Методическая статья

Сравнительное исследование содержания полисахаридов и антиоксидантной активности Hippophae rhamnoides subsp. sinensis и Hippophae gyantsensis

DOI:

10.3791/68855

⸱

15 августа 2025 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 2School of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В этом исследовании сравнивали содержание полисахаридов в Hippophae rhamnoides subsp. sinensis Rousi и Hippophae gyantsensis (Rousi) Y. S. Lian, полученных путем экстракции горячей водой и количественно оцененных с помощью фенол-серной колориметрии. Мы также исследовали in vitro антиоксидантную активность полисахаридов из этих двух видов Hippophae с помощью экспериментов по удалению свободных радикалов 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В данной статье представлено хорошо спланированное и углубленное сравнительное исследование выходов, содержания и антиоксидантной активности полисахаридов двух видов Hippophae , имеющих большую исследовательскую ценность, а именно, Hippophae rhamnoides subsp. sinensis Rousi и Hippophae gyantsensis (Rousi) Y. S. Lian. Общие полисахариды H.rhamnoides subsp. sinensis и H. gyantsensis были получены путем экстракции горячей водой. Сравнивали выходы и точно определяли содержание полисахаридов с помощью фенол-серной колориметрии и сравнивали. Между тем, антиоксидантную активность полисахаридов оценивали с помощью поглотителя свободных радикалов 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил (DPPH). Результаты показали, что выход полисахаридов (процентное содержание сырого экстракта по отношению к сырью) H. rhamnoides subsp. sinensis (1,18% ± 0,02%) был значительно ниже, чем у H. gyantsensis (3,12% ± 0,06%) (P < 0,01). Содержание полисахаридов (определяемых как чистые полисахариды в экстракте) H. rhamnoides subsp. sinensis (352,97±1,07 мг/г) было значительно выше, чем у H. gyantsensis (300,21 ± 1,49 мг/г) (P < 0,01). Полуингибирующая концентрация поглотителя свободных радикалов DPPH полисахаридов H.rhamnoides subsp. sinensis (0,026 ± 0,004 мг/мл) была несколько ниже, чем у полисахаридов H. gyantsensis (0,021 ± 0,004 мг/мл). Тем не менее, не было обнаружено существенной разницы между двумя видами Hippophae (P > 0,05). Этот эксперимент прояснил различия в выходе, содержании и антиоксидантной активности полисахаридов между H.rhamnoides subsp. sinensis и H. gyantsensis. Данная работа может послужить научной основой для оценки качества облепихи и дальнейшей разработки активных компонентов полисахаридов.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Облепиха – это высушенные спелые плоды растения семейства Облепиховые. Он является широко используемым лекарственным и съедобным материалом в Китае, а также важным источником пищевых добавок и товаров для здоровья в Индии, России, Финляндии и других европейских странах из-за его свойств бодрить селезенку, способствовать пищеварению, облегчать кашель и выгонять мокроту, способствовать кровообращению и рассеивать застой крови.. Облепиха содержит богатый набор биологически активных компонентов, таких как флавоноиды, фенольные соединения, полисахариды, гликозиды и органические кислоты, и имеет давнюю историю применения в традиционной китайской медицине 2,3. Вообще, флавоноиды считаются важнейшими биологически активными соединениями облепихи. Тем не менее, недавно было признано, что полисахариды также обладают отличной физиологической и фармакологической активностью и поэтому привлекли внимание научных исследователей. Показано, что полисахариды облепихи проявляют активность в регуляции иммунной системы, защите печени, регулировании нарушений липидного обмена и кишечной микробиоты, а также антиоксидантное, противовоспалительное, противоопухолевое и гипогликемическое действие 4,5,6. Они могут действовать как природные антиоксиданты, что позволяет разрабатывать новые функциональные продукты питания и фармацевтические препараты. Между тем, полисахариды облепихи также подвержены разложению желудочной кислотой, что благотворно сказывается на усвоении и утилизации питательных веществ в организме человека 7,8.

