Мы представляем протокол использования подкожного иглоукалывания Фу в модели хронической констрикционной травмы для индуцирования боли в седалищном нерве у крыс.
Методическая статья
* These authors contributed equally
Мы представляем протокол использования подкожного иглоукалывания Фу в модели хронической констрикционной травмы для индуцирования боли в седалищном нерве у крыс.
Подкожное иглоукалывание Фу (FSN), изобретенная техника иглоукалывания из традиционной китайской медицины, используется во всем мире для облегчения боли. Однако механизмы действия до сих пор до конца не изучены. Во время лечения ФСН игла ФСН вводится и удерживается в подкожных тканях в течение длительного времени покачивающим движением. Тем не менее, исследователи сталкиваются с проблемами, связанными с поддержанием позы при манипулировании FSN на животных моделях (например, крысах). Некомфортное лечение может привести к страху и резистентности к иглам FSN, увеличивая риск травм и даже может повлиять на данные исследований. Анестезия также может повлиять на результаты исследования. Следовательно, существует необходимость в стратегиях терапии FSN на животных, которые минимизируют травмы во время вмешательства. В этом исследовании используется модель хронической травмы сужения у крыс Спрэга-Доули для индуцирования нейропатической боли. Эта модель воспроизводит боль, вызванную повреждением нерва, наблюдаемую у людей при хирургическом сужении периферического нерва, имитируя компрессию или защемление, наблюдаемое при таких состояниях, как синдромы компрессии нервов и периферические невропатии. Мы вводим соответствующую манипуляцию для легкого введения иглы FSN в подкожный слой тела животного, включая введение и направление иглы, удержание иглы и покачивание. Сведение к минимуму дискомфорта крысы предотвращает напряжение крысы, которое заставляет мышцу сокращаться и препятствовать вхождению иглы, а также повышает эффективность исследования.
По оценкам, нейропатическая боль, определяемая как боль, вызванная повреждением нерва, затрагивает 6,9–10% населения мира, а распространенность в течение жизни составляет 49–70%1,2. Он также считается одним из самых сложных для лечения болевых синдромов. Использование фармакологических средств для купирования нейропатической боли дало ограниченный успех, поскольку обычно назначаемые обезболивающие препараты, такие как нестероидные противовоспалительные препараты и опиоиды, показали низкую эффективность в облегчении этого типа боли 3,4. Поэтому существует большая потребность в изучении новых вариантов лечения, особенно немедикаментозных методов лечения. Иглоукалывание, как немедикаментозное вмешательство, потенциально облегчает нейропатическую боль, оказывая обезболивающее действие на соматосенсорную систему. Как клинические, так и доклинические исследования показали, что иглоукалывание эффективно в облегчении симптомов нейропатической боли без значительных побочных эффектов 5,6,7. Тем не менее, центральный механизм лечения иглоукалыванием для облегчения боли при нейропатической боли еще предстоит исследовать.
