов (LED) (DC 12 В) на внутреннюю часть непрозрачного пластикового стаканчика (8 см х 7 см), как показано на рисунке 1 , чтобы установить систему фотолиза31.
  2. Добавьте реагенты (см. ниже) в стеклянные пробирки (диаметром 13 мм и высотой 100 мм) и закрепите трубки в верхней части чашки, как показано на рисунке 1. Поместите экспериментальную установку в помещение с постоянной температурой 25 ± 3 °C.
  3. Контролируйте и регистрируйте температуру испытательных блоков на протяжении всех фотолитических реакций с помощью инфракрасного термометра.
    ПРИМЕЧАНИЕ: На рисунке 2 показаны спектры излучения для синего, зеленого, красного и фиолетового огней, записанные с помощью калиброванного оптического спектрометра UV-Vis. Длины волн, соответствующие максимуму поглощения для синих, зеленых, красных и фиолетовых светодиодных фонарей, используемых в исследовании, составляют 465, 529, 632 и 405 нм соответственно. Светодиодные чипы могут нагревать аппарат во время экспериментов по облучению. Поэтому вся система фотореакции в каждом эксперименте помещалась в помещение, где температура поддерживалась постоянной на уровне 25 ± 3 °C.

2. Влияние длины волны света на фотолиз FMN (рисунок 3)

  1. Приготовьте раствор FMN 0,1 мМ в буфере фосфата калия (ПБ) 100 мМ (рН 7,8). Подвергайте образцы FMN (по 3 мл каждый) синему, зеленому, красному или фиолетовому свету с интенсивностью 10 Вт/м2 в течение 5 мин. Держите 3 мл раствора FMN в темноте в качестве контроля.
  2. Регистрируйте поглощение облученных образцов FMN в диапазоне 250-750 нм с помощью УФ/видимого спектрофотометра.

3. Метод восстановления нитро-голубого тетразолия (NBT) для обнаружения figure-protocol-1 (рисунок 4).

ПРИМЕЧАНИЕ: Метод восстановления NBT, используемый здесь, был немного модифицирован по сравнению с анализом фотореакции рибофлавина. Метод восстановления NBT используется для оценки уровня генерируемого figure-protocol-2 фотолиза FMN. Фотохимически возбужденный FMN сначала восстанавливается L-метионином в полухинон, который затем отдает электрон кислороду, давая начало figure-protocol-331. As-generated figure-protocol-4 снижает NBT до формазана, который имеет характерную абсорбцию при 560 нм32.

  1. Добавьте 109,3 мг L-метионина к 73,3 мл ПБ (100 мМ; рН 7,8). Вихрь раствора для растворения L-метионина.
  2. После того, как L-метионин полностью растворится, добавьте в раствор 10 мг порошка NBT и 1,53 мл 0,117 мМ FMN. На каждый 1 мл применяемого реакционного раствора (т.е. смеси FMN, L-метионина и NBT) конечные концентрации FMN, метионина и NBT составляют соответственно 2,4 х 10-6 М, 1,0 х 10-2 М и 1,6 х 10-4 М.
  3. Подвергают реакционный раствор (1 мл) облучению синим или фиолетовым светодиодом при 10 Вт/м2 в течение 1-5 мин.
  4. figure-protocol-5 Обнаруживают виды (от поглощения при 560 нм), образующиеся в результате фотохимической реакции, которая снижает NBT и производит формазан.

4. Жизнеспособность S. aureus после фотолиза FMN (рисунок 5)

