Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Гетеротопная модель мыши для изучения трансплантации гортани

2.4K просмотров

DOI:

10.3791/63619

13 января 2023 г.

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Целью этой рукописи является описание микрохирургических этапов, необходимых для выполнения гетеротопной трансплантации гортани у мышей. Преимуществами этой мышиной модели по сравнению с другими животными моделями трансплантации гортани являются ее экономическая эффективность и доступность иммунологических анализов и данных.

Аннотация

Гетеротопная трансплантация гортани, хотя и является технически сложной процедурой, предлагает больше научного анализа и экономических преимуществ по сравнению с другими моделями животных. Хотя эта техника впервые описана Шипчандлером и др. в 2009 году, она не получила широкого распространения, возможно, из-за трудностей в изучении микрохирургической техники и времени, необходимого для ее освоения. В этой статье подробно описываются хирургические этапы, а также потенциальные подводные камни, которых следует избегать, чтобы стимулировать эффективное использование этой техники.

В этой модели двусторонние сонные артерии донорской гортани анастомозируются к сонной артерии реципиента и наружной яремной вене, что позволяет кровотоку через трансплантат. Кровоток может быть подтвержден интраоперационно визуализацией наполнения крови в двусторонних сонных артериях трансплантата, покраснением щитовидной железы трансплантата и кровотечением из микрососудов в трансплантате. Важнейшими элементами успеха являются деликатное сохранение сосудов трансплантата, проведение артериотомии и венотомии правильного размера, а также использование соответствующего количества швов на артериально-артериальных и артериально-венозных анастомозах для обеспечения безопасности сосудов без утечки и предотвращения окклюзии.

Любой желающий может овладеть этой моделью с достаточной подготовкой и выполнить процедуру примерно за 3 часа. В случае успешного выполнения эта модель позволяет проводить иммунологические исследования с легкостью и по низкой цене.

Введение

Для пациентов, страдающих непоправимым повреждением гортани или раком гортани, тотальная ларингэктомия часто является единственным вариантом1. Тотальная ларингэктомия оставляет пациентов без возможности дышать и говорить самостоятельно, в дополнение к переживанию социального и психологического стресса2. Пациенты с раком гортани, которые нуждаются в тотальной ларингэктомии, являются отличными потенциальными кандидатами на трансплантацию гортани. В то время как трансплантация гортани человека в условиях непоправимого повреждения гортани была выполнена, аллотрансплантация гортани в настоящее время избегается у этих пациентов из-за страха рецидива опухоли, возможности хронического отторжения и инфекций донорского происхождения3. Иммуносупрессия является основной причиной этих проблем. Резкая потеря первого пациента с частичной трансплантацией гортани из-за рецидива опухоли после обычного иммуносупрессивного лечения является свидетельством того, что соответствующий иммуносупрессивный режим должен быть разработан до дальнейших попыток трансплантации у пациентов с раком гортани 4,5.

Чтобы лучше понять иммунный ответ хозяина на пересаженную гортань, первая модель трансплантации гортани у крыс была разработана в 1992 году Стромом, а улучшения в хирургической технике были сделаны в 2002 году 6,7. Хотя эта модель эффективна для изучения трансплантации гортани, отсутствие специфических для крыс иммунологических агентов и более высокая стоимость, связанная с моделями крыс, привели к разработке новой мышиной модели для изучения трансплантации гортани в 2009году8.

Основным применением описанной методики является изучение различных схем иммуносупрессивных препаратов при трансплантации гортани. Улучшение современных иммуносупрессивных методов лечения может расширить пул кандидатов и привести к безопасной трансплантации у больных раком. Преимуществами этой мышиной модели являются ее экономическая эффективность и широкая доступность иммунологических данных и реагентов.

