Name: Экспериментальные Пробирной метастазы (Видео) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-08-24T17:10:00.000+00:00
Duration: 8 min 28 s
Description: Изучите экспериментальную пробирную метастазу для оценки метастатического потенциала человеческих раковых клеток с помощью инъекций в хвостовую вену иммунодефицитным мышам.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Этот протокол был протестирован и оптимизирован первоначально в лаборатории д-р Ричард Хайнс (MIT). Финансирование предоставляется AWARD NYSTEM IDEA (для LX) и Рут Л. Kirschstein Национальный исследовательский Service Award (для LX).

1. Подготовка образцов <ol><li> Расти клетки ~ 70% сливающийся в их конкретных средств массовой информации с факторами роста или FBS (например, DMEM с 10% FBS для МС-1 клеток). Аспирируйте средств массовой информации из пластины и аккуратно мыть несколько раз с 1 х PBS (8 г / л NaCl, 0,2 г / л KCl, 1,15 г / л Na 2 HPO 4 .7 H 2 O, 0,2 г / л KH 2 PO 4, рН 7,3). </li><li> Аспирируйте PBS и добавьте 2 мл 0,05% трипсина в версена (0,014 г / л фенола красного и 0,2 г / л ЭДТА-Na в 1 х PBS, рН 7,2). Аккуратно каменную плиту, чтобы облегчить ячейки отрыв от пластины. Соблюдайте клетки под микроскопом. Обычно это занимает 2-5 минут для клеток необходимо отсоединить. </li><li> Добавить достаточным объемом сред, содержащих FBS (или ингибитором трипсина сои), чтобы утолить трипсин активности и сбора клеток в 50 мл трубки сокола. Граф клеток с использованием hemacytometer. Нагрузка 10 мкл суспензии клеток на чистую hemacytometer. Число клеток в мл равна средней # клеток в каждом из пяти квадратов умножается на 10 4. </li><li> Центрифуга клетки при 1000 оборотов в минуту (или ~ 200 мкг) в настольных центрифуг в течение 3 минут. </li><li> Осторожно снимите СМИ, не нарушая клеточный осадок. Ресуспендируют клеток в соответствующий объем Хэнкс Сбалансированный буферного раствора (HBSS), чтобы достичь конечной концентрации ~ 5 х 10 6 клеток / мл. </li><li> Фильтры клеток через Сокол 70 мкм сито ячейки, чтобы исключить крупные агрегаты клеток. Место кончика пипетки непосредственно на фильтре более помечены 5 мл трубку культуры Falcon. Быстро извлечь суспензии через фильтр в пробирку. </li><li> Граф еще раз, используя клетки hemacytometer и разбавить их конечной концентрации 2,5 х 10 6 / мл. Держите клетки на льду. </li><li> Определение жизнеспособности клеток. Смешайте несколько клеток с трипанового синего и измерить процентное содержание мертвых (синий) клетки более общий клеток с использованием hemacytometer. Жизнеспособность клеток должна быть ≥ 90% перед инъекцией. </li></ol> 2. Внутривенных инъекций <ol><li> Изменение перчатки. Аккуратно захватите хвост иммунодефицитных мышей (ню, NOD-SCID, или ГЯП, Лаборатория Джексона) и потяните ее на мыши фиксатор, с его спиной к щели и хвост, торчащие из маленького отверстия в задней части фиксатор . </li><li> Медленно слайд кольцо внутрь вдоль щели и зафиксировать ее на месте когда-то кольцо бросается в устье мыши. Мышь не должны иметь возможность свободно передвигаться, но должны иметь нормальный темп дыхания. </li><li> Найти основные вены хвоста. Четыре крупных кровеносных сосудов присутствуют в мышь хвоста. Кровеносные сосуды на спинной и брюшной сторонах хвоста артерий. Вены находятся на боковых сторонах хвоста. </li><li> Нарисуйте более 200 мкл подготовленных клеток в 1 мл шприца. Прикрепить 30 G1 / 2 дюйма иглы и вытолкнуть пузырьков воздуха, которые могут существовать. Конечный объем клеток в шприце должно быть 200 мкл (например, 5 х 10 5 клеток в общей сложности). </li><li> Inject клетки в хвостовую вену. <ol class="lalpha"><li> Начните с дистального конца хвоста, так что если первый процесс не удается, более проксимальной области хвоста могут быть использованы для второй попытки. </li><li> Протрите хвост с 70% этанола. Потяните хвост прямой. Держите кончик хвоста с большим и поддержку точки для инъекций с указательным пальцем. </li><li> Вставьте иглу в вену и ввести клетки. Убедитесь в том, игл и шприцев параллельны вены во время инъекции, иначе игла будет тыкать через стенку