Методическая статья

Быстрое выявление вирулентности Helicobacter pylori и типирование с помощью технологии маркировки квантовыми точками

DOI:

10.3791/67792

⸱

13 июня 2025 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Laboratory Medicine, Guangdong Provincial People's Hospital (Guangdong Academy of Medical Sciences), Southern Medical University

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Среди многочисленных методов диагностики Helicobacter pylori иммунофлюоресценция квантовых точек позволяет быстро типировать и обнаруживать Helicobacter pylori, обеспечивая основу для принятия решений о клиническом лечении. В этой статье подробно рассказывается о значении технологии квантовых точек в типировании и обнаружении Helicobacter pylori.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Мы представляем метод, основанный на технологии мечения квантовыми точками для быстрого выявления вирулентности Helicobacter pylori и выполнения типирования, направленный на преодоление ограничений традиционных методов диагностики и обеспечение основы для персонализированного клинического лечения. Набор был разработан с использованием метода сэндвича с двойным антигеном. Это включало в себя ряд кропотливых этапов, включая создание буферных реакционных систем и проведение процессов активации и сопряжения для реакций антиген-антитело во время подготовки набора. Кроме того, существовали специальные процедуры сбора, обработки и тестирования образцов для определения инфекционного статуса и типа вирулентности Helicobacter pylori. Путем создания моделей данных для различных результатов (отрицательных, типа II и типа I) была проверена эффективность технологии квантовых точек в обнаружении типизации. В случае отрицательных образцов наблюдались слабые значения сигнала или их отсутствовали в соответствующих зонах обнаружения. Для образцов типа II наблюдалась специфическая картина положительных и отрицательных значений сигнала для различных антител, а для образцов типа I был отмечен отчетливый набор положительных сигнальных значений, соответствующих ключевым антителам. Более того, его применение в исследованиях, связанных с хроническим гастритом и раком желудка, продемонстрировало его ценность в качестве скринингового индикатора. Метод на основе квантовых точек имеет такие преимущества, как повышенная чувствительность и специфичность по сравнению с традиционными методами диагностики. Тем не менее, он также сталкивается с такими проблемами, как потенциальное влияние времени хранения образца и относительно высокие затраты. Тем не менее, ожидается, что благодаря непрерывным технологическим инновациям в будущем он будет играть более значительную роль в биомедицинской области для обнаружения Helicobacter pylori и диагностики связанных с ним заболеваний.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Helicobacter pylori (H. pylori) — грамотрицательная бактерия, обнаруженная между слизистой оболочкой привратника и подслизистой оболочкой желудочного отдела 1,2. В 1994 году Всемирная организация здравоохранения/Международное агентство по изучению рака (ВОЗ/МАИР) классифицировали его как канцероген класса I. В зависимости от того, экспрессируют ли они токсины вакуолярного цитотоксина А (VacA) и связанного с цитотоксином гена А (CagA), они делятся на два типа: вирулентный штамм инфекции H. pylori типа I: более вирулентный и более вредный для пациентов. Тесно связанная с частотой язвы желудка и двенадцатиперстной кишки и рака желудка, инфекция H. pylori типа II включает штаммы с низкой вирулентностью и слабой патогенностью, обычно проявляющиеся в виде легкого несварения желудка 3,4. Исследователи обнаружили, что уровень инфицирования типа I выше, чем типа II, при этом уровень инфицирования типа I и типа II составляет 72,4% и 27,6%соответственно5. Быстрое выявление типов H. pylori, особенно различие между типами I и II, имеет решающее значение для клинического лечения и профилактики заболеваний.

Хронический гастрит, вызванный инфекцией H. pylori, может привести к тяжелым заболеваниям пищеварительной системы, таким как атрофический гастрит, язвенная болезнь, аденокарцинома желудка и лимфома слизистой оболочки лимфоидной ткани (MALT) у инфицированных пациентов 6,7,8. Согласно прогнозам Исследования глобального бремени болезней 2014 года, начиная с 2010 года, примерно 3,5 смерти на 100 000 человек будут вызваны язвенной болезнью каждыйгод9. Отчеты об исследованиях показали, что почти 800 000 новых случаев рака желудка во всем мире в 2018 году были связаныс инфекцией H. pylori. В последние годы исследования показали, что инфекция H. pylori также тесно связана с неврологическими заболеваниями, сердечно-сосудистыми заболеваниями, диабетом и т. д. Инфекция H. pylori стала глобальной проблемой общественного здравоохранения. Поэтому точное выявление инфекции H. pylori важно для выявления сопутствующих заболеваний. Лечение имеет решающее значение, что делает точное обнаружение H. pylori горячей точкой исследований.

