Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Модифицированная мышиная модель повторяющейся легкой черепно-мозговой травмы, включающей истонченное окно черепа и жидкостную перкуссию

1.9K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/66440

⸱

19 апреля 2024 г.

 ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

В этой статье

Уведомление об исправлении

Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice

Краткое содержание

В этом протоколе представлена модифицированная мышиная модель повторяющейся легкой черепно-мозговой травмы (ЧМТ), индуцированной методом закрытой черепно-мозговой травмы (ЧС). Этот подход включает в себя утонченное окно черепа и перкуссию жидкости для уменьшения воспаления, обычно вызванного воздействием мозговых оболочек, а также улучшенную воспроизводимость и точность в моделировании rmTBI у грызунов.

Аннотация

Легкая черепно-мозговая травма является клинически высокогетерогенным неврологическим расстройством. Для изучения механизмов невропатологии после легкой ЧМТ и тестирования методов лечения крайне необходимы высоковоспроизводимые животные модели черепно-мозговой травмы (ЧМТ) с четко определенными патологиями. Воспроизведение всех последствий ЧМТ на животных моделях оказалось сложной задачей. Таким образом, наличие нескольких животных моделей ЧМТ необходимо для учета различных аспектов и тяжестей, наблюдаемых у пациентов с ЧМТ. CHI является одним из наиболее распространенных методов изготовления моделей rmTBI у грызунов. Тем не менее, этот метод подвержен влиянию многих факторов, включая используемый метод воздействия, толщину и форму кости черепа, апноэ у животных, а также тип используемой поддержки головы и иммобилизации. Целью данного протокола является демонстрация комбинации методов «окна истонченного черепа» и жидкостной перкуссионной травмы (FPI) для создания точной мышиной модели RMTBI, связанной с CHI. Основная цель этого протокола — свести к минимуму факторы, которые могут повлиять на точность и согласованность моделирования CHI и FPI, включая толщину костей черепа, форму и поддержку головы. Использование метода «окна истонченного черепа» сводит к минимуму потенциальное воспаление из-за трепанации черепа и FPI, что приводит к улучшению мышиной модели, которая воспроизводит клинические особенности, наблюдаемые у пациентов с легкой ЧМТ. Результаты поведенческого и гистологического анализа с использованием окрашивания гематоксилином и эозином (ПЭ) позволяют предположить, что ЧМТ может привести к кумулятивному повреждению, которое приводит к изменениям как в поведении, так и в общей морфологии мозга. В целом, модифицированный ЦИ, ассоциированный с ЧМЧ, представляет собой полезный инструмент для исследователей для изучения основных механизмов, которые способствуют фокальным и диффузным патофизиологическим изменениям при ЧМТ.

Введение

Легкая ЧМТ, включая сотрясение мозга и подсотрясение мозга, составляет большинство всех случаев ЧМТ (>80% всех ЧМТ)1. Легкая ЧМТ обычно возникает в результате падений, дорожно-транспортных происшествий, актов насилия, контактных видов спорта (например, футбола, бокса, хоккея) и военных боев 2,3. Легкая ЧМТ может привести к нейробиологическим событиям, которые влияют на нейроповеденческие функции на протяжении всей жизни пациента и увеличивают риск нейродегенеративных заболеваний 4,5,6. Животные....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все процедуры, включенные в этот протокол, были выполнены с одобрения Комитета по уходу за животными и их использованию (Чжэцзянский педагогический университет, номер разрешения, dw2019005) и в соответствии с ARRIVAL и Руководством NIH по уходу и использованию лабораторных животных. С техническими характеристиками можно ознакомиться в Таблице материалов.

1. Порядок обращения с животными

  1. Домашние мыши в контролируемой среде с температурой 22-24 °C, влажностью в пределах 40%-60%, 12-часовым циклом свет/темнота, а также обеспечивают свободный доступ к воде и стандартному мышиному чау. Для пр....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Протокол, описанный в этом исследовании, описывает метод индуцирования rmTBI через окно с истонченным черепом, который предлагает решение для травмы головного мозга, вызванной подготовкой к трепанации черепа во время традиционного моделирования перкуссии ЧМТ. Использование этой модифицированной процедуры перкуссии жидкости с модифицированным устройством позволило добиться повышенной точности и воспроизводимости воздействия FPI13. Модифицированный импактор обладает универсальностью для использовани.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

ЧМТ относится к двум основным типам: закрытым и проникающим, причем последний характеризуется разрушением черепа и твердой мозговой оболочки. Клинические данные свидетельствуют о том, что ЦИ более распространены, чем проникающие ранения 1,2. После одной легкой ЧМТ большинство пациентов испытывают симптомы ЧЛС, которые обычно проходят в течение короткого периода времени, и существуют разногласия относительно доли пациентов, у которых ЧЛС развивается в долгосрочные.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

У авторов нет конфликта интересов, который можно было бы раскрыть.

