дрозофила Количественная оценка нервно-мышечных соединений (NMJ): метод оценки морфологии и функции синапсов

- Во-первых, иммуноокрашивание личинок дрозофилы маркерами, которые выделяют различные аспекты NMJ или нервно-мышечных соединений. Это область, где окончание аксона мотонейрона контактирует с мышцей, и его морфология используется в качестве считывания синаптической функции.

Аксон заканчивается несколькими ветвями, которые образуют выпуклости, называемые бутонами. Нейротрансмиттеры высвобождаются из бутонов и вызывают сокращение мышц. Области высвобождения нейромедиаторов называются активными зонами. Здесь один маркер специфичен для синаптического белка, который очерчивает NMJ, а другой маркер — для белка, присутствующего в активных зонах.

Затем получите NMJ-изображения с помощью микроскопии и количественно оцените их морфологию с помощью полуавтоматического программного обеспечения для анализа изображений. Примените к изображениям предустановленный набор программных команд. Выходные файлы содержат проанализированные NMJ-изображения и результаты морфологии. Характеристики, которые могут быть измерены, включают количество и площадь поверхности бутонов, длину и количество ветвей NMJ, количество несоединенных отсеков NMJ и количество активных зон.

В следующем примере мы проанализируем