Методическая статья

Эффективный и быстрый метод HPLC-QQQ-MS для количественного определения тропановых алкалоидов в лекарственных растениях

DOI:

10.3791/70510

⸱

12 июня 2026 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1College of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 2Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В этом исследовании была разработана высокоэффективная жидкостная хроматография в сочетании с методом тройной квадрупольной масс-спектрометрии (HPLC-QQQ-MS) для выявления и количественной оценки тропановых алкалоидов (гиосциамин, анизодамин, скополамин) в Anisodus tanguticus. Метод оказался быстрым, точным и надёжным для высокопроизводительного анализа лекарственных растений.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Anisodus tanguticus — важное тибетское лекарственное растение. Тропановые алкалоиды (ТА), такие как гиосциамин, анизодамин и скополамин, проявляют значительную анальгетикическую и седативную фармакологическую активность, что делает этот вид ценным природным источником для извлечения этих биоактивных соединений. Однако химический состав A. tanguticus весьма сложен. Он включает большое количество соединений без проясненных структур, что делает систематическую идентификацию и структурную характеристику его активных компонентов особенно важными. Хотя высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) широко используется для разделения экстрактов из этого завода, многие неизвестные компоненты остаются трудно точно идентифицировать, даже при сопоставлении спектральных баз данных.

В этом исследовании был установлен аналитический метод, основанный на высокоэффективной жидкостной хроматографии в сочетании с тройной квадрупольной масс-спектрометрией (ВЭЖХ-QQQ-MS) для определения тропановых алкалоидов у A. tanguticus. Метод включает в себя ряд систематических процедур, включая стандартизированную подготовку образцов, конфигурацию параметров масс-спектрометрии, предварительное уравновесение LC, установку метода, сбор данных MS, многоступенчатое сканирование масс-спектрометрии (MSⁿ) и ручную интерпретацию данных. Используя эту стратегию, мы успешно идентифицировали три репрезентативных тропановых алкалоида у A. tanguticus: гиосциамин, анизодамин и скополамин. Кроме того, он подтверждает точность установленного метода HPLC-QQQ-MS, подтверждая, что метод быстрый, чувствительный, осуществимый и точный для количественного определения тропановых алкалоидов (ТА) у A. tanguticus. Устоявшийся подход демонстрирует хорошую универсальность и надёжность, а также подходит для высокопроизводительной идентификации и количественной оценки тропановых алкалоидов в A. tanguticus и других лекарственных растениях.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Терапевтическая эффективность традиционной китайской медицины (ТКМ) во многом зависит от её вторичных метаболитов, таких как алкалоиды, флавоноиды, терпеноиды и другие активные компоненты 1,2,3. Следовательно, точный и чувствительный качественный и количественный анализ конкретных целевых метаболитов в этих сложных смесях является ключевым шагом к обеспечению качества ТКМ, разъяснению материальной основы его эффективности и продвижению современныхисследований 3. Однако разнообразие и сложность компонентов ТКМ, в сочетании с крайне низкими концентрациями многих ключевых активных компонентов, создают значительные трудности для достижения эффективного и точного обнаружения.