Поскольку уровень инфицирования H. pylori в Китае высок, своевременное и точное выявление инфекции H. pylori полезно для раннего выявления и лечения и имеет положительное значение для профилактики и лечения рака желудка. Существуют различные методы выявления инфекции H. pylori, включая инвазивные методы, такие как экспресс-тест на уреазу (RUT), окрашенная микроскопия участков слизистой оболочки желудка, эндоскопия и уреа-тест на выдох C13 или C14. (UBT), тест на антиген кала H. pylori (SAT) и другие неинвазивные методы 11,12,13. Эти методы обнаружения имеют определенные ограничения. Например, гистологическое исследование может дать ложноотрицательные результаты из-за качества и размера образца биопсии, выбранного в месте проведения биопсии; На дыхательный тест может влиять недавнее применение пациентом антибиотиков или ингибиторов протонной помпы (ИПП) и влияние различных влияющих факторов 11,14,15. Ввиду ограничений традиционных методов, таких как трудоемкость и недостаточная чувствительность и специфичность, разработка методов быстрой диагностики на основе иммунофлуоресценции квантовых точек (QD-IF) показала большой потенциал применения в области биотестов16,17. Анализ QD-IF представляет флуоресцентные зонды на квантовых точках для достижения специфического детектирования молекулярных мишеней путем специфического связывания с молекулярными мишенями18,19.

Квантовые точки — это полупроводниковые наночастицы с радиусом меньше или близким к радиусу экситона Бора, обычно от 1 до 10 нм. Квантовые точки используются в качестве флуоресцентных зондов. Флуоресцентные сигналы генерируются возбуждающими квантовыми точками, а количественные данные получаются путем измерения прибора. К его преимуществам относятся широкий диапазон длин волн возбуждения, узкие длины волн излучения, регулируемый размер флуоресценции, высокая чувствительность, хорошая оптическая стабильность, длительный срок службы флуоресценции, большой сдвиг Стокса и высокая эффективность квантовой флуоресценции. Квантовые точки преодолевают недостатки других маркеров, такие как короткое время люминесценции, точные требования к окружающей среде, плохая повторяемость, плохая стабильность (например, флуоресцентные красители), инактивация ферментов и низкая чувствительность. Флуоресцентный иммуноанализ на квантовых точках сочетает в себе преимущества флуоресцентного иммуноанализа на квантовых точках и флуоресцентного иммуноанализа на основе биомаркеров и обладает такими преимуществами, как простота, быстрота, высокая специфичность и высокая чувствительность20,21.

Традиционные диагностические инструменты для выявления H. pylori, включая бактериальный посев, уреа-тест на дыхание и серологические тесты, имеют свои ограничения. Бактериальное культивирование занимает много времени и требует строгих лабораторных условий, что часто приводит к относительно низкой чувствительности из-за привередливых требований к росту H. pylori. Дыхательный тест с мочевиной может дать ложноотрицательные результаты при определенных обстоятельствах, таких как недавнее использование антибиотиков или ингибиторов протонной помпы 22,23,24. В некоторых случаях серологические тесты могут указывать только на прошлый контакт, а не на текущий статус инфекции, и они не способны различать различные типы вирулентности патогена.

В отличие от этого, технология иммунофлуоресценции квантовых точек (QD-IF) стала многообещающей альтернативой. QD-IF сочетает в себе превосходные оптические свойства квантовых точек, такие как высокая интенсивность флуоресценции, узкие спектры излучения и хорошая фотостабильность, со специфичностью иммунологических реакций. Это позволяет быстро и с высокой чувствительностью обнаруживать антигены или антитела к H. pylori в биологических образцах. Кроме того, он обладает уникальным преимуществом, заключающимся в том, что он может одновременно идентифицировать тип вирулентности заражающего штамма, чего с трудом удается достичь традиционными методами. Заполняя этот пробел в диагностическом процессе, технология QD-IF обладает большим потенциалом для того, чтобы революционизировать способы диагностики и лечения инфекций H. pylori , способствуя более персонализированному и эффективному медицинскому вмешательству.

