Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Выявление инфекции Helicobacter pylori и устойчивости к антибиотикам с помощью количественного анализа полимеразной цепной реакции кала

2.1K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/67710

⸱

16 мая 2025 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Guangdong Provincial People's Hospital (Guangdong Academy of Medical Sciences), Southern Medical University, 2Medical Technology School, Xuzhou Medical University

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Протокол использует неинвазивный отбор образцов кала в сочетании с количественной полимеразной цепной реакцией, чтобы предложить удобный и быстрый метод диагностики инфекции Helicobacter pylori и ее устойчивости к кларитромицину и хинолонам.

Аннотация

Helicobacter pylori (H. pylori) широко распространена во всем мире, при этом примерно 50% населения мира имеют в анамнезе инфекцию H. pylori. В Китае уровень заражения колеблется от 40% до 70%. H. pylori в первую очередь связана с желудочно-кишечными заболеваниями, такими как хронический гастрит, язва желудка и двенадцатиперстной кишки. В настоящее время клиническое лечение инфекции H. pylori включает в себя тройную или четверную терапию. Однако широкое использование антибиотиков привело к развитию устойчивости к антибиотикам у H. pylori. Таким образом, обнаружение как H. pylori, так и ее устойчивости к антибиотикам имеет решающее значение для назначения клинического лечения.

Методы диагностики H. pylori включают уреа-дыхательный тест (UBT), тест на антиген, серологический тест на антитела, эндоскопию, экспресс-тест на уреазу (RUT) и бактериальный посев. Хотя первые три метода являются неинвазивными, они не позволяют восстанавливать бактерии и, таким образом, не могут использоваться для тестирования на устойчивость. Последние три метода являются инвазивными, дорогостоящими, требуют высокой технической квалификации и могут причинить вред пациентам.

Таким образом, неинвазивный, быстрый метод одновременного выявления инфекции H. pylori и устойчивости к антибиотикам имеет первостепенное клиническое значение для эффективной эрадикации H. pylori. Целью данной работы является внедрение специального протокола, сочетающего количественную полимеразную цепную реакцию (кПЦР) с технологией флуоресцентного зонда TaqMan для быстрого выявления инфекции H. pylori и устойчивости к антибиотикам. Этот метод обеспечивает удобный, быстрый и неинвазивный способ диагностики инфекции и резистентности H. pylori , в отличие от традиционного бактериального культивирования и других методов. qPCR используется для идентификации инфекции и обнаружения мутаций в генах 23S рРНК и gyrA , которые связаны с устойчивостью к кларитромицину и хинолонам соответственно. По сравнению с традиционными методами культивирования, этот подход предлагает неинвазивный, экономически эффективный и эффективный по времени метод выявления инфекции Helicobacter pylori и определения ее устойчивости к антибиотикам.

Введение

Helicobacter pylori – грамотрицательная спиралевидная бактерия, которая может постоянно инфицировать 1-й желудочныйэпителий человека. В 1994 году Всемирная организация здравоохранения классифицировала H. pylori как канцероген группы 1 для рака желудка, при этом у ~3% инфицированных людей в конечном итоге развилось заболевание2. Недавно опубликованный систематический обзор показал, что в последнее десятилетие наблюдалась общая тенденция к повышению устойчивости H. pylori к антибиотикам, которая достигла тревожных уровней во всем мире,особенно резистентность к кларитромицину. В Китае данные последнего обследования показали, что совокупная распространенность H. pylori среди городского населения Китая составляет 27,08%; Показатели резистентности к кларитромицину и левофлоксацину составили 50,83% и 47,17%4, что выше, чем в США (левофлоксацин 37,6%, кларитромицин 31,5%)5и Европе (левофлоксацин 15,8% и кларитромицин 21,4%)6. Следовательно, ранняя и точная диагностика и лечение имеют решающее значение. Тем не менее, растущая устойчивость H. pylori к антибиотикам значительно снижает эффективность лечения, что подчеркивает настоятельную необходимость продолжения исследований в области ее диагностики и лечения.