Команды, работающие над иммуносупрессивными схемами лечения трансплантации гортани, могут использовать этот метод для сбора большого объема иммунологических данных, а различные схемы лечения могут быть быстро протестированы и сопоставлены. Другие потенциальные методы лечения, которые могут модулировать иммунный ответ на трансплантацию, такие как инъекции стволовых клеток, также могут быть протестированы с использованием этой модели. Наконец, эксперименты могут быть разработаны для наблюдения долгосрочных системных эффектов трансплантации гортани путем продления периода наблюдения.

Метод, описанный здесь, использует сквозные анастомозы для обеспечения артериального и венозного потока к гетеротопному трансплантату гортани. Трансплантат представляет собой ларинготрахеэзофагеальный (LTE) комплекс, включающий гортань, щитовидную железу, паращитовидные железы, трахею и пищевод донора, с двусторонними сонными артериями и нетронутыми ножками. Одна донорская сонная артерия анастомозируется к сонной артерии реципиента и обеспечивает артериальный кровоток, в то время как другая донорская сонная артерия анастомозируется к наружной яремной вене реципиента и обеспечивает венозный кровоток (рисунок 1).

Несколько модификаций были внесены в хирургическую технику модели крысы, чтобы обеспечить успех в мышиной модели. Например, вместо инъекционного агента использовался ингаляционный анестетик для повышения контроля над глубиной анестезии и уменьшения осложнений. Непрерывное наложение швов применяется при артериально-артериальном анастомозе у крыс; однако из-за меньшего размера сосудов мышей это технически сложно и может вызвать сужение просвета сосуда7. В результате прерывистые швы используются в мышиной модели и приводят к улучшению проходимости сосудов. Кроме того, в модели крысы верхняя ножка щитовидной артерии (STA) рассечена и визуализирована. Учитывая меньший размер STA у мышей, это рассечение может привести к повреждению и даже трансекции STA. В результате он не препарируется в мышиной модели. Вместо этого близлежащая фасция сохраняется, чтобы гарантировать, что STA остается нетронутым.

Основные потенциальные подводные камни этого метода включают повреждение донорских ножек комплекса LTE, проведение артериотомии или венотомии неправильного размера, окклюзию сосудов в местах анастомоза или оставление пробелов в местах анастомоза, которые могут вызвать кровотечение. Чтобы избежать этих ошибок, необходимо соблюдать осторожность при приобретении донорского трансплантата, оставляя манжету ткани вокруг ножки STA. Артериотомия и венотомия должны быть достаточно большими, чтобы обеспечить кровоток, но достаточно маленькими, чтобы предотвратить утечку. Для анастомозов должно быть использовано соответствующее количество швов, чтобы закрыть любые промежутки, но не слишком много, чтобы закрыть сосуды.

Если получено знакомство с микрохирургическими методиками, эту процедуру можно выполнить примерно через 3 ч. Эта модель трансплантации гортани может быть надежно выполнена на мышах и использована для изучения иммунного ответа хозяина после васкуляризированной композитной аллотрансплантации.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Это исследование было выполнено в соответствии с Комитетом по уходу и использованию животных клиники Майо (IACUC). Мыши BalbC (10-12 недель) использовались в качестве доноров, а мыши C57 / BL6 (10-12 недель) использовались в качестве реципиентов, потому что их основные комплексы гистосовместимости, H-2Db и H-2Kb, соответственно, иммунологически несовместимы, и поэтому иммунный ответ на трансплантат может быть дополнительно изучен. Все инструменты, используемые во время операции, были стерилизованы (см. Дополнительный рисунок S1 и Дополнительный рисунок S2), а хирургическое поле оставалось стерильным на протяжении всего протокола в соответствии с инструкциями IACUC.