  1. Передайте колонию S. aureus (BCRC 10451) из культивируемой пластины в 10 мл бульона Lysogeny, взятого в пробирке с винтовой крышкой 15 мл. Культивировать в шейкере при 37 °C в течение 16 ч.
  2. Перенесите 0,5 мл культуры в центрифужную трубку объемом 1,5 мл. Добавьте стерилизованную воду в центрифужную трубку, чтобы разбавить культуру до оптической плотности 0,5 при 600 нм (OD600) (~6 x 107 КОЕ/мл).
  3. Переложите 0,5 мл культуры в центрифужную трубку объемом 1,5 мл, центрифугу при 14 000 х г в течение 10 мин и декантирование супернатанта для получения ячейки гранулы.
  4. Добавьте 1 мл FMN-буферного раствора (30, 60 и 120 мкМ FMN в ПБ) к гранулам клеток, полученным на стадии 4.3, и вихревые. Для облученного контроля добавьте только 1 мл ПБ.
  5. Переложите по 1 мл жизнеспособных растворов бактериальных клеток, содержащих только 30 мкМ FMN и PB, в стеклянные трубки и облучите их фиолетовым светом при 10 Вт/м2 в течение 30 мин.
  6. Переложите по 1 мл жизнеспособных растворов бактериальных клеток, содержащих 30, 60 и 120 мкМ FMN и PB, в стеклянные трубки и облучите их синим светом при 20 Вт/м2 в течение 120 мин. Установите еще одну стеклянную трубку с 1 мл жизнеспособного раствора бактериальных клеток, содержащего 120 мкМ FMN, и облучите его синим светом при 20 Вт/м2 в течение 60 мин.
  7. Установите пробирки, как описано в шагах 4.5 и 4.6, и покройте их толстой алюминиевой фольгой. Эти трубки служат темными регуляторами.
  8. Держите камеру облучения (а также темные органы управления) в холодном помещении при температуре 9 ± 1 °C в течение 30-120 мин облучения.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Тепло, выделяемое светодиодными лампами, нельзя игнорировать, так как светодиодные чипы, размещенные внутри чашки, могут нагревать систему фотореакции во время экспериментов по облучению. Поэтому эксперименты проводились в холодном помещении при температуре 9 ± 1 °C.
  9. После облучения перенесите 0,2 мл из каждого реакционного раствора на пластину лурия-агара (LA). Распределите бактерии по пластине С помощью L-образного стеклянного стержня и инкубируйте в течение ночи при 37 °C.
  10. Рассчитайте количество жизнеспособных пластин и скорость инактивации S. aureus после ночного роста.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Скорость инактивации S. aureus рассчитывается как процентное снижение, которое равно [1 -I/D] ×100%, где I и D обозначают, соответственно, количество КОЕ в облученном образце и темный контроль. Процентное снижение определяется как отрицательное значение коэффициента инактивации.

5. Обнаружение figure-protocol-6 в S. aureus (рисунок 6)

  1. Подготовьте образцы S. aureus , как описано в шаге 4.
  2. Разбавить бактериальную плотность образцов стерилизованной водой до оптической плотности 0,5 при 600 нм (OD600, ~6 x 106 КОЕ/мл). Перенесите 0,5 мл культуры в центрифужную трубку объемом 1,5 мл. Центрифуга при 14 000 х г в течение 10 мин и декантирование супернатанта для получения ячейки гранулы.
  3. Добавьте 0,1093 г L-метионина, 0,1 г NBT и 25 мл FMN (400, 240 или 120 мкМ) к 75 мл ПБ. На каждый 1 мл применяемого реагента конечные концентрации FMN, метионина и NBT составляют соответственно 100 (60 или 30) х 10-6 М, 7,3 х 10-3 М и 1,2 х 10-3 М.
  4. Добавляют 1 мл каждого раствора реагента (т.е. с изменяющимися концентрациями FMN) к гранулам клеток, полученным на стадии 5.2. Облучают растворы фиолетовым светом при 10 Вт/м2 в течение 10 мин.
  5. Центрифугируйте смесь при 14 000 х г в течение 10 мин и декантируйте супернатант. Повторно суспендируют гранулу в 1 мл диметилсульфоксида (ДМСО) для извлечения восстановленного NBT. Обнаружение полученных figure-protocol-7 видов по поглощению при 560 нм.

