$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Тяговая пипетки
Использование нить съемник, таких как Саттер Р-97 Flaming / коричневый Микроэлектродные Puller, тянуть набор примерно 10-20 пипеток.
- Выберите стекла. Мы используем боросиликатного (BF150-86-10, OD = 1,5 мм, ID = 0,86 мм). Магазин стекла осторожно, чтобы она остается чистой и без пыли.
- Дизайн потянув программы. Основной целью является открытие наконечника примерно нужного размера, который будет зависеть от приложения. Р-97 Саттера Внесите Cookbook 2 является отличным ссылки.
- Понаблюдайте за своим пипетки под микроскопом, чтобы определить диаметр открытия и гладкость. Отменить грубая, неровная, или нерегулярные советы. Для стандартной записи зажим патч, наконечник открытие, что составляет 2-4 мкм по всему, тем лучше. Тупым кончиком приводит к снижению сопротивления для того же диаметра отверстие, которое является предпочтительным. Форма и размер может быть изменен во время полировки, ниже.
Пипетки давления полировки
- Прикрепите держатель пипетки на чистую, линии сжатого воздуха. Использование регулятора, установить линии сжатого воздуха давлением до ~ 40 PSI. Подключение линии сжатого воздуха 4-ходовой регулирующий клапан, который позволит давления пипетки держателю будет включаться и выключаться. Подключите пипетки держателю управление клапаном с длиной ⅛ в Tygon ® труб.
- Используйте полировки машина (microforge) с высоким давлением пипетки держателю, полировка катушки контролируется ножной педали, микроскоп с низким и высоким увеличением, долгие рабочие расстояния (в идеале, 10x и 100x) воздух целей. Очень важно, чтобы иметь возможность наблюдать во время открытия пипетка протокола.
- Дополнительно: Пальто пипетки с гидрофобным изолятором для уменьшения емкости и улучшения шумовых характеристик (см. "Тяговая пипетки" для этой техники).
- Проверьте давление клапан находится в закрытом положении. Место пипетки в пипетку держатель и затяните уместно пальца туго.
Безопасность внимание: если пипетки плотно прижаты в держатель пипетки, давление воздуха заставит пипетки необходимо извлечь из держателя пипетки.
- Место пипетки и держателя в microforge. Расположите держатель пипетки на столике микроскопа так, чтобы оба кончика и полировки катушки видны при низких (10x) питание microforge. Принесите наконечник ~ 75 мкм от нити. Имейте в виду, что нить будет расширяться при нагревании.
- Переключение в режим высокой мощности (100x) цели. Оба кончика пипетки и полировки катушки должны быть в центре внимания и в поле зрения. Если нет, то регулировать высоту полировки катушку. (Положение пипетки, не могут быть скорректированы). Кончика пипетки и полировки катушка должна быть близка к противоположным сторонам поля зрения. Избегайте позиционирования катушку слишком близко к пипетки потому что он будет расширяться, поскольку она нагревается и врезаться в вашем пипетки.
- Поверните клапан прямого давления воздуха в пипетку, и тепло пипетки до конической за кончик начинает шар наружу.
- Стоп отопления до кончика шары слишком широко. Эксперимент требует, чтобы определить соответствующее расстояние, тепло, и времени на желаемую форму.
- Дополнительно: Уменьшить диаметр кончика открытие полировка наконечника при отсутствии давления. Шаги 7 и 8 могут повторяться для тонкой настройки как форма и размеры пипетки.
- Выключите давления и, указывая кончиком пипетки в безопасном направлении, удалить пипеткой и поместите его в чистый ящик для хранения, где он будет защищен от пыли.
Безопасность внимание: если давление воздуха не выключена, пипетки удается извлечь из держателя пипеткой во время удаления.
Заметки о microforge
Мы используем microforge собран из отходящих готовые коммерчески доступные компоненты. (Вы можете также купить давления полировка Комплект из немногих компаний, например, ALA науки, GlassWorx). Независимо от того, microforge, важно, чтобы оптика, что достаточно хороши, чтобы увидеть кончик отверстие, которое часто является лишь несколько микрон в диаметре. Мы используем долгосрочные рабочее расстояние 100x линзы для этой цели. Кроме того, слой полировки катушки с высокой температурой плавления стекла, чтобы минимизировать сдаче испарения металла на пипеток.
Часть 3: Ожидаемые результаты
Умеренная полировка давление может уменьшить сопротивление пипетки без заметного изменения диаметром отверстия. При желании, этот протокол может быть использован для пипеток с суб-микронных отверстий и сопротивлений между 5-10МОм.