Экстракция горячей водой (HWE), микроволновая экстракция и ультразвуковая экстракция являются широко используемыми методами экстракции полисахаридов облепихи9. Структуры полисахаридов, полученных различными методами экстракции, различаютсяпомоносахаридному составу, молекулярной массе (Mw), степени ветвления, содержанию уроновой кислоты, типам гликозидных связей и конформации триспирали11,12. Как правило, полисахаридные растворы с высоким содержанием Mw обладают высокой вязкостью и низкой растворимостью, что может влиять на их биологическую активность и применение13. HWE является наиболее часто используемым методом экстракции полисахаридов в лабораторных и промышленных условиях благодаря его преимуществу простоты 14,15. Более того, это один из наиболее часто используемых методов экстракции полисахаридов облепихи9. Поэтому в данном исследовании полисахариды экстрагировались с помощью HWE. К основным методам определения содержания полисахаридов относятся фенол-сернокислотный и антрон-сернокислотный методы 16,17,18,19. Фенол-сернокислотный метод широко применяется из-за его простой процедуры обнаружения, хорошей стабильности и высокой чувствительности20. Wen et al. определяли содержание полисахаридов, экстрагированных из облепихи фенол-сернокислотным методом21. Поэтому в данном эксперименте содержание полисахаридов определяли фенол-сернокислотным методом. Глубина раствора соединения апельсина, образующегося после фенол-сернокислотной реакции, пропорциональна содержанию полисахаридов и может быть определена при длине волны 490 нм22.

Природные полисахариды проявляют замечательную антиоксидантную активность in vivo и in vitro. Полисахариды малины могут ослаблять окислительный стресс в моделях диеты с высоким содержанием жиров, регулируя микробиоту кишечника23. Полисахариды являются основными активными компонентами Pueraria lobata и проявляют разнообразную биологическую активность, включая антиоксидантное действие24. Dou et al. обнаружили, что полисахариды ежевики обладают физиологическими функциями, такими как антиокисление. Антиоксидантную активность полисахаридов обычно оценивают на основе их способности поглощать различные свободные радикалы, включая 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил (DPPH), гидроксил и супероксид-анионные радикалы, а также их способность поглощать катионы ABTS-радикалов26. Анализ DPPH широко используется, поскольку он измеряет способность антиоксидантов восстанавливать фиолетовые радикалы DPPH до бледно-желтых стабильных молекул засчет переноса атомов водорода. Оставшиеся фиолетовые DPPH-радикалы количественно оценивают с помощью ультрафиолетового (УФ) видимого (Vis) спектрофотометра на длине волны примерно 515-520 нм для определения антиоксидантной активности 28,29.

В предыдущих исследованиях изучалось содержание и антиоксидантная активность полисахаридов облепихи21. Тем не менее, подавляющее большинство этих исследований было ограничено Hippophae rhamnoides subsp. sinensis. Это наиболее часто используемый и широко распространенный вид гиппофей в Китае и официально зарегистрирован в Китайской фармакопее. Об исследованиях Hipphophae gyantsensis, эндемичного для Сизана, Китай, который часто используется в тибетской медицине и задокументирован в Каталоге тибетских лекарственных материалов провинции Сычуань, сообщалось редко. Кроме того, ни в одном исследовании не сравнивали содержание и антиоксидантную активность полисахаридов различных видов Hippophae , а именно H. rhamnoides subsp. sinensis и H. gyantsensis. Таким образом, в этом исследовании сначала сравнивается содержание полисахаридов в H. rhamnoides subsp. sinensis и H. gyantsensis, экстрагированных с помощью HWE и количественно определенных с помощью колориметрии фенол-серной кислоты. Антиоксидантная активность полисахаридов этих двух видов Hippophae была дополнительно исследована с помощью анализов DPPH на удаление свободных радикалов. Ожидается, что настоящее исследование предоставит научные данные для оценки качества и дальнейшей разработки активных полисахаридных компонентов двух вышеупомянутых видов Hippophae .