6. Статистический анализ

  1. Выражайте данные как среднее ± стандартное отклонение (SD) трех независимых тестов.
  2. Примените гомоскедастический t-тест с двумя образцами, чтобы оценить, отличаются ли два измерения. p-значения < 0,05 считаются статистически значимыми.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Влияние длины волны света на FMN
Спектры поглощения 0,1 мМ FMN, которые облучаются с помощью синих, зеленых, красных и фиолетовых светодиодов, показаны на рисунке 3. Есть два пика для FMN (372 нм и 444 нм) для управления темным. Зеленый и красный свет не имеют никакого эффекта, потому что изменения в спектрах незначительны. С другой стороны, соответствующее поглощение FMN при 444 нм снижается примерно на 19% и 34% соответственно после облучения синим и фиолетовым светом п...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Фотосенсибилизатор увеличивает фотохимическую реакцию химических соединений с образованием АФК. Патогенные микроорганизмы могут быть инактивированы легким облучением в присутствии фотосенсибилизаторов. Это исследование определяет aPDI S. aureus за счет АФК, генерируемого облучением фиолетовым светом экзогенного фотосенсибилизатора FMN.

Как показано на рисунке 3, для FMN поглощение при 444 нм значительно снижается после 5 мин облучения с использованием фио...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Благодарности

Авторы благодарны доктору Так-Ва Вонгу и г-ну Цзун-Дже Се за их поддержку в экспериментах.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Синие, зеленые и красные светодиодные фонариVita LED Technologies Co., Тайнань, ТайваньDC 12 V 5050
ДиметилсульфоксидSigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури190186
инфракрасный термометрRaytek Co. Санта-Круз, CAMT4
LB бульонDifco Co., NJ
L-метионинSigma-Aldrich, Сент-Луис, MO1.05707
NBTBio Basic, Inc. Маркхэм, Онтарио, Канада
ЭлектроснабжениеChina tech Co., Нью-Тайбэй, ТайваньYP30-3-2
Рибофлавин 5′-фосфатSigma-Aldrich, Сент-Луис, MOR7774
RNaseNew England BioLabs, Inc. Ипсвич, Массачусетс
Счетчик солнечной энергииTenmars Electronics Co., Тайбэй, ТайваньTM-207
Staphylococcus aureus subsp. aureusBioresource Collection and Research Center (BCRC), Синьчжу, Тайвань10451
УФ-Вид оптический спектрометрOcean Optics, Данидин, ФлоридаUSB4000
УФ-Вид спектрофотометрHitachi High-Tech Science Corporation, Токио, ЯпонияU-2900
Violet LEDLong-hui Electronic Co., LTD, Дунгуань, Китай

