Диагностическое вскрытие и забор тканей

1. Внешний осмотр

Тщательный внешний осмотр тела, который включает в себя визуальный осмотр тела на предмет повреждений и новообразований, должен быть выполнен в качестве начального шага при вскрытии. Шерсть волосяного покрова должна быть осмотрена на предмет участков выпадения волос. Зубы и ногти оцениваются на предмет чрезмерного роста или износа. Следует обратить внимание на любые пятна шерсти во рту, ноздрях, глазах, анальных и половых отверстиях. Для выявления внешних паразитов следует проводить тесты с помощью ленты, соскоб кожи и осмотр шкур (см. процедуры ниже).

1. Тест ленты
   1. Оборудование, необходимое для теста на ленте, включает перчатки, полоску прозрачной целлофановой ленты, предметное стекло для микроскопа и ножницы.
   2. При работе с лентой всегда надевайте перчатки, так как клей удаляет жир и клетки кожи с пальцев, скрывая результаты или вызывая путаницу при оценке предметного стекла.
   3. Отрежьте кусок ленты, который немного уже по ширине и короче по длине предметного стекла микроскопа.
   4. Осторожно прижмите липкую сторону ленты к анальному отверстию и окружающей области, и быстро снимите ее.
   5. С помощью противоположного конца ленты прижмите ее между лопатками и быстро снимите.
   6. Приложите скотч к предметному стеклу микроскопа.
   7. Тест на ленте готов к микроскопическому исследованию. Яйца паразитов видны при 4-кратном увеличении, но затем их следует исследовать при 10-кратном увеличении, чтобы правильно идентифицировать вид.
   8. Важно избегать прикосновения к клейкой стороне ленты. Лента поднимет мусор с рук в перчатках и затруднит чтение предметного стекла.
2. Соскоб кожи
   1. Тест на соскоб кожи проводится на любых участках алопеции, поражений кожи или экскориации.
   2. Оборудование, необходимое для соскабливания кожи, представляет собой чистое предметное стекло микроскопа, минеральное масло и металлический шпатель или лезвие скальпеля.
   3. Нанесите несколько капель минерального масла на предметное стекло микроскопа.
   4. Сожмите кожу в складку по краю очага поражения или области интереса.
   5. Нанесите небольшое количество минерального масла на кожу.
   6. Поместите край шпателя или лезвия скальпеля на кожу, и соскребите по направлению роста волос.
   7. Продолжайте соскабливать до тех пор, пока на коже не станет заметно небольшое покраснение.
   8. Поместите волосы и ткани, соскобленные с поверхности кожи, в масло на предметном стекле микроскопа. При необходимости распределите материал так, чтобы он равномерно распределился в масле.
   9. Теперь предметное стекло готово к рассмотрению под микроскопом. При желании к масляной капле на предметном стекле может быть наложен защитный лист. Рассмотрите предметное стекло с 4-кратным и 10-кратным увеличением.
3. Осмотр шкуры
   1. Осмотр шкуры является последним проводимым внешним осмотром, однако фактически он проводится после завершения внутреннего осмотра.
   2. Животное помещают в стеклянную или пластиковую чашку Петри после того, как будут собраны все образцы внутренних органов.
   3. Блюдо помещается в холодильник на 15 минут.
   4. Через 15 минут посуду помещают под препарирующий микроскоп и осматривают шкуру на наличие внешних паразитов. Большинство меховых клещей перемещаются на кончики волосков, и за ними легко наблюдать.

