Method Article

Мышиная модель перехода острой к хронической болезни почек, вызванной ишемией почек/реперфузионной травмой

DOI:

10.3791/69866

⸱

February 10th, 2026

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pediatrics, University of Pittsburgh Medical Center Children's Hospital of Pittsburgh (UPMC CHP), University of Pittsburgh

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В этой статье представлена ишемическая модель ХБП с использованием односторонней почечной ИРИ с контралатеральной нефрэктомией, выполненной за день до взятия образца; этот протокол позволяет проводить функциональную оценку на основе сыворотки, высокую выживаемость и воспроизводимую патологию ХБП на 28 и 42 днях, предоставляя универсальную платформу для механистических и интервенционных исследований.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Хирургическая временная окклюзия педикулы почки вызывает ишемию почек и реперфузионное повреждение (ИРИ), широко используемую модель для изучения острого повреждения почек (ОПП) и её прогрессирования в хроническую болезнь почек (ХБП) у мышей. Однако традиционные протоколы часто либо исключают функциональную оценку на основе сыворотки, либо приводят к высокой смертности. Хотя существующие односторонние и двусторонние модели почечного ИРС делают акцент на воспроизводимости, остаются трудности в достижении как стабильной тяжести травмы, так и долгосрочной выживаемости, подходящей для изучения прогрессирования ХБП. Здесь представлен протокол дорсального подхода, который предоставляет надёжную и воспроизводимую модель ишемического перехода от ОПП к ХБП. Дорсальный подход облегчает прямой доступ к почкам и минимизирует внутревальные манипуляции. Мы используем одностороннюю почечную ИРТ в сочетании с контралатеральной нефрэктомией, выполняемой за день до забора крови и ткани. Этот подход имеет два основных преимущества: (1) он минимизирует вариабельность, избегая несоответствий, связанных с двусторонними травмами, и (2) достигает почти 100% выживаемости при сохранении стабильности травмы, в отличие от протоколов, где нефрэктомия проводится раньше и связана с более высокой смертностью. Функциональная оценка проводится с помощью сыворотки BUN и креатинина, а интерстициальный фиброз количественно измеряется с помощью трихромного отложения коллагена и генов маркеров ХБП Массона через 28 и 42 дня после ИРС почек. Вместе эти показатели дают дополнительное понимание функциональных нарушений и развития патологии тканей. Этот протокол устанавливает надёжную и универсальную модель ишемического ХБП у мышей для механистических исследований.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ОПП является распространённым осложнением у госпитализированных пациентов и остаётся серьёзной глобальной проблемой здравоохранения. Эпидемиологические исследования показывают, что ОПП встречается до 20% госпитализированных и 30-60% тяжело больныхпациентов 1,2. Хотя некоторые пациенты восстанавливают почечную функцию, другие демонстрируют неполное восстановление, что предрасполагает их кХБП 3. Переход от ОПП к ХБП всё больше признаётся основным фактором долгосрочных результатов и стал объектом механистических и терапевтических