В последние годы подкожное иглоукалывание Фу (FSN) приобрело популярность для лечения неврологических расстройств, связанных с болью8. FSN берет свое начало от традиционной китайской акупунктуры и была впервые описана традиционным китайским врачом Чжунхуа Фу в 1996 году 9,10. Несмотря на то, что FSN берет свое начало от традиционной акупунктуры, она значительно отличается по своим методам и теориям от акупунктуры, основанной на меридианах, принципах инь и ян и концепциях акупунктурных точек. FSN уделяет больше внимания нейрофизиологическим и анатомическим подходам для эффективного лечения миофасциальной боли11. FSN-терапия применяется в клинической практике для лечения различных болезненных мышечных расстройств, воздействуя на соединительные ткани, тесно связанные с мышцами, уделяя особое внимание лечению напряженных мышц (ТМ)12. В качестве дополнительной терапии для облегчения боли также имеются клинические доказательства того, что FSN эффективна при лечении травм мягких тканей в дополнение к быстрому обезболиванию и значительному уменьшению спазмов мягких тканей13,14. Терапия FSN включает в себя специальные методы, адаптированные для воздействия на основные миофасциальные триггерные точки (MTrP), связанные с этим заболеванием. Положение введения иглы FSN тщательно выбирается в зависимости от расположения этих триггерных точек, что позволяет точно нацеливаться на пораженные участки. Во время процедуры игла FSN вводится в подкожный слой, где намеренно останавливается для оптимизации терапевтического эффекта. Затем используется особая техника, известная как покачивающее движение, включающая мягкое колебательное движение иглы для стимуляции тканей и стимулирования терапевтических реакций10. Развитие MTrP связано с теорией энергетического кризиса, которая объясняет, что такие факторы, как хроническая мышечная перегрузка, чрезмерные физические нагрузки, неправильные позы при физической нагрузке, мышечная атрофия и дегенерация могут способствовать возникновению ишемии и гипоксии мышечной ткани. Считается, что дефицит кислорода и энергии в мышечной ткани играет ключевую роль в образовании MTrP15,16. Предыдущие исследования на животных показали, что лечение хронической боли у крыс FSN в некоторой степени улучшает морфологическую структуру и функцию митохондрий в ТМ, подтверждая потенциал терапии FSN для содействия восстановлению поврежденных нервов и мышц17.
Ишиас классифицируется как нейропатическая боль18. Считается, что источник нейропатической боли лежит где-то между моторной концевой пластиной и внешним фиброзным слоем мышцы, вовлекая микрососудистую систему и нейротрансмиттеры на клеточном уровне. Потеря мышечной иннервации и апоптоз иннервированных нервных клеток происходит при повреждении нерва19, что приводит к болевой походке в пораженной конечности. Кроме того, хроническое сдавливание или раздражение нерва может привести к различным изменениям в способе нервных функций, что может еще больше усугубить симптомы ишиаса20. Однако сложность нервной системы затрудняет ее воспроизведение in vitro, что обуславливает необходимость использования животных моделей для таких исследований. При исследовании нейропатических болевых расстройств обычно используются модельные организмы, включающие различные методы прямого повреждения периферических нервов, такие как лигатура седалищного нерва, рассечение или компрессия21,22. Модель хронического повреждения сужения (CCI) у крыс Спрэга-Доули была использована для индуцирования нейропатической боли. Эта модель воспроизводит боль, вызванную повреждением нерва, наблюдаемую у людей при хирургическом сужении периферического нерва, имитируя компрессию или защемление, наблюдаемое при таких состояниях, как синдромы компрессии нервов и периферические невропатии.
В этом исследовании мы оценили обезболивающие эффекты терапии FSN и низкочастотной электротерапии (чрескожный электрический стимулятор нервов, TENS) у крыс с хронической травмой сужения и нейропатической болью. Поскольку анестезия замедляет или блокирует нервные импульсы и влияет на синаптическую передачу и функцию нейронов23, животных нельзя обезболивать при всех процедурах иглоукалывания и покачивающих движениях. Поэтому для уменьшения дискомфорта у крыс требуется соответствующая игольчатая техника. Подробно описаны этапы создания модели ЧМТ крыс, способ лечения крыс комбинированными покачивающимися движениями без анестезии, возможные тесты поведенческих паттернов животных и электрофизиологические исследования.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
В октябре 2022 года все процедуры, связанные с животными, были одобрены Комитетом по уходу за животными и их использованию (IACUC) Мемориальной больницы Чан Бин Шоу Чван, Чанхуа, Тайвань (111031) (рисунок 1).
1. Подготовка животных
2. Группировка животных
3. Создание модели крысы CCI
ПРИМЕЧАНИЕ: Хирургическая модель ЧМТ на крысах была модифицирована в соответствии с Беннеттом и Се, проведенной в 1988 г.25.
4. Администрирование манипуляций FSN
5. Проведение манипуляций TENS
6. Физиологические измерения при проведении поведенческого теста на животных
ПРИМЕЧАНИЕ: Индекс седалищной функции (SFI)30 является широко используемым индексом исследователей, изучающих патологию и потенциальное лечение повреждений нервов, определяемым путем сравнения геометрии пораженной задней лапы у травмированных крыс с геометрией контралатеральной лапы и сравнения ее с противоположной лапой.