2. Внутреннее грубое исследование брюшной полости

1. Иссечение кожи
   1. Небольшой разрез делается прямо перед тазом у женщин и над крайней плотью у самцов.
   2. Срез кожи продлевается до подбородка.
   3. Тупое рассечение используется для ослабления кожи от фасции и мышц.
   4. Поперечные надрезы делаются спереди по отношению к задним конечностям и сзади по отношению к передним. Следует соблюдать осторожность, чтобы не разорвать кровеносные сосуды в подмышечной области.
   5. Используйте тупое рассечение, чтобы обнажить шейный отдел и грудную клетку. Следует проявлять особую осторожность, чтобы избежать разрыва яремных и сонных сосудов на шее.
2. Молочные железы
   1. У женщин исследуйте ткани молочной железы на предмет новообразований, обесцвечивания или аномалий.
   2. Кормящие или беременные самки будут иметь увеличенный объем ткани молочной железы, и может присутствовать молоко.
   3. Ткань молочной железы расположена от верхней части грудины в области манубриума до генитального отверстия на вентральной поверхности и простирается латерально вверх по обеим сторонам, почти соприкасаясь с дорсальной поверхностью в области бедер и плеч.
   4. Иссечение молочных желез требует захвата края железы большими щипцами и использования тупого рассечения для ослабления прикреплений к коже. После того, как железа отделена от кожи, можно использовать ножницы для радужной оболочки, чтобы разрезать любые оставшиеся насадки, прежде чем поместить железу в фиксирующий раствор.
3. Подкожные железы
   1. Препуциальные железы парные и расположены прямо перед крайней плотью у самцов крысы. Они кажутся крупными и имеют серый или желтоватый цвет с пенистым видом.
   2. Подчелюстные слюнные железы парные, расположены у нижней челюсти, и простираются вдоль шеи до грудины манубриума. Они имеют жесткое покрытие и плотно прилегают к мышцам.
   3. Удаление этих желез требует тупого рассечения и особой осторожности при работе в шейном отделе для предотвращения разрыва кровеносных сосудов. Тупое рассечение — это метод анатомического рассечения, при котором ткани отделяются, а нижележащие структуры обнажаются без разреза.
   4. Для тупого рассечения ножницы используются для раздвигания тканей, а не для их разрезания. Закрытые кончики вдавливаются в ткань, а затем открываются для расщепления ткани вдоль естественных плоскостей. Этот процесс требует терпения и деликатных прикосновений, так как растяжение тканей может привести к повреждению соседних органов и кровеносных сосудов.
   5. Железы, освободившись от подлежащих мышц, подтягиваются, а любые остаточные прикрепления разрываются.
   6. Сальники требуют как минимум одного разреза, чтобы обеспечить проникновение фиксатора.
   7. Подкожный жир оценивается по количеству и отложению. У животного с ожирением может быть большое количество жира, а кожа может казаться утолщенной. Животные, которые обезвожены, будут иметь сниженную эластичность кожи, и она будет казаться тоньше.
4. мышца
   1. Наблюдайте за брюшными, межреберными и открытыми мышцами шеи и конечностей. Обратите внимание на любое аномальное загущение, образование или обесцвечивание.
   2. Если для анализа необходимы мышцы, выберите и отрежьте образец перед взятием любых органов брюшной полости, чтобы уменьшить загрязнение крови.
5. Вскрытие полости тела
   1. Небольшой поперечный разрез делается в самой каудальной точке обнаженной мышцы живота.
   2. Приподнимая мышцу в сторону от органов, разрежьте по белой линии до мечевидной кости.
   3. Разрежьте мышцы живота от средней линии сбоку, чуть выше задних конечностей с обеих сторон.
   4. Разрежьте мышцы живота по изгибу ребер с обеих сторон.
6. Абдоминальный жир
   1. Оцените количество и накопление жира в организме. У здорового животного будут жировые пакеты в брюшной полости и немного жира вдоль спинной поверхности брюшной полости. У чрезмерно худощавого животного или очень молодого животного не будет заметного количества жира вокруг почек.
   2. Наблюдайте за цветом жировых отложений и отмечайте любые отклонения.