Anisodus tanguticus (Максим.) Пашер представляет собой основной ботанический источник тропановых алкалоидов (ТА)4, известный своим богатым содержанием фармакологически активных соединенийтропанового типа 5. Ключевые характерные алкалоиды включают анизодамин, скополамин и гиосциамин, которые имеют общий тропанный ядро, но демонстрируют выраженные замены функциональных групп (рисунок 1), что приводит к расходящимся фармакологическимпрофилям 6,7,8. Хотя их структурные сходства усложняют хроматографическое разрешение, они также предоставляют ценную модель для сравнительных фитохимических и метаболических исследований. Недавние исследования изучали химический состав и географические вариации A. tanguticus с использованием метаболомики и подходов сетевойфармакологии 9,10. Современные аналитические подходы к метаболитам A. tanguticus преимущественно опираются на высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ)11. Тем не менее, уровень тропановых алкалоидов у саженцев стадии A. tanguticus может достигать 0,01% (одна часть на десять тысяч), а традиционные методы ВЭЖХ часто ограничены ограниченным разрешением, чувствительностью и аналитической пропускностью. Эти ограничения препятствуют полному разделению структурно аналогичных гомологов алкалоидов и затрудняют обнаружение следовых компонентов, тем самым снижая аналитическую точность и ограничивая поддержку более продвинутых исследовательских применений. В последние годы достижения в области HPLC в сочетании с тандемной масс-спектрометрией предоставили мощные инструменты для решения этих аналитических узких мест. В частности, высокопроизводительная жидкостная хроматография — тройная квадрупольная масс-спектрометрия (HPLC-QQQ-MS) обеспечивает значительно повышенное хроматографическое разрешение, эффективность разделения и исключительнуючувствительность 12,13,14. Эта технология стала передовой платформой для изучения вторичных метаболитов в ТКМ, обеспечивая эффективную и точную квалификацию и количественную оценку следовых мишенных аналитов в сложных биологическихматрицах 11, 15, 16, 17. Таким образом, он обеспечивает прочную техническую основу для комплексного химического профилирования и оценки качества лекарственных растений, таких как A. tanguticus. В этом исследовании мы рассматриваем постоянные проблемы обнаружения тропановых алкалоидов у A. tanguticus, с акцентом на точную идентификацию и количественную оценку компонентов на уровне следов. Систематически оптимизируя хроматографические и масс-спектрометрические условия, мы разработали и подтвердили новый метод HPLC-QQQ-MS для одновременного определения нескольких основных тропановых алкалоидов. Оптимизированный подход значительно повышает чувствительность, селективность и методологическую устойчивость, тем самым преодолевая распространённые ограничения, связанные с традиционными масс-спектрометрическими анализами — такие как недостаточная чувствительность, эффекты матрицы и интерференция ко-элюции, часто встречающиеся при анализе следовых алкалоидных соединений.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Подготовка образца

  1. Подготовка стандартных растворов
    1. Точно взвесьте по 10,0 мг гиосциамина, анизодамина гидробромида и скополамин гидробромида с использованием аналитического баланса в десять тысячных и размещайте их в отдельные колбы по 10 мл соответственно.
