Стабилизированное окно для прижизненной визуализации поджелудочной железы мышей

Jakeb Petersen; Wei Du; Christian Adkisson; Claudia Gravekamp; Maja H. Oktay; John Condeelis; Nicole C. Panarelli; John C. McAuliffe; David Entenberg

doi:10.3791/65498

Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Стабилизированное окно для прижизненной визуализации поджелудочной железы мышей

2.8K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/65498

⸱

6 октября 2023 г.

Jakeb Petersen^*¹^,²^,³ , Wei Du^*⁴^,⁵ , Christian Adkisson¹^,⁴ , Claudia Gravekamp⁶^,⁷ , Maja H. Oktay²^,³^,⁴^,⁷^,⁸^,⁹ , John Condeelis¹^,³^,⁴^,⁷^,⁸^,⁹^,¹⁰ , Nicole C. Panarelli²^,³^,⁷ , John C. McAuliffe¹^,²^,³^,⁷^,⁸ , David Entenberg²^,³^,⁴^,⁷^,⁸^,⁹

^* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Представлен протокол хирургической имплантации стабилизированного постоянного оптического окна для субклеточной визуализации поджелудочной железы мышей, позволяющий проводить серийные и лонгитюдные исследования здоровой и больной поджелудочной железы.

Аннотация

Физиология и патофизиология поджелудочной железы сложны. Заболевания поджелудочной железы, такие как панкреатит и аденокарцинома поджелудочной железы (PDAC), характеризуются высокой заболеваемостью и смертностью. Прижизненная визуализация (ВВИ) — это мощный метод, позволяющий получать изображения тканей с высоким разрешением как в здоровом, так и в больном состоянии, что позволяет наблюдать за динамикой клеток в режиме реального времени. ИВИ поджелудочной железы мышей представляет собой серьезную проблему из-за глубокой висцеральной и податливой природы органа, что делает его очень подверженным повреждениям и артефактам движения.

Здесь описан процесс имплантации S-табилизированного W-индудля визуализациимышиного P-ancreas(SWIP). SWIP позволяет проводить внутривенное введение поджелудочной железы мышей в нормальном здоровом состоянии, во время трансформации здоровой поджелудочной железы в острый панкреатит, индуцированный церулеином, и при злокачественных состояниях, таких как опухоли поджелудочной железы. В сочетании с генетически мечеными клетками или введением флуоресцентных красителей, SWIP позволяет измерять динамику одиночных клеток и субклеток (включая одноклеточную и коллективную миграцию), а также получать последовательные изображения одной и той же области интереса в течение нескольких дней.

Способность улавливать миграцию опухолевых клеток имеет особое значение, поскольку основной причиной смертности, связанной с раком, при PDAC является подавляющее метастатическое бремя. Понимание физиологической динамики метастазирования при ОАК является критической неудовлетворенной потребностью и имеет решающее значение для улучшения прогноза пациента. В целом, SWIP обеспечивает улучшенную стабильность визуализации и расширяет область применения IVI при здоровых заболеваниях поджелудочной железы и злокачественных заболеваниях поджелудочной железы.

Введение

Доброкачественные и злокачественные заболевания поджелудочной железы потенциально опасны для жизни, при этом существуют значительные пробелы в понимании их патофизиологии. Панкреатит – воспаление поджелудочной железы – является третьей по значимости причиной госпитализаций и повторных госпитализаций в связи с желудочно-кишечными заболеваниями в США и связан со значительной заболеваемостью, смертностью и социально-экономическим бременем^. Протоковая аденокарцинома поджелудочной железы (PDAC), занимающая третье место среди основных^{причин смертности}, связанной с раком, является причиной большинства злокачественных новообразо....