Представлен протокол оценки диастолической функции с помощью допплеровской ультразвуковой работы в доклинической модели легочной гипертензии, вызванной болезнью левой части сердца.
Методическая статья
Представлен протокол оценки диастолической функции с помощью допплеровской ультразвуковой работы в доклинической модели легочной гипертензии, вызванной болезнью левой части сердца.
Диастолическая дисфункция и сердечная недостаточность с сохраненной фракцией выброса (HFpEF) являются значительными факторами легочной гипертензии (PH), вызванной заболеванием левого сердца. Стандартная оценка релаксационных аномалий in vivo в доклинических моделях включает двумерную (двумерную) эхокардиографию с доплеровской оценкой трансмитрального потока и релаксации тканей, что сложно, дорого и требует сложного эхокардиографического оборудования. Здесь ценный суррогатный метод оценки диастолической дисфункции при ЛГ, вызванной болезнью левого сердца, продемонстрирован в хорошо проверенной модели грызунов с использованием импульсно-волнового допплеровского ультразвука без двумерной эхокардиографии. Диастолический трансмитральный поток определяется по апикальному окну и коррелирует с одновременно записанной ЭКГ-трекингом. Собираются индексы диастолической функции, и их идентификация описывается в этом протоколе. Эта недорогая, легко применяемая методика выявляет соответствующие маркеры диастолической дисфункции, связанных с ЛГ, сердечно-сосудистыми заболеваниями и HFpEF. Кроме того, он воспроизводимо обнаруживает его прогрессирование со временем, когда двумерная эхокардиография не предпочтительна или недоступна. Основные ограничения этого метода связаны с отсутствием визуализации сердечных структур, возможностью неточностей из-за угловой зависимости доплеровского сигнала, а также с габитусом организма животного, который можно уменьшить, изменяя положение зонда и оптимизируя его выравнивание с кровотоком.
Легочная гипертензия (РГ) — это смертельное заболевание без лечения, характеризующееся повышением лёгочного артериальногодавления 1. Заболевание левой сердца (ЛБГ) является самой распространённой причиной РГ во всем мире и связано с высокой стоимостью и значительной заболеваемостью 2,3. К сердечным причинам PH-LHD относятся различные формы, приводящие либо к систолическим, либо к диастолическим нарушениям, например, к сердечной недостаточности — многогранному клиническому синдрому, который продолжает оставаться одной из ведущих причин смертности во всёммире 4. Среди пациентов с сердечной недостаточностью HFpEF составляет более половины от числа госпитализаций, связанных синцидентами, 4,5. Диастолическая дисфункция определена как один из важнейших предшественников и фундаментальная особенность взаимодействия между HFpEF и PH из-за LHD (PH-LHD)6,7. Из-за отсутствия подходящих доклинических моделей, которые бы обобщали большинство клинических и субклинических признаков PH и HFpEF, понимание механизмов, лежащих в основе этих заболеваний,неполно 7.
Диастолическая дисфункция является характерной чертой PH-LHD и может быть оценена с помощью 2D и доплеровскойэхокардиографии 8. Двумерные и доплеровские методы оценки функции левого желудочка включают, среди прочего, пиковую раннюю диастолическую скорость E-волны, пиковую позднюю диастолическую A-волну, длительность A митрального клапана (интервал времени от начала A-волны до конца волны A при нулевой базовой линии), отношение E/A митрального клапана, время замедления E-волны (DT, интервал времени от пика E-волны экстраполирован до нулевой базовой линии). тканевое доплеровское изображение (TDI) кольца септального митрального клапана (e', эхокардиографический параметр расслабления тканей кольца митрального клапана) и IVRT (время изоволюмической релаксации, время между закрытием аортального клапана и открытием митрального клапана). Эхокардиографические маркеры нарушенной релаксации включают сочетание уменьшенного или обратного отношения E/A в условиях увеличения A-волны и уменьшения E-волны, удлинённого IVRT, уменьшения времени замедления E-волны, задержки тканевых доплеровских индексов (удлинённая e-скорость, повышенная средняя септальная E/e') и более низкое абсолютное значение глобального продольного напряжения (GLS)9. Исследования, сравнивающие эхокардиографические и инвазивные гемодинамические измерения, показали, что эхокардиографические и инвазивные измерения сопоставимы и являются надёжным методом оценки гемодинамикисердца 10. Однако двумерная эхокардиография сложна, дорогостоящая и требует сложного эхокардиографического оборудования и персонала. Эти факторы являются серьёзным ограничением для отслеживания прогрессирования заболевания у животных. В результате исследователи либо используют два показателя (начало и конец исследования) для лонгитюдных исследований или отдельные измерения в дизайне поперечного сечения.