    2. Добавьте хроматографический метанол к отмеченной линии и тщательно растворите стандарты с помощью ультразвуковой обработки для получения единичных стандартных растворов с концентрацией 1,0 мг/мл.
    3. Переложите бульонные растворы в бутылки с коричневыми реагентами, храните их при 4 °C в темноте.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Используемые алкалоиды очень токсичны. Соблюдайте меры предосторожности при обращении со стандартными образцами. Все растворы готовились перед анализом и хранили при температуре 4 °C в темноте для предотвращения разрушения.
  2. Приготовление смешанных рабочих растворов
    1. Пипетить 100 мкл каждого вышеупомянутого стандартного раствора в объёмную колбу объёмом 10 мл и разбавить до отмеченной линии хроматографическим метанолом, чтобы получить смешанный стандартный промежуточный раствор с концентрацией 10 мкг/мл.
    2. В соответствии с требованиями линейного диапазона дополнительно разведите промежуточный раствор поэтапно метанолом, чтобы получить серию смешанных рабочих растворов.
    3. Возьмём 50 мкл, 200 мкл и 500 мкл соответственно. Получите концентрации 0,5 мкг/мл, 2 мкг/мл, 5 мкг/мл и 10 мкг/мл. Готовьте свежим перед использованием.
    4. Переложите 100 мкл промежуточного раствора 10 мкг/мл в объёмную колбу объёмом 1 мл, чтобы получить разбавленный раствор с концентрацией 1 мкг/мл.
    5. Затем перенесите 100 мкл раствора 1 мкг/мл в другую колбу объёмом 1 мл и разведите его до объёма метанолом.
  3. Предварительная обработка образцов
    1. Проведите сублимацию свежих материалов Sophora flavescens и затем измельчите их в однородный порошок с помощью высокоскоростной кофемолки.
    2. Просейте порох через стандартное тестовое сито диаметром 0,25 мм. Точно взвесьте 20 мг этого порошка, переложите его в объёмную колбу объёмом 100 мл и добавьте хроматографический метанол почти к отмеченной линии.
    3. Проведите ультразвуковую экстракцию при комнатной температуре в течение 30 минут. После извлечения достаньте объёмную колбу, дайте ей остыть до 25 °C при комнатной температуре, пополните хроматографический метанол до линии с отметкой 100 мл и смешайте вихрь в течение 2 минут.
    4. Пипетте 1 мл вышеуказанного экстракта в объёмную колбу объемом 100 мл и разведите до отмеченной линии метанолом (разбавление в 100 раз). После хорошей встряхивания он служит материнским раствором для инъекции ВЭЖХ (рисунок 2).
      ПРИМЕЧАНИЕ: При работе высокоскоростной шлифовальной машины крайне важно носить защитные очки и маску от пыли; Контролируйте количество и длительность помола, чтобы избежать перегрева.
  4. Фильтрация и хранение образцов
    1. Подготовьте одноразовый безигольный шприц объемом 1 мл (специализированный для хроматографии, не адсорбтивный) и органическую микропористую мембрану диаметром 0,22 мкм.
    2. Аспирируйте 1,2 мл материнского раствора для инъекции и медленно вдавливайте для фильтрации.
    3. Соберите следующий фильтрат в ампулу для образца объёмом 2 мл с внутренней вставкой и плотно запечатайте крышкой.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Частота ультразвукового очистителя фиксирована на 40 кГц. Избегайте ослабления колбы во время экстракции, чтобы предотвратить испарение растворителя. Скорректируйте коэффициент разбавления в соответствии с пиковой реакцией выборки в предварительном эксперименте, чтобы целевой пиковый участок попадал в линейный диапазон стандартной кривой. Все образцы необходимо немедленно хранить в холодильнике при температуре 4 °C.