В целом, существует острая клиническая потребность в неинвазивном, эффективном методе диагностики, который может одновременно обнаруживать инфекцию H. pylori и ее типы вирулентности (тип I и тип II). Целью данной статьи является использование метода QD-IF для оценки наличия инфекции H. pylori в образцах тканей и построения быстрого и точного метода выявления типов инфекции H. pylori . Быстрое выявление инфекции H. pylori и ее вирулентных типов имеет большое значение для достижения точной медицины, улучшения эффектов лечения, снижения риска сопутствующих заболеваний и профилактики рака желудка. Он обеспечивает научно-теоретическую основу для выбора клиническим персоналом точных методов выявления инфекции H. pylori .

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Данное исследование (KY2025-191-01) было проведено в соответствии с рекомендациями комитета по этике исследований человека Народной больницы провинции Гуандун (Академия медицинских наук провинции Гуандун), Южный медицинский университет. Эта статья соответствует заявлению об освобождении от информированного согласия.

Примечание: Данное исследование направлено на использование технологии квантовых точек для проектирования и разработки набора для диагностики того, содержат ли виды крови участников антитела к уреазе Helicobacter pylori (Ureas), антитела к вакуолярному цитотоксину A (VacA) и антитела к цитотоксину, связанные с геном A (CagA), чтобы определить, инфицирована ли H. pylori и относится ли инфицированный штамм к типу I или типу II. В этом разработанном наборе используется метод сэндвича с двойным антигеном для измерения антител Helicobacter pylori Urаза, антител CagA и антител VacA. Когда испытуемый образец, содержащий целевое вещество, добавляется в прокладку для образца, он протекает через квантовую площадку и мембрану за счет сифонного действия, образуя твердофазный комплекс антиген-антитело. После обнаружения линия обнаружения и масса считываются анализатором соответственно. Сигнальное значение контрольной линии используется для определения отрицательного и положительного статуса антитела Urase, антитела CagA и антитела VacA на основе значений сигнала T/C каждого из трех антител. Схема конструкции представлена на рисунке 1.

figure-protocol-1
Рисунок 1: Принципиальная схема тестовой карты для набора текста H. pylori . На рисунке представлена структура и состав тестовой карты. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

1. Подготовка набора

  1. Создание буферной реакционной системы этанессульфоновой кислоты (MES) QDs-2-(n-морфин)
    1. Уравновесьте исходный раствор квантовых точек до комнатной температуры (RT). Затем аспирируйте 1000 μл и добавьте равный объем 2x раствора MES (конечная концентрация MES составила 10 ммоль/л).
    2. Перемешайте, встряхните и обрабатывайте ультразвуком в течение 30 секунд - 3 минут.
  2. Активация
    1. Добавьте 20 мг/мл 1-этил-3- (3-диметиламинопропил)карбодиимид (EDC)/N-гидроксисукцинимид (NHS) в буферную систему QDs-MES в соотношении 10:1. Перемешайте, встряхните и обработайте ультразвуком в течение 3 минут.
    2. Приготовленный раствор поместить на водяную баню при температуре 37 °C на 15 минут и центрифугировать при 13 000 × г в течение 20 минут.
    3. Удалите надосадочную жидкость из центрифугированного раствора и повторно растворите его 1x раствором MES. Несколько раз продуйте раствор пипеткой, встряхните, чтобы он равномерно перемешался, и обрабатывайте ультразвуком в течение 3 минут.
    4. Поместите вышеуказанный раствор в водяную баню при температуре 37 °C на 15 минут и центрифугируйте при 13 000 × г в течение 20 минут.
  3. Соединение
    1. Добавьте 0,03 мг антигена уреазы, антигена CagA, антигена VacA и антимышиного IgG козы в 1000 мкл раствора активации, многократно пипетируйте наконечник, встряхивайте и обрабатывайте ультразвуком в течение 3 минут.
    2. Поместите вышеуказанный раствор в водяную баню при температуре 37 °C и вмешайтесь в течение 3 часов.
  4. Укупорка и хранение
    1. Добавьте 100 μл раствора для блокировки (дополнительная таблица 1) и инкубируйте в течение 1 ч.
    2. Центрифугируйте заблокированный раствор при 13 000 × г в течение 15 минут.
    3. Удалите надосадочную жидкость из центрифугированного раствора, добавьте 750 μL восстановительного раствора (Дополнительная таблица 1), повторите пипетку, встряхните и обрабатывайте ультразвуком в течение 5 минут, затем храните при температуре 4 °C.

