Почечная заготовка в доклинической модели крупного животного

Eleni M. Drivas; Amanda H. Loftin; Siavash Khaki; Alexandrea L. Bailey; Michael Wallis; Jessica Izzi; Byoung Chol Oh; Gerald Brandacher

doi:10.3791/67835

Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Почечная заготовка в доклинической модели крупного животного

1.2K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/67835

⸱

2 мая 2025 г.

Eleni M. Drivas¹ , Amanda H. Loftin¹^,² , Siavash Khaki¹ , Alexandrea L. Bailey³ , Michael Wallis³ , Jessica Izzi³ , Byoung Chol Oh^*¹ , Gerald Brandacher^*¹^,⁴

¹Department of Plastic and Reconstructive Surgery, Johns Hopkins University School of Medicine, ²Department of Pathology, Johns Hopkins University School of Medicine, ³Department of Molecular and Comparative Pathobiology, Johns Hopkins University School of Medicine, ⁴Department of Visceral, Transplant and Thoracic Surgery, Innsbruck Medical University

^* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

В данной статье мы представляем протокол, в котором подробно описывается хирургическая модель получения почки в доклинической модели свиньи для последующей машинной перфузии или трансплантации.

Аннотация

Машинная перфузия превратилась в жизнеспособную стратегию для оценки, мониторинга, лечения и оптимизации органов ex vivo , а также для продления срока хранения. Модели крупных животных имели первостепенное значение для развития и оптимизации этих технологий. Тем не менее, для обеспечения качества трансплантата и воспроизводимости данных следует придерживаться стандартизированных и клинически переводимых хирургических методов заготовки органов и тканей. Таким образом, здесь мы описываем оптимизированный протокол закупки почек в доклинической модели свиней. Восстановление почек проводится с использованием свиней смешанной породы (йоркширский кросс/микс). Вкратце, после стерильной дезинфекции и драпировки операционного поля, выполняется полный разрез по средней линии для обеспечения оптимального доступа к обеим почкам. Мочеточник, почечная вена и артерия рассекаются до тех пор, пока они не выйдут из нижней полой вены и аорты соответственно. После полной почечной диссекции мочеточник перевязывают и разрезают дистально. Затем донорское животное полностью гепаринизируется с концентрацией 100 МЕ на кг/массу тела. Далее почечная артерия пережимается вплотную к аорте, а почечная вена пережимается вплотную к полой вене с помощью сосудистого зажима Сатинского. Затем почечный трансплантат резецируется, а почечная артерия немедленно канюлируется на заднем столе. Затем почка будет промыта ледяным консервационным раствором и храниться на льду до аппаратной перфузии или трансплантации. Наконец, культя почечной артерии перевязывается шелковой лигатурой 2-0, а полая вена закрывается полипропиленовым швом 6-0. Этот метод восстанавливает почки и моделирует либо живого (одна почка), либо мертвого (две почки) донора. Восстановление одной почки дает преимущество для проведения последующей аутотрансплантации. В модели умершего донора кровь может быть собрана до эвтаназии путем введения игл для мешка с кровью непосредственно в аорту, тем самым обескровливая животное и обеспечивая кровь для перфузии ex vivo с помощью аппарата.

Введение

Трансплантация почки является оптимальным методом лечения терминальной стадии почечной недостаточности (ТХПН), обеспечивая улучшение качества жизни и долгосрочные результаты по сравнению с диализом¹. Несмотря на достижения в области сохранения органов, десятки людей умирают каждый день от ТХПН, находясь в списке ожидания на пересадку почки^. Аппаратная перфузия — это растущая область, которая увеличивает время хранения, позволяя расширить донорские сети и более эффективно распределять органы. Эта технология также позволяет осуществлять мониторинг и оптимизацию органов ex vivo, те....