2. Предварительный запуск ВЭЖХ, установка методов и приобретение MS

  1. Подготовка подвижных фаз
    1. Подготовьте мобильную фазу A: измерьте 1000 мл сверхчистой воды, добавьте 1,0 мл хроматографической муравьиной кислоты (доля объёма: 0,1% v/v) и равномерно перемешайте с помощью магнитной мешалки в течение 10 минут.
    2. Подготовьте мобильную фазу B: Используйте хроматографический метанол напрямую без дополнительной обработки.
    3. Вливать подвижные фазы A и B в ультразвуковые устройства для дегазации соответственно и выполнять ультразвуковое дегазирование на частоте 40 кГц в течение 15 минут.
    4. Немедленно перенесите дегазированные подвижные фазы в бутылки с растворителем после дегазации, запечатайте их и подключите к соответствующим линиям растворителя A и B системы ВЭЖХ.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Все растворители хроматографического качества и должны быть профильтрованы через микропористую органическую мембрану диаметром 0,45 мкм перед использованием. Регулярно контролируйте давление в системе. Если колебания давления превышают ±±5%, проверьте возможные засоры колонны или воздушные пузырьки в трубопроводе.
  2. Установка условий для ВЭЖХ
    1. Для хроматографического разделения используйте колонку C₁₈ (2,1 мм × 100 мм, 2,7 мкм). Уравновесьте колонку с метанолом:водой = 80:20 (v/v) за 30 минут до использования, при расходе 0,3 мл/мин при уравнивании. Установите температуру духовки на 30 °C и начните разогрев за 10 минут до этого.
    2. Оптимизировать программу градиентного элюирования следующим образом: 0–10,0 мин, 5–10% B; 10,0–15,0 мин, 10–35% B; 15,0–20,0 мин, 35–60% B; 20,0–25,0 мин, 60%–95% B. Установите расход 0,60 мл/мин, объём инжекции на 2 мкл и длину волны обнаружения на 210 нм.
  3. Условия масс-спектрометрии
    1. Выполнить масс-спектрометрическое обнаружение (MS) с помощью масс-спектрометра с тройным квадрупольным (QQQ) масс-спектрометром, оснащённым источником электрораспылительной ионизации (ESI), работающим в режиме положительной ионизации (ESI+).
    2. Установите рабочие параметры следующим образом: давление небулайзера: 15 psi; капиллярное напряжение: 4000 В; температура газа: 300 °C; и расход газа: 11 л/мин.
    3. Систематически оптимизируйте параметры MS/MS для каждого аналита.
      1. Во-первых, идентифицировать ионы-предшественники, напрямую вводя отдельные стандартные растворы в режиме MS2 SCAN .
      2. Оптимизируйте напряжение Fragmentor для каждого ион-предшественника до максимальной интенсивности сигнала с помощью режима MS2 SIM.
      3. Затем используйте режим сканирования ионов продукта для определения характерных продуктовых ионов. Систематически оптимизировать энергию столкновения (CE) для ион-предшественника для максимизации интенсивности сигнала произведенного иона.
      4. Выберите самый интенсивный продукт для количественной оценки и используйте второй по интенсивности ион для качественного подтверждения.
        ПРИМЕЧАНИЕ: Идентифицировать ионы-предшественники путём прямой инфузии отдельных стандартных растворов в режиме MS2 SCAN. Убедитесь, что стандартная концентрация раствора соответствует правилам, чтобы избежать насыщения сигнала. Регулярно калибруйте прибор, чтобы избежать смещения параметров.
  4. Валидация методов
    1. Специфика
      1. Введите заготовочный растворитель (метанол), смешанный стандартный рабочий раствор и образец экстракта отдельно, сравнивая хроматограммы.
      2. Убедитесь, что выполнены следующие требования: отсутствие мешающих пиков в пустом растворителе; время удержания целевых компонентов в образце соответствует времени стандартного (отклонение ≤ ±±0,1 мин); Пиковое отношение иона квантора к квалификатору соответствует соотношению стандартного (отклонение ≤ ±±10%).
    2. Линейность
      1. Последовательно вводите серию смешанных рабочих растворов, приготовленных на этапе 1.1 (0,1, 0,5, 2, 5, 10 мкг/мл) в указанных условиях ВЭЖХ-МС, с 3 инъекциями на концентрацию.
      2. Постройте стандартную кривую с концентрацией (x, мкг/мл) каждой компоненты как абсциссой и средней пиковой площадью (y) кванторного иона в качестве ордината. Провести линейный регрессионный анализ, требующий коэффициента корреляции (R 2) ≥ 0,995.
    3. Точность и точность
      1. Внутридневная точность (повторяемость): Проанализировать 6 репликаций образцов контроля качества (QC) при трёх уровнях концентрации (2 мкг/мл, 5 мкг/мл и 10 мкг/мл) в течение одного дня и рассчитать относительное стандартное отклонение (RSD%).
      2. Междневная точность (средняя точность): независимо подготовьте образцы контроля качества из одной партии сушёного растительного сырья и анализируйте их разными операторами в течение трёх последовательных дней. и рассчитать процент RSD. Убедитесь, что процент RSD ≤ 10% для обоих случаев.
      3. Оценивайте точность с помощью теста на восстановление при вспышках и выражайте как процент восстановления (%). Обеспечить средний уровень восстановления при низких, средних и высоких концентрациях в диапазоне от 85% до 115%, при этом RSD% ≤ 5%.
        ПРИМЕЧАНИЕ: Линейный диапазон должен охватывать ожидаемый диапазон концентрации целевых компонентов в реальных образцах (включая низкие, средние и высокие уровни), чтобы отразить практическую применимость. Все валидационные эксперименты проводились в тройном экземпляре, а результаты выражались в среднем значении.

3. Сбор данных

  1. Выполнять сбор данных в режиме мониторинга множественных реакций (MRM). См. Таблицу 1 для оптимизированных параметров MRM — включая ион-предшественника, переходы производных ионов, напряжение фрагмента и энергию столкновения (CE) — для каждого анализируемого.
  2. Рассчитайте время задержки, чтобы обеспечить достаточное количество точек данных на каждом хроматографическом пике для каждого перехода, сохраняя соответствующее время цикла.