Методы диагностики H. pylori подразделяются на инвазивные и неинвазивные методы7. Инвазивные методы включают гистопатологическое исследование, экспресс-тест на уреазу (RUT) и бактериальный посев8. Гистопатологическое исследование основано на обработке и микроскопическом наблюдении образцов биопсии, точность которых ограничена гистологической подготовкой и патологоанатомической экспертизой9. RUT обнаруживает H. pylori через активность уреазы, которая гидролизует мочевину с образованием аммиака, что приводит к щелочному сдвигу в реагенте, что указывает на присутствие бактерии9. Это просто и экономически выгодно. Бактериальная культура, считающаяся «золотым стандартом», часто имеет вероятность успеха ниже 50% из-за уникальных физиологических характеристик H. pylori10.

К неинвазивным методам относятся уреа-дыхательный тест (UBT) 13C/14C, серологическая диагностика и анализ кала на антиген (SAT)11. Дыхательный тест работает по принципу, аналогичному принципу RUT, обнаруживая изотопно меченный CO2 в выдыхаемом воздухе для подтверждения инфекции12. Серологический диагноз выявляет антитела, которые могут сохраняться после эрадикации бактерий, что затрудняет оценку эффективности лечения13. Анализ кала на антиген выявляет специфические антигены H. pylori в образцах кала, обеспечивая надежный неинвазивный метод с меньшим процентом ложноположительных результатов и хорошей точностью для диагностики активных инфекций14.

Каждый метод диагностики имеет свои преимущества и ограничения15. Помимо бактериального культивирования, другие методы испытывают трудности с выявлением устойчивости к антибиотикам, в то время как культивирование затруднено низкими показателями успеха16. В последнее время для обнаружения микроорганизмов широко применяются методы молекулярной диагностики, такие как количественная ПЦР в реальном времени (кПЦР)17. Количественная ПЦР позволяет точно обнаруживать H. pylori и анализировать мутации гена резистентности, обеспечивая более полное представление об инфекции18.

Флуоресцентные зонды предназначены для специфического связывания с целевой последовательностью в ДНК в процессе количественной ПЦР. Эти зонды обычно помечены флуоресцентным красителем, который излучает сигнал, когда зонд связывается со своей мишенью, и расщепляется полимеразой во время амплификации. Это обеспечивает измерение процесса ПЦР в режиме реального времени. Флуоресцентные зонды известны своей высокой специфичностью благодаря уникальной конструкции зонда, которая обеспечивает обнаружение только целевой последовательности ДНК, снижая вероятность неспецифического связывания и улучшая специфичность анализа. Это делает технологию флуоресцентных зондов особенно полезной для обнаружения мишеней с низким содержанием, таких как ДНК Helicobacter pylori в образцах стула. Хотя SYBR Green является широко используемым ДНК-связывающим красителем в ПЦР, он может связываться с любой двухцепочечной ДНК, что может привести к неспецифической амплификации и ложноположительным результатам.

Культивирование Helicobacter pylori из клинических образцов не дает данных об устойчивости к антибиотикам напрямую. Напротив, кПЦР на основе флуоресцентных зондов является более быстрой, удобной и может быть адаптирована для одновременного обнаружения H. pylori и маркеров устойчивости к антибиотикам. Этот метод не только дает более быстрые результаты, чем традиционные методы культивирования, но и позволяет одновременно обнаруживать гены устойчивости к антибиотикам, что значительно повышает эффективность и удобство обнаружения. Этот метод обеспечивает удобный, быстрый и неинвазивный способ диагностики инфекции и резистентности H. pylori , в отличие от традиционного бактериального культивирования и других методов.

Существуют два важнейших вопроса, которые необходимо учитывать для устойчивости к антибиотикам H. pylori : 1) постоянство генотипа и фенотипа, 2) множественная лекарственная устойчивость. Крупномасштабное многоцентровое исследование в Китае показало, что модели двойной резистентности к кларитромицину/левофлоксацину составили 26,1%. Фенотипы и генотипы H. pylori, устойчивые к кларитромицину и левофлоксацину, показали удовлетворительное совпадение (коэффициент каппа = 0,810 и 0,782 соответственно)19. Таким образом, целесообразно использовать метод количественной ПЦР для выявления инфекции H. pylori и лекарственной устойчивости. Тест кала на антиген (SAT) и методы количественной ПЦР используются все чаще из-за удобства забора. Чувствительность, специфичность и точность методов обнаружения H. pylori представлены следующим образом: qPCR > UBT > SAT > RUT> CagA IgG > культуре20. Для первичного скрининга подходят все неинвазивные методы. Поскольку кПЦР может дополнительно обнаруживать гены лекарственной устойчивости, кПЦР и культуральное исследование будут более подходящими для руководства лечением.

