Был разработан метод с использованием плодов зеленого кофе (ГФ) для проверки токсичности инсектицидов против бура кофейной ягоды (CBB). Инсектициды или токсичные вещества применялись к дезинфицируемым ГФ до или после заражения ЦББ. Оценивалась смертность насекомых, репеллентность и репродуктивная способность, в дополнение к другим параметрам.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Методология тестирования контрольных агентов и инсектицидов против кофейной ягоды Borer Hypothenemus hampei
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Прежде чем рекомендовать инсектициды для обработки кофейной ягоды (CBB) Hypothenemus hampei, полезно знать смертность и репеллентность этих инсектицидов против взрослых насекомых или их влияние на репродуктивный выход. Однако имеющиеся в настоящее время методы оценивают только смертность взрослых, ограничивая выбор новых инсектицидов другим способом действия. В этой работе были изучены различные экспериментальные методы для выявления различных эффектов на ЦБД в лабораторных условиях. Для этого плоды зеленого кофе (ГФ) собирали и дезинфицировали погружением в раствор гипохлорита натрия с последующим ультрафиолетовым облучением. Параллельно взрослых CBB из колонии дезинфицировали погружением в раствор гипохлорита натрия. Для оценки защиты плодов (прединфекции) плоды помещали в пластиковые коробки, а инсектициды применяли. Затем взрослые CBB были выпущены со скоростью два CBB на GF. GF оставляли в контролируемых условиях для оценки заражения CBB и выживаемости через 1, 7, 15 и 21 день. Для оценки эффективности инсектицидов после заражения CBB (постинфекцией) взрослых CBB выпускали в ГФ в соотношении 2:1 в течение 3 ч при 21 °C. Зараженные плоды, показывающие взрослых особей CBB с частично обнаженными брюшками, были отобраны и помещены в 96-луночные стойки, а CBB, бурящиеся в плодах, были обработаны напрямую. Через 20 дней плоды были рассечены, и биологические стадии CBB внутри каждого плода были зарегистрированы. GF служили субстратами, которые имитируют природные условия для оценки токсичных, химических и биологических инсектицидов против CBB.
Введение
Кофейный ягодный бур (CBB), Hypothenemus hampei, был впервые обнаружен в 1988 году в Колумбии и с тех пор стал самым важным видом вредителей кофейной культуры. Самки CBB оставляют натальные плоды уже оплодотворенными, ища новые плоды, руководствуясь летучими химическими веществами, которые они выделяют 1,2. Полный цикл выполняется в течение 23 дней3 при температуре 25 °C. Цикл начинается с того, что самка-основатель проникает в семя и откладывает яйца в эндосперм плода. Обездоленные личинки едят семена. Если в этот момент препарировать плоды, то можно будет наблюдать как за са....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
ПРИМЕЧАНИЕ: В настоящем протоколе рассматриваются различные методы выявления различных видов воздействия на ЦБД в лабораторных условиях.
1. Коллекция фруктов
- Выбирайте ГФ с возрастом развития ~120-150 дней после цветения с деревьев на кофейной плантации рано утром.
2. Дезинфекция фруктов20
- Принесите в лабораторию около 300 ГФ. Выберите однородные по размеру и здоровые ГФ и извлеките цветоносы.
- Окуните ГФ в мыльный раствор (2 мл жидкого мыла для мытья посуды в 998 мл водопроводной воды), а затем втирайте для мытья ГФ. Зат....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Результаты показали, что самки CBB распознавали плоды, и в зависимости от характеристик поверхности плодов и испускаемых запахов самки CBB начали проникать или выносить плоды в течение 3 ч при 21 °C.
Влияние инсектицида на CBB при нанесении на плоды кофе (процедура прединфекции) через 24 ч и с течением времени показано на рисунке 4. Два инсектицида (алкалоидная эмульсия в 5% и 6%) вызвали высокую смертность насекомых на 20-й день (таблица 1) и пок.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
В этом протоколе дезинфекция плодов, а также насекомых является критическим шагом. Когда плоды с поля используются в лаборатории, они часто показывают высокое загрязнение и обезвоживание, поскольку микроорганизмы и клещи присутствуют в эпидермисе 7,15,16. Поэтому использование фруктов или насекомых, которые не дезинфицируются, приведет к гибели насекомых из-за загрязнения, вызванного микроорганизмами, такими как бактерии или гри.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Ни у одного из авторов нет конфликта интересов, о котором можно было бы заявить.
Благодарности
Авторы выражают благодарность Национальной федерации производителей кофе Колумбии, ассистентам кафедры энтомологии (Диана Марсела Хиральдо, Глория Патрисия Наранхо), Экспериментальной станции Наранжал и Джону Феликсу Трехосу.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Стакан с носиком, низкая форма, 500 мл | BRAND PP | ||
| Настольный шейкер | New Brunswick Scientific Innova 4000 Инкубатор Шейкер | ||
| Жидкое мыло для мытья посуды-AXION | Colgate-Palmolive | AXION | |
| Hood; Горизонтальная станция ламинарного потока | Terra Universal | Сталь с порошковым покрытием, 1930 мм Ш x 1118 мм Г x 1619 мм В, 120 В (https://www.terrauniversal.com/hood-horizontal-laminar-flow-station-9620-64a.html) | |
| Насекомые CBB | BIOCAFE( | http://avispitas.blogspot.com/p/biocafe.html). | |
| Multi Fold Белые бумажные полотенца | Familia | 73551 | |
| Preval Spray unit | Preval Merck | Z365556-1KT | https://www.sigmaaldrich.com/CO/es/product/sigma/z365556?gclid=Cj0KCQiAweaNBhDEARIsAJ 5hwbfZOy1TWGj6huatFtRQt AzOyHe5-oBiKnOUK2T1exuuk WwJLdvxkvsaAjoYEALw_wcB |
| Реверсивные стойки 96-Well | heathrowнаучный | HEA2345A | https://www.heathrowscientific.com/reversible-racks-96-well-i-hea2345a |
| Лезвия скальпеля N 11 | Merck | S2771-100EA | |
| Скальпельные ручки N3 | Merck | S2896-1EA | |
| Гипохлорид натрия | Компания Clorox | ||
| Стереомикроскоп | Zeiss | Stemi 508 | https://www.zeiss.com/microscopy/int/products/stereo-zoom-microscopes/stemi-508.html |
Ссылки
- Mendesil, E., et al. Semiochemicals used in host location by the coffee berry borer, Hypothenemus hampei. Journal of Chemical Ecology. 35 (8), 944-950 (2009).
- Jaramillo, J., et al. Coffee berry borer joins bark beetles in coffee klatch. PLoS....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