3. Органы брюшной полости

1. печень
   1. В норме цвет печени должен быть темно-красным. Поля должны быть ровными и иметь хрустящие края. Аномальная печень будет иметь утолщенный край и может иметь выемки или зубчатые края.
   2. Следует соблюдать осторожность при обращении с печенью, так как она представляет собой рыхлую ткань. Любое нарушение целостности органа приведет к тому, что кровь будет просачиваться в полость тела и затемнять органы.
   3. Аккуратно отразите печень в сторону от диафрагмы, и сделайте надрез через кровеносные сосуды перед печенью.
   4. Отразите печень обратно к диафрагме и захватите фиброзный узел, который соединяет все доли печени в центре. Поднимите печень, разорвав при этом все прикрепления к кишечному тракту и желудку.
   5. Удалите печень целиком и промокните лишнюю кровь с поверхности органа. Его можно поместить в солевую ванну или промыть в стерильном физрастворе перед разрезанием на более тонкие секции, чтобы обеспечить проникновение фиксирующих растворов.
2. желчный пузырь
   1. Желчный пузырь представляет собой небольшой прозрачный мешочек, который часто кажется желтым из-за скопления желчи. Он присутствует у мышей, но не у крыс.
   2. Желчный пузырь расположен между самыми верхними долями печени по средней линии. Как правило, он соединен с диафрагмой тонкой уздечкой, которая может быть случайно разорвана, что приведет к разрыву желчного пузыря.
   3. Желчный пузырь может быть удален вместе с печенью и позже отделен для исследования.
3. селезенка
   1. Селезенка темно-красного цвета и расположена вдоль нижней кривизны желудка. Он должен быть правильной формы, со слегка матовой поверхностью.
   2. Как правило, у самцов он больше, чем у самок. У животных с внутренними паразитарными инфекциями, бактериальными инфекциями или заболеваниями крови может быть увеличена селезенка.
   3. Поскольку селезенка отфильтровывает поврежденные эритроциты из кровообращения, она наполняется кровью. При удалении селезенки избегайте пункции органа.
   4. Чтобы удалить его, селезенка приподнимается, а прикрепления разрезаются между желудком и селезенкой.
4. Кишечный тракт
   1. Посмертные изменения происходят быстро и включают в себя скопление крови в тканях, что приводит к появлению кровоподтеков и раздуванию кишечника газами, часто образующимися в результате избыточного бактериального роста. Кишечный тракт тщательно обследуется после того, как он был выведен из организма.
5. желудок
   1. Желудок расположен на дистальном конце пищевода. Он кажется двухцветным, дифференцируя мышечную и железистую части.
   2. Желудок следует оценивать на наличие пищи на ощупь. Грызуны обычно едят постоянно из-за высокой скорости метаболизма. Следует обратить внимание на пустой желудок, так как он может свидетельствовать о болезни.
   3. Не стоит резать желудок, так как содержимое загрязнит органы в брюшной полости.
   4. Чтобы удалить желудок из кишечного тракта, пищевод отделяют прямо перед желудком. Если желудок должен быть помещен в общий контейнер с фиксатором, вокруг пищевода может быть наложен кусок шва, чтобы предотвратить утечку содержимого желудка перед разрезанием.
6. тонкая кишка
   1. Тонкая кишка состоит из трех отделов: двенадцатиперстной кишки, тощей кишки и подвздошной кишки. Он не будет содержать фекальных гранул.
   2. Двенадцатиперстная кишка представляет собой более короткий участок от заднего сфинктера желудка до начала тощей кишки. Желчный проток поступает в тонкую кишку в двенадцатиперстной кишке, и ткань поджелудочной железы более прочно прикрепляется к этой части тонкой кишки.
   3. Тощая кишка является центральной частью тонкой кишки.
   4. Пейеровы пятна, состоящие из лимфоидной ткани в виде небольших овальных пятен, присутствуют на небрыжеечной поверхности тощей кишки и подвздошной кишки у крыс. ³ Они являются частью иммунной системы и могут быть полезны в диагностике иммунных заболеваний.
   5. Подвздошная кишка является дистальным отделом тонкой кишки и является самой длинной частью, заканчивающейся в слепой кишке.
7. слепая кишка
   1. Слепая кишка имеет зеленоватый цвет и очень мягкая.
   2. Он располагается на стыке тонкого и толстого кишечника.
   3. Брожение происходит в слепой кишке, поэтому прокол органа приведет к неприятному запаху и загрязнению органов бактериями.
8. толстая кишка
   1. Толстая кишка начинается у слепой кишки и продолжается до анального отверстия. Его легко идентифицировать, так как фекальные гранулы можно визуализировать в просвете кишечника.
   2. Сразу после эвтаназии не должно быть никаких участков кровоизлияния или обесцвечивания.
9. брыжейка
   1. Тонкий и толстый кишечник прикреплены к телу брыжейкой, мембраной, содержащей кровеносные сосуды, жир и лимфатические узлы.
   2. Перед удалением из кишечного тракта следует обследовать на предмет увеличения лимфатических узлов и любых новообразований.
10. поджелудочная железа