4. Анализ данных

  1. Запустите программное обеспечение для качественного анализа, нажмите File > Import Data и импортируйте все собранные файлы данных (в формате .d).
  2. Экстракция экстракционных ионных хроматограмм (EIC): в модулье Quantitation выберите переход MRM, введите ионные пары ион-продукт прекурсора каждого компонента и извлеките соответствующие EIC.
  3. Проверка и интеграция пиков: проверьте симметрию пиков и согласованность времени удержания (отклонение ≤ ±±0,1 мин по сравнению со стандартом) целевых пиков в каждом EIC.
  4. Программное обеспечение выполняет автоматическую интеграцию по умолчанию; Если существуют базовый дрейф или мешающие пики, вручную корректируйте параметры интеграции (начальные и конечные точки интеграции) для обеспечения точной интеграции.
  5. Вычислите концентрацию каждого компонента в неизвестных образцах с помощью стандартной кривой. Нажмите Report > Generate Report, выберите формат Excel для экспорта отчета. В отчёте указаны название соединения, время удержания, пиковая зона, концентрация, RSD% и т.д.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

HPLC-QQQ-MS хроматографическое разделение и идентификация ТА
Типичная хроматограмма MRM, полученная в результате анализа стандартной смеси и экстракта корня A.tanguticus , представлена на рисунках 3 и 4. При оптимизированных условиях ВЭЖХ все три целевых тропановых алкалоида: гиосциамин, анизодамин и скополамин — были успешно разделены в течение 20 минут, что демонстрирует высокую эффективность разра...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

С ростом интереса к вторичным метаболитам растений аналитические методы обнаружения алкалоидов привлекли значительное внимание. Хотя была создана фундаментальная хроматографическая система анализа тропановых алкалоидов (ТА),18 недавние достижения, такие как внедрение капиллярного электрофореза (КЭ), повышение инструментальной эффективности при ГК–МС и ВЭЖ–МС, а также выявление новых структурных соединений, включая конволвинные и тропиноподобные токсины, подчёркива...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

У авторов нет конфликтов интересов, которые нужно раскрывать.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эта работа поддерживается Сычуаньским провинциальным управлением традиционной китайской медицины (No 2024MS562) и Программой талантов Синлинь Университета ТКМ Чэнду (No MPRC2022035). Мы очень благодарны за поддержку Инновационного института китайской медицины и фармации Университета традиционной китайской медицины Чэнду.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Программное обеспечение Agilent MassHunterAgilent Technologies
Колонка Agilent ZORBAX SB-C18Agilent Technologies880975-902C18 колонка для обратной фазы, 4,6 × 250 мм, 5 мкм
Анизодамина гидробромидChengdu glip Biotechnology Co., Ltd101-31-5HPLC>98%
Муравьиная кислотаSigma-Aldrich5.33002
ЛиофилизаторEYELA, Токио, ЯпонияFDU-2110
Универсальный высокоскоростной блендерTaisite Instrument Co., Ltd., Тяньцзинь, Китай6010210100FW-100, 24 000 об/мин, вместимость 100 г, 80 очков
СкополаминChengdu glip Biotechnology Co., Ltd55449-49-5HPLC>98%
МетанолThermo Fisher Scientific022909.K2
Микроволокнистая мембрана 0,22 мкмMilliporeSLGV033RB
Система Milli-Q Direct 8MilliporeSigma, Бёрлингтон, MA, СШАZRQSVP0JP
Скополамина гидробромидChengdu glip Biotechnology Co., Ltd114-49-8HPLC>98%