2. Подготовка пластин с покрытием

  1. Подготовка квантовых прокладок
    1. Разбавьте меченный квантовыми точками антигенный комплекс H. pylori 1:5 с буфером для разведения квантовых точек для получения необходимого количества в соответствии с серийным производством.
    2. Возьмите квантовую прокладку и равномерно распылите на нее определенное количество меченого квантовыми точками антигенного комплекса H. pylori с помощью пленочного распылителя и высушите при температуре 37 °C в течение 30 минут.
  2. Подготовка мембраны
    1. Используйте печатный буфер для разбавления материалов покрытия контрольной линии и тестовой линии и подготовьте необходимое количество в соответствии с объемом серийного производства.
    2. Наклейте нитроцеллюлозную мембрану на пластину из поливинилхлорида (ПВХ), используйте распылитель для удаления царапин из пленки, чтобы равномерно покрыть линию контроля качества и материалы линии тестирования на мембране, и высушите при температуре 57 °C в течение 24 часов.

3. Сборка

  1. Последовательно наклейте квантовые и сэмплированные прокладки на пластину из ПВХ с пленочным покрытием.

4. Нарезка на соломку

  1. С помощью полосореза разрежьте собранную большую доску на тестовые полоски.

5. Внутренняя упаковка

  1. Укомплектуйте упаковку в соответствии с требованиями к составу набора.
    ПРИМЕЧАНИЕ: В комплект входят следующие компоненты: (i) Тестовая карта: Она состоит из оболочки тест-полоски и тест-полоски. Тест-полоска состоит из пластины из ПВХ, прокладки для образца, квантовой прокладки (комплекс антигена, меченного квантовыми точками; комплекс содержит антиген Urаза, антиген CagA, антиген VacA и мышиный IgG), нитроцеллюлозной мембраны (область обнаружения фиксируется антигеном VacA, антигеном CagA и антигеном Urease (рекомбинантная экспрессия антигена эукариот), а зона контроля качества покрыта козьим антимышиным IgG (козье поли-антитело)), и впитывающая бумага. Разные спецификации упаковки имеют разное количество тестовых карт. Для реагента одного человека требуется одна тестовая карта. (ii) SD-карта: 1 штука/коробка. Компоненты тестовой карты и защищенной цифровой карты (SD) из разных партий тестовых наборов нельзя смешивать.

6. Обработка образцов

ПРИМЕЧАНИЕ: Для получения информации о сборе образцов обратитесь к Процедурам работы Национальной клинической лаборатории.

  1. Соберите кровь в разделительную гелевую пробирку. Следите за тем, чтобы не допустить гемолиза.
  2. Протестируйте отделенный образец сыворотки в течение 4 часов при комнатной температуре (ОТ). Если его не удается проверить вовремя, храните образец при температуре 2-8 °C в течение 3 дней. Для длительного хранения (в течение 1 года) укупорьте и храните при температуре ниже -20 °C.
  3. Восстановите образцы до состояния RT и тщательно перемешайте их перед использованием.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Замороженные и размороженные образцы должны быть полностью разморожены перед использованием, а количество циклов замораживания-размораживания не должно превышать пяти. Повторное замораживание и размораживание образцов может привести к ухудшению качества анализируемого вещества, и его следует избегать. Тяжелые образцы хила и гемолиза также повлияют на тест, и их следует избегать.