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эксперименты на животных, проведённые в этом исследовании, были одобрены Институциональным комитетом по уходу и использованию животных Университета Питтсбурга (IACUC; Протокол No 23103811), в соответствии с институциональными руководящими принципами. По мере необходимости может быть включена группа, проводящая фиктивную хирургическую контрольную группу, которая обычно проходит хирургическое воздействие без сосудистого зажимания или контралатеральной нефрэктомии. См. раздел «Материалы» для подробной информации о используемых инструментах и оборудовании. Острые предметы, включая иглы, лезвия для скальпеля и зажимы, необходимо утилизиров....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Характерное изменение цвета почек, наблюдаемое во время операции, подтвердило индукцию равномерной почечной ишемии, за которой последовала успешная реперфузия. Успешная ишемия характеризуется изменением цвета почек с чёрного на тёмно-фиолетовый, с последующим улучшением после снятия сосудистого зажима, что подтверждает реперфузию. Если почечная ишемия не будет успешно вызвана, почка демонстрирует лишь минимальное изменение цвета, и последующее повреждение может быть непоследовательным. В.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Этот протокол предоставляет воспроизводимую модель перехода от ОПП к ХБН, индуцированную почечной ИРС, которая характеризуется устойчивой дисфункцией почек и прогрессирующим интерстициальным фиброзом, широко признанными признакамиХБП 17,18. Односторонняя мочеточная обструкция (УУО) — это широко используемая модель ХБН, которая индуцирует обструктивную нефропатию и в первую очередь вызывает фиброз через устойчивую трубчат.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ни одного.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эта работа была поддержана NIDDK K01-DK133635; Награда UPMC VMI P3HVB; Премия Фонда Самуэля и Эммы Уинтерс; UPMC CHP RAC стартовый грант; Премия грантодателей Фонда UPMC CHP Children's Trust; Программа Opportunity Pool Alliance по почечным ресурсам Джорджа М. О'Брайена (OKRA OPP) (для TC), NIDDK R01-DK121758; DK134346; R25-DK119180 (на SSL), NIDDK R01-DK125015; R01-DK137410 (JH), а также Кэролин и Марк Снайдер с семьёй Снайдеров (JH и SSL). Мы благодарим Гистологическую лабораторию CHP UPMC за помощь в гистологии и сканировании, а также Ветеринарные диагностические лаборатории Университета штата Канзас за поддержку в области сывороточ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Газовый фильтр для анестезииА.М. Бикфорд  F-AIR
Анестезиологическая индукционная камера, прогревЛабораторные продукты AIMSWCS8
Трубка для сбора кровиBD Microtainer365967
ЭтанолDecon Labs2701
Ethiqa XR (бупренорфин с пролонгированным выпуском)Fidelis Animal HealthNDC 86084-100-30
Мазь для глазAKORNNDC 17478-062-35
Марлевые прокладки, стерильные Динарекс3353
Машинка для стрижки для мелких животныхWAHLCLP-9868
Тепловая лампа, инфракрасныйPhysitemp InstrumentsHL-1
Тепловой насос для циркуляции тёплой водыBrainTree ScientificHTP-1500
Система тепла/анестезии для мелких животных, Versaflex и nbsp;BrainTree ScientificEZ-7150
Хирургические шторы, удерживающие теплоBraintree ScientificSPDR-MPS
Горячий стерилизатор бусинокСаймон КеллерSteri 250
Раствор изофлуранаКоветрус29405
Прикладщик для лигирования клипаУХ533140
Зажимы для перевязкиУХ533837
Микрозонд для температуры ректальной кишки PhysitempRET-3
Микрозондовый термометрPhysitempBAT-12
Микроскоп, оптическийLeicaDM2500
Микроскоп, слайдерный сканерLeicaСлайд-сканер Aperio CS2
Мышь (FVB/NJ)Лаборатория Джексона001800
Игла (23G)BD305145
Повидон йодные палочки и nbsp;Динарекс1201
Лезвия скальпеляТонкие научные инструменты10020-00
Рукоятка скальпеляТонкие научные инструменты10060-13
Хирургические щипцы, без зубцовХирургический инструмент RobozRS-5228
Хирургические щипцы с зубцамиТонкие научные инструменты11051-10
Хирургические щипцы, зубчатыеТонкие научные инструменты11019-12
Хирургические перчаткиCTISPGF750
Хирургические ножницы для разделения тканейТонкие научные инструменты14072-10
Швы, полигликолевая кислота (PGA)/абсорбируемая и bbsp; (5-0)Динарекс9131
Швы, шёлк (4-0)ОазисMV-683-V
Шприц (3 мл)BD309628
Шторы для полотенец, стерильные Динарекс4410
Сосудистый зажим с применением щипцовТонкие научные инструменты15057-14
Сосудистый зажим, нетравматический Тонкие научные инструменты 18055-03
Прикладной аппарат для зажимов для раныТонкие научные инструменты12020-09
Зажимы для ранТонкие научные инструменты12022-09

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Susantitaphong, P., et al. World incidence of AKI: A meta-analysis. Clin J Am Soc Nephrol. 8, 1482-1493 (2013).
  2. Pickkers, P., et al. Acute kidney injury in the critically ill: an updated review on pathophysiology and management. Intensive ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Renal IschemiaReperfusion InjuryAcute Kidney InjuryChronic Kidney DiseaseMouse ModelDorsal ApproachUnilateral Renal IRIContralateral NephrectomySerum CreatinineInterstitial Fibrosis

Related Articles