    1. Поджелудочная железа – диффузный орган, расположенный ниже желудка и между первыми складками двенадцатиперстной кишки. Он имеет светло-коричневый или серый цвет и состоит из множества небольших лепестков с неровными краями.
    2. Может оказаться невозможным удалить поджелудочную железу целиком.
    3. Если необходимо забор ткани поджелудочной железы, это должно быть сделано до удаления из кишечного тракта.
    4. Ткань, идентифицированная как поджелудочная железа, должна быть тщательно отделена от окружающей ее брыжеечной ткани.
11. Удаление из кишечного тракта
    1. Кишечный тракт удаляется как единое целое, начиная с желудка и продолжаясь до анального отверстия.
    2. Надрез делается через толстую кишку, прямо перед анальным отверстием. Весь кишечный тракт может быть поднят, а любые перепончатые прикрепления разорваны. Затем кишечный тракт может быть удален из брыжейки, разрезан на части и зафиксирован.
    3. При помещении участков кишечника в банки, содержащие другие органы, обязательно нужно перевязать концы, чтобы предотвратить заражение тканей кишечными бактериями.
    4. Просвет кишечного тракта можно обнажить, сократив его длину с помощью небольших ножниц с тонким наконечником. Внутреннюю часть можно промыть после обнажения просвета.
    5. Некоторые исследования могут потребовать, чтобы часть кишечника была удалена и промыта, а не разрезана. Закрепляя тупую иглу в одном конце иссеченной ткани, можно ввести физиологический раствор или фиксирующий раствор в кишечник для вымывания содержимого.
12. почка
    1. Почки – это парные органы, расположенные на фоне мышц спины. Правая почка находится выше левой. Почки у пожилых животных могут быть окружены жировыми отложениями, что затрудняет их визуализацию.
    2. Она примерно равна по размеру и цвету темной фасоли, а ее поверхности должны быть гладкими.
    3. Непосредственно перед почкой находится надпочечник, проявляющийся в виде маленького светло-розового узелка.
    4. Чтобы удалить почку, изолируйте ее с помощью щипцов, и разрежьте между почкой и мочеточником.
    5. Почки имеют жесткую внешнюю капсулу, которую можно отслаивать, чтобы лучше визуализировать поверхности. Разрежьте одну почку пополам по длинной оси, а другую почку поперек. Обратите внимание, что любой песок в почке может указывать на наличие кристаллов или минеральных отложений.
13. Женская репродуктивная система
    1. Матка представляет собой Y-образную структуру. Тело матки короткое, с парными рогами слева и справа. Рога заканчиваются на маточных трубах и яичниках. У небеременной самки рога будут бледно-розовыми и тонкими. У беременного животного рога будут казаться более темными и иметь ярко выраженные кровеносные сосуды, проходящие рядом с рогами матки. По мере вынашивания плода рога матки будут иметь вид «нити жемчуга». Развивающиеся эмбрионы создадут бледную область внутри рога, и по мере их развития матка будет растягиваться, а ткань станет тоньше, что позволит визуализировать.
    2. Яичники будут располагаться чуть ниже почек. Они будут иметь шероховатую поверхность из-за разных стадий созревания фолликулов. Кистозные яичники имеют наполненные жидкостью пузырьки. Эта жидкость может варьироваться от соломенного цвета до кровавого.
    3. Чтобы удалить яичники, разрежьте артериальные прикрепления спереди и маточную трубу сзади. При желании яичники могут быть удалены прикрепленными к матке.
    4. Чтобы удалить матку, ее необходимо аккуратно захватить и применить тракцию, чтобы иметь возможность разрезать ниже шейки матки. После разреза приподнять тело и рога матки, разорвав любые прикрепления в полости тела.
14. Мужская репродуктивная система
    1. Семенные пузырьки белые, в форме бараньего рога, парные структуры, расположенные спереди от мочевого пузыря и прикрепленные по средней линии у предстательной железы. Размеры варьируются, но они могут быть такими же большими, как слепая кишка.
    2. Предстательная железа расположена вокруг мочевого пузыря у основания. Эта ткань обычно имеет легкий загар. У пожилых животных у него может проявляться гиперплазия. У пожилых животных, как правило, больше жира в организме, что может затруднить визуализацию предстательной железы.
    3. Семенники спарены и расположены в мошоночных мешках. Поверхность должна быть гладкой с выраженной на поверхности тонкой васкуляризацией. У мышей и крыс отсутствует паховое кольцо или сфинктер, который позволяет животному выводить семенники в брюшную полость. Чтобы визуализировать их, возьмитесь за жировые пакеты живота, расположенные в нижней части живота, и потяните их вперед. Это приведет к извлечению яичек из мошонки для проведения обследования. Придаток яичка находится вдоль нижнего края яичка и сужается к верху. Семявыносящий проток прикрепляется к концу придатка яичка и ведет обратно к простате.
    4. Удаление яичек может быть осуществлено путем разрезания аттачмента в мошонке и разрезания семявыносящего протока.
    5. Удаление простаты и семенных пузырьков требует захвата основания мочевого пузыря и подъема, при этом разрывая прикрепления под простатой