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Образцы и материалы

  1. Соберите образцы облепихи различных видов Hippophae с плато Цинхай-Сицзан.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Образцы были идентифицированы доцентом Юэ Лю из Университета традиционной китайской медицины Чэнду. Образцы ваучеров были переданы на хранение в Школу этнической медицины Университета традиционной китайской медицины Чэнду. Информация о выборке представлена в таблице 1. Подробная информация о реагентах и оборудовании, использованных в этом исследовании, приведена в Таблице материалов.
  2. Высушите образцы в духовке при температуре 40 °C в течение 72 часов.
  3. Измельчите по 20 г каждого образца облепихи в порошок и пропустите его через сито No 3. Обработайте каждый образец с помощью трех параллельных повторов. Продолжайте измельчать образцы, которые не прошли через сито, затем просейте их до тех пор, пока все не будут просеяны.
  4. Храните образцы при температуре −20 °C для последующих исследований.

2. Экстракция полисахаридов облепихи

Примечание: В данном исследовании был принят ранее установленный метод экстракции облепихи с некоторыми модификациями для получения полисахаридов30.

  1. Взвесьте 5,0 г порошка образца облепихи и поместите его в колбу с круглым дном объемом 250 мл. Добавьте в порошок 50 мл безводного этанола и замочите его при комнатной температуре (RT; 25 °C) на 24 ч для удаления липофильных компонентов. Обработайте каждый образец с помощью трех параллельных повторов.
  2. Отфильтруйте порошок образца, который был замочен на ночь, с помощью воронки Бюхнера, затем выбросьте фильтрат, чтобы получить остатки фильтра. Остатки фильтра трижды промойте 50 мл деионизированной воды и высушите до постоянного веса при 40 °C.
  3. Обезжиренный остаток фильтра переложите в высушенную колбу с круглым дном объемом 250 мл, добавьте 150 мл деионизированной воды в соотношении твердое вещество: жидкость 1:30 (г/мл) и дважды в течение 2 ч выполните экстракцию обратным потоком на водяной бане при температуре 80 °C. Отделите фильтрат до получения сырого раствора полисахарида облепихи.
  4. Концентрируйте экстракт с помощью ротационного испарителя при температуре 50 °C в течение 1,5 ч. Концентрированный раствор хранить в холодильнике при температуре 4 °C для последующего использования.
  5. Добавьте реагент Севаж (CHCl3:C4H9OH = 4:1, v:v) в раствор сырого полисахарида в соотношении реагент Севаж: объемный раствор сырого полисахарида 1:4. Перемешивайте смесь магнитной мешалкой со скоростью 1050 об/мин в течение 20 минут.
  6. Перелейте жидкость в центрифужную пробирку объемом 50 мл и центрифугируйте при температуре 4000 × г в течение 15 минут, затем соберите надосадочную жидкость. Повторите описанную выше операцию три раза до тех пор, пока на границе между двумя фазами не появится осадок белого флокулянта.
  7. Сконцентрируйте полисахаридный экстракт облепихи после удаления белка. Добавьте безводный этанол в объемном соотношении 1:3 для осаждения безводного этанола и поместите смесь при температуре 4 °C на ночь.
  8. Снимите верхний слой безводного этанола, переложите смесь в центрифужную пробирку объемом 50 мл и центрифугируйте при температуре 4000 × г в течение 15 минут для получения осадка. Сублимационную сушку осадка для получения общего количества полисахаридов.
  9. Рассчитайте общий выход полисахаридов, используя уравнение (1) ниже:
    figure-protocol-1
    ПРИМЕЧАНИЕ: В уравнении (1) m представляет массу (г) полисахаридов облепихи, а M представляет массу (г) образца облепихи.