Другие инновационные подходы, такие как алгоритмы искусственного интеллекта (ИИ) в сочетании с эндоскопическими изображениями21, цифровая микрофлюидика22 и RPA-CRISPR/Cas12a23, теоретически показывают хорошую диагностическую эффективность и многообещающие перспективы применения. Тем не менее, кПЦР в настоящее время является наиболее сложным методом молекулярной биологии, способным обеспечить превосходное решение для диагностики и лечения инфекций, вызванных H. pylori .

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Это исследование соответствует этическим принципам, установленным Комитетом по этике Народной больницы провинции Гуандун Южного медицинского университета, Гуанчжоу, Китай (Одобрение No: KY2024-445-01). Подробную информацию о материалах, использованных в этом исследовании (реактивы, химикаты, оборудование и программное обеспечение), можно найти в Таблице материалов.

1. Отбор участников

  1. Выбирайте участников в возрастном диапазоне от 18 до 60 лет.
  2. Выбирайте участников, которые могут пройти скрининг инфекции Helicobacter pylori , таких как пациенты с такими симптомами, как гастрит, пептическая язва или диспепсия, а также бессимптомные люди.
  3. Исключить из исследования пациентов, которые в течение последнего месяца применяли антибиотики, препараты, содержащие висмут (такие как капсулы цитрата калия, капсулы коллоидного пектина висмута или таблетки на основе соединения висмута) или противомикробные китайские препараты, или тех, кто в течение последних 2 недель применял ингибиторы протонной помпы или антагонисты Н2-рецепторов (такие как омепразол, пантопразол, рабепразол, циметидин или низатидин). Также исключите из исследования женщин во время менструального периода.

2. Забор образцов кала

ПРИМЕЧАНИЕ: Предоставьте участникам раздел 2 в качестве инструкций.

  1. Убедитесь, что внешняя упаковка набора для отбора проб не повреждена и срок годности не истек. Выньте материалы из набора.
  2. Положите в унитаз белую бумагу для сбора кала и испражнитесь (во избежание загрязнения мочой).
  3. С помощью шпателя соберите порцию кала размером примерно с боб (~5 г) и переложите ее в контейнер для образца.
  4. Поместите шпатель для отбора проб вместе с образцом кала в пробирку для сбора, следя за тем, чтобы уровень жидкости поднялся до уровня, близкого к линии отбора проб, указанной на пробирке.
  5. Надежно затяните крышку трубки. Переверните пробирку несколько раз, чтобы обеспечить тщательное перемешивание образца с консервирующим раствором.
  6. Образец хранят в холодильнике до доставки в клиническую лабораторию для последующей идентификации H. pylori и оценки профилей устойчивости к антибиотикам с помощью количественной ПЦР.

3. Экстракция нуклеиновых кислот

ПРИМЕЧАНИЕ: Выполняйте все процедуры в шкафу биобезопасности, чтобы избежать загрязнения.

  1. Переверните пробирку для консервации образцов и тщательно перемешайте. Перелейте 1,0 мл раствора кала в микроцентрифужную пробирку.
  2. После смешивания пробирок центрифуги поместите их в металлическую ванну при температуре 80 °C на 10 минут, с прерывистым перемешиванием в течение 30 с на пятой минуте. После того, как пробирки остынут до комнатной температуры, центрифугируйте при 10 000 × г в течение 5 минут и соберите надосадочную жидкость для дальнейшей обработки.
  3. Переверните 96-луночную пластину несколько раз, чтобы снова суспендировать магнитные шарики. Осторожно снимите уплотнитель из алюминиевой фольги, стараясь не трястись, чтобы предотвратить разлив.
  4. Добавьте 200 мкл подготовленного образца (начиная с шага 3.2) в каждую лунку 96-луночного планшета, содержащего буфер для лизиса, чтобы убедиться, что каждая лунка соответствует одному образцу. Поместите 96-луночный планшет в специальный отсек для образцов прибора для экстракции нуклеиновых кислот для автоматической экстракции.
  5. Храните оставшиеся образцы и извлеченные образцы нуклеиновых кислот при температуре -20 °C для долгосрочного хранения и использования в будущем.