7. Порядок проведения теста

  1. Достаньте набор реагентов и материалы для контроля качества, чтобы сбалансировать их с RT.
  2. Подготовка образца: Центрифугируйте образцы цельной крови при плотности 1467 г в течение 10 минут.
  3. Убедитесь, что номер партии SD-карты совпадает с номером набора реагентов. Вставьте SD-карту в прибор для автоматической калибровки.
  4. Питание прибора и рабочего компьютера. Запустите указанное программное обеспечение и выберите модуль «Тест». Выберите Initialization Settings (Настройки инициализации ), чтобы инициализировать инструмент и дождаться успешного завершения.
  5. Получите доступ к области реагентов прибора и извлеките слот для тестовой карты. Откройте набор реагентов и выберите необходимое количество тестовых карт.
  6. Откройте мешочки из фольги с тестовыми картами и поместите их в слот в соответствии с указанной ориентацией. Снова вставьте слот для карты в область реагента прибора.
  7. Тестирование контроля качества (QC)
    1. В модуле Тест выберите Ручной ввод. Нажмите кнопку Ввод информации и введите конкретную информацию о материале контроля качества. Нажмите кнопку Создать. Поместите материалы контроля качества в специальный штатив для образцов, обеспечив правильный порядок и ориентацию.
    2. Нажмите «Начать тест», чтобы начать тестирование контроля качества. Игла для образца прибора отсасывает 80 мкл образца и вертикально дозирует его в лунку для образца. Прибор автоматически начнет синхронизировать время после дозирования пробы. Через 15 минут прибор выполнит обнаружение, считывает значения измерений и выдаст результаты.
  8. Тестирование образца: В модуле «Тест» выберите «Двунаправленная ЛИС». Поместите образцы для тестирования в специальный штатив для образцов, обеспечив надлежащий порядок и ориентацию. Нажмите «Начать тест». Прибор аналогичным образом отсасывает 80 мкл образца из каждого из них и обрабатывает их идентично процессу контроля качества.
  9. После завершения тестирования извлеките использованные тестовые карты из прибора и утилизируйте их как медицинские отходы.

8. Контроль качества

  1. Отрицательный результат теста на H. pylori : Проверьте и убедитесь, что результаты тестирования отрицательных референтных препаратов Helicobacter pylori , а именно антител к уреазе, антител CagA и антител VacA, являются отрицательными.
  2. Инфекция H. pylori типа II: Проверьте и убедитесь, что референтный препарат Helicobacter pylori типа II, то есть антитела Ureaza, положительны, а результаты тестирования антител CagA и антител VacA отрицательны.
  3. Инфекция H. pylori I типа: Проверьте и убедитесь, что референтный препарат Helicobacter pylori I типа, то есть антитела к Urease, антитела CagA и/или антитела VacA положительные.

9. Анализ результатов

  1. Инфекция типа II слабыми или нетоксигенными штаммами: когда показания антител Urease положительные, а показания антител CagA и антител VacA отрицательные, интерпретируйте это как инфекцию слабым или нетоксигенным штаммом H. pylori .
  2. Инфекция I типа высокопатогенными штаммами, продуцирующими токсины: когда показания антител Urease положительные, а показания антител CagA или антитела VacA положительные, или оба положительны, интерпретируют это как инфекцию высокопатогенным штаммом, продуцирующим токсин H. pylori .
  3. Отрицательные: Когда показания антител Urease, антител CagA и антител VacA отрицательные, интерпретируйте это как отсутствие инфекции штаммами H. pylori .
  4. Invalid (Недействительный): Если прибор считает результат недействительным, проверьте наличие неправильной работы или отказа набора реагентов и повторите процедуру.

10. Калибровка флуоресцентного анализатора

  1. Сначала включите анализатор и дайте ему прогреться около 15 минут, чтобы стабилизировать его производительность. Затем вставьте калибровочный стандарт, предоставленный производителем, в держатель для образцов.
  2. Затем откройте функцию калибровки в интерфейсе анализатора и запустите процесс. Анализатор автоматически определит флуоресценцию эталона и соответствующим образом настроит его внутренние параметры в соответствии с заданными эталонными значениями.
  3. После этого снимите калибровочный стандарт и вставьте пустой образец, чтобы убедиться, что показания находятся в допустимом диапазоне.
  4. Регулярное повторение этих шагов в соответствии с рекомендованным графиком помогает поддерживать точность анализатора для надежных измерений.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