Ссылки

  1. Jian, H. L., Cheng, C. W., Chen, L. Y., Liang, J. Y. The photochemistry of riboflavin. MC-Transaction on Biotechnology. 3, 1-11 (2011).
  2. Lin, Y., Eitenmiller, R. R., Landen, W. O. Riboflavin. Vitamin analysis for the health and food sciences. , CRC Press. 329-360 (2008).
  3. Xie, L. J., Wang, R. L., Wang, D., Liu, L., Cheng, L. Visible-light-mediated oxidative demethylation of N(6)-methyl adenines. Chemical Communications. 53 (77), 10734-10737 (2017).
  4. Tim, M. Strategies to optimize photosensitizers for photodynamic inactivation of bacteria. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 150, 2-10 (2015).
  5. Maisch, T., et al. Photodynamic inactivation of multi-resistant bacteria (PIB) - a new approach to treat superficial infections in the 21st century. Journal of the German Society of Dermatology. 9 (5), 360-366 (2011).
  6. Hamblin, M. R. Antimicrobial photodynamic inactivation: a bright new technique to kill resistant microbes. Current Opinion in Microbiology. 33, 67-73 (2016).
  7. Del Rosso, J. Q. Oral Doxycycline in the management of acne vulgaris: Current perspectives on clinical use and recent findings with a new double-scored small tablet formulation. The Journal of Clinical and Aesthetic Dermatology. 8 (5), 19-26 (2015).
  8. Wong, T. W., et al. Photodynamic inactivation of methicillin-resistant Staphylococcus aureus by indocyanine green and near infrared light. Dematologica Sinica. 36 (1), 8-15 (2018).
  9. Yuann, J. M. P., et al. Effects of free radicals from doxycycline hyclate and minocycline hydrochloride under blue light irradiation on the deactivation of Staphylococcus aureus, including a methicillin-resistant strain. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 226, 112370(2022).
  10. Liang, J. Y., Cheng, C. W., Yu, C. H., Chen, L. Y. Investigations of blue light-induced reactive oxygen species from flavin mononucleotide on inactivation of E. coli. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 143, 82-88 (2015).
  11. Yang, M. J., et al. Effects of blue-light-induced free radical formation from catechin hydrate on the inactivation of Acinetobacter baumannii, Including a carbapenem-resistant strain. Molecules. 23 (7), 1631(2018).
  12. Yuann, J. M. P., et al. A study of catechin photostability using photolytic processing. Processes. 9 (2), 293(2021).
  13. Yuann, J. M. P., Wang, J. S., Jian, H. L., Lin, C. C., Liang, J. Y. Effects of Clinacanthus nutans (Burm. f) Lindau leaf extracts on protection of plasmid DNA from riboflavin photoreaction. MC-Transaction on Biotechnology. 4 (1), 45-59 (2012).
  14. Rineh, A., et al. Attaching NorA efflux pump inhibitors to methylene blue enhances antimicrobial photodynamic inactivation of Escherichia coli and Acinetobacter baumannii in vitro and in vivo. Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters. 28 (16), 2736-2740 (2018).
  15. Dai, T., et al. Photodynamic therapy for Acinetobacter baumannii burn infections in mice. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 53 (9), 3929-3934 (2009).
  16. Nitzan, Y., Ashkenazi, H. Photoinactivation of Acinetobacter baumannii and Escherichia coli B by a cationic hydrophilic porphyrin at various light wavelengths. Current Microbiology. 42 (6), 408-414 (2001).
  17. Tseng, C. C., et al. Altered susceptibility to the bactericidal effect of photocatalytic oxidation by TiO2 is related to colistin resistance development in Acinetobacter baumannii. Applied Microbiology and Biotechnology. 100 (19), 8549-8561 (2016).
  18. Boluki, E., et al. Antimicrobial activity of photodynamic therapy in combination with colistin against a pan-drug resistant Acinetobacter baumannii isolated from burn patient. Photodiagnosis and Photodynamic Therapy. 18, 1-5 (2017).
  19. Yang, M. Y., et al. Blue light irradiation triggers the antimicrobial potential of ZnO nanoparticles on drug-resistant Acinetobacter baumannii. Journal of Photochemistry and Photobiology B, Biology. 180, 235-242 (2018).
  20. Code of Federal Regulations. , Available from: https://www.gpo.gov/fdsys/pkg/CFR-2009-title21-vol6/pdf/CFR-2009-title21-vol6-sec582-5695.pdf (2022).
  21. Lu, C. Y., et al. Generation and photosensitization properties of the oxidized radical of riboflavin: a laser flash photolysis study. Journal of Photochemistry and Photobiology B, Biology. 52 (1-3), 111-116 (1999).
  22. Sato, K., et al. The primary cytotoxicity in ultraviolet-a-irradiated riboflavin solution is derived from hydrogen peroxide. The Journal of Investigative Dermatology. 105 (4), 608-612 (1995).