4. Количественная ПЦР Обнаружение нуклеиновых кислот Helicobacter pylori и мутаций резистентности к кларитромицину и хинолонам

  1. Возьмите реактивы из хранилища реактивов и разморозьте их при комнатной температуре.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Этот набор был использован для качественного обнаружения нуклеиновой кислоты H. pylori, включая мутации в гене 23S рРНК (A2143G, A2143C, A2144G) и гене gyrA (261A, 261G, 260T, 271A, 271T, 272G). В наборе были доступны праймеры, зонды, фермент Taq, фермент UNG и dNTP. Гены-мишени H. pylori и человеческого β-актина были включены в положительный контроль качества. В качестве внутреннего контроля качества был выбран ген β-актина человека.
  2. Исходя из количества образцов, подлежащих тестированию, используйте N + 2 копии лиофилизированного реагента, где N представляет количество образцов, подлежащих тестированию, а 2 представляет отрицательный и положительный контроль качества.
  3. Кратковременно центрифугируйте, чтобы убедиться, что лиофилизированный порошок осел на дне пробирок. Откройте крышку лиофилизированного реагента (стараясь не допустить рассыпания порошка) и добавьте 25 мкл на лунку экстрагированных нуклеиновых кислот из исследуемых образцов, а также из положительного и отрицательного контроля. Плотно закройте трубки.
  4. Вортексируйте реагенты для ПЦР в течение 8-10 с, затем кратковременно центрифугируйте в течение 3-5 с, чтобы избежать образования пузырьков.
  5. Поместите 96-луночный планшет для количественной ПЦР на аппарат для количественной ПЦР. Установите программу циклов следующим образом: сначала инкубируйте реакционную смесь (содержащую праймеры, зонды, Taq-полимеразу, фермент UNG, dNTP и т.д.) при 42 °C и 95 °C (оба этапа в одном цикле) в течение 2 мин; затем цикл 10 раз по 10 с при 95°С и 45 с при 65°С; наконец, цикл 35x с 10 с при 95 °C и 45 с при 58 °C для денатурации, отжига и растяжения.
  6. Установите следующие параметры детектирования флуоресцентного сигнала: ROX флуоресцентное мечение консервативных генов H. pylori; FAM флуоресцентное мечение генов устойчивости к кларитромицину H. pylori; HEX-флуоресцентное мечение генов устойчивости к хинолонам H. pylori; и флуоресцентное мечение CY5 гена β-актина человека использовались в качестве внутреннего контроля набора. Собирайте данные при температуре 58 °C. По завершении реакции убедитесь, что данные сохранены для будущего анализа.
  7. Анализируйте данные с помощью специального программного обеспечения для количественной ПЦР, так как прибор автоматически выбирает базовый порог. Установите все диагностические критерии, включая наличие инфекции Helicobacter pylori или резистентность, к значению КТ ≤30; подтверждают, что они демонстрируют характерную S-образную кривую.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Применение количественной ПЦР для выявления инфекции Helicobacter pylori и устойчивости к антибиотикам в образцах кала
Нами были разработаны праймеры и зонды на основе точечных мутаций в консервативных генах Helicobacter pylori, а также в гене 23S рРНК и гене gyrA . Эти праймеры и зонды были помечены различными флуоресцентными красителями, а затем использованы для обнаружения количественной ПЦР. Результаты к...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

В последние годы методы молекулярного детектирования широко применяются в области микробиологии, что значительно изменило клиническое лечение ряда инфекционных заболеваний. Эти методы работают на генетическом уровне, позволяя не только подтвердить присутствие бактерий, но и типировать гены и тестировать устойчивость к антибиотикам. Флуоресцентная количественная ПЦР в реальном времени (кПЦР) становится все более предпочтительной из-за ее короткого времени обработки, высокой чувствительнос...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов.