3. Определение содержания полисахаридов

  1. Приготовление раствора
    1. Приготовление раствора фенольного реагента
      1. Аккуратно взвесьте 3 г фенола и переложите его в коричневую мерную колбу. Добавьте 50 мл деионизированной воды для растворения фенола.
      2. Тщательно встряхните смесь до однородности. Наклейте на колбу этикетку и храните ее для последующего использования.
    2. Приготовление стандартного раствора глюкозы
      1. Точно взвесьте 10 мг безводной глюкозы и переложите ее в мерную колбу объемом 10 мл. Добавьте деионизированную воду для растворения глюкозы и хорошо встряхните смесь.
      2. Разбавьте смесь до нужного объема деионизированной водой до получения стандартного раствора глюкозы.
    3. Приготовление раствора испытуемого образца.
      1. Точно взвесьте 5 мг лиофилизированных полисахаридов облепихи (ZG1-ZG5 и JZ1-JZ5) в мерные колбы (n = 10). Добавьте деионизированную воду в каждую колбу до конечного объема 50 мл.
      2. Обработайте смесь ультразвуком в течение 20 мин до полного растворения полисахаридов. Обработайте каждый образец с помощью трех параллельных повторов.
  2. Построение стандартной кривой
    ПРИМЕЧАНИЕ: При фенол-сернокислотном методе полисахариды реагируют с концентрированной серной кислотой с образованием производных фурфула, которые затем конденсируются с фенолом с образованием оранжево-желтого соединения. Максимальная длина волны поглощения этого соединения составляет примерно 490 нм. Поэтому длина волны детектирования для этого эксперимента была установлена на 490 нм22.
    1. Стандартный раствор глюкозы разбавить деионизированной водой до концентрации 0,1 мг/мл. С помощью микропипетки осторожно перенесите 200, 300, 400, 500, 600 и 700 мкл стандартного раствора глюкозы в шесть отдельных чистых пробирок. Добавьте чистую воду до общего объема 1,0 мл, затем аккуратно перемешайте каждый раствор, чтобы обеспечить равномерное разбавление.
    2. Добавьте в упомянутые выше пробирки 1,0 мл 6% раствора фенола и 5,0 мл серной кислоты. Хорошо перемешать, остудить, а затем дать постоять на RT в течение 30 минут.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Фенол является токсичным химическим соединением, а концентрированная серная кислота вызывает коррозию. При приготовлении растворов фенола и серной кислоты следует надевать перчатки, а процедуру проводить внутри вытяжного шкафа.
    3. Переложите вышеупомянутые образцы в кюветы и используйте чистую воду в качестве заготовки вместо образца. Измерьте их поглощение на длине волны 490 нм с помощью УФ-ВИД спектрофотометра и трех повторов.
    4. Постройте стандартную кривую с концентрацией глюкозы по оси x и значениями поглощения по оси y. Получите уравнение регрессии и вычислите коэффициент корреляции (R²).
      ПРИМЕЧАНИЕ: УФ-ВИД спектрофотометр необходимо предварительно нагреть за полчаса. При измерении поглощения на этом этапе поглощение должно быть в диапазоне от 0,2 до 0,8. Поэтому концентрация образца должна быть количественно определена.
  3. Методология исследования
    1. Тест на точность:
      1. Возьмите JZ2 и приготовьте тестовый раствор в соответствии со методом, описанным в пункте 3.1.3. Проводят фенол-серную колориметрию по методу, описанному в шаге 3.2.2.
      2. Затем определяют абсорбцию в соответствии с процедурой, описанной в шаге 3.2.3. Повторите эту процедуру шесть раз и рассчитайте относительное стандартное отклонение (ОСД).
    2. Испытание на устойчивость:
      1. Приготовьте образец раствора JZ2, следуя методу, описанному в шаге 3.1.3. Через 0, 2, 4, 6, 8 и 10 ч после пробоподготовки проводят фенол-серную колориметрию в соответствии со методом, указанным в шаге 3.2.2.
      2. Затем определите абсорбцию, следуя процедуре, описанной в шаге 3.2.3, и рассчитайте ДСД.
    3. Тест на повторяемость:
      1. Приготовьте образец раствора JZ2, следуя методу, описанному в шаге 3.1.3. Подготовьте шесть повторов параллельно. Проводят фенол-серную колориметрию в соответствии со методом, указанным в. 3.2.2.
      2. После этого определите абсорбцию, следуя процедуре, описанной в шаге 3.2.3, и рассчитайте RSD.
    4. Тест на восстановление:
      1. Возьмите JZ2 и приготовьте тестовый раствор в соответствии со методом, описанным в пункте 3.1.3. Подготовьте девять повторений параллельно. Добавьте эталонные растворы, эквивалентные 80%, 100% и 120% от общего содержания полисахаридов в образце, и приготовьте три параллельных образца.
      2. Проводят фенол-серную колориметрию в соответствии со методом, указанным в пункте 3.2.2. Затем определите абсорбцию, следуя процедуре, описанной в шаге 3.2.3, и рассчитайте скорость восстановления с помощью уравнения (2).
        figure-protocol-2
        ПРИМЕЧАНИЕ: В уравнении (2) А представляет количество глюкозы в образце облепихи, В представляет количество добавленной глюкозы, а С представляет измеренное значение раствора, содержащего глюкозу и раствор образца облепихи.
  4. Определение содержания
    1. Приготовьте раствор образца, как описано в шаге 3.1.3, и выполните фенол-серную колориметрию в соответствии со методом, указанным в шаге 3.2.2.
    2. Определите абсорбцию, следуя процедуре, описанной в шаге 3.2.3, и рассчитайте содержание полисахаридов с использованием метода стандартной кривой. Выполняйте эти операции параллельно три раза для каждого образца.