1. Донорская хирургия и закупка трансплантата

  1. Вводят донору бупренорфин с пролонгированным высвобождением (3,25 мг/кг массы тела подкожно) за 30 мин до начала процедуры. Поместите мышь в ящик для анестезии грызунов для индукции анестезии при 3% изофлуране, доставляемом потоком 1 л /мин O2 . После того, как животное будет полностью обезболено, перенесите мышь в область бритья и введите 1,5% изофлурана с потоком 1 л/мин O2 для поддержания анестезии. Подтвердите глубину анестезии ущемлением пальца ноги.
  2. Побрейте грудь и шею мыши до линии челюсти и нанесите крем для депиляции. Через 30 с протрите крем стерильной марлевой прокладкой, смоченной водой, и перенесите мышь в хирургическую область.
  3. Нанесите смазку для глаз мыши на глаза мыши. Поместите мышь на драпированную дополнительную грелку, чтобы обеспечить правильную температуру тела.
  4. Обездвижьте мышь, трижды подготовьте хирургическую область повидон-йодом и спиртом, а затем задрапируйте мышь.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Проверьте глубину анестезии с помощью щипка пальца ноги и поддерживайте анестезию на уровне 1,5% изофлурана и 1 л / мин O2 потока через маску для лица на протяжении всей процедуры.
  5. Сделайте небольшой горизонтальный разрез, чуть превосходящий надгрудничную выемку. Используя тонкие ножницы, поднимите кожу двусторонне через этот разрез до нижней челюсти. Иссечение трапециевидного сегмента кожи, приводящего к воздействию двусторонних слюнных желез, стерномастоидных мышц, дигастральных мышц и верхнего аспекта грудины (рисунок 2А).
  6. Иссечение двусторонних слюнных желез с помощью прижигания в верхней части, где визуализируется небольшая вена, проходящая через железу (рисунок 2А).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Если не принять меры для прижигания сосуда перед удалением железы, на этом этапе может возникнуть значительное кровотечение.
  7. Осторожно втягивайте лимфоидную и жировую ткани сбоку, чтобы обнажить грудиномастоидные и ремешковые мышцы. Рассекайте двусторонние грудиномастоидные мышцы от окружающих тканей и втягивайте их латерально с помощью втягивателей.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Этот маневр полностью обнажит комплекс LTE с ремешковыми мышцами и обеспечит комфортное рабочее пространство для рассечения сонных артерий (рисунок 2B).
  8. Сделайте разрез средней линии между мышцами ремешка и двусторонне иссекните их, заботясь о том, чтобы не повредить подлежащую щитовидную железу и оставив ее на комплексе LTE.
    ПРИМЕЧАНИЕ: После этого этапа должны быть видны двусторонние сонные артерии (рисунок 2C).
  9. По окружности рассекают общие сонные артерии до уровня ключицы ниже и до уровня бифуркации сонной артерии выше. Рассечение блуждающего нерва и внутренней яремной вены от сонных артерий. Не включайте их в закупаемый трансплантат.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Верхняя щитовидная артерия может быть замечена только выше бифуркации, путешествующей медиально. Оставьте тонкую фасцию, окружающую этот сосуд, неповрежденной и не пытайтесь рассечь ее по окружности. Этот сосуд снабжает кровоток к комплексу LTE и будет служить ножкой после трансплантации. Сохранение этого судна имеет первостепенное значение.
  10. Рассекайте внутренние и наружные сонные артерии достаточно далеко, чтобы иметь возможность связывать и разделять. Если есть трудности с визуализацией сосудов, используйте отдельный втягиватель для втягивания дигастральных мышц сбоку.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Избегайте рассечения наружной сонной артерии ближе к бифуркации, чтобы предотвратить любое повреждение верхней артерии щитовидной железы. На этом этапе можно встретить затылочную артерию, которая ответвляется от наружной сонной артерии и следует параллельно внутренней сонной артерии, и ее не следует путать с внутренней сонной артерией, которая больше и находится глубже (рисунок 2D).
  11. Использование 8-0 нейлоновые швы, перевязывают внутренние сонные артерии на 2 - 3 мм лучше, чем сонная бифуркация. Лигат наружных сонных артерий не менее чем на 3 мм превосходит точку ветвления верхней щитовидной артерии.
    ПРИМЕЧАНИЕ: После этих перевязок комплекс LTE будет педикирован через верхние артерии щитовидной железы к двусторонним сонным артериям.
  12. Обжигайте общие сонные артерии на уровне грудины и перерезайте все перевязанные сосуды двусторонне. Держите сосудистые ножки поверх комплекса LTE, чтобы избежать случайного повреждения во время дальнейшего рассечения. Чтобы предотвратить утечку газа или непреднамеренную потерю анестезии, убедитесь, что срок годности животного истек, прежде чем делать какие-либо порезы дыхательных путей.
  13. Разделите инфрагиоидные мышцы на уровне подъязычной кости. Создают переднюю глоточную глотокомию, как раз уступающую подъязычной. Проведите разрез вниз к превертебральной фасции, чтобы лучше освободить комплекс LTE.
  14. Трансектируйте трахею ниже пятого трахеального кольца и проведите разрез через пищевод вниз к превертебральной фасции, чтобы освободить комплекс LTE ниже. Освободите трахею и пищевод от подлежащей превертебральной фасции с нижнего к верхнему направлению.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Держите сосудистые ножки поверх комплекса LTE, чтобы избежать случайного повреждения во время дальнейшего рассечения.
  15. Создают переднюю глоточную глотокомию, как раз уступающую подъязычной. Проведите разрез вниз к превертебральной фасции, чтобы лучше освободить комплекс LTE. Разделите все оставшиеся лимфоидные или соединительнотканные соединения между комплексом LTE и окружающими тканями. Удалите трансплантат.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Трансплантат содержит донорскую гортань, трахею, щитовидную железу, паращитовидные железы, пищевод и мышцы гортани в качестве составной единицы (рисунок 2E).

