Забор крови II

1. Кровотечение из лицевых вен у мышей

1. оборудование
   1. Забор крови осуществляется из свободного улова в пробирку для крови или пробирку Эппендорфа. В некоторых случаях желательно собирать кровь непосредственно в гематокритные пробирки.
   2. Ланцеты золотарника будут подобраны исходя из подходящего размера для животного в соответствии с возрастом и полом.
      1. Ланцеты подбираются в зависимости от возраста/размера мышей следующим образом:
         4 мм ланцет: 3-4-недельные мыши (до 15 граммов массы тела)
         5 мм ланцет: самки мышей в возрасте до 10 недель (до ~20 граммов массы тела)
         5 мм ланцет: самцы мышей в возрасте до 6 недель (до ~20 граммов массы тела)
         5 мм ланцет: для образцов с одной каплей (для мазков крови)
         5,5 мм ланцет: самки мышей старше 10 недель (более ~20 грамм массы тела)
         5,5 мм ланцет: самцы мышей старше 6 недель (более ~20 грамм массы тела)
         5,5 мм ланцет: крупные образцы
2. сдержанность
   1. Мышей удерживают с помощью техники загривки.
   2. Важно, чтобы движения головы из стороны в сторону были сведены к минимуму. Это обеспечивает точную и безопасную венепункцию с помощью ланцета.
3. Забор крови
   1. Ланцет соответствующего размера держат перпендикулярно поверхности кожи.
   2. Острие ланцета слегка наклонено, кончик обращен к носу.
   3. Ланцетное лезвие лучше всего использовать в вертикальном положении.
   4. Удерживая мышь, определите приблизительную область лицевой вены, измерив длину глаза ниже бокового кантуса и ширину глаза каудально.
   5. Острием ланцета аккуратно нащупайте точку, на которой заканчивается челюстная кость.
   6. Для лучшей точности при проколе сосуда расположите мышь в положении бокового лежания.
   7. Проткните кожу до плеча ланцета в этом месте. Это делается с сильным толчком, а не как при метании дротика.
   8. При извлечении ланцета начнет течь кровь.
   9. Чтобы улучшить кровоток, расположите мышь так, чтобы голова была ниже сердца.
   10. Соберите кровь в нужный сосуд для сбора.
   11. Промокните место прокола и ослабьте давление на загривок для гемостаза.

Рисунок 1. Кровотечение из лицевых вен у мышей.

2. Подчелюстное кровотечение у мышей: Хотя это очень похоже на технику кровотечения из лицевых вен, существуют различия в оборудовании и тонкие различия в этой процедуре кровотечения.

1. оборудование
   1. Забор крови осуществляется из свободного улова в пробирку для крови или пробирку Эппендорфа. В некоторых случаях его желательно собирать непосредственно в гематокритные трубки.
   2. Иглы 18-22 калибра подбираются исходя из подходящего размера для животного в соответствии с возрастом и полом.
      1. Иглы подбираются в соответствии с возрастом/размером мышей следующим образом:
         22 калибр: 3-4-недельные мыши (до 15 граммов массы тела)
         20 калибр: самки мышей в возрасте до 10 недель (до ~20 грамм массы тела)
         20 калибр: самцы мышей в возрасте до 6 недель (до ~20 граммов массы тела)
         20 калибр: для образцов с одной каплей (для мазков крови)
         18 калибр: самки мышей старше 10 недель (более ~20 грамм массы тела)
         18 калибр: самцы мышей старше 6 недель (более ~20 грамм массы тела)
         18 калибр: большие образцы
2. сдержанность
   1. Мышей удерживают с помощью техники загривки.
   2. Важно, чтобы движения головы из стороны в сторону были сведены к минимуму. Это обеспечивает точную и безопасную венепункцию иглой.
3. Забор крови
   1. Игла проводится перпендикулярно поверхности кожи.
   2. Удерживая мышь, найдите приблизительную область подчелюстной вены в точке, где линия от угла рта пересекается с линией от бокового кантуса глаза. Это совпадает с небольшой безволосой ямочкой, расположенной каудально к углу рта и немного ниже линии челюсти.
   3. Для лучшей точности при проколе сосуда расположите мышь в положении бокового лежания.
   4. Проткните кожу кончиком иглы в этом месте. Это делается с сильным толчком, а не как при метании дротика.
   5. Игла не вводится за кончик фаски.
   6. После извлечения иглы начнет течь кровь.
   7. Чтобы улучшить кровоток, расположите мышь так, чтобы голова была ниже сердца.
   8. Соберите кровь в нужный сосуд для сбора.
   9. Промокните место прокола, и ослабьте давление на загривок для гемостаза.

Рисунок 2. Кровотечение из подчелюстной вены у мышей.