4. Активность поглощения радикалов DPPH31,32

  1. Точно взвесьте 2,7 мг DPPH в пустую мерную колбу объемом 50 мл. Растворите его в 50 мл безводного этанола для приготовления стокового раствора DPPH с концентрацией 0,054 мг/мл и получите рабочий раствор DPPH.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Раствор DPPH следует хранить в темноте.
  2. Точно взвесьте 5 мг витамина С (Vc) в пустую объемную колбу объемом 10 мл и растворите ее в 10 мл деионизированной воды для приготовления раствора Vc с концентрацией 0,5 мг/мл. Его последовательно разбавляют для получения тестовых растворов Vc с концентрациями 0,5, 0,125, 0,03125, 0,0078125 и 0,001953 мг/мл.
  3. Точно взвесьте по 5 мг каждого полисахарида облепихи (ZG1-ZG5 и JZ1-JZ5). Растворите каждый образец в 10 мл деионизированной воды для приготовления растворов образцов полисахаридов облепихи с концентрацией 0,5 мг/мл. Разбавляют вышеуказанные растворы последовательно для получения тестовых растворов облепиховых полисахаридов с концентрациями 0,5, 0,125, 0,03125, 0,0078125 и 0,001953 мг/мл.
  4. Используя раствор DPPH в качестве субстрата, в 96-луночном планшете готовят следующие группы: отрицательную контрольную группу A0 (150 μл воды и 50 μL раствора DPPH), группу образцов A1 (150 μL образца или раствора Vc и 50 μL раствора DPPH) и контрольную группу образца A2 (150 μL образца и 50 μL безводного этанола). Выполняют эту процедуру в трех экземплярах.
  5. Дайте реакции протекать в течение 30 минут в темноте. Далее измерьте поглощение на длине волны 517 нм. Повторите эксперимент три раза и рассчитайте скорость удаления свободных радикалов DPPH с помощью уравнения (3).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Абсорбционная способность раствора DPPH должна поддерживаться на уровне 0,7 ± 0,02. Чрезмерно высокие и низкие концентрации могут привести к неточным показаниям поглощения, что повлияет на окончательные результаты эксперимента.
    figure-protocol-3
    В уравнении (3) A0 – поглощение деионизированной воды и раствора DPPH, A1 – поглощение образца или раствора Vc и DPPH, а A2 – поглощение образца и безводного этанола.
  6. Расчет полуингибирующей концентрации (Ic50)
    1. Создайте визуально организованную таблицу данных, иллюстрирующую корреляцию между концентрациями испытуемых соединений в реакции (0,5, 0,125, 0,03125, 0,0078125 и 0,001953 мг/мл) и соответствующими процентными значениями реакции.
    2. Используйте нелинейную аппроксимацию кривой (с помощью GraphPad Prism) для определения IC50 и стандартной ошибки.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Выход сырых полисахаридов
Полисахариды экстрагировали с помощью HWE. Рефлюкс в водяной бане показан на дополнительном рисунке 1. Концентрация раствора полисахаридного экстракта показана на дополнительном рисунке 2. Эффект стратификации центрифугирования после депротеинации представлен на дополнительном рисунке 3. Пять партий H. rhamnoides subsp. sinensis имеют выход полисахаридов 0,89% ± 0,01%, 0,78% ± 0,02%, 1,63% ± 0,03%, 1,50% ± 0...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Облепиха – традиционная тибетская медицина. Полисахариды являются важными компонентами облепихи. Проведено множество исследований по определению содержания полисахаридов и антиоксидантной активности21. Тем не менее, лишь немногие из них сравнивали содержание полисахаридов и антиоксидантную активность различных видов Hippophae , таких как лекарственные виды H. rhamnoides subsp. sinensis и H. gyantsensis. Таким образом, в данной р...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