2. Подготовка трансплантата

  1. Поместите полученный трансплантат в стерильную чашку Петри и вымойте его обычным физиологическим раствором, чтобы избавиться от любых сгустков крови. Используя микрощипцы, осторожно дойте кровь и сгустки из двусторонних сонных артерий. Расширяют двусторонние сонные артерии с помощью микродилаторов 1 мм.
  2. Используя иглу с тупым наконечником 30 г, введите примерно 2 мл гепаринизированного физиологического раствора в каждую сонную артерию, чтобы промыть трансплантат.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Кровь и физиологический раствор могут быть замечены вымыванием из контралатеральной сонной артерии и небольших свободных окончаний сосудов, что подтверждает интактные верхние артерии щитовидной железы.
  3. Иссечь адвентицию от артериальных концов, чтобы у них были чистые края для анастомоза.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Трансплантат можно оставить в гепаринизированном физиологическом растворе и сделать небольшой перерыв на срок до 3 ч, прежде чем пересаживать его реципиенту9.

3. Реципиентная хирургия и анастомоз сосудов

  1. Подготовьте мышь-реципиент таким же образом, как описано для донора после этапа индукции анестезии, бритья и хирургической подготовки. Вводят мышке-реципиенту анальгетик пролонгированного высвобождения подкожно за 30 мин до начала операции.
  2. Используя скальпель, сделайте разрез средней линии шеи, простирающийся от линии челюсти выше грудины ниже. Приподнимите кожу с левой стороны и втяните ее сбоку.
  3. Иссекайте левую слюнную железу, прижигая высшие сосуды, как описано ранее. Иссекайте жировую и лимфоидную ткань, разделяя любые видимые сосуды низкотемпературным прижиганием, следя за тем, чтобы не повредить подлежащую внешнюю яремную вену (рисунок 3А).
  4. Рассекните наружную яремную вену по окружности. Используйте не менее 5 мм прозрачной длины сосуда для анастомоза. Используйте низкотемпературное прижигание или лигат и разделите любые относительно крупные вены, ответвляющиеся от яремной вены.
  5. Рассекните грудиномастоидную мышцу и втяните ее латерально. Держите рассеченную вену защищенной позади мышцы, чтобы избежать прямого контакта с втягивающим устройством.
  6. Иссекните мышцы левого ремня, чтобы получить доступ к сонной артерии реципиента. По окружности рассекают общую сонную артерию от ключицы ниже до бифуркации сонной артерии (рисунок 3B).
  7. Пропустите фоновый материал под наружную яремную вену и нанесите двойные приближающиеся зажимы сосуда V3.
  8. Поместите нейлоновый шов 10-0 через переднюю стенку наружной яремной вены в месте нужной венотомии и используйте этот шов, чтобы вытянуть переднюю часть и зафиксировать сосуд.
  9. Нарежьте на шов микросубами достаточно глубоко, чтобы создать венотомию подходящего размера однощелевую и обеспечить, чтобы разрез полностью проходил через венозную стенку.
  10. Используя иглу с тупым наконечником 30 г, промыть внутреннюю часть вены гепаринизированным физиологическим раствором.
