Энциклопедия экспериментов JoVE
Биология
0 просмотров • 2:20 мин. • April 30th, 2023
- Для начала перенесите 10 эмбрионов данио-рерио с помощью переносной пипетки в стакан, наполненный 20 миллилитрами воды. Теперь выращивайте эмбрионы при температуре 28 градусов по Цельсию в соответствии с соответствующим светлым темным циклом, необходимым для эксперимента. Далее переложите личинок в лунки пластин. Убедитесь, что в каждой лунке содержится по одной личинке, чтобы было достаточно места для плавания.
Теперь полностью заполните каждую лунку водой. Поместите планшет в камеру регистрации поведения и отслеживайте движение личинок с помощью программного обеспечения для видеослежения. Личинки демонстрируют повышенную подвижность в темноте и уменьшенную подвижность на свету при воздействии аномального цикла света и темноты из-за повышенного уровня стресса. Вычисление разницы между средним расстоянием, пройденным в последнюю минуту начального периода и в первую минуту последующего периода, говорит нам о фотомоторной реакции рыбы.
В этом протоколе мы рассмотрим фотомоторную реакцию у личинок данио-рерио и толстоголового гольяна, подвергшихся воздействию кофеина. Во-первых, поместите планшет с экспериментальной рыбой в камеру регистрации поведения. Затем откройте ранее разработанный протокол отслеживания. В просмотрщике видеослежения убедитесь, что все личинки видны, что в каждой лунке присутствует только одна личинка и что лунки выровнены с определенными зонами наблюдения.
Затем нажмите на «Экспериментировать и выполнить». Укажите имя и место сохранения данных и нажмите на значок «Несколько живых изображений», чтобы выделить все предопределенные области просмотра. Наконец, закройте панель записывающей камеры и нажмите «Фон», а затем «Пуск» на мониторе компьютера.