Это видео и протоколом продемонстрировать, как имплантат застекленным окном черепа у грызунов. Эти препараты могут быть использованы при хронических в естественных условиях двухфотонного изображения новой коры на временных масштабах месяцев. Он также может быть использован и для других типов изображений, в том числе оптических внутренней визуализации сигнала.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Процедура Краниотомия хирургии при хроническом изображений мозга
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Методов визуализации становятся все более важными в исследовании функции мозга. Среди них, двухфотонного микроскопии лазерного сканирования возникла как чрезвычайно полезный метод, поскольку он позволяет изучать живой нетронутой мозга. При соответствующей подготовки, эта техника позволяет наблюдать же области коры хронически, от нескольких минут до нескольких месяцев. В этом видео мы покажем, подготовка к хроническим в естественных изображений мозга с помощью двухфотонной микроскопии. Этот метод был впервые удалось доктор Карел Свобода, который в настоящее время Медицинского института Говарда Хьюза следователя на Janelia Farm. Подготовка, как показано здесь, может использоваться для работы с изображениями из неокортекса структуры (например, дендритные и аксонального динамика), для записи нейронной активности с использованием кальций-чувствительной краски, изображения корковой динамики кровотока, или для собственного оптические исследования изображений. Глубокая изображений неокортекса можно с оптимальным черепной хирургии окна. Действуя под наиболее стерильных условиях возможное, чтобы избежать инфекции, наряду с использованием особой осторожностью, чтобы не повредить мозговой оболочки во время операции, приведет к успешной и длительной застекленным черепных окон.
Протокол
- Обезболить мышей с изофлуран (4% для индукции, 1,5-2% для хирургии), используя IACUC утвержденными процедурами. Важно, чтобы хвост и / или ног пинчей используются для того, чтобы обеспечить животным полностью седации.
- Использование грызунов триммер, брить волосы от затылка до глаз.
- Наведите в стереотаксической раме, над водой хирургии рециркуляции одеяло. Твердо безопасный голову ухом баров.
- Применение глазной мази, для того, чтобы предотвратить глаз животного от высыхания.
- Администрирование, подкожно, дексаметазон (0,2 мг / кг) и Carprofen (5 мг / кг), чтобы предотвратить отек мозга и / или воспалительная реакция, соответственно.
- Пе....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Как было показано в видео и в дополнительных фигур, черепно подготовке окно, в сочетании с использованием двух-фотонной микроскопии, является очень мощным инструментом для изучения в естественных условиях структуры и функции коры головного мозга. Техника требует упорных тренировок, чтобы ознакомиться с соответствующими анатомии и тонкой хирургической процедуры и навыки, что этот препарат требует. Только нетронутой операции могут быть использованы для хронических изображений. Если длительность манипулируют чрезмерно или проткнуть, препарат н.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
Титан баров на заказ
Ссылки
- Svoboda, K., Denk, W., Kleinfeld, D., Tank, D. W. In vivo dendritic calcium dynamics in neocortical pyramidal neurons. Nature. 85, 161-165 (1997).
- Lendvai, B., Stern, E. A., Chen, B., Svoboda, K. Experience-dependent plasticity of dendritic spines in the developing....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