  23. Tripathi, A. K., et al. Attenuated neuroprotective effect of riboflavin under UV-B irradiation via miR-203/c-Jun signaling pathway in vivo and in vitro. Journal of Biomedical Science. 21 (1), 39(2014).
  24. Liang, J. Y., et al. Blue light induced free radicals from riboflavin on E. coli DNA damage. Journal of Photochemistry and Photobiology B, Biology. 119, 60-64 (2013).
  25. Ottaway, P. B. The Technology of Vitamins in Food. , Chapman and Hall. London. Ch. 5 233-244 (1993).
  26. Kumar, V., et al. Riboflavin and UV-light based pathogen reduction: extent and consequence of DNA damage at the molecular level. Photochemistry and Photobiology. 80 (1), 15-21 (2004).
  27. Ito, K., Inoue, S., Yamamoto, K., Kawanishi, S. 8-Hydroxydeoxyguanosine formation at the 5'site of 5'-GG-3'sequences in double-stranded DNA by UV radiation with riboflavin. Journal of Biological Chemistry. 268 (18), 13221-13227 (1993).
  28. Liang, J. Y., Yuann, J. M. P., Hsie, Z. J., Huang, S. T., Chen, C. C. Blue light induced free radicals from riboflavin in degradation of crystal violet by microbial viability evaluation. Journal of Photochemistry and Photobiology B, Biology. 174, 355-363 (2017).
  29. Yang, M. Y., Chang, C. J., Chen, L. Y. Blue light induced reactive oxygen species from flavin mononucleotide and flavin adenine dinucleotide on lethality of HeLa cells. Journal of Photochemistry and Photobiology B, Biology. 173, 325-332 (2017).
  30. Cui, Z., Huang, Y., Mo, Q., Wang, X., Qian, K. Inactivation of lymphocytes in blood products using riboflavin photochemical treatment with visible light. Photochemistry and Photobiology. 84 (5), 1195-1200 (2008).
  31. Wong, T. W., Cheng, C. W., Hsieh, Z. J., Liang, J. Y. Effects of blue or violet light on the inactivation of Staphylococcus aureus by riboflavin-5′-phosphate photolysis. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 173, 672-680 (2017).
  32. Russell, L. F., Vanderslice, J. T. Comprehensive review of vitamin B2 analytical methodology. Journal of Micronutrient Analysis. 8, 257-310 (1990).
  33. Cheng, C. W., Chen, L. Y., Chou, C. W., Liang, J. Y. Investigations of riboflavin photolysis via coloured light in the nitro blue tetrazolium assay for superoxide dismutase activity. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 148, 262-267 (2015).
  34. Huang, S. T., et al. Effects of 462 nm light-emitting diode on the inactivation of Escherichia coli and a multidrug-resistant by tetracycline photoreaction. Journal of Clinical Medicine. 7 (9), 278(2018).
  35. Barua, M. G., Escalada, J. P., Bregliani, M., Pajares, A., Criado, S. Antioxidant capacity of (+)-catechin visible-light photoirradiated in the presence of vitamin B2. Redox Report: Communications in Free Radical Research. 22 (6), 282-289 (2017).
  36. Castillo, C., Criado, S., Díaz, M., García, N. A. Riboflavin as a sensitiser in the photodegradation of tetracyclines. Kinetics, mechanism and microbiological implications. Dyes and Pigments. 72 (2), 178-184 (2007).
  37. Huvaere, K., Sinnaeve, B., Van Bocxlaer, J., Skibsted, L. H. Flavonoid deactivation of excited state flavins: reaction monitoring by mass spectrometry. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 60 (36), 9261-9272 (2012).
  38. Massad, W. A., Bertolotti, S., Garcia, N. A. Kinetics and mechanism of the vitamin B2-sensitized photooxidation of isoproterenol. Photochemistry and Photobiology. 79 (5), 428-433 (2004).
  39. Maclean, M., MacGregor, S. J., Anderson, J. G., Woolsey, G. High-intensity narrow-spectrum light inactivation and wavelength sensitivity of Staphylococcus aureus. FEMS Microbiology Letters. 285 (2), 227-232 (2008).
  40. Huang, S. T., et al. The influence of the degradation of tetracycline by free radicals from riboflavin-5'-phosphate photolysis on microbial viability. Microorganisms. 7 (11), 500(2019).
  41. Maisch, T., et al. Fast and effective photodynamic inactivation of multiresistant bacteria by cationic riboflavin derivatives. PLoS One. 9 (12), 111792(2014).
  42. Grijzenhout, M., et al. Ultraviolet-B irradiation of platelets induces a dose-dependent increase in the expression of platelet activation markers with storage. British Journal of Haematology. 83 (4), 627-632 (1993).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Фотолиз рибофлавинаинактивация видимым светомфлавинмононуклеотидStaphylococcus aureusактивные формы кислородаопределение супероксид-радикалавосстановление NBTоблучение фиолетовым светомбактериальная инактивацияфотосенсибилизирующая терапия
Инактивация патогенов посредством фотолиза рибофлавина-5'-фосфата в видимом свете
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.