7. Нейрофизиологическая оценка методом электрофизиологического измерения33
ПРИМЕЧАНИЕ: Электромиография использовалась для регистрации электрофизиологической активности в этом исследовании. Сложный мышечный потенциал действия (CMAP) обусловлен активацией мышечных волокон в мышце-мишени, снабжаемой нервом. Исследованы амплитуда и задержка CMAP. Амплитуда CMAP измеряется от базового уровня до отрицательного пика. Латентность CMAP определяется путем измерения времени между применением стимула и возникновением потенциала сложного действия, на которое влияет расстояние между местом стимуляции и сайтом записи. Электрофизиология обеспечивает объективную оценку функции периферических нервов у крыс.
8. Статистика:
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Следы и определение SFI
Мы рассмотрели развитие SFI только в группах CCI+FSN и CCI+TENS (рис. 7). После 4 сеансов лечения FSN и TENS на 7-й день операции по удалению ЧМТ показатели SFI в группах CCI+FSN (-15,85 ± 3,46) и CCI+TENS (-29,58 ± 9,19) значительно улучшились по сравнению с группой, получавшей только ЧМТ (-87,40 ± 14,22). Улучшение было значительным в группе CCI+FSN по сравнению с группой CCI+TENS (рис. 7A).
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
В этом исследовании наблюдалось влияние лечения ФСН на нейропатическую боль в моделях ЧМТ крыс. В данном исследовании представлен протокол СФИ и электрофизиологического тестирования для оценки терапевтических эффектов после лечения ФСН или ТЭНС. Кроме того, он иллюстрирует, как оценить функциональное восстановление поврежденного нерва с помощью неинвазивных поведенческих тестов и физиологических измерений. Результаты показали, что лечение ФСН после боли в седалищном нерве, индуцированной ЧМТ, показало значительно лучшее ...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих конфликтов интересов.
Это исследование было поддержано грантом от центра животных Chang Bing Show Chwan Memorial Hospital, Чанхуа, Тайвань. Авторы хотели бы поблагодарить Show Chwan Memorial Hospital IRCAD TAIWAN за их неоценимую поддержку и помощь на протяжении всего этого исследовательского проекта.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Щипцы | World Precision Instruments | 14098 | |
| Fu' с подкожным иглоукалыванием | Nanjing Paifu Medical Science and Technology Co. | Иглы FSN предназначены для одноразового использования. Игла FSN состоит из трех частей: прочного стального сердечника иглы (внизу), мягкой обсадной трубы (посередине) и защитной оболочки (вверху). | |
| Электромиография Medelec Synergy | Oxford Instrument Medical Ltd. | 034W003 | Электромиограмма (ЭМГ) используется для помощи в диагностике и лечении таких расстройств, как невропатии. Содержит портативную двухканальную систему электромиографии/скорости нервной проводимости. |
| Физиологический раствор (0,9%) 20 мл | Taiwan Biotech Co., Ltd. | 4711916010323 | Лот: 1TKB2022 |
| POLYSORB 4-0 VIOLET 30" CV-25 | UNITED STATES SURGICAL, ПОДРАЗДЕЛЕНИЕ TYCO HEALTHC | GL-181 | |
| Retractor | COOPERSURGICAL, INC.(США) | 3311-8G | |
| Rompun | Elanco Animal Health Korea Co. Ltd. | 27668 | |
| НОЖНИЦЫ CVD 90 мм | BBRUAN | XG-lbb-BC101R | |
| Чрескожная электрическая стимуляция нервов | Well-Life Healthcare Co. | Номер модели 2205A | Цифровое устройство, которое предлагает ЧЭНС. Поставляется в комплекте с проводами для пациента, самоклеящимися электродами, 3 батарейками типа ААА и инструкциями в мягкой сумке для переноски. Время включения интервала 1– 30 с. Интервал ВЫКЛ Время 1– 30 с. |
| Золетил | ВИРРБАК | 8V8HA |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE
Запросить разрешение