Благодарности

Это исследование было профинансировано Исследовательским фондом передовых талантов Народной больницы провинции Гуандун [Грант No. KY012023293]. Эта работа была поддержана компанией Jiangsu Mole Bioscience Co. Спонсоры не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
BSC-1500IIA2-XBIOBASESEDAШкаф биобезопасности
Одноразовая пробирка для сбора и хранения калаМольСбор образцов кала
E-центрифугаWEALTECЦентрифуга остаточная жидкость со стенки пробирки
Нуклеиновая кислота Helicobacter pylori, кларитромицин и набор для обнаружения мутаций резистентности к хинолонам МольВыявление инфекции Helicobacter pylori и устойчивости к антибиотикам; лиофилизированный реагент H. pylori (содержащий праймеры, зонды, Taq-полимеразу, фермент UNG, dNTP и т.д.), положительный контроль на H. pylori (содержащий Helicobacter pylori и гены-мишени β-актина человека) и отрицательный контроль на H. pylori (содержащий гены-мишени β-актина человека)
Mole 96M автоматизированный экстрактор нуклеиновых кислотMoleFor DNA Extraction
Набор для экстракции нуклеиновых кислотMoleTo extract нуклеиновой кислоты; содержит буфер для лизиса (соль гуанидина, трис гидроксиметиламинометан, Tween-20, хлорид натрия), Wash Buffer 1 (хлорид натрия), Wash Buffer 2 (трис гидроксиметиламинометан, Tween-20), Wash Buffer 3 (магнитные шарики, Tween-20), Wash Buffer 4 (вода без нуклеазы) и Elution Buffer (трис гидроксиметиламинометан), а также полностью
автоматическую систему медицинского анализа ПЦР SLAN на магнитной стойке SLANHONGSHIАнализ данных
SLAN-96S Машина для ПЦР в реальном времениHONGSHIФлуоресцентная количественная ПЦР-амплификация
Сверхнизкотемпературные морозильные аппараты (DW-YL450)MELINGSEDA20172220091-20 ° С для хранения реактивов
Vortex-5Kylin-bellДля смешивания реактивов
20143222263