Благодарности

Эта работа была поддержана Ключевым фондом социального развития муниципалитета Цзиньхуа (No 2020-3-071), Программой обучения студентов Чжэцзянского колледжа инновациям и предпринимательству (No: S202310345087, S202310345088) и Проектом плана научно-технической инновационной деятельности студентов колледжа провинции Чжэцзян (2023R404044). Авторы благодарят мисс Эмму Оуянг (студентку первого курса Университета Джона Хопкинса, бакалавр наук, Балтимор, США) за языковое редактирование статьи.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
75% этанола Шаньдун Секан Медикал Технолоджи Ко., Лтд. 
Бупренорфина гидрохлоридТяньцзиньский фармацевтический научно-исследовательский институт Pharmaceutical Co., LtdH12020272раствор, анальгетик
карпрофенShanghai Guchen Biotechnology Co., Ltd53716-49-7порошок, анальгетик
хлоргексидина диглюконатShanghai Macklin Biochemical Co., Ltd.18472-51-019%-21% водный раствор, антимикробный
стоматологический цемент и набор растворителейShanghai New Century Dental Materials Co., Ltd.20220405, 3 #Порошок восстановлен в соответствующем растворителе
Препарирующий микроскопШэньчжэнь RWD Life Science Inc.77019
Эритромициновая мазь Ухань Майинглун Фармацевтическая группа Ко., Лтд.220412
Антибиотик Волоконно-оптический источник холодного светаШэньчжэнь RWD Life Science Inc.F-150C
Микросверло с плоскими наконечниками Шэньчжэнь RWD Life Science Inc.HM310082 мм, стальной
FPI прибор программное обеспечениеJiaxing Bocom Biotech Inc.Biocom Animal Brain Impactor V1.0
ICRЦентр лабораторных животных Цзиньхуа   Stock#202309125 самцов мышей, 25-30 г, 8 недель
IsofluraneShandong Ante Animal Husbandry Technology Co., Ltd. 
Изотермическая грелка Вэньчжоу Репшоп Зоотовары Ко., Лтд. 
ХупИзготовлен на заказ с использованием ступицы иглы 19G
Микроручная дрель для черепаShenzhen RWD Life Science Inc.78001Макс.: 38 000 об/мин
Модифицированное устройство FPIJiaxing Bocom Biotech Inc.
Водный лабиринт МоррисШэньчжэнь RWD Life Science Inc.63031Оценка способностей мыши к пространственному обучению и памяти
Открытое полеШэньчжэнь RWD Life Science Inc.63008Оценка опорно-двигательного аппарата и тревожности мышей
Офтальмологическая смазка Сучжоу Тяньлун Фармацевтическая Компания, Лтд. 
Мазь с диклофенаком натрия Ухань Майинглун Фармацевтическая группа Ко., Лтд.221207нестероидный противовоспалительный препарат
Система анестезии для мелких животных-Enhanced Шэньчжэнь RWD Life Science Inc.R530IP
Интеллектуальная система слеженияза видео Panlab Harvard Apparatus Inc., MA, СШАV3.0Отслеживание и анализ животных
Стереотаксическая рамка Шэньчжэнь RWD Life Science Inc.68043
Vetbond Tissue Adhesive3M, Сент-Пол, Миннесота, США202402AXШовный материал для животной раны
Y mazeShenzhen RWD Life Science Inc.63005Оценка пространственной рабочей памяти мыши
220502 мыши 2023090501 Luer Loc SC230724B

Ссылки

  1. Jiang, J. Y., et al. Traumatic brain injury in china. Lancet Neurol. 18 (3), 286-295 (2019).
  2. Naumenko, Y., Yuryshinetz, I., Zabenko, Y., Pivneva, T. Mild traumatic brain injury as a pathological process. Heliyon. 9 (7), e18342(2023).
  3. Zhao, Q., Zhang, J., Li, H., Li, H., Xie, F.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Исправление


Formal Correction: Erratum: Modified Mouse Model of Repetitive Mild Traumatic Brain Injury Incorporating Thinned-Skull Window and Fluid Percussion
Posted by JoVE Editors on 6/04/2025. Citeable Link.

This corrects the article 10.3791/66440

Больше статей

Повторные черепно-мозговые травмымодель ЧМТ у мышейжидкостная перкуссионная травмазакрытая черепно-мозговая травмамеханизмы нейропатологииповеденческий анализгистологический анализокрашивание гематоксилином и эозином