На рисунке 2 показан принцип работы флуоресцентного иммуноанализатора с квантовыми точками. В основном он состоит из источника света возбуждения, источника приемного света, модуля схемы фотоэлектрического преобразования, схемы обработки сигналов, схемы преобразования значений AD и модуля расчета обработки сигналов; Возбуждающий источник света генерирует флуоресцентные маркеры. Он поглощает монохроматический свет с аналогичной длиной волны, и монохроматический свет светит на фиксированную точ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Современные методы диагностики Helicobacter pylori в основном делятся на две категории: инвазивные и неинвазивные26. Такие методы, как экспресс-тест на уреазу (RUT), гистология, молекулярная биология и бактериальное культивирование, имеют ограничения по инвазивности, чувствительности, специфичности, временным ограничениям, стоимости, требованиям к оборудованию, обработке образцов и мониторингу в режиме реального времени. Более распространенной является эк...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Данное исследование финансировалось в рамках проекта Фонда фундаментальных и прикладных фундаментальных исследований провинции Гуандун (грант No: 2021A1515220022, 2022A1515220023).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
1-(3-диметиламинопропил) -3-этилкарбодиимида гидрохлорид (EDC)Sigma25952-53-85 г/флакон
2-(n-морфин) этансульфоновая кислота (MES)Sigma145224-94-8100 г/флакон
ЦентрифугаSigma3K15
Флуоресцентный иммуноанализаторGuangzhou Labsim Biotech Co., LtdПровинция Гуандун Регистрационный номер медицинского устройства.
Helicobacter pylori Typing Test Kit Chongqing iSIA BIO-Technology Co., LtdНациональная регистрация медицинского изделия No 20203400330QDs Метод иммунофлуоресценции
Натриевая соль N-гидрокситиосукцинимида (NHS)Sigma106627-54-71 г/флакон
2017221743