4. Грудная полость

1. легкие
   1. Легкие обычно ярко-розового цвета и губчатые по текстуре с гладкой поверхностью. Однако эвтаназия с CO₂ может вызвать легочные кровотечения, в результате чего образуются темно-красные пятна, которые могут покрывать всю поверхность легких.
2. сердце
   1. Сердце темно-красного цвета с четырьмя камерами. Желудочки мышечные и на ощупь твердые. Предсердия имеют более темно-красный цвет и расположены в верхней части желудочков. Они гораздо менее мускулистые и кажутся вялыми.
   2. Перикардиальный мешок представляет собой тонкую полупрозрачную оболочку, окружающую сердце.
3. тимус
   1. Вилочковая железа расположена спереди от сердца и находится над трахеей. Он должен быть гладким по текстуре.
   2. У молодых животных он проявляется в виде загара с жирной текстурой.
   3. У более старых животных происходит инфильтрация жировой ткани в тимус, увеличивая его и придавая тимусу белый цвет.
4. трахея
   1. Трахея простирается от надгортанника до разветвления бронхов. Это ребристая хрящевая трубка, которая является гибкой.
   2. Он должен быть прозрачным и не иметь жидкости или пенистой жидкости в просвете. Эвтаназия с CO₂ может привести к накоплению жидкости (серозно-кровянистой и/или пенистой) в легких и трахее из-за кровоизлияния.
5. пищевод
   1. Пищевод простирается от ротовой полости до желудка. Это очень тонкая трубка, которая находится непосредственно за трахеей и за сердцем и проходит через диафрагму в желудок.
   2. Пищевод трудно удалить, так как он легко рвется, даже несмотря на то, что ткань эластичная. Удаление пищевода легче всего осуществить, рассекая его в сторону от трахеи после удаления сердца и легких.
6. Удаление органов грудной клетки
   1. Сердце и легкие легче всего удаляются вместе.
   2. Расположите щипцы перпендикулярно трахее и крепко обхватите трахею, чуть выше тимуса.
   3. С помощью ножниц сделайте надрез перпендикулярно трахее прямо перед щипцами. На этом разрезе следует разорвать трахею и пищевод.
   4. Не ослабляя хватку трахеи, поднимите трахею вверх каудально и отрежьте любые прикрепления легких к поверхности позвоночника в грудной клетке.
   5. Пищевод может потребоваться перерезать, чтобы иметь возможность приподнять сердце и легкие из грудной полости.
   6. После того, как сердце будет выведено из организма, его можно промыть физиологическим раствором для удаления остатков крови и тромбов, или же его можно заполнить фиксатором через аорту.
   7. После того, как легкие иссекаются, их надувают с помощью фиксатора. Вокруг трахеи свободно накладывается лигатура. Игла, которая прикрепляется к шприцу, содержащему фиксатор по выбору, вводится в просвет трахеи. Лигатура затягивается вокруг иглы, а фиксатор вводится до тех пор, пока легкие не будут надуты. После извлечения иглы лигатура затягивается, чтобы предотвратить протекание.
7. Ротовая полость
   1. язык
      1. Язык у грызунов гладкий.
      2. Осмотрите поверхность на предмет повреждений, в том числе и нижнюю сторону.
      3. Язык редко собирают, за исключением специализированных исследований, таких как исследования рака полости рта.
      4. Чтобы удалить язык, прорежьте щечные поверхности с каждой стороны ротовой полости к височно-нижнечелюстному суставу.
      5. Вывихните нижнюю челюсть и отразите верхнюю челюсть, чтобы открыть надгортанник и основание языка.
      6. С помощью щипцов удлините язык, разрежьте насадки снизу каудально к основанию языка.
      7. Сохраняя вытяжение, надрежьте горизонтально у основания языка, чтобы освободить его от ротовой полости.
   2. зубы
      1. Зубчатость крысы состоит из трех коренных зубов и одного резца в каждом квадранте, которые отделены беззубой диастемой. Они покрыты эмалью только с губной стороны; На внутренней поверхности зуба находится дентин.
      2. Зубы крысы обычно желто-оранжевого цвета. Наиболее ярко такой цвет проявляется на эмали резцов и обусловлен наличием железосодержащего пигмента. Цвет начинается примерно на 21 день после рождения и становится более глубоким с возрастом.
      3. Осмотрите зубы на предмет разрастания или неправильного прикуса.

5. Голова

1. взор
   1. Глаза должны быть одинаковыми по размеру и чистыми от экссудата. Конъюнктива должна быть гладкой.
   2. Чтобы удалить глаза, надавите на кожу вокруг глаза назад и вниз, чтобы глаз выступил из орбиты. С помощью щипцов с изогнутым наконечником изолируйте шар и разрежьте крепления, удерживающие его в гнезде.
2. Уши
   1. Наблюдайте за ушами для идентификации. Некоторые исследователи требуют, чтобы ушные бирки были включены в образцы органов для подтверждения идентичности животного.
   2. Слуховые проходы исследуются на предмет каких-либо поражений, новообразований или экссудата.
3. нос
   1. В носу наблюдается жидкость или экссудат.
   2. Ноздри должны быть симметричными и четкими.