Среди этих параметров диастолической дисфункции E, A, E/A, A продолжительность, DT и IVRT можно оценить с помощью импульсно-волновой доплеровской эхокардиографии, что исключает необходимость двумерной эхокардиографии. В этой статье продемонстрирован протокол доплеровской оценки диастолической функции в хорошо известной модели крыс ZSF-1 при PH-LHD11. Всего 25 (10 генетически ожиренных и 15 генетически худых) самцов-крыс ZSF1 были продолжены и оценены сонографически на предмет развития диастолической дисфункции в течение шестнадцати недель в возрасте от 8 до 24 недель. Одинаковые эхокардиографические параметры были оценены в двух когортах. Все животные были обследованы на начальном уровне (8 недель). Доплеровские признаки диастолической дисфункции проявились к 16 неделям возраста, когда проводились промежуточные измерения. Измерения конечной точки проводились в возрасте 24 недель. Хотя исследователь, проводивший сбор данных, не мог быть ослеплён из-за очевидного набора веса в когорте с ожирением, исследователь, проводивший анализ данных, был ослеплен к фенотипу животных. Хотя этот легко применяемый метод открывает путь для продольной оценки прогрессирования заболевания у грызунов, ограничениями этой техники являются угловая зависимость качественного доплеровского сигнала, что может быть сложно получить в зависимости от выравнивания зонда и размера животного.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Все процедуры проводились в соответствии с одобрением Комитета по уходу и использованию животных Университета Джонса Хопкинса (ACUC) для протокола RA21M273. Ни одно животное не подвергалось дискомфорту для сбора данных или целей измерений. Реагенты и используемое оборудование перечислены в Таблице материалов.
1. Подготовка оборудования и животного
2. Получение трассировки ЭКГ
3. Настройка компьютера
4. Проведение доплеровских измерений
5. Получение данных с помощью доплеровской ультразвуковой работы
6. Завершение эксперимента
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Этот метод позволяет продольно оценивать диастолическую функцию при PH-LHD. Для наиболее точной оценки диастолической функции необходимо визуализировать антеградные и ретроградные паттерны потока, связанные с открытием и закрытием митрального и аортального клапанов, в рамках одного и того же сердечного цикла на протяжении нескольких циклов (см. рисунок 1). Закрытие аортального клапана знаменует начало диастолы, самой ранней фазой которой является изоволюмиче...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
В этой статье суррогатный метод оценки диастолической дисфункции при PH-LHD демонстрируется в хорошо известной модели грызунов с использованием импульсно-волнового допплеровского ультразвука без двумерной эхокардиографии. Диастолический трансмитральный паттерн потока определяется по апикальному окну и коррелирует с одновременно записанной ЭКГ-трассировкой, которая позволяет определить показатели диастолической функции. Этот недорогой метод определяет маркеры диастолической функции и дисф...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Авторы не имеют финансовых отношений с производителями используемых материалов.
Эта работа была поддержана премией Американской кардиологической ассоциации для MB (24CDA1267633), наградой NHLBI R56 для JS (1R56HL169285) и наградой NHLBI для LS (R01HL14811201).
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Установка анестезиологии | VetEquip Inc. | 901806 | |
| Компьютер | Dell | 7420 Plus | |
| Ватная палочка | Пуританская компания по производству медицинских продуктов | 806-WC | |
| Крем-депилятор и нбс; | Черч и Дуайт | 300725 | |
| Доплеровский зонд 10 и 20 МГц | INDUS Instruments | NA | |
| Доплеровская установка | INDUS Instruments | NA | |
| ЭКГ-панель | INDUS Instruments | NA | |
| Электродный гель | Лаборатории Паркера | 45993 | |
| Испаритель с изофлураном | VetEquip Inc. | 911103 | |
| Гель для ультразвука | Лаборатории Паркера | 45659 | |
| Вентилируемая анестезирующая индукционная камера | VetEquip Inc. | 942102 |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE
Запросить разрешение