У авторов нет конфликта интересов, который можно было бы раскрыть.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Работа выполнена при финансовой поддержке Национального фонда естественных наук Китая (No 82374145), Фонда естественных наук провинции Сычуань (No 2025ZNSFSC0608) и Национального фонда естественных наук Китая (No U23A20520)

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Аналитические весы (с точностью до 0,0001 г)Sartorius Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd.BSA224S-CW
Аналитические весы (с точностью до 0,00001 г)Sartorius Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd.CPA225D
Настольная низкоскоростная центрифугаШанхай Зигуй Инструмент Ко., Лтд.ТД4К-З
ДППГШанхай Юанье Био-Технолоджи Ко., Лтд.КАШ 1898-66-4
ЭтанолЧэнду Келонг Кемикал Продактс Ко., Лтд.КАС 64-17-5
Трубка EPХунань БКМАК Холдинг Ко., Лтд.БС-20-М2 мл
Сублимационная сушилкаКорпорация «Лабконко»ЛАБКОНКО
Глюкоза безводнаяЧэнду Келонг Кемикал Продактс Ко., Лтд.КАС 50-99-7Эталон
ГрафПад  Prim 9.5.0 Программное обеспечение GraphPadН/ДОпределите значение IC50 и значение P.
Сушильный шкаф с циркуляцией горячего воздухаШанхай Ихэн Технолоджи Инструментарий Ко., Лтд.НБ-ДГГ-9070А
L-аскорбиновая кислотаПекин Лабгик Технолоджи Ко., Лтд.КАС 50-81-7препарат положительного контроля
Считыватель микропланшетовШанхай Шаньпу Биотехнология Ко., Лтд.Считывание макс. 1500
96-луночный планшетПекин Лабгик Технолоджи Ко., Лтд.11512
ОриджинПро 2025Лаборатория OriginLabН/ДСоздание линейной диаграммы коэффициента распродажи
НАКОНЕЧНИКИ ДЛЯ ПИПЕТОКПекин Лабгик Технолоджи Ко., Лтд.БС-200-Т200 μ L
НАКОНЕЧНИКИ ДЛЯ ПИПЕТОКПекин Лабгик Технолоджи Ко., Лтд.Т-1000-Б1000 μ L
ФенолЧэнду Келонг Кемикал Продактс Ко., Лтд.КАС 108-95-2
Ротационный испаритель  BUCHI Laboratory Equipment Trading (Shanghai) Ltd.Бучи Р-100
Стандартный тип реагента Система чистой водыQingdao Flom Technology Co., Ltd.FBZ2001-вверх-
Термостатическая водяная баня с цифровым дисплеемГуаньань Научные инструменты (Чжэцзян) Ко., Лтд.ВБ100-6Ф
УФ-видимый спектрофотометрШанхай Мапада Инструментс Ко., Лтд. В-1100Д
Ультразвуковой очистительШэн Чжэн ЧаоЦзе Индастриал Ко., Лтд.CJ-060SDУльтразвуковой очиститель 360 Вт 50 Гц