  11. Поместите донорский комплекс LTE между левой сонной артерией реципиента и левой наружной яремной веной. Выровняйте свободный конец донорской левой сонной артерии по направлению к левой наружной яремной вене реципиента и острыми ножницами скосите концы сосудов.
  12. Используя четыре 10-0 нейлоновых прерванных швов, анастомоз донора левой сонной артерии и реципиента оставила наружную яремную вену сквозным способом.
  13. Сдвиньте фоновый материал под общую сонную артерию реципиента и поместите двойные приближающиеся зажимы сосуда А3 на общую сонную артерию реципиента. Создайте артериотомию таким же образом, как и венотомию.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Убедитесь, что артериотомия имеет тот же размер, что и просвет донорской сонной артерии. Если он слишком большой, после снятия зажимов возникнет обильное кровотечение. Если он слишком мал, приток крови к трансплантату будет затруднен.
  14. Анастомоз донорской правой сонной артерии к левой сонной артерии реципиента сквозным способом с использованием шести 10-0 нейлоновых прерванных швов.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Правильная микрососудистая техника должна соблюдаться во всем анастомозе сосудов. Прохождение через заднюю стенку приводит к значительному сужению кровотока, что ставит под угрозу выживание трансплантата. Из-за небольших размеров сосудов пытаться переделать швы очень сложно.
  15. Снимите зажимы на венозной стороне. При обнаружении кровотечения примените мягкое давление ватными наконечниками.
  16. Снимите зажимы на артерии и сразу же приложите мягкое давление ватными наконечниками.
    ПРИМЕЧАНИЕ: На этом этапе ожидается некоторое кровотечение, которое обычно прекращается через 1 мин при мягком давлении.
  17. Проверьте целостность кровотока в артерии и вене.
    ПРИМЕЧАНИЕ: При интактном артериальном потоке обычно наблюдается пульсация донорской сонной артерии, и донорская щитовидная железа меняется от своего покрасневшего прозрачного цвета обратно к своему первоначальному красноватому цвету. Также может наблюдаться красная окраска малых судов на комплексе LTE.
  18. Орошайте операционное поле гепаринизированным физиологическим раствором и закройте разрез кожи 5-0 монофиламентным швом в режиме бега. Нанесите антибиотическую мазь или кожный клей на разрез.
  19. Введите 1 мл теплого физиологического раствора подкожно, чтобы учесть потерю жидкости во время операции.
  20. Прекратите анестезию и переведите мышь в клетку восстановления. Наблюдайте за мышью на грелке до тех пор, пока она полностью не проснется, чтобы избежать переохлаждения.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Подтверждение успешной трансплантации
Используя протокол, описанный выше, можно оценить приток крови к комплексу LTE, наблюдая пульсацию донорской сонной артерии после удаления зажимов сосудов. Пульсация обычно видна, а немедленная красная окраска донорской артерии подтверждает активный кровоток (рисунок 4А). Если анастомоз не эффективен, артерия не будет иметь пульсации, выглядеть частично разрушенной и иметь бледный цвет (рисунок 4B).