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ji, P., Yang, X., Zhao, X. Application of metabolomics in quality control of traditional Chinese medicines: a review. Front Plant Sci. 15, 1463666(2024).
  2. Li, S. -S., et al. Phytochemical variation among the traditional Chinese medicine mu dan pi from Paeonia suffruticosa (tree peony). Phytochemistry. 146, 16-24 (2018).
  3. Wang, N., et al. Pinelliae rhizoma alleviated acute lung injury induced by lipopolysaccharide via suppressing endoplasmic reticulum stress-mediated NLRP3 inflammasome. Front Pharmacol. 13, 883865(2022).
  4. Pughaih, T., et al. Tropane Alkaloids: Sources, Chemistry, Pharmacology and Biotechnology. , Nature, Springer. Singapore. (2025).
  5. Chen, C., Wang, B., Xiao, Y., Xiong, F., Zhou, G. Geographical origin discrimination of Anisodus tanguticus (Maxim.): chemometrics methods applied to ICP-OES analysis. Arab J Chem. 17 (5), 105730(2024).
  6. Cardillo, R., et al. Scopolamine, anisodamine and hyoscyamine production by Brugmansia candida hairy root cultures in bioreactors. Process Biochem. 45 (9), 1577-1581 (2010).
  7. Yuan, B., Zheng, C., Teng, H., You, T. Simultaneous determination of atropine, anisodamine, and scopolamine in plant extract by nonaqueous capillary electrophoresis coupled with electrochemiluminescence and electrochemistry dual detection. J Chromatogr A. 1217 (1), 171-174 (2010).
  8. Zhang, P., et al. Simultaneous determination of atropine, scopolamine, and anisodamine from Hyoscyamus niger L. in rat plasma by high-performance liquid chromatography with tandem mass spectrometry and its application to a pharmacokinetics study: liquid chromatography. J Sep Sci. 37 (19), 2664-2674 (2014).
  9. Chen, C., Wang, B., Li, J., Xiong, F., Zhou, G. Multivariate statistical analysis of metabolites in Anisodus tanguticus (Maxim.) Pascher to determine geographical origins and network pharmacology. Front Plant Sci. 13, 927336(2022).
  10. Chen, C., et al. Multivariate statistical analysis of tropane alkaloids in Anisodus tanguticus (Maxim.) Pascher from different regions to trace geographical origins. Acta Chromatogr. 34 (4), 422-429 (2022).
  11. Sawabe, Y., et al. Rapid determination of atropine and scopolamine content in Scopolia extract powder by HPLC. J Nat Med. 65 (2), 395-399 (2011).
  12. Baj, J., et al. Application of HPLC-QQQ-MS/MS and new RP-HPLC-DAD system utilizing the chaotropic effect for determination of nicotine and its major metabolites cotinine,and trans-3′-hydroxycotinine in human plasma samples. Molecules. 27 (3), 682(2022).
  13. Chen, D., et al. Qualitative and quantitative analysis of the major constituents in Shexiang tongxin dropping pill by HPLC-Q-TOF-MS/MS and UPLC-QqQ-MS/MS. Molecules. 20 (10), 18597-18619 (2015).
  14. Huang, Y. -F., et al. Simultaneous determination of twenty-nine active compounds in Fuzhengjiedu granules by HPLC-QQQ-MS/MS. Heliyon. 9 (2), e13675(2023).
  15. Zhang, K. -X., et al. Improved quality control method for prescriptions of Polygonum capitatum through simultaneous determination of nine major constituents by HPLC coupled with triple quadruple mass spectrometry. Molecules. 18 (10), 11824-11835 (2013).
  16. Ding, M., et al. Comprehensive chemical profiling and quantification of Shexiang xintongning tablets by integrating liquid chromatography-mass spectrometry and gas chromatography-mass spectrometry. Arab J Chem. 16 (3), 104527(2023).
  17. Zhu, L., et al. The QuEChERS method coupled to HPLC-QQQ-MS/MS for the determination of 25 banned pesticide residues in ethnic medicines. Res Sq. , (2022).
  18. Cinelli, M. A., Cline, J., Watson, T. Applications of liquid chromatography-tandem mass spectrometry in natural products research: Tropane alkaloids as a case study. J Vis Exp. (205), e66620(2024).
  19. Pang, Y., Huang, Y. -K., Li, F., Yang, F. -Q., Xia, Z. -N. Rapid screening and evaluation of antioxidants in alkaloid natural products by capillary electrophoresis with chemiluminescence detection. Anal Methods. 8 (35), 6545-6553 (2016).