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chinese Pharmacopoeia Committee. Pharmacopoeia of the People's Republic of China. 1, Chinese Medical Science and Technology Press. (2025).
  2. Su, S. Y., et al. Structure elucidation, immunomodulatory activity, antitumor activity and its molecular mechanism of a novel polysaccharide from Boletusreticulatus Schaeff. Food Sci Hum Wellness. 12 (2), 647-661 (2023).
  3. Wang, Y. X., et al. Utilizing relative ordered structure theory to guide polysaccharide purification for structural characterization. Food Hydrocoll. 115, 106603(2021).
  4. Zhang, W., et al. Seabuckthorn berry polysaccharide protects against carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity in mice: via anti-oxidative and anti-inflammatory activities. Food Funct. 8 (9), 3130-3138 (2017).
  5. Wang, X., et al. Seabuckthorn berry polysaccharide extracts protect against acetaminophen induced hepatotoxicity in mice via activating the Nrf-2/HO-1-SOD-2 signaling pathway. Phytomedicine. 38, 90-97 (2018).
  6. Zhao, L., et al. Proteomic analysis reveals the molecular mechanism of Hippophae rhamnoides polysaccharide intervention in LPS-induced inflammation of IPEC-J2 cells in piglets. Int J Biol Macromol. 164, 3294-3304 (2020).
  7. Chen, J. H., Chen, X., Zhou, G. H., Xu, X. L. Ultrasound: a reliable method for regulating food component interactions in protein-based food matrices. Trends Food Sci Technol. 128, 316-330 (2022).
  8. Pundir, S., et al. Ethnomedicinal uses, phytochemistry and dermatological effects of Hippophae rhamnoides L.: A review. J Ethnopharmacol. 266, 113434(2021).
  9. Teng, H., He, Z. G., Hong, C. Z., Xie, S. Z., Zha, X. Q. Extraction, purification, structural characterization and pharmacological activities of polysaccharides from sea buckthorn (Hippophae rhamnoides L.): A review. J Ethnopharmacol. 324, 117809(2024).
  10. Niu, H., et al. Pectin-stabilized emulsions: Structure-emulsification relationships, covalent and non-covalent modifications, and future trends. Trends Food Sci Technol. 159, 104986(2025).
  11. Dou, Z. M., Chen, C., Huang, Q., Fu, X. The structure, conformation, and hypoglycemic activity of a novel heteropolysaccharide from the blackberry fruit. Food Funct. 12 (12), 5451-5464 (2021).
  12. Niu, H., et al. Multiscale combined techniques for evaluating emulsion stability: A critical review. Adv Colloid Interface Sci. 311, 102813(2023).
  13. Yuan, D., Li, C., Huang, Q., Fu, X. Ultrasonic degradation effects on the physicochemical, rheological and antioxidant properties of polysaccharide from Sargassum pallidum. Carbohydr Polym. 239, 116230(2020).
  14. Chen, R., et al. Extraction, structural characterization and biological activities of polysaccharides from mulberry leaves: A review. Int J Biol Macromol. 257, 128669(2024).
  15. Lei, J., et al. Pressurized hot water extraction, structural properties, biological effects, and in vitro microbial fermentation characteristics of sweet tea polysaccharide. Int J Biol Macromol. 222 (Pt B), 3215-3228 (2022).
  16. Chen, F., Huang, G. L. Antioxidant activity of polysaccharides from different sources of ginseng. Int J Biol Macromol. 125, 906-908 (2019).
  17. Chen, Y. F., Yang, H., Shen, Z. Z., Ye, J. R. Whole-genome sequencing and potassium-solubilizing mechanism of Bacillus aryabhattai SK1-7. Front Microbiol. 12, 722379(2022).
  18. Yun, Y. H., et al. A green method for the quantification of polysaccharides in Dendrobium officinale. RSC Adv. 5, 105057-105065 (2015).