сосуда и придать клеток в окружающие ткани хвоста. </li><li> Снять иглу после инъекции. Кровь следует обильно из места инъекции, если инъекции прошел успешно. Пресс чистый кусок бумажной салфеткой или ватным тампоном на месте инъекции для облегчения свертывания крови, и ощупывать хвостом вверх, чтобы подтолкнуть любой остаточной образца в вену в обращение. </li><li> Отпустите кнопку мыши, из фиксатор и вернуть его в клетку. Запись инъекции процесса (например, сколько попыток понадобилось вводить клетки и сколько клетки вводили) в лаборатории ноутбука. </li><li> Определить жизнеспособность клеток после инъекции, как описано в разделе подготовки проб, Шаг 9. Этот шаг дает уверенность в том, что клетки, остаться в живых протяжении процесса впрыска. В конце эксперимента инъекции, жизнеспособность клеток будет снижаться, но должна быть выше 80%. </li><li> (Опционально) спином вниз оставшиеся клетки и промыть гранулы с PBS один раз. Замораживание гранул при температуре -80 ° С для будущего анализа (например, западная пятна, чтобы подтвердить экспрессии генов или нокдаунов). </li></ol></li><li> Обычно после одного-двух месяцев, мышей будет расчленена и расположения метастазов грубо определена. Легких является основной сайт для метастазирования, так как он содержит первую капиллярного русла, что клетки встреча после того как онивведите обращении. </li><li> После промывки PBS, каждый доли легкого (или других тканей, содержащих метастазов) наблюдается при вскрытии микроскопа (рис. 1). Число обнаруживаемых метастазов по обе стороны легких считается и количество метастазов в легких на все четыре доли складываются как общее количество метастазов в легких. 1 метастазов легкого легче обнаружить, если легкие фиксировали в формалине ночь , так как метастазы будет apppear как белесые пятна, в отличие от соседней темной легкого коричневого тканей. </li></ol> 3. Культивирования клеток от метастазов в легких <ol><li> Метастазов в легких изолированы от вводили мышам. Каждый из них должен быть культурным отдельно. </li><li> Каждый метастазы измельчается до конца колпачок с иглы (стерильные) на 70 ячейки фильтра мкм. </li><li> Промойте ячейки фильтра с несколькими мл средних и собранных клеток, которые проходят через фильтр в культуре блюдо. </li><li> Инкубируйте клетки при 37 ° С в течение по крайней мере, четыре дня без нарушений. </li><li> Смыть крови или тканей мусора на блюдо с PBS. </li><li> Добавить свежую среду. В начале, как раковые клетки и фибробласты клетки растут на пластинках, но постепенно, клеток фибробластов вымрет и будет заменен раковых клеток. Если раковые клетки несут никакой гены лекарственной устойчивостью, выделите ячейки с соответствующими антибиотиками. </li><li> Чистотой клеток, полученных является методом иммуногистохимии с использованием антител против человека-специфических белков. Мы используем анти-человеческий виментин антител (NCL-ВИМ-V9, Novocastra). Клетки мы получили обычно содержат более 99% клеток человека, даже в случае отсутствия наркотика выбора. Вновь клеток, полученных могло быть введен снова в иммунодефицитных мышей, чтобы проверить их метастатической способности, как описано выше. </li></ol> 4. Представитель Результаты <ol><li> В конце этого теста, высокой метастатической линии раковых клеток обычно возникает много метастаз легких (рис. 1), 1 в то время как очень немногие метастазы легких будет поступать из плохо метастатическим линии клеток рака. </li><li> Клетки, полученные с помощью этого метода обычно приводит к более метастазов, чем родительские линии, когда они проверяются еще раз, используя результаты анализа. 1-3 </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1942/1942fig1.jpg" alt="Рисунок 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Рисунок 1"> Рисунок 1. Представителю изображения мышью легких после хвостовую вену инъекции раковых клеток. 5 х 10 5 метастатических линии человеческих клеток меланомы, С. М. клетки, 4 вводили в хвостовую вену иммунодефицитных мышей. Два месяца спустя, легкие были изолированы и метастазы были обнаружены рассеянные среди нормальной ткани легкого.

