Микрожидкостных Датчик: эксплуатация и использование для локализованной поверхностной обработки

Эта процедура показывает, как собрать и использовать микрофлюидный зонд или МФУ. Микрофлюидными компонентами МФУ являются газонепроницаемые шприцы, стеклянные капиллярные трубки, микрогерметичные коннекторы от Upchurch и головка МФУ. В этом видео будут представлены важнейшие этапы сборки и выравнивания.

После сборки МФУ можно использовать с большим разнообразием подложек и реагентов для моделирования поверхности и обработки. Привет, меня зовут Сесил Перо. Я являюсь постдокторантом в лаборатории Дэвида Якера на факультете биомедицинской инженерии Университета Макгилла в Монреале, Канада.

Здравствуйте, меня зовут Мохаммад Касиме. Я являюсь кандидатом наук в лаборатории Дэвида И на факультете биомедицинской инженерии Университета Макгилла. Привет, я Дэвид Йокер.

Я являюсь доцентом кафедры биомедицинской инженерии, и я хотел бы приветствовать вас сегодня на нашей демонстрации микрофлюидного зонда. Сегодня мы покажем вам процедуру работы и использования микрофлюидного зонда. Мы используем эту процедуру в нашей лаборатории для обработки поверхностей и нанесения рисунков.

Итак, приступим к запуску этого протокола. Пластиковые шприцы и иглы используются для наполнения стеклянных шприцев газового типа реагентами, гарантируя отсутствие пузырьков воздуха. Как правило, мы используем шприц объемом от одного до 10 микролитров для инъекций и шприц с объемом от 5 до 10 микролитров для аспирации.

Далее, с помощью наноплотных фитингов с малым мертвым объемом, шприцы подключаются к капиллярным трубкам. Затем капилляры заполняются и проверяются на наличие пузырьков под микроскопом. Микросхема МФУ предварительно заполнена буферным раствором для предотвращения улавливания пузырьков при подключении капилляров.

Наконец, капилляры вставляются в соединительный элемент PDMS в микроизготовленной головке винта. Теперь, когда МФУ собрано, мы готовы приступить к его настройке. Субстрат вставляется в самодельный держатель.

Он прикреплен к предметному столику микроскопа. Зазор между МФУ и подложкой имеет решающее значение для процессов структурирования поверхности. С помощью трехточечной опоры, образованной микрометрическими винтами, горизонтальное выравнивание регулируется с точностью до микрометра.

Это необходимо, потому что подложка обрабатывается путем сканирования под МФУ. Чтобы начать настройку МФУ, головка зонда зажимается в держателе зонда и устанавливается на станцию зонда в верхней части инвертированного микроскопа. Затем шприцы помещаются в высокоточные шприцевые насосы.

Затем с помощью пары гониометров выравнивание мезы МФУ с подложкой корректируется путем наблюдения за кольцами Ньютона, также известными как интерференционные полосы. Они появляются, когда МФУ соприкасается с подложкой, точка контакта и частота колец служат индикатором наклона. Когда МФУ выровнено по поверхности, одно интерференционное кольцо проходит по всей поверхности.

Эта мера также служит для калибровки расстояния между МФУ и подложкой. Теперь, когда МФУ настроено, мы готовы перейти к его эксплуатации. Во время работы МФУ дозирование контролируется программным обеспечением для лабораторного просмотра.

Работа прибора визуализируется на глаз и с помощью ПЗС-камеры. Перед началом правильной аспирации введите немного жидкости, чтобы убедиться, что аспирационный шприц правильно ориентирован и на нем нет пузырьков. Затем МФУ погружается в буфер.

Теперь мы можем начать впрыскивание жидкости, наблюдая за удержанием бусин. Коэффициент аспирации при впрыске варьируется от одного до трех до одного до 10, в зависимости от диффузии реагента с окружающим буфером и желаемой геометрической схемы течения. Наконец, теперь зонд можно использовать для различных задач.

Показанные здесь поверхностные узоры были получены с помощью МФУ с меченным флуоресцеином биотином на стеколах из гидрогелевого стекла с покрытием ENC. Скорость потока впрыска составляла один нанолитр в секунду, а скорость потока аспирации составляла 10 нанолитров в секунду при использовании шприцев объемом 10 микролитров и 50 микролитров соответственно. Зазор между поверхностью и зондом составлял пять микрометров.

МФУ также можно использовать для локального окрашивания и обработки клеток и тканей. Удержание потока предотвращает диффузию реагента и позволяет проводить точное химическое окрашивание клеток. Как показано здесь, монослой клеток фибробластов окрашивали 100 микрограммами на миллилитр дай.

Итак, мы показали вам, как работать с микрофлюидным зондом. При выполнении этой процедуры вы должны убедиться, что на системе нет пузырей и что поверхность микрофлюидного реквизита параллельна субстрату. Вот и все.

Спасибо за просмотр и удачи в ваших экспериментах.