  19. Kim, J. M., et al. Quantitative determination of fucoidan using polyion-sensitive membrane electrodes. Anal Chim Acta. 877, 1-8 (2015).
  20. Ogura, I., Sugiyama, M., Tai, R., Mano, H., Matsuzawa, T. Optimization of microplate-based phenol-sulfuric acid method and application to the multi-sample measurements of cellulose nanofibers. Anal Biochem. 681, 115329(2023).
  21. Wen, J., et al. Polysaccharides from sea buckthorn - Ultrasound-assisted enzymatic extraction, purification, structural characterization, and antioxidant activity analysis. Food Chem X. 26, 102265(2025).
  22. Yue, F. F., et al. Effects of monosaccharide composition on quantitative analysis of total sugar content by phenol-sulfuric acid method. Front Nutr. 9, 963318(2022).
  23. Dou, Z. M., et al. Pectin-type polysaccharides from raspberry (Rubus idaeus L.): structure characterization and activity against DSS-induced colitis. Carbohydr Polym. 364, 123710(2025).
  24. Li, Q., et al. α-D-1,3-glucan from Radix Puerariae thomsonii improves NAFLD by regulating the intestinal flora and metabolites. Carbohydr Polym. 299, 120197(2023).
  25. Dou, Z. M., Chen, C., Fu, X. Digestive property and bioactivity of blackberry polysaccharides with different molecular weights. J Agric Food Chem. 67 (45), 12428-12440 (2019).
  26. Zhou, S. Y., Huang, G. L., Huang, H. L. Extraction, derivatization and antioxidant activities of onion polysaccharide. Food Chem. 388, 133000-133009 (2022).
  27. Musa, K. H., Abdullah, A., Kuswandi, B., Hidayat, M. A. A novel high throughput method based on the DPPH dry reagent array for determination of antioxidant activity. Food Chem. 141 (4), 4102-4106 (2013).
  28. Garcia, E. J., et al. Antioxidant activity by DPPH assay of potential solutions to be applied on bleached teeth. Braz Dent J. 23 (1), 22-27 (2012).
  29. Wei, A., Shibamoto, T. Antioxidant/lipoxygenase inhibitory activities and chemical compositions of selected essential oils. J Agric Food Chem. 58 (12), 7218-7225 (2010).
  30. Song, Y. C. Extraction, purification and modulation of mice gut microbiota by sea buckthorn polysaccharides. , Xihua University. (2022).
  31. Dong, N., et al. Exploring quality variations of Polygonati Rhizoma during nine-steaming and nine-drying process through color-polysaccharides-antioxidant activity linkages. Chin Tradit Herbal Drugs. 56 (2), 476-486 (2025).
  32. Rumpf, J., Burger, R., Schulze, M. Statistical evaluation of DPPH, ABTS, FRAP, and Folin-Ciocalteu assays to assess the antioxidant capacity of lignins. Int J Biol Macromol. 233, 123470(2023).
  33. Zhang, C. C., et al. Research progress in microevolutionary process of excellent traits and quality of Dao-di herbs. Chin Mater Med. 48 (22), 6021-6029 (2023).
  34. Li, X. W., Zhang, H. T., Zhang, Z. J. The relation between contents of flavonoids in leaves of Hippophae tibetana Schlecht. and ecological factors. J Ecological Environ. 27 (02), 239-245 (2018).
  35. Li, C., et al. Characterization, antioxidant and immunomodulatory activities of polysaccharides from Prunella vulgaris Linn. Int J Biol Macromol. 75, 298-305 (2015).
  36. Cao, C., et al. Physicochemical characterization, potential antioxidant and hypoglycemic activity of polysaccharide from Sargassum pallidum. Int J Biol Macromol. 139, 1009-1017 (2019).
  37. Li, Q. Y., et al. A comparison study on structure-function relationship of polysaccharides obtained from sea buckthorn berries using different methods: antioxidant and bile acid-binding capacity. Food Sci Hum Wellness. 13 (1), 494-505 (2024).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

DPPH

Похожие статьи