<...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Заболеваемость и распространенность рака гортани увеличились на 12% и 24% соответственно за последние три десятилетия, и многие из этих пациентов проходят ларингэктомию для лечения10. Эта процедура значительно ухудшает качество жизни человека, а потому желательно альтернативное лечение. Васкуляризированная композитная аллотрансплантация гортани может улучшить способность пациента дышать и говорить; тем не менее, исследования все еще необходимы, прежде чем этот метод может быть использован клиничес...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов. Расходы на проезд и проживание Эгехана Салепчи на исследования финансировались Советом по научным и технологическим исследованиям Турции (TUBITAK).

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить Рэндалла Райша за его отличную видеографию и помощь в редактировании.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
#1 СкрепкиСкобыOP-7404Скрепки имеют ручную форму для использования в качестве втягивающих
шприцев с инсулином 1 куб. см BD 32941227 G 5/8
10-0 Ethilon нейлоновый шовный материалEthicon2870G
25 G Прецизионная игла для скольженияBD 3051251 в
3 мл шприц с наконечником Luer-LokBD 
30 г стерильные стандартные тупые иглыCellinkNZ5300505001
5-0 Моноакриловый шовный материалEthiconY822G
8-0 Нейлоновый шовный материал Ethicon2815G
Щипцы АдсонаFine Science Tools11027-12Прямой, 1 x 2 зуба
Ножницы AdventitiaS& TSAS-1019 мм, 10 см, прямые
угловые щипцыFine Science Tools00109-1145/11 см
Искусственные слезы Смазка Офтальмологическая мазьAkorn Animal Health59399-162-35
Пластырь Ткань Кончик пальцаCardinal Healthcare299399
раствор бетадина ТампоныPurdue Products67618-153-01
Бупренекс для инъекцийCIII12495-0757-10,3 мг/мл
Зажим для наложения щипцов без замкаAccurate Surgical & Научные приборыASSI. CAF514 см
Ватные палочкиPuritan10806-001-PK
DeBakey щипцы
Dermabond MiniCardinal Healthcare315999
Доски для препарированияMopec22-444-314
Falcon Стерильная одноразовая чашка Петри Corning25373-04135 мм
Тонкие ножницыИнструменты для тонкой науки14029-10Изогнутый Острый-Тупой 10 см
Золотой A5 2-скоростной нож для лезвия Oster008OST-78005-140#10
Средство для удаления волос Чувствительная формула2260000033
гепариномMeitheal Pharmaceuticals71288-4O2-1010 000 единиц USP на 10 мл
Изофлуранпирамал Здравоохранение66794-013-25
Низкотемпературный микротонкий наконечник ПрижиганиеBovie MedicalAA90
Mercian Visibility Фоновый материалSynovis Micro CompaniesVB3Зеленый
микрососудистый аппроксиматор Зажим без рамкиAccurate Surgical & ампер; Научные приборыASSI. ABB11V0,4-1 мм Диаметр сосуда
Набор маски для лица мышиXenotecXRK-SМаленький
иглодержательS& TC-14 W5,5", 8 мм, 0,4 мм
Press n' SealGlad70441
СкальпельBraunBA21010 лезвий
Single Mini VesselClamp Accurate Surgical & Научные приборыASSI. ABB11M.31(8 мм), 3 x 1 мм Rnd. Bl.,
СтереомикроскопOlympusSZ61
Стерильные спиртовые салфеткиFisherbrand06-669-62
Стерильные одноразовые простыниDynarexDYN4410-CASE
Стерильные марлевые салфеткиDukal1212
Стерильный физраствор Hospira236173NaCl 0,9%
Стерильные хирургические перчаткиGammex851_A
прямые щипцыFine Science Tools00108-1111 см
Тканевые щипцыAccurate Surgical & Научные приборыASSI. JFLP313,5 см, 8 мм, 0,3 мм
Ножницы с рисунком Точная хирургия и Научные приборыASSI. SDC15RV15 см, 8 мм, изогнутое лезвие 7 мм
Пружинные ножницы VannasFine Science Tools15000-103 мм режущая кромка, изогнутый
наконечник расширителя сосуда Fine Science Tools00126-11Диаметр 0,1 мм / Угловой 10/11 см
Расширитель сосуда, Классическая линияS& TD-5a.3 Ш9 мм, 0,3 мм, угловой 10
309657 черной пары