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Tacconelli, E., et al. research and development of new antibiotics: WHO priority list of antibioticresistant bacteria and tuberculosis. Lancet Infect Dis. 18 (3), 318-327 (2018).
  2. Kamboj, A. K., et al. Helicobacter pylori: past, present, and future of treatment. Mayo Clin Proc. 92 (4), 599-604 (2017).
  3. Yamaoka, Y. Disease mechanisms: Helicobacter pylori virulence factors. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 7 (11), 629-641 (2010).
  4. Sharndama, H. C., Mba, I. E. Helicobacter pylori: an updated overview on its virulence and pathogenesis. Braz J Microbiol. 53 (1), 33-50 (2022).
  5. Lin, Y., et al. Infection status of type I and type II Helicobacter pylori in areas with high incidence of gastric cancer and its impact on gastrin and pepsinogen levels. World J Gastroenterol. 26 (25), 3673-3685 (2020).
  6. Li, Y. H., et al. Global prevalence of Helicobacter pylori infection from 1980 to 2022: a systematic review and metaanalysis. Lancet Gastroenterol Hepatol. 8 (6), 553-564 (2023).
  7. Karbalaei, M., Keikha, M. Rescue effect of lactobacillicontaining bismuth regimen on Helicobacter pylori treatment failure. New Microbiol New Infect. 42, 100904(2021).
  8. Malfertheiner, P., et al. Helicobacter pylori infection. Nat Rev Dis Primers. 9 (1), 19(2023).
  9. Stewart, B., et al. Global burden of disease requiring emergency surgery. Br J Surg. 101 (1), e9-e22 (2014).
  10. de Martel, C., et al. The global burden of cancer attributable to infection in 2018: a global incidence analysis. Lancet Glob Health. 8 (2), e180-e190 (2020).
  11. Godbole, G., et al. Review: diagnosis of Helicobacter pylori infection. Helicobacter. 25 (S1), e12735(2020).
  12. Lee, Y. C., et al. Diagnosis and treatment of Helicobacter pylori infection. Annu Rev Med. 73 (1), 183-195 (2022).
  13. Fischbach, W., Malfertheiner, P. Helicobacter pylori infection. Ger Int Med J. 115, 429-436 (2018).
  14. Zhang, C., et al. Survey on the quantitative detection of serum Helicobacter pylori antibodies in clinical laboratories in my country. J Clin Lab Anal. 36 (1), e24069(2021).
  15. Wan, W. S., et al. Improving the detection rate of Helicobacter pylori in chronic gastritis biopsies: a comparative analysis of H&E, methylene blue, WarthinStarry, immunohistochemistry, and quantum dot immunohistochemistry. Front Oncol. 13, 1229871(2023).
  16. Bodo, J., et al. Quantitative in situ detection of phosphoproteins in fixed tissues using quantum dot technology. J Histochem Cytochem. 57 (7), 701-708 (2009).
  17. Chen, C., et al. Quantum dotbased immunofluorescence technology for quantitative determination of HER2 expression in breast cancer. Biomaterials. 30 (15), 2912-2918 (2009).
  18. Kuang, H., et al. Recent developments in quantum dot analytical applications. TrAC Trends Anal Chem. 30 (10), 1620-1636 (2011).
  19. Park, Y., et al. Medically transformable quantum dots for biosensing and imaging. J Photochem Photobiol C Photochem Rev. 30, 51-70 (2017).
  20. SanmartinMatalbobs, J., et al. Semiconductor quantum dots as target analytes: properties, surface chemistry and detection. Chem Detect Nanomaterials. 12 (14), 2501(2022).
  21. Katan, C., Mercier, N., Even, J. Quantum and dielectric confinement effects in lowerdimensional hybrid perovskite semiconductors. Chem Rev. 119 (5), 3140-3192 (2019).
  22. Chinese Medical Association Branch of Health Management. Physical examination population 13C expert consensus on technical specifications for urea breath tests. Health Exam Manag. 2 (2), 94-96 (2021).
  23. National Clinical Medical Research Center for Digestive Diseases. Expert consensus on clinical application of Helicobacter pyloriurea breath test (2020). Chin J Health Manag. 14 (2020), 510-513 (2020).
  24. Zhang, Y., et al. The influence factors of Helicobacter pylori infection were detected by urea breath test. Chin J Clin Gastroenterol. 32 (3), 197-202 (2020).
  25. Lin, B., et al. Diagnostic value of gastric function triad and Helicobacter pylori typing in chronic gastritis and gastric cancer. Labeled Immunoassays Clin Med. 30 (1), 74-76 (2023).
  26. Cardos, A. I., et al. Evolution of diagnostic methods for Helicobacter pylori infection: from traditional tests to hightech, advanced sensitivity and identification tools. Diagnostics. 12 (508), 1-23 (2022).
  27. Ding, S. Z., et al. Chinese consensus report on familybased Helicobacter pylori infection control and management (2021 edition). Gut. 71 (2), 238-253 (2021).
  28. Wan, W., et al. Comparison of quantum dot immunofluorescence histochemistry and conventional immunohistochemistry in detecting Helicobacter pylori infection in paraffinembedded tissue of gastric biopsy. J Mol Histol. 52, 461-466 (2021).
  29. Zhou, Y., et al. Development of a fast and sensitive doubleantigen sandwich lateral flow immunoassay based on quantum dot nanobeads and its clinical performance in detecting SARSCoV2 total antibodies. Sens Actuators B Chem. 343, 130139(2021).
  30. Liu, H., et al. Consistency analysis of highsensitivity cardiac troponin I in peripheral blood and venous blood using quantum dot immunofluorescence method and its clinical application in acute myocardial infarction. J Chest Dis. 14 (4), 1267-1274 (2022).
  31. Xirong, W., et al. Development of quantum dotbased lateral flow immunoassay test strips for rapid and sensitive detection of SARSCoV2 neutralizing antibodies. Sci Rep. 13, 22253(2023).
  32. Purwidyantri, A., et al. Programmable graphenebased microfluidic sensor for DNA detection. Sens Actuators B Chem. 367, 132044(2022).
  33. Lee, K. S., Wagner, M., Stocker, R. Ramanbased sorting of microbial cells to link functions to their genes. Microb Cell. 7 (3), 62-65 (2020).
  34. Hu, C., et al. Design and fabrication of carbon dots for energy conversion and storage. Chem Soc Rev. 48 (8), 2315-2337 (2019).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Helicobacter pylori

Похожие статьи