Ссылки

  1. Yuan, C., et al. The global prevalence of and factors associated with Helicobacter pylori infection in children: a systematic review and meta-analysis. Lancet Child Adolesc Health. 6 (3), 185-194 (2022).
  2. Watari, J., et al. Helicobacter pylori associated chronic gastritis, clinical syndromes, precancerous lesions, and pathogenesis of gastric cancer development. World J Gastroenterol. 20 (18), 5461-5473 (2014).
  3. Yu, Y., et al. Global primary antibiotic resistance rate of Helicobacter pylori in recent 10 years: A systematic review and meta-analysis. Helicobacter. 29 (3), e13103(2024).
  4. Wang, L., et al. cross-sectional surveillance of Helicobacter pylori prevalence and antibiotic resistance to clarithromycin and levofloxacin in urban China using the string test coupled with quantitative PCR. Lancet Microbe. 5 (6), e512-e513 (2024).
  5. Ho, J. J. C., Navarro, M., Sawyer, K., Elfanagely, Y., Moss, S. F. Helicobacter pylori antibiotic resistance in the United States between 2011 and 2021: A systematic review and meta-analysis. American J Gastroenterol. 117 (8), 1221-1230 (2022).
  6. Megraud, F., et al. Helicobacter pylori resistance to antibiotics in Europe in 2018 and its relationship to antibiotic consumption in the community. Gut. 70 (10), 1815-1822 (2021).
  7. Guevara, B., Cogdill, A. G. Helicobacter pylori: A review of current diagnostic and management strategies. Dig Dis Sci. 65 (7), 1917-1931 (2020).
  8. Rotimi, O., Cairns, A., Gray, S., Moayyedi, P., Dixon, M. F. Histological identification of Helicobacter pylori: Comparison of staining methods. J Clin Pathol. 53 (10), 756-759 (2000).
  9. Lim, L. L., Ho, K. Y., Ho, B., Salto-Tellez, M. Effect of biopsies on sensitivity and specificity of ultra-rapid urease test for detection of Helicobacter pylori infection: A prospective evaluation. World J Gastroenterol. 10 (13), 1907-1910 (2004).
  10. Hortelano, I., Moreno, Y., Vesga, F. J., Ferrús, M. A. Evaluation of different culture media for detection and quantification of H. pylori in environmental and clinical samples. Int Microbiol. 23 (4), 481-487 (2020).
  11. Wang, Y. K., et al. Diagnosis of Helicobacter pylori infection: Current options and developments. World J Gastroenterol. 21 (40), 11221-11235 (2015).
  12. Gisbert, J. P., Pajares, J. M. Review article: 13C-Urea breath test in the diagnosis of Helicobacter pylori infection -- a critical review. Aliment Pharmacol Ther. 20 (10), 1001-1017 (2004).
  13. Laheij, R. J., Straatman, H., Jansen, J. B., Verbeek, A. L. Evaluation of commercially available Helicobacter pylori serology kits: A review. J Clin Microbiol. 36 (10), 2803-2809 (1998).
  14. Gisbert, J. P., Pajares, J. M. Stool antigen test for the diagnosis of Helicobacter pylori infection: A systematic review. Helicobacter. 9 (4), 347-368 (2004).
  15. Benigno, T. G. D. S., et al. pylori primary strains and virulence genotypes in the Northeastern region of Brazil. Rev Inst Med Trop Sao Paulo. 64, e47(2022).
  16. Savoldi, A., Carrara, E., Graham, D. Y., Conti, M., Tacconelli, E. Prevalence of antibiotic resistance in Helicobacter pylori: A systematic review and meta-analysis in World Health Organization regions. Gastroenterology. 155 (5), 1372-1382.e17 (2018).
  17. Kalach, N., et al. Usefulness of gastric biopsy-based real-time polymerase chain reaction for the diagnosis of Helicobacter pylori infection in children. J Pediatr Gastroenterol Nutr. 61 (3), 307-312 (2015).
  18. Han, X., et al. Quantitative PCR of string-test collected gastric material: A feasible approach to detect Helicobacter pylori and its resistance against clarithromycin and levofloxacin for susceptibility-guided therapy. Helicobacter. 28 (4), e12985(2023).
  19. Zhong, Z., et al. A retrospective study of the antibiotic-resistant phenotypes and genotypes of Helicobacter pylori strains in China. Am J Cancer Res. 11 (10), 5027-5037 (2021).
  20. Hussein, R. A., Al-Ouqaili, M. T. S., Majeed, Y. H. Detection of Helicobacter pylori infection by invasive and non-invasive techniques in patients with gastrointestinal diseases from Iraq: A validation study. PloS One. 16 (8), e0256393(2021).
  21. Bang, C. S., Lee, J. J., Baik, G. H. Artificial intelligence for the prediction of Helicobacter pylori infection in endoscopic images: Systematic review and meta-analysis of diagnostic test accuracy. J Med Internet Res. 22 (9), e21983(2020).
  22. Liu, J., et al. Rapid and multi-target genotyping of Helicobacter pylori with digital microfluidics. Biosens Bioelectron. 256, 116282(2024).
  23. Liu, H., Wang, J., Hu, X., Tang, X., Zhang, C. A rapid and high-throughput Helicobacter pylori RPA-CRISPR/Cas12a-based nucleic acid detection system. Clin Chim Acta. 540, 117201(2023).
  24. Fan, C. J., et al. Diagnostic accuracy of a real-time PCR assay for detection of Helicobacter pylori and resistance to clarithromycin and levofloxacin directly from stool. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 28 (12), 3836-3840 (2024).
  25. Patel, S. K., Pratap, C. B., Jain, A. K., Gulati, A. K., Nath, G. Diagnosis of Helicobacter pylori: what should be the gold standard. World J Gastroenterol. 20 (36), 12847-12859 (2014).
  26. Celiberto, F., et al. The state of the art of molecular fecal investigations for Helicobacter pylori (H. pylori) antibiotic resistances. Int J Mol Sci. 24 (5), 4361(2023).
  27. Yang, H., Hu, B. Diagnosis of Helicobacter pylori infection and recent advances. Diagnostics. 11 (8), 1305(2021).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

кПЦР калаколичественная ПЦРзонд TaqManтестирование образцов фекалиймутация 23S рРНКмутация gyrAрезистентность к кларитромицинурезистентность к хинолонам
Выявление инфекции Helicobacter pylori и устойчивости к антибиотикам с помощью количественного анализа полимеразной цепной реакции кала
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.