3. Подкожное кровотечение

1. оборудование
   1. Прозрачные пластиковые, гибкие удерживающие конусы можно использовать как для мыши, так и для крысы. Для мышей для удержания можно использовать модифицированные пластиковые конические трубки объемом 50 миллилитров. Для крыс можно использовать модифицированные удерживающие трубки из плексигласа с прорезью, достаточно широкой, чтобы вытянуть заднюю ногу.
   2. При использовании пластикового конуса его измеряют относительно длины тела животного, а на уровне бедра вырезают овальное отверстие.
   3. Для этого метода сбора крови можно модифицировать коническую трубку для мыши, отрезав конец трубки, чтобы обеспечить отверстие для дыхания. На конце крышки трубки вырезается прорезь шириной около 1/2 дюйма и длиной 2 дюйма. Края обтягиваются тканевой лентой или сглаживаются для безопасности животных.
   4. Жгут изготавливается с помощью шприца объемом 3 мл и длиной 2-0 нерассасывающегося шва. ³
   5. Мазь с тройным антибиотиком или белый вазелин используется в качестве влагозащитного барьера на коже.
   6. Игла 22 калибра является предпочтительным размером для венепункции.
   7. Кровь собирается непосредственно в гематокритные пробирки.
2. сдержанность
   1. Гибкие пластиковые конусы
      1. Мышь или крысу помещают в конус носом вперед.
      2. Конец конуса складывается и закрывается с помощью небольшого зажима для связывания, чтобы предотвратить выход животного из удерживающего конуса.
      3. Заднюю лапу аккуратно протягивают через овальное отверстие к паху.
   2. Коническая трубка для мышей
      1. Мышь помещается в трубку носом вперед.
      2. Заднюю ногу аккуратно направляют в прорезь.
      3. Средний палец помещается на конец трубки, чтобы предотвратить выход мыши из трубки.
      4. Указательный и большой пальцы стабилизируют ногу мыши.
   3. Плексигласовая удерживающая трубка для крыс
      1. Крысу помещают в трубку носом вперед.
      2. Заднюю ногу аккуратно направляют в прорезь.
      3. Конец трубки закреплен таким образом, чтобы крыса не могла сдать назад и выйти из трубы.
      4. Указательный и большой пальцы стабилизируют ногу крысы.
3. Забор крови
   1. Шерсть удаляется с боковой стороны ноги от скакательного сустава до колена. Это можно сделать с помощью выщипывания, бритья или с помощью крема для депиляции.
   2. После удаления волос наносится небольшое количество мази и распределяется очень тонким слоем на безволосый участок.
   3. Жгут накладывают как можно дальше краниально и затягивают.
   4. Подкожный сосуд, проходящий по внешней поверхности ноги от колена до лодыжки, начнет заполняться и станет приподнятым, и его будет легко визуализировать.
   5. Игла проводится перпендикулярно поверхности кожи непосредственно над кровеносным сосудом. Проколите сосуд. Будьте осторожны, чтобы не вводить иглу глубоко в ногу, чтобы не проколоть мышцу или не задеть кость.
   6. Кровь будет стекать на поверхность ноги для сбора с помощью гематокритной трубки.
   7. После того, как кровь будет собрана, ослабьте жгут и надавите на прокол для гемостаза.
   8. Как только кровотечение остановится, снимите животное с удерживающего устройства и верните его в домашнюю клетку.

Рисунок 3. Кровотечение из подкожной вены у мышей.

4. Бедренная вена у крыс

1. оборудование
   1. Кровь собирается в гематокритическую пробирку.
   2. Мазь с тройным антибиотиком необходима для создания барьера между кожей/волосами и каплей крови.
   3. Для прокола вены используется игла 22 калибра.
   4. Небольшая портативная машинка для стрижки волос с лезвием шириной около 1 дюйма используется для стрижки волос с ноги.
2. сдержанность
   1. Крыс удерживают с помощью прозрачного, гибкого пластикового удерживающего конуса.
   2. Пластиковые конусы измеряются по длине тела и овальным отверстием, вырезанным на уровне бедра. Конус разрезают так, чтобы заднюю ногу можно было вынести наружу с доступом к вене.
3. Забор крови
   1. Волосы сбриваются от внутренней поверхности ноги от паха до колена.
   2. Мазь с тройным антибиотиком наносится тонким слоем в месте прокола.
   3. Удерживающий человек закупоривает вену и удерживает крысу внутренней поверхностью ноги лицом к флеботомисту.
   4. С помощью иглы проколите вену. Игла проводится перпендикулярно кровеносному сосуду, а прокол делается непосредственно на вене.
   5. Прокол делается как можно ближе к колену, что позволяет провести дополнительный забор образцов перед первым местом забора крови.
   6. Сосуд поверхностный. Поэтому глубина прокола не должна быть больше длины скоса иглы.
   7. Чтобы улучшить кровоток, расположите крысу ногой ниже сердца.
   8. Соберите кровь в пробирки с гематокритом по мере того, как она попадает на поверхность кожи.
   9. Ослабьте давление на ногу и надавите на место прокола для достижения гемостаза.

Рисунок 4. Кровотечение из бедренной вены у крыс.