Ссылки

  1. Strome, M., et al. Laryngeal transplantation and 40-month follow-up. The New England Journal of Medicine. 344 (22), 1676-1679 (2001).
  2. Hilgers, F. J. M., Ackerstaff, A. H., Aaronson, N. K., Schouwenburg, P. F., Zandwijk, N. Physical and psychosocial consequences of total laryngectomy. Clinical Otolaryngology. 15 (5), 421-425 (1990).
  3. Heyes, R., Iarocci, A., Tchoukalova, Y., Lott, D. G. Immunomodulatory role of mesenchymal stem cell therapy in vascularized composite allotransplantation. Journal of Transplantation. 2016, (2016).
  4. Kluyskens, P., Ringoir, S. Follow-up of a human larynx transplantation. Laryngoscope. 80 (8), 1244-1250 (1970).
  5. Krishnan, G., et al. The current status of human laryngeal transplantation in 2017: A state of the field review. Laryngoscope. 127 (8), 1861-1868 (2017).
  6. Strome, S., Sloman-Moll, E., Wu, J., Samonte, B. R., Strome, M. Rat model for a vascularized laryngeal allograft. Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 101 (11), 950-953 (1992).
  7. Lorenz, R. R., Dan, O., Nelson, M., Fritz, M. A., Strome, M. Rat laryngeal transplant model: technical advancements and a redefined rejection grading system. Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 111 (12), 1120-1127 (2002).
  8. Shipchandler, T. Z., et al. New mouse model for studying laryngeal transplantation. Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 118 (6), 465-468 (2009).
  9. Strome, M., Wu, J., Strome, S., Brodsky, G. A comparison of preservation techniques in a vascularized rat laryngeal transplant model. The Laryngoscope. 104 (6), 666-668 (1994).
  10. Nocini, R., Molteni, G., Mattiuzzi, C., Lippi, G. Updates on larynx cancer epidemiology. Chinese Journal of Cancer Research. 32 (1), 18-25 (2020).
  11. Strome, S., Sloman-Moll, E., Wu, J., Samonte, B. R., Strome, M. Rat model for a vascularized laryngeal allograft. Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 101 (11), (1992).
  12. Work, W. P., Boles, R. Larynx: Replantation in the dog. Archives of Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 82 (4), 401-402 (1965).
  13. Birchall, M. A., et al. Model for experimental revascularized laryngeal allotransplantation. British Journal of Surgery. 89 (11), 1470-1475 (2002).
  14. Nakai, K., et al. Rat model of laryngeal transplantation with normal circulation maintained by combination with the tongue. Microsurgery. 23 (2), 135-140 (2003).
  15. Lott, D. G., Dan, O., Lu, L., Strome, M. Long-term laryngeal allograft survival using low-dose everolimus. Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 142 (1), 72-78 (2010).
  16. Lott, D. G., Russell, J. O., Khariwala, S. S., Dan, O., Strome, M. Ten-month laryngeal allograft survival with use of pulsed everolimus and anti-αβ T-cell receptor antibody immunosuppression. Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 120 (2), 131-136 (2011).
  17. Lott, D. G., Dan, O., Lu, L., Strome, M. Decoy NF-κB fortified immature dendritic cells maintain laryngeal allograft integrity and provide enhancement of regulatory T cells. The Laryngoscope. 120 (1), 44-52 (2010).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Модель трансплантации на мышахгетеротопическая трансплантацияанастомоз сонной артериинаружная яремная венамикрохирургическая техникаиммунологические исследованиясосудистый анастомозсохранение трансплантатаотторжение органов