Удаление разветвленных и циклических соединений путем индукции мочевины для палеотермометрии U^k'37

1. Настройка и подготовка материалов

1. Получить общий липидный экстракт (TLE) с помощью метода экстракции растворителем (Sonation, Soxhlet или Accelerated Solvent Extraction (ASE)).
2. Приобретайте следующие материалы в любом розничном магазине химической продукции: пипетки и лампы из боросиликатного стекла; чистая вода; гексан; Дихлорметан (ДХМ); метанол; мочевина.
   1. Реагенты должны быть чистыми и не содержать углеводородов. В качестве альтернативы чистая вода может быть получена в лаборатории с использованием системы очистки воды.
3. Получите флаконы из боросиликатного стекла объемом 4 мл с крышками, покрытыми ПТФЭ.

2. Методы

1. Приготовьте смесь 2:1 DCM:Hexane (v:v).
   1. В колбе Эрленмейера смешайте 200 мл DCM и 100 мл гексана.
2. Сделайте смесь мочевины в метаноле (100 мг/мл).
   1. Налейте 300 мл метанола в колбу Эрленмейера.
   2. Добавьте 300 мг мочевины.
   3. Перемешивайте на автоматической мешалке до полного растворения мочевины.
3. Начните с сухого образца во флаконе объемом 4 мл.
4. Суспендируйте образец в 1,5 мл смеси DCM:Hexane (v:v) в соотношении 2:1.
   1. Если образец растворяется не полностью, проводить ультразвуковую обработку в течение 5 мин.
5. К этой смеси добавьте 1,5 мл мочевины в метаноле.
   1. После этого добавления следите за тем, чтобы образовался белый осадок. Это сигнализирует о создании кристаллов мочевины.
6. Аккуратно высушите кристаллы под азотом, используя слабый нагрев. Убедитесь, что весь растворитель испарился, прежде чем переходить к следующему этапу.
7. Промойте кристаллы 3 раза примерно 1 мл гексана. Удаляйте гексан между каждым полосканием с помощью стеклянной пипетки, чтобы перелить его во флакон с надписью «без аддукта».
8. Растворите кристаллы в 2 мл чистой воды. Встряхните, чтобы обеспечить полное растворение.
9. Экстрагируйте водную фазу гексаном, добавив 1 мл и осторожно встряхивая в течение 5 с.
10. Дайте гексану и воде полностью разделиться, прежде чем удалить примерно 75% гексана с помощью стеклянной пипетки и переложить его во флакон с надписью «аддук».
11. Повторите шаг 2.10 дважды.
12. Слейте воду и раствор мочевины в соответствующий контейнер для отходов.