  20. Voeten, R. L. C., Ventouri, I. K., Haselberg, R., Somsen, G. W. Capillary electrophoresis:trends and recent advances. Anal Chem. 90 (3), 1464-1481 (2018).
  21. Pellati, F., Benvenuti, S. Chromatographic and electrophoretic methods for the analysis of phenetylamine alkaloids in Citrus aurantium. J Chromatogr A. 1161 (1), 71-88 (2007).
  22. Cirlini, M., et al. A sensitive UHPLC-ESI-MS/MS method for the determination of tropane alkaloids in herbal teas and extracts. Food Control. 105, 285-291 (2019).
  23. Wojakowska, A., et al. Structural analysis and profiling of phenolic secondary metabolites of Mexican lupine species using LC-MS techniques. Phytochemistry. 92, 71-86 (2013).
  24. Shimizu, T., Watanabe, M., Fernie, A. R., Tohge, T. Targeted LC-MS analysis for plant secondary metabolites. Methods Mol Biol. 1778, 171-181 (2018).
  25. Mennickent, S., De Diego, M. Analytical Method Validation as the First Step in Drug Quality Control. Quality Management and Quality Control - New Trends and Developments. , IntechOpen. London, UK. (2019).
  26. Yang, S. H., Wang, J., Zhang, K. Validation of a two-dimensional liquid chromatography method for quality control testing of pharmaceutical materials. J Chromatogr A. 1492, 89-97 (2017).
  27. Zhang, X., et al. HPLC with chiral stationary phase for separation and kinetics study of aspartic acid epimerization in peroxiredoxin 2 active site peptide. J Pharm Biomed Anal. 247, 116247(2024).
  28. Lu, W., et al. Metabolite measurement: pittfalls to avoid and practices to follow. Annu Rev Biochem. 86, 277-304 (2017).
  29. Leopold, J., Popkova, Y., Engel, K. M., Schiller, J. Recent developments of useful MALDI matrices for the mass spectrometric characterization of lipids. Biomolecules. 8 (4), 173(2018).
  30. Parasuraman, S., et al. An overview of liquid chromatography-mass spectroscopy instrumentation. Pharm Methods. 5 (2), 47-55 (2014).
  31. Alanazi, S. Recent advances in liquid chromatography–mass spectrometry (LC–MS) applications in biological and applied sciences. Anal Sci Adv. 6 (1), e70024(2025).
  32. Cortese, M., et al. Compensate for or minimize matrix effects? Strategies for overcoming matrix effects in liquid chromatography-mass spectrometry technique: A tutorial review. Molecules. 25 (13), 30-47 (2020).
  33. Wang, L., et al. The interplay between herbal medicines and gut microbiota in metabolic diseases. Front Pharmacol. 14, 1105405(2023).
  34. Musharraf, S. G., et al. Screening of inhibitors of angiotensin-converting enzyme (ACE) employing high performance liquid chromatography-electrospray ionization triple quadrupole mass spectrometry (HPLC-ESI-QqQ-MS). Eur J Pharm Sci. 101, 182-188 (2017).
  35. Liu, H., et al. Integrating qualitative and quantitative assessments of Yougui pill, an effective traditional Chinese medicine, by HPLC-LTQ-orbitrap-MSn and UPLC-QqQ-MS/MS. Anal Methods. 9 (23), 3485-3496 (2017).
  36. Parks, H. M., et al. Redirecting tropane alkaloid metabolism reveals pyrrolidine alkaloid diversity in Atropa belladonna. New Phytol. 237 (5), 1810-1825 (2023).
  37. Yan, Z., et al. Triterpenoid saponins profiling by adducts-targeted neutral loss triggered enhanced resolution and product ion scanning using triple quadrupole linear ion trap mass spectrometry. Anal Chim Acta. 819, 56-64 (2014).
  38. Sosa-Ferrera, Z., Mahugo-Santana, C., Santana-Rodríguez, J. J. Analytical methodologies for the determination of endocrine disrupting compounds in biological and environmental samples. Biomed Res Int. 2013, 674838(2013).
  39. Heyde, B. J., Barthel, A., Siemens, J., Mulder, I. A fast and robust method for the extraction and analysis of quaternary alkyl ammonium compounds from soil and sewage sludge. PLoS One. 15 (8), e0237020(2020).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Anisodus Tanguticus

Похожие статьи