<ol><li>Xu, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+expression+changes+in+an+animal+melanoma+model+correlate+with+aggressiveness+of+human+melanoma+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Gene expression changes in an animal melanoma model correlate with aggressiveness of human melanoma metastases.</a> Mol Cancer Res. 6 (5), 760-760 (2008).</li>
<li>Clark, E. A., Golub, T. R., Lander, E. S., Hynes, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomic+analysis+of+metastasis+reveals+an+essential+role+for+RhoC%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Genomic analysis of metastasis reveals an essential role for RhoC.</a> Nature. 406 (6795), 532-532 (2000).</li>
<li>Xu, L., Begum, S., Hearn, J. D., Hynes, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GPR56%2C+an+atypical+G+protein-coupled+receptor%2C+binds+tissue+transglutaminase%2C+TG2%2C+and+inhibits+melanoma+tumor+growth+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">GPR56, an atypical G protein-coupled receptor, binds tissue transglutaminase, TG2, and inhibits melanoma tumor growth and metastasis.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 103 (24), 9023-9023 (2006).</li>
<li>Kozlowski, J. M., Hart, I. R., Fidler, I. J., Hanna, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+human+melanoma+line+heterogeneous+with+respect+to+metastatic+capacity+in+athymic+nude+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Natl+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">A human melanoma line heterogeneous with respect to metastatic capacity in athymic nude mice.</a> J Natl Cancer Inst. 72 (4), 913-913 (1984).</li>
<li>Kang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+multigenic+program+mediating+breast+cancer+metastasis+to+bone%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">A multigenic program mediating breast cancer metastasis to bone.</a> Cancer Cell. 3 (6), 537-537 (2003).</li>
</ol>

Метастазы являются основной причиной смерти у онкологических больных. Она включает в себя четыре основных этапа: отряд раковые клетки от их основных локусов, их вступление в обращении (intravasation), их выезда из кровообращения (кровоизлияние), а выживание и рост в далеком органа. Метастазы в человеческой считается медленным процессом и часто проявляется после нескольких лет ожидания. Для изучения его прогрессирования своевременно, выше относительно быстро экспериментального анализа была создана в иммунодефицитных мыше...

<table><tbody><tr><td>DMEM</td><td>Invitrogen</td><td>10313-021</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Hyclone</td><td>SH30088.03</td><td></td></tr><tr><td>HBSS</td><td>Invitrogen</td><td>14175-095</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9888</td><td></td></tr><tr><td>KCl</td><td>Mallinckrodt Baker Inc.</td><td>6838-04</td><td></td></tr><tr><td>Na&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; HPO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;.7H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O</td><td>Mallinckrodt Baker Inc.</td><td>7896-04</td><td></td></tr><tr><td>KH&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;PO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;</td><td>Mallinckrodt Baker Inc.</td><td>7100-12</td><td></td></tr><tr><td>Феноловый красный</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P3532</td><td></td></tr><tr><td>EDTA-Na</td><td>EMD Millipore</td><td>4010</td><td></td></tr><tr><td>Трипановый синий</td><td>Invitrogen</td><td>15250-061</td><td></td></tr><tr><td>Трипсин 2.5%</td><td>Invitrogen</td><td>15090-046</td><td></td></tr><tr><td>Этанол</td><td>Ultrapure</td><td>200-CSGP</td><td></td></tr><tr><td>Пробирка Falcon 50 ml</td><td>VWR international</td><td>89039-656</td><td></td></tr><tr><td>Микроцентрифужные пробирки</td><td>Axygen Scientific</td><td>MCT-175-C</td><td></td></tr><tr><td>Клеточный стрейнер Falcon 70&amp;mu;m</td><td>BD Biosciences</td><td>352350</td><td></td></tr><tr><td>Культуральная пробирка Falcon 5ml</td><td>VWR international</td><td>60818-576</td><td></td></tr><tr><td>Гемоцитометр</td><td>Hausser Scientific</td><td>15170-208</td><td></td></tr><tr><td>Шприц 1 ml</td><td>BD Biosciences</td><td>329650</td><td></td></tr><tr><td>Игла 30 &amp;frac12; G</td><td>BD Biosciences</td><td>305106</td><td></td></tr><tr><td>Фиксатор для мышей</td><td>Plas Labs Inc.</td><td>551-BSRR</td><td></td></tr><tr><td>Хирургические ножницы</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-940</td><td></td></tr><tr><td>Пинцет</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-902</td><td></td></tr><tr><td>Диссекционный микроскоп</td><td>Nikon Instruments</td><td>SMZ1500</td><td></td></tr><tr><td>Настольная центрифуга</td><td>Thermo Fisher Scientific, Inc.</td><td>75003491</td><td></td></tr></tbody></table>

Экспериментальные Пробирной метастазы

Experimental Metastasis Assay

Метастазы являются основной причиной смерти у онкологических больных. Чтобы понять механизм метастазирования, экспериментальные анализа метастазы был установлен с использованием иммунодефицитных мышей. Данная статья описывает процедуры, связанные в этом анализе, в том числе подготовка проб, внутривенные инъекции, и культивирования клеток от метастазов в легких. Короче говоря, заранее оговоренное число раковых клеток человека были подготовлены<em&gt; В пробирке</em&gt; И непосредственно вводится в обращение иммунодефицитных мышей в их жилах хвост. Небольшое число клеток выживать турбулентности в обращении и расти, как метастазы во внутренних органах, таких как рак легких. Вводили мышам расчленены по истечении определенного периода. Распределение в тканях метастазов определяется по рассекает микроскопом. Количество метастазов в конкретной ткани считается и прямо коррелирует с метастатическим способность вводили раковые клетки. Возникли метастазы изолированных и культурной<em&gt; В пробирке</em&gt; Как клеточных линий, которые часто показывают расширение метастатическим способностями, чем родительские линии, когда вводили опять в иммунодефицитных мышей. Эти высоко метастатической производных стать полезным инструментом для выявления генов или молекулярных путей, которые регулируют метастатической прогрессии.

В этой статье описываются процедуры анализа экспериментальных метастазов, который используется для определения метастатического потенциала человеческих клеточных линий рака.

Метастазирование является основной причиной смерти пациентов с онкологическими заболеваниями. Для изучения механизмов метастазирования был разработан экспериментальный метод анализа метастазирования...

Общая цель следующего эксперимента заключается в проверке метастатического потенциала раковых клеток человека с помощью инъекций в хвостовую вену. В иммунодефицитных мышах подготавливаются клетки для инъекции. Затем клетки вводят иммунодефицитным мышам, у которых через один-два месяца развиваются метастазы в легких.Мышей подвергают диссекции, после чего количественно определяют и культивируют метастазы в легких. Результаты данного типа анализа указывают на степень метастазирования конкретного типа раковых клеток. Здравствуйте, я Сонали Моханти из лаборатории доктора LE факультета биомедицинской генетики Рочестерского университета.Сегодня мы продемонстрируем процедуру проведения экспериментального анализа метастазирования. Мы используем этот метод в нашей лаборатории для изучения метастазирования рака. Итак, приступим.Начните с клеток, выращенных до примерно 70% конфлюэнтности; аспирируйте среду из планшета и осторожно промойте один раз 1×PBS. Затем добавьте два миллилитра 0,05% трипсина. Осторожно покачайте планшет, чтобы облегчить открепление клеток.Наблюдайте за клетками под микроскопом в процессе их открепления. Добавьте достаточный объем среды с FBS для нейтрализации действия трипсина. Затем перенесите суспензию в пробирку объемом 50 мл.Подсчитайте количество клеток с помощью гемоцитометра. После определения концентрации центрифугируйте пробу при ускорении около 200 ×g в течение трех минут, стараясь не потревожить осадок клеток. Осторожно удалите среду и ресуспендируйте осадок в соответствующем объеме сбалансированного солевого раствора Хэнкса (HBSS) для достижения конечной концентрации примерно 5 × 10⁶ клеток/мл.Затем профильтруйте суспензию через клеточный фильтр Falcon с размером пор 70 мкм. Чтобы исключить крупные клеточные агрегаты, поместите кончик пипетки непосредственно на фильтр, установленный на культуральной пробирке объемом 5 мл. Быстро вытесните суспензию через фильтр в пробирку.Повторно подсчитайте количество клеток, используя трипановый синий, для определения жизнеспособности. Перед инъекцией жизнеспособность должна составлять более 90%. Затем разведите суспензию до конечной концентрации 2,5 × 10⁶ клеток на мл.Хранить на льду. Осторожно возьмите иммунодефицитную мышь за хвост и поместите ее в фиксатор так, чтобы спина была прижата к прорези, а хвост выступал из небольшого отверстия сзади. Медленно сдвиньте кольцо внутрь вдоль прорези.Когда кольцо зафиксирует рот мыши, закрепите его. Мышь не должна иметь возможности свободно двигаться, но при этом должна сохранять нормальную частоту дыхания. Найдите основные хвостовые вены.В хвосте мыши расположены четыре основных кровеносных сосуда. Артерии находятся на дорсальной и вентральной сторонах хвоста. Вены расположены с латеральных сторон.Наберите не менее 200 µL подготовленной клеточной суспензии в шприц объемом 1 мл. Установите иглу калибра 30 G и удалите все пузырьки воздуха. Конечный объем в шприце должен составлять 200 µL.Подготовьтесь к инъекции в дистальный конец хвоста. Таким образом, если первая попытка окажется неудачной, для повторной инъекции можно будет использовать более проксимальный отдел хвоста. После протирания места инъекции 70% ethanol выпрямите хвост.Удерживайте наконечник большим пальцем, поддерживая место инъекции указательным пальцем. Введите иглу в вену и введите клетки. Во время инъекции следите за тем, чтобы игла и шприц были параллельны вене.В противном случае игла проткнет стенку сосуда, и клетки будут введены в прилегающие ткани хвоста. Извлеките иглу, если процедура прошла успешно. Из места инъекции должна начать сочиться кровь.Прижмите чистый ватный тампон, чтобы облегчить удаление остатков препарата, и пальпируйте хвост в направлении к телу, чтобы протолкнуть остатки образца в кровоток. Освободите мышь из фиксатора и верните её в клетку. Запишите количество попыток инъекции и количество введенных клеток в лабораторный журнал.Определите жизнеспособность клеток после инъекции. Как и прежде, этот этап позволяет убедиться, что клетки остаются живыми на протяжении всего процесса инъекции. По завершении эксперимента по инъекции жизнеспособность клеток снизится, но должна оставаться выше 80%. В качестве дополнительного этапа осадите оставшиеся клетки центрифугированием и один раз промойте осадок раствором PBS.Затем заморозьте осадки при температуре −80 °C для последующих анализов, таких как вестерн-блоттинг. Для подтверждения экспрессии генов при нокдауне через один-два месяца проведите диссекцию мышей для определения локализации метастазов. Начните с размещения эвтаназированной мыши на диссекционном столе.Обильно опрыскайте мышь этанолом. Вскройте грудную клетку, чтобы обнажить легкие и сердце. Затем аккуратно извлеките их и поместите в PBS.Легкие являются основным местом метастазирования, так как они содержат первое капиллярное русло, с которым сталкиваются клетки. После их попадания в кровоток удалите сердце и промойте легкие в PBS, затем осмотрите каждую долю легкого под диссекционном микроскопе. Подсчитайте количество обнаруживаемых метастазов с обеих сторон легких, затем суммируйте количество метастазов во всех четырех долях, чтобы определить общее число метастазов в легких.Затем с помощью ножниц путем иссечения изолируйте отдельные метастазы в легких. Перенесите каждую метастазу в клеточный фильтр с размером пор 70 µm и измельчите ее концом стерильного колпачка иглы. Промойте фильтр несколькими миллилитрами среды и соберите клетки, прошедшие через фильтр.В чашку для культивирования помещают клетки одного метастаза (в каждую чашку — клетки отдельного метастаза). Инкубируют клетки при 37 °C в течение не менее четырех дней, не тревожа культуру. Первоначально на планшетах будут расти как раковые клетки, так и фибробласты, но постепенно фибробласты погибнут, и их место займут раковые клетки.Если раковые клетки несут гены устойчивости к определенным препаратам, проведите селекцию клеток с помощью соответствующих антибиотиков. Через три дня удалите остатки крови или тканей с чашки путем промывания PBS и добавьте свежую среду. Оцените чистоту полученных клеток с помощью иммуноокрашивания антителами к специфическим человеческим белкам; в данном случае антитела против человеческих белков используются даже при отсутствии селекции препаратами. Доля человеческих клеток должна составлять более 99%.Полученные клетки теперь можно повторно ввести иммунодефицитным мышам, чтобы в конце данного анализа проверить их метастатический потенциал. Высокометастатическая линия раковых клеток обычно приводит к образованию многочисленных метастазов в легких, в то время как при использовании низкометастатической линии таких метастазов будет очень мало. На этих изображениях показаны метастазы в легких через два месяца после инъекции линии клеток меланомы человека.A 3 7 5 sm. Клетки, полученные этим методом, обычно при тестировании дают больше метастазов, чем родительская линия. Таким образом, с помощью данного анализа мы продемонстрировали вам процедуру проведения экспериментального анализа метастазирования.При выполнении данной процедуры крайне важно следить за тем, чтобы клетки вводились именно в хвостовую вену, а не в окружающие ткани хвоста. На этом все. Спасибо за просмотр и удачи в ваших экспериментах.

Research

JoVE Journal

Medicine

Медицина

Экспериментальные метастазы легких и CTL модель мыши иммунотерапии для анализа опухолевых клеток-Т-клеток...

Экспериментальные метастазы и CTL Приемные Передача Иммунотерапия мышиной модели

Использование количественной ПЦР, мы показали, как устоявшихся куриных CAM модель может быть использована для количественного анализа метастазирование опухолевых клеток человека в отдаленные органы.

Количественный анализ рака метастазы использовании Птичий Модель эмбрионов

В этом видео описывается протокол создания мышиной модели спонтанного метастазирования ксенотрансплантатов или PDX пациента с колоректальным раком. Эти модели ксенотрансплантатов частично имитируют особенности карцином человека и понимают критические аспекты злокачественных новообразований человека, включая инвазию и метастазирование.

Мышиные модели спонтанных метастазов: платформа для изучения метастатического потенциала ортотопически вводимых клеток колоректального рака

Это ортотопической модели рака предстательной железы человека позволяет для количественного определения размера опухоли, циркулирующих опухолевых клеток и образование различных метастазов в легких. Как клетки должны бежать первичный орган, попадает в кровь, и имплантировать в дополнительном сайте, эта модель эффективно повторяет сценарий в организме человека.

Ортотопическая мышиной модели человеческого рака простаты Метастазы

Эта рукопись описывает метод количественной оценки накопления клеток опухоли в легких в животной модели метастазов опухоли.

Assay набора клетки опухоли легких

Этот протокол описывает, как использовать количественную ПЦР в реальном времени (QRT-PCR) для обнаружения специфических мРНК опухолевых клеток, представляющих метастазы в пределах мыши легочной ткани.

Оценка метастазов в легких у мыши опухоли молочной Модели количественными ПЦР в реальном времени

Метастазирование играет важную роль в вирулентности рака, на его долю приходится примерно 90% смертей.  Мы сообщаем о протоколе для модели метастатической меланомы у мышей, который полезен для определения эффективности терапевтических агентов против этого клинического феномена.

Инъекция Сингенная мышиной меланомы клеток с целью определения их метастатического потенциала в Легких

Цель этой статьи заключается в том, предоставить подробное описание протокола для assay легочных метастазов (PuMA). Эта модель позволяет исследователям изучить метастатического остеосаркома (OS) рост клеток в легочной ткани, с помощью widefield флуоресценции или конфокальный лазерный сканирующий микроскоп.

Практические соображения в изучении метастатического легких колонизации в остеосаркома, используя Assay легочных метастазов

Описанный подход сочетает в себе экспериментальные метастазирование хвостовой вены с in vivo живой изображения животных, чтобы в режиме реального времени мониторинга образования метастазов рака молочной железы и роста в дополнение к количественной метастазировать число и размер в легких.

Комбинированное использование хвоста вен ы метастазы анализы и в режиме реального времени в Vivo Imaging для количественной диагностики рака молочной железы метастатическая колонизация и бремя в легких

В этой статье описывается рабочий процесс методов, используемых для тестирования новых потенциальных медиаторов метастазирования меланомы и их механизма (механизмов) действия.

Надежная платформа discovery для идентификации новых медиаторов метастазирования меланомы

В рукописи описана методология установления и лонгитюдного мониторинга роста спонтанных метастазов в легкие из ортотопически инъецируемых опухолей молочной железы, поддающихся вмешательству на всех стадиях метастатического каскада.

В естественных условиях Визуализация для измерения спонтанных метастазов в легкие ортотопически инъекционных опухолевых клеток молочной железы

Изучите экспериментальную пробирную метастазу для оценки метастатического потенциала человеческих раковых клеток с помощью инъекций в хвостовую вену иммунодефицитным мышам.

Экспериментальные